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本文以“逆向”ELISA 测定 Wistar 大鼠抗 DNP抗血清中抗体的独特型,即以抗独特型抗体为涂布物来测定抗血清的效价。实验结果表明“逆向”ELISA可以专一地半定量测定大鼠抗 DNP抗血清的独特型,为进一步研究抗独特型抗体对抗体独特型表达的调节作用打下基础。同时,DNP-BSA封闭大鼠抗 DNP抗体的实验初步表明,这抗体的独特型决定簇位于抗体分子的抗原结合部位,至少十分接近抗原结合部位。 相似文献
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刘宪玲 《国外医学:免疫学分册》1997,20(5):264-269
内影像抗独特型抗体可模拟外部抗原,刺激机体的免疫反应,其制备的关键步骤包括动物的选择,免疫原的制备,免疫的剂量及方法以及独特型抗体的鉴定。 相似文献
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抗独特型抗体的制备与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
内影像抗独特型抗体可模拟外部抗原,刺激机体的免疫反应。其制备的关键步骤包括动物的选择,免疫原的制备、免疫的剂量及方法以及独特型抗体的鉴定。 相似文献
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本文用小鼠单克隆抗HBcIgG及其Fad片段免疫家兔,制备出了特异牲的抗独特型抗体(抗Id),抗Id针对的部位与抗体的抗原结合位点密切相关。应用这种抗Id在同种小鼠的抗-HBc中检出了交叉反应独特型(Idx),而在人、猴、马、豚鼠、鸡和鸽的抗-HBc血清中未能检出相应的Idx。我们的研究还表明用IgG Fab片段来免疫制备抗Id较用IgG全分子效果好。此外,我们建立了两种特异检测抗Id的ELISA方法,应用它们可以排除抗同种型和同种异型抗体的干抚,对免疫过程中动物产生抗Id的水平进行观察。 相似文献
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为了研究抗独特型抗体对乙型肝炎免疫反应的调节作用,我们用人的多克隆抗HBc作为免疫原,制备单克隆抗独特型抗体(抗-Id)。将人HBcAb用亲和层析纯化,并经SPA-Sepharose4B柱提取Fab片段。用4株抗正常人IgG的单克隆抗体与人HBcAb复合,制成免疫复合物,再用作免疫原,采用3种不同的免疫方案,除了采用国内外公认的抗原-抗体结合抑制试验检测外,还做了中和试验。在“独特型结合试验”中,在用人HBcAb包放的同时,还用正常人IgG作对照,以排除其抗异种免疫球蛋白的干扰。同时,还进行了交叉反应独特型的筛选工作。我们共对6300个克隆进行了检测,没有检出特异性的抗独特型抗体,却有1450个抗正常人IgG的阳性克隆。对出现上述结果的可能原因进行了探讨。 相似文献
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为了研究抗独特型抗体对乙型肝炎免疫反应的调节作用,我们用人的多克隆抗HBc作为免疫原,制备单克隆抗独特型抗体(抗-Id)。将人HBcAb用亲和层析纯化,并经SPA-Sepharose 4B柱提取Fac片段。用4株抗正常人IgG的单克隆抗体与人HBcAb复合,制成免疫复合物,再用作免疫原,采用3种不同的免疫方案,除了采用国内外公认的抗原-抗体结合抑制试验检测外,还做 相似文献
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《细胞与分子免疫学杂志》2019,(8)
