MMP-2、PTEN在骨肉瘤组织中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及张力蛋白和辅助蛋白同源、第10号染色体丢失的磷酸酶（PTEN）的表达在骨肉瘤发生、发展中的作用及其相互关系。方法应用免疫组化SP法检测40例骨肉瘤组织、20例骨软骨瘤组织中MMP-2、PTEN蛋白的表达情况,并分析两者之间表达的相关性。结果MMP-2在骨肉瘤组织中的阳性率为65%（26/40）,而在骨软骨瘤组织中的阳性率为0,差异具有显著性（χ^2=7.253,P〈0.01）。PTEN蛋白在骨肉瘤组织中的阳性表达率为55%（22/40）,而在骨软骨瘤组织中为90%（18/20）,两者相比差异有统计学意义（χ^2=4.164,P〈0.05）。在骨肉瘤组织中,MMP-2和PTEN表达强度之间呈负相关（r=-0.403,P〈0.05）。结论MMP-2和PTEN与骨肉瘤的发生、发展以及侵袭、转移有关,且两者具有相关性,联合检测MMP-2和PTEN的表达将对骨肉瘤的早期诊断、预后判断有一定指导意义。     

caspase-3在骨肉瘤中表达的研究

应用SP免疫组织化学方法分别检测caspase-3在38例骨肉瘤及20例骨软骨瘤中的表达。caspase-3在骨肉瘤中表达阳性率为52．6％，骨软骨瘤中为85．0％，差异显著（P〈0．05）。骨肉瘤组织中caspase-3的表达降低与骨肉瘤的发生有关。     

PTEN在骨肉瘤组织中的表达及意义

目的:研究骨肉瘤组织中抑癌基因PTEN的表达情况,探讨其在骨肉瘤发生、发展中的可能作用.方法:用免疫组化S-P法检测PTEN蛋白在38例骨肉瘤及20例骨软骨瘤石蜡标本中的表达情况.结果:PTEN蛋白在骨肉瘤中表达阳性率为55.3%,在骨软骨瘤中为90.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P＜0.01).结论:抑癌基因PTEN蛋白在骨肉瘤组织中表达下调,可能与骨肉瘤的恶性进展有关.     

PTEN和Caspase-3在骨肉瘤中的表达

目的探讨抑癌基因PTEN蛋白和Caspase-3在骨肉瘤中的表达及在其发生发展中的可能作用。方法用免疫组织化学方法检测PTEN和Caspase-3在38例骨肉瘤及20例骨软骨瘤中的表达。结果PTEN蛋白在骨肉瘤中,表达阳性率为55.3%。在对照组骨软骨瘤中为90.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P<0.01)。Caspase-3在骨肉瘤中表达阳性率为52.6%,在对照组骨软骨瘤中为85.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P<0.05)。结论PTEN蛋白和Caspase-3与骨肉瘤的发生有关。     

PTEN和Gaspase-3在骨肉瘤中的表达

目的探讨抑癌基因PTEN蛋白和Caspase-3在骨肉瘤中的表达及在其发生发展中的可能作用.方法用免疫组织化学方法检测PTEN和Caspase-3在38例骨肉瘤及20例骨软骨瘤中的表达.结果PTEN蛋白在骨肉瘤中,表达阳性率为55.3%.在对照组骨软骨瘤中为90.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P＜0.01).Caspase-3在骨肉瘤中表达阳性率为52.6%,在对照组骨软骨瘤中为85.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P＜0.05).结论PTEN蛋白和Caspase-3与骨肉瘤的发生有关.     

Fas在骨肉瘤中的表达及其意义

免疫组化S-P方法检测Fas在骨肉瘤及骨软骨瘤中的表达。Fas在38例骨肉瘤中表达阳性率为73．7％，加例骨软骨瘤中为95．0％，差异显著（P〈0．05）。Fas在骨肉瘤组织中表达下调，可能与骨肉瘤的恶性进展有关。     