目的在成功制备中和性生长抑素(SS)单克隆抗体的基础上,制备了SS抗独特型卵黄抗体Ab2,鉴定其生物学特性,探讨其在促进动物生长方面的应用。方法用对SS具有免疫中和性的单克隆抗体2E7免疫产蛋鸡,筛选并收集有高效价抗独特型卵黄抗体的鸡蛋,分离蛋黄,破碎蛋黄组织,用稀释和酸化沉淀法除脂蛋白,用冷酒精沉淀法纯化抗独特型卵黄抗体Ab2。用间接ELISA检测卵黄Ab2的特异性、效价和浓度,用竞争抑制和动物免疫检测卵黄Ab2β,用动物实验检测卵黄Ab2β促进鸡生长的效力。结果该SS抗独特型卵黄抗体Ab2效价为10~(-5),含量为8 mg/mL。且与兔抗SS抗体发生免疫反应,不与兔抗生长激素抗体、兔抗胰岛素抗体、兔抗胃泌素抗体发生免疫反应。该SS卵黄Ab2能和异种动物兔产生的SS抗体发生免疫反应,该免疫反应能被SS竞争抑制,该SS卵黄Ab2能诱导小鼠产生SS Ab3,该SS Ab3能和SS发生免疫反应,说明它是SS卵黄Ab2β。用其作疫苗,以0.8μg/只和3.2μg/只分别皮下注射免疫小鼠,以0.8μg/羽和3.2μg/羽分别肌肉注射免疫鸡,以3.2μg/尾浸泡免疫多宝鱼。一个月后,实验小鼠平均体质量比对照组分别增加33.5%和37.9%,实验鸡平均体质量比对照组分别增加25.6%和34.1%,实验鱼平均体质量比对照组增加24.8%。结论成功制备了特异性强、效价高的SS卵黄抗体Ab2β,以其作疫苗免疫动物,以较小剂量一次性免疫即可产生显著的促鸡和多宝鱼生长效果。 相似文献
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抗独特型抗体是研究免疫调节的强有力的试剂,而且作为抗肿瘤和抗传染病的疫苗也有着潜在的意义。比较了三种制备大鼠单克隆抗独特型抗体的免疫方案。即先用750μg 纯化的抗恶性疟原虫单克隆抗体作为免疫原。以腹腔和皮下多点免疫雄性Wistar大鼠,基础免疫3次后,接着用以下、三种免 相似文献
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本文用小鼠单克隆抗HBcIgG及其Fab片段免疫家兔制备出了特异性的抗独特型抗体(抗Id),抗Id针对的部位与抗体的抗原结合位点密切相关。应用这种抗Id在同种小鼠的抗-HBc中检出了交叉反应独特型(Idx),而在人、猴、马、豚鼠和鸡,鸽的抗-HBc血清中未能检出相应的Idx。我们的研究还表明用IgG Fab片段来免疫制备抗Id较用IgG全分子效果好。此外,我们建立了两种特异检测抗Id的ELISA方法,应用它们可以排除抗同种型和同种异型抗体的干扰,对免疫过程中动物产生抗Id的水平进行观察。 相似文献
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本研究用针对鼻咽癌相关抗原的单克隆抗体Fc_1作免疫原,采用常规免疫和杂交瘤方法,制备了一株抗Fc_1V区的独特型的杂交瘤2 A9。双夹心ELISA显示,2A9对Fc_1有较强的亲和力。ELISA结合抑制试验结果显示,2A9能抑制Fc_1对鼻咽癌细 相似文献
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目的:制备宫颈癌抗独特型单克隆抗体并鉴定其抗原模拟特性。 方法和结果: 以识别小鼠和人宫颈癌相关抗原分子共同表位的单克隆抗体AU14-1(Ab1)为免疫原在含免疫反应剂的无血清培养液中致敏小鼠脾细胞,并将其与SP2/0融合,经筛选和克隆化,建成一株能分泌抗独特型单克隆抗体(Ab2)的杂交瘤细胞系。Ab2的抗原模拟特性经ELISA、结合和竞争抑制试验以及免疫组化染色,表明为Ab2β,具有宫颈癌细胞膜表面抗原的“内影像”。 结论: 获得一株具有宫颈癌抗原内影像的抗独特型单克隆抗体。 相似文献
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鼻咽癌抗独特型单克隆抗体的制备和鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
用针对鼻咽癌癌细胞相关抗原的单克隆抗体Fc1(Ab1)作免疫原,采用常规免疫和杂交瘤制备方法,获得了一株抗Fc1V区独特型的杂交瘤:2A9。双夹心ELISA显示2A9所分泌的抗体(Ab2)对Fc1有效强的亲和力。ELISA结合抑制试验结果显示,Ab2能抑制Fc1对鼻咽癌细胞CNE1的反应。这就证明Ab2作用于Fc1抗体的V区。用Ab2与钥孔戚血蓝素(KLH)交联物免疫小鼠产生的抗-抗独特型抗体(Ab3)的血清,能与Fc1竞争CNE1细胞株上的原始靶抗原。免疫组化证实,Ab3与Fc1对鼻咽癌细胞有相同的反应,均为细胞膜染色。可以看出Ab3与Ab1(Fc1)具有相同的配位。以上结果表明:2A9杂交瘤细胞所分泌的抗独特型抗体Ab2是带有鼻咽癌相关抗原内影像的单克隆抗体。 相似文献
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由严重存在SLE,并无需外源免疫能自发产生抗DNA自身抗体的小鼠MRL-Lpr/Lpr脾细胞与SP2/0-Ag-14骨髓瘤细胞杂交,获得一系列杂交瘤细胞株,它们分别分泌单克隆抗DNA自身抗体。我们用其中的细胞株H241的单抗免疫家兔,从免疫血清中收获到抗H241独特型扰体。通过放射免疫分析法(RIA),对H241进行了敏感度分析,并研究了H241与抗H211血清反应中,H241与另24个抗DNA单抗独特型交叉反应。结果表明,H241是高敏感度的单抗,6ng非标记H241能使~(125)I-H241与抗H241独特型抗体的结合达50%抑制。实验还证明,24个抗DNA单抗中有15个与H241不同程度地存在独特型交叉反应。实验提示,虽然抗DNA自身抗体独特型往往结构分离,从而表现抗体多样性,但有些抗体由于独特型结构类似,多样性受到限制;全身性红斑狠疮小鼠控制免疫球蛋白合成的胚系基因含有某些抗DNA抗体的相关位点。 相似文献
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B_3为我室建立的带有HBsAg表位内影像的单克隆抗独特型抗体(mAb_2)。本文采用脾脏内和尾静脉内注射途径,用B_3免疫BALB/c鼠,获得了具有抗-HBs结合活性的同系单克隆抗-抗独特型抗体(mAb_3)3B_8株。这一结论基于以下两点观察:(1)3B_8能与纯化的HBsAg结合。纯化的HBsAg或抗-HBs均能以剂量依赖形式抑制这一结合;(2)3B_8能以剂量依赖形式抑制抗-HBs与B_3的结合。小鼠在从未接触HBsAg的情况下,单独用B_3免疫,获得了具有抗-HBs结合活性的单克隆抗-抗独特型抗体3B_8,进一步证明我室过去建立的mAb_2B_3株,确实带有HBsAg表位内影像。 相似文献
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抗SARS抗体独特型单链抗体的筛选及鉴定 总被引:3,自引:1,他引:2
目的从人源噬菌体抗体库中筛选抗SARS独特型抗体为SARS的诊断及疫苗的研究奠定基础。方法以混合SARS病人恢复期血清免疫球蛋白(Ig)作为筛选分子,从噬菌体抗体库中筛选出能与病人血清IgG(IgM)结合的抗体,并通过与混合正常人血清Ig作负性筛选,从而获得抗SARS病毒的独特型抗体(AId)。通过4轮“吸附-洗涤-扩增”,从最后一轮所得单克隆菌株中分别通过ELISA筛选出能和SARS病人恢复期血清Ig结合的菌株,提取质粒DNA,并对PCR扩增产物进行DNA序列测定,最后用所筛选的克隆通过与不同人群血清反应,证实其特异性。结果随机挑选经第4轮筛选后的200个单克隆菌落,其中有10个与SARS病人恢复期血清Ig结合的OD值明显高于其与正常人Ig结合的OD值;以上10个克隆经PCR扩增,其中有6个克隆于l000bp处有电泳条带;其DNA序列经与BLAST数据库和IMGT/QUEST软件比对有5个均与人的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)高度同源,且与其同源性最高的人Ig的VH属VHI亚群,VL属k链,属VKⅡ亚群;最后确认有3个克隆其噬菌体抗体和SARS病人血清Ig结合的OD值均明显高于与正常人血清Ig结合的OD值。结论利用抗体库技术可不经免疫制备特异性抗SARS抗体独特型抗体,为SARS诊断及疫苗的研制奠定基础。 相似文献
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抗独特型抗体在免疫调节的研究中是一种有效的试剂,而且作为抗肿瘤及传染病的疫苗具有潜在的实用意义。本文中作者对制备单克隆抗独特型抗体进行了研究,并且比较了3种制备大鼠单克隆抗独特型抗体的免疫方案。 方法是先用750μg纯化的抗恶性疟原虫单克隆抗体免疫雄性Wistar大鼠,免疫途径 相似文献