人骨肉瘤中endostatin的表达及其临床意义

目的探讨endostatin在人骨肉瘤中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化elivision两步法检测30例骨肉瘤和30例骨软骨瘤中endostatin和CD34的表达，并用SPSS13．0统计软件对endostatin和CD34在骨肉瘤和骨软骨瘤中的阳性表达率以及在骨肉瘤中表达存在的相关关系进行分析。结果endostatin和CD34在骨肉瘤中的阳性率分别为93．3％和96．7％，在骨软骨瘤中的阳性率分别为40．0％和16．7％，两者在骨肉瘤和骨软骨瘤中的阳性表达率均有显著差异（P〈0．01）。endostatin与CD34在骨肉瘤中表达存在正相关关系（P〈0．05），相关系数rs=0．528，endostatin表达在组织高、低分化间有显著差异（P〈0．05），endostatin表达与骨肉瘤转移有关（P〈0．05）。结论endostatin可作为术后肿瘤转移的预测因子及判断预后的指标，检测endostatin为骨肉瘤恶性程度及预后评估提供一定的辅助参考指标。     

Survivin、Caspase-3、cyclinD1在骨肉瘤中的表达及临床意义

目的研究Survivin、Caspase-3、cyclinD1在骨肉瘤中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测36例骨肉瘤中Survivin、Caspase-3、cyclinD1的表达水平以及Survivin与Caspase-3、cyclinD1两者之间的相关性,并对所有病例进行随访。10例骨软骨瘤为对照组。结果①Survivin在骨肉瘤中的阳性率为63.7%(23/36),明显高于对照组骨软骨瘤10.0%(1/10)的阳性率,两者相比差异有统计学意义(P<0.01);Caspase-3在骨肉瘤中的阳性表达率为52.8%(19/36),而在骨软骨瘤中为90.0%(9/10),两者相比差异有统计学意义(P<0.01);cy-clinD1蛋白在骨肉瘤中的阳性率为74.4%(29/36),高于在骨软骨瘤中的40.0%(4/10),两者相比差异有统计学意义(P<0.05);前2者表达部位在细胞浆,cyclinD1表达于细胞核。②Survivin和Caspase-3表达强度之间呈显著负相关(r=-0.46,P<0.01)。③Survivin与cyclinD1表达呈正相关(r=0.641,P<0.01)。结论①...     

P14ARF和VEGF在骨肉瘤中的表达及其意义

目的探讨P14ARF和VEGF在骨肉瘤中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学S—P法检测52例骨肉瘤、15例骨软骨瘤标本中的P14ARF和VEGF,骨软骨瘤作为对照,分析二者在骨肉瘤中表达及相关性。结果P14ARF的阳性表达率在骨肉瘤中为26．92％（14／52）,在骨软骨瘤中73．33％（11／15）,两者比较有明显差异（P〈0．01）;VEGF的阳性表达率在骨肉瘤中82．69％（43／52）,在骨软骨瘤中为20％（3／15）,两者差异显著（P〈0．01）,与年龄,性别及民族无统计学差异（P〉0．05）;在骨肉瘤组织中P14ARF和VEGF表达无相关性（P〉0．05）。结论P14ABF在骨肉瘤中低表达,VEGF在骨肉瘤中高表达,与骨肉瘤的发生、发展有关,可作为诊断骨肉瘸及评价其预后的辅助指标。它们的表达与患者年龄。性别及民族无关。     

RANKL、OPG、TRAIL在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的 探讨骨肉瘤组织中RANKL、OPG、TRAIL蛋白的表达情况.方法 采用免疫组织化学SP法测定RANKL、OPG、TRAIL蛋白在50例骨肉瘤、20例骨软骨瘤中的表达.分析其在骨肉瘤、骨软骨瘤中表达差异及与骨肉瘤临床病理特征之间的关系.结果 OPG在骨肉瘤中的表达明显高于骨软骨瘤(P<0.01);TRAIL在骨肉瘤中的表达明显低于骨软骨瘤(P<0.01).OPG、TRAIL的表达与Enneking临床分期有关(P<0.01).结论 OPG、TRAIL是骨肉瘤发生、发展的标记之一.     

抑凋亡蛋白Survivin及P-糖蛋白在骨肉瘤中的表达与骨肉瘤化疗耐药性关系的研究

目的探讨抑凋亡蛋白Survivin及多药耐药基因mdr1表达的P-糖蛋白(P-gp)的表达与骨肉瘤临床病理特征间的关系。方法应用免疫组织化学技术(SP法)检测34例骨肉瘤组织及30例骨软骨瘤(对照组)组织中抑凋亡蛋白Survivin及多药耐药基因mdr1表达的P-糖蛋白的表达,统计分析Survivin、P-gp在骨肉瘤组织中表达的相关性和其表达情况与病例临床特征的相关性。结果①34例骨肉瘤组织标本中19例Survivin蛋白表达阳性为55.9%(19/34),27例P-gp表达阳性为79.4%(27/34);对照组30例标本中未检测到Survivin蛋白表达、P-gp表达(P<0.01)。②39例骨肉瘤患者中发生转移的病例16例,其Survivin蛋白、P-gp表达水平显著高于未发生转移病例(P<0.05)。结论抑凋亡蛋白Survivin及多药耐药基因mdr1表达的P-gp的在骨肉瘤组织中呈现高表达,且两者表达水平与骨肉瘤病理分级和转移成正比。     

miR-586在骨肉瘤患者体内的表达及意义的相关研究

目的:探究miR-586在骨肉瘤患者体内的表达及意义.方法:选取我院2014年9月~2016年9月收治的骨肉瘤患者151例,将其作为观察组,选择同期于我院进行体检的健康的志愿者52例,将其作为对照组,对患者瘤体周围正常骨组织及骨肉瘤瘤体组织中miR-586的表达、两组血清miR-586的表达、患者血清中miR-586表达与骨肉瘤患者瘤体组织的相关性、miR-586对骨肉瘤的诊断价值进行分析.结果:瘤体周围正常骨组织、骨肉瘤瘤体组织的miR-586相对表达水平分别为(0.94±0.27)、(5.34±0.29),患者瘤体周围正常骨组织较骨肉瘤瘤体组织中miR-586相对表达水平高,差异明显具有统计学意义;观察组、对照组血清miR-586的相对表达水平分别为(1.48±0.47)、(0.85±0.22),观察组较对照组高,差异明显,具有统计学意义;经皮尔森相关系数分析发现,患者血清中miR-586与骨肉瘤患者瘤体组织呈正相关的关系;经对观察组、对照组患者外周血miR-586水平ROC曲线分析,曲线下面积为0.882(0.774、0.991为95%可信区间;P=0.023),当0.9551为最佳筛查阳性届值(cut-off)时,特异度及敏感度均为85%.结论:miR-586对骨肉瘤患者具有较好的诊断价值,其表达水平可作为骨肉瘤患者诊断的生物学指标.     

P14ARF和PCNA在骨肉瘤中表达及其意义

目的:探讨P14ARF和增殖细胞核抗原(PCNA)在骨肉瘤中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测52例骨肉瘤中的P14ARF和PCNA表达,并以15例骨软骨瘤作为对照,与临床病理参数进行比较分析。结果:P14ARF在骨肉瘤的阳性表达率为26.9%(14/52),在骨软骨瘤为73.3%(11/15),差异有统计学意义(P<0.01);PCNA在骨肉瘤的阳性表达率为84.6%(44/52),在骨软骨瘤为13.3%(2/15),差异亦有统计学意义(P<0.01);P14ARF和PCNA在骨肉瘤的表达与患者年龄、性别、组织类型及民族均无相关性(P>0.05)。结论:P14ARF和PCNA表达与骨肉瘤的发生、发展有关,其可作为诊断骨肉瘤及评价其预后的辅助指标。     

血清miR-1225-5p在骨肉瘤病人诊断及预后中的价值

目的:探讨血清miR-1225-5p在骨肉瘤病人诊断及预后中的价值.方法:选取104例骨肉瘤病人(骨肉瘤组)、45例骨膜炎病人(骨膜炎组)和50名健康体检者(对照组)为研究对象.用RT-PCR检测血清中miR-1225-5p的表达水平.以中位数为截断值,将骨肉瘤病人分为高表达组和低表达组.绘制ROC曲线分析miR-12...     

Effect of estrogen on gene expression of fatty acid synthase in periosteum

Background Estrogen deficiency contributes to postmenopausal osteoporosis. Periosteum might be a potential target of estrogen, but the underlying mechanism at gene level is far from being elucidated. The objective of this study was to investigate the correlation between estrogen and fatty acid synthase （FAS） expression in periosteum. Methods Human periosteum cells were cultured in vitro. Expressed genes in the substrated cDNA library were verified using semi-quantitative PCR and real-time PCR. The expression of FAS in periosteum of ovarectomized （OVX） SD rats was investigated. Results FAS gene was most significantly expressed in the subtracted cDNA library of periosteal cells screened by semi-quantitative PCR. Low FAS expression was verified by real-time PCR in the estrogen exposed human periosteum rather than in the control. The estradiol levels were （20.81±12.62） pg/ml, （19.64±4.35） pg/ml and （13.47±1.84） pg/ml in the sham group, the control, and the OVX group, respectively. The estradiol levels in the OVX group was significantly lower （P=-0.0386）. The FAS gene expression in periosteum in the OVX group, sham group, and control group was 3.09±1.97, 1.33±0.47 and 1.51±1.32, respectively. The gene expression in the OVX group was significantly higher （P=0.0372）. Conclusion Estrogen modulates FAS gene expression in in vitro human perisoteum as well as in in vivo rat periosteum.     

Alpha-亚麻酸对HepG2细胞脂肪酸合成关键基因的影响

目的探讨不同剂量Alpha-亚麻酸(ALA)对硬脂酸培养后的HepG2细胞脂肪酸合成基因表达的影响。方法 HepG2细胞分为对照组(NC)以及含有0.5 mmol/L硬脂酸的培养液培养高脂组(HF),培养36 h后应用实时定量PCR检测脂肪酸合成关键基因SREBP1C、FAS及ACC表达;基因表达存在显著差异后分别用10%、20%、50%、70%、100%ALA替代硬脂酸培养36 h,实时定量PCR和免疫印迹法检测上述基因mRNA水平及蛋白表达。结果硬脂酸处理后HepG2细胞SREBP1C、FAS及ACC基因显著升高(P0.001),ALA替代组SREBP1C基因mRNA表达水平均显著低于高脂组(P0.001),0.5 mmol/L ALA组及0.35 mmol/L ALA组FAS显著低于高脂组(P0.001),各替代组ACC基因mRNA水平与高脂组无统计学差异;替代组SREBP1C及FAS蛋白表达水平显著低于高脂组,而ACC蛋白表达量与高脂组无明显差异。结论硬脂酸促进HepG2细胞脂肪酸合成,ALA通过抑制SREBP1C及FAS基因表达来减弱脂肪酸合成。     

Expression of Beclinl in Osteosarcoma and the Effects of Down-regulation of Autophagy on the Chemotherapeutic Sensitivity

To explore the expression of Beclin1 in osteosarcoma and investigate the effects of down-regulation of autophagy on the chemotherapeutic sensitivity to cisplatin (DDP),the expression of Beclin1 in 28 specimens of osteosarcoma (group A) and 19 specimens of normal bone tissues (group B) were immunohistochemically detected. The expression of Beclin1 mRNA in MG63 cells treated with different concentrations of DDP was examined with RT-PCR. After down-regulation of autophagy in MG63 cells by an autophagy inhibitor,3-methyladenine (3-MA),the cell proliferation inhibition rate of MG63 cells treated with DDP was evaluated by using the MTT assay. The positive rates of Beclinl were 67.85% in group A and 94.73% in group B. Its expression was lower in osteosarcoma than in normal bone tissues,with a significant difference found between them (P＜0.05).RT-PCR showed that the expression of Bcclin1 mRNA in the cells treated with high-dose DDP were higher than that in the non-treated cells,and no significant difference in the expression of Beclin1 mRNA was found between the cells treated with low-dose DDP and the non-treated cells. There was a positive correlation between the level of Beclin1 mRNA expression and the concentration of DDP.MTT assay showed that the proliferation inhibition rates of the cell treated with 3-MA and DDP combined were substantially increased when compared with those treated with DDP alone (P＜0.01).This study demonstrated that autophagy may be implicated in the carcinogenesis of osteosarcoma,and DDP may induce autophagy in the MG63 cells. It also suggests that the down-regulated autophagy could increase chemotherapeutic sensitivity of DDP to osteosarcoma.     

siRNA对骨肉瘤细胞MDM2的表达及细胞增殖的抑制作用

目的: 研究siRNA对人骨肉瘤U20S细胞MDM2基因表达及肿瘤细胞增殖的抑制作用。 方法: 构建可表达针对MDM2的siRNA质粒(PGCsilencer^TM-MDM2-siRNA)。转染siRNA MDM2(简称siMDM2),阴性对照质粒到U20S,并设只加转染试剂作空白对照组,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting法检测siMDM2对MDM2基因和蛋白表达的抑制作用,并用MTT法检测siMDM2对细胞增殖的抑制作用。 结果: RT-PCR结果显示,转染siMDM2-1和 -2组MDM2的mRNA表达量分别下调到空白对照组的32.61%和39.06%;Western blotting结果显示,转染siMDM2-1和 -2组蛋白表达量下调到空白对照组的35.76%和42.20%;转染阴性对照质粒的MDM2基因和蛋白与转染试剂组比较差异均无显著性(P>0.05)。MTT结果显示,转染siMDM2后细胞生长受到明显抑制,与转染试剂组比较差异具有显著性(P<0.05),阴性对照组抑制率与转染试剂组比较差异无显著性(P>0.05)。结论：siRNA可以有效地抑制U20S细胞中MDM2的表达,并抑制细胞增殖。     

MDM2与VEGF在骨肉瘤组织中的表达及临床意义

目的: 探讨MDM2、VEGF在骨肉瘤组织中的表达与骨肉瘤病理分级、转移及预后的关系。方法:采用免疫组织化学（S-P）法检测56例骨肉瘤标本中MDM2、VEGF的表达情况,并分析MDM2、VEGF的表达与病理分级、转移及预后的关联性。同时设8例骨纤维结构不良为阴性对照组。结果:骨肉瘤组织中MDM2表达总阳性率为64.3%(36/56),VEGF表达总阳性率为67.9%(38/56)。骨纤维结构不良组MDM2、VEGF呈阴性表达。骨肉瘤组织中MDM2、VEGF表达与病理分级无关联(P>0.05),而与骨肉瘤的转移和预后相关联(P<0.05)。MDM2和（或）VEGF阳性表达者5年生存率均明显低于阴性表达组(P<0.05);MDM2和VEGF均阳性表达者生存率最低,而二者均阴性表达者生存率最高,MDM2和VEGF均阳性和均阴性表达两组生存率比较,差异具有显著性(P<0.01)。结论:骨肉瘤组织MDM2异常表达者肿瘤的恶性程度增高、预后差,MDM2可能与VEGF共同参与骨肉瘤血管生成并起协同作用。检测骨肉瘤中MDM2和VEGF的表达水平对评价患者的预后有一定价值。     

Expression of Beclin1 in osteosarcoma and the effects of down-regulation of autophagy on the chemotherapeutic sensitivity

To explore the expression of Beclin1 in osteosarcoma and investigate the effects of down-regulation of autophagy on the chemotherapeutic sensitivity to cisplatin （DDP）, the expression of Beclin1 in 28 specimens of osteosarcoma （group A） and 19 specimens of normal bone tissues （group B） were immunohistochemically detected. The expression of Beclin1 mRNA in MG63 cells treated with different concentrations of DDP was examined with RT-PCR. After down-regulation of autophagy in MG63 cells by an autophagy inhibitor, 3-methyladenine （3-MA）, the cell proliferation inhibition rate of MG63 cells treated with DDP was evaluated by using the MTT assay. The positive rates of Beclin1 were 67.85% in group A and 94.73% in group B. Its expression was lower in osteosarcoma than in normal bone tissues, with a significant difference found between them （P〈0.05）. RT-PCR showed that the expression of Beclin1 mRNA in the cells treated with high-dose DDP were higher than that in the non-treated cells, and no significant difference in the expression of Beclin1 mRNA was found between the cells treated with low-dose DDP and the non-treated cells. There was a positive correlation between the level of Beclin1 mRNA expression and the concentration of DDP. MTT assay showed that the proliferation inhibition rates of the cell treated with 3-MA and DDP combined were substantially increased when compared with those treated with DDP alone （P〈0.01）. This study demonstrated that autophagy may be implicated in the carcinogenesis of osteosarcoma, and DDP may induce autophagy in the MG63 cells. It also suggests that the down-regulated autophagy could increase chemotherapeutic sensitivity of DDP to osteosarcoma.