大鼠血浆中环丙沙星的HPLC荧光分析检测法及其体内药物动力学研究

建立测定大鼠血浆中环丙沙星的RP HPLC荧光检测法和研究其体内的药物动力学。以格帕沙星为内标 ,血浆样品经乙腈沉淀蛋白 ,取上清夜进行HPLC检测。流动相为 0 0 5mol/L磷酸盐缓冲液( pH3 0 )—乙腈—甲醇 ( 77∶13∶10 ,v/v/v) ,荧光检测 ,λEX=2 76nm ,λEM=448nm。血浆样品在 0 0 0 2 5～ 0 5μg/ml范围内线性关系良好 ,平均提取回收率为 97 1% ,日间和日内精密度RSD均小于 8 0 % ,最低检测限达到 1 0ng/ml。环丙沙星在大鼠体内的过程符合双隔室开放型一级吸收动力学模型、药动学参数分别为 :T1/2(ka) =0 44h ,T1/2 (α) =0 92h ,T1/2 ( β) =5 6 6h ,Tmax=1 0 4h ,Cmax=0 35 μg/ml,AUC =1 86h·μg/ml。     

大鼠血浆中野黄芩苷的HPLC测定及其药动学研究

建立了HPLC法测定中药复方茵山莲颗粒灌胃后大鼠血浆中野黄芩苷的浓度,并研究了其在大鼠体内的药动学。以黄芩苷为内标,采用C18柱,乙腈-四氢呋喃-0.4%磷酸(15∶35∶150)为流动相,检测波长为335nm。野黄芩苷浓度在0.025～0.16μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9946),定量限为0.025μg/ml,日内和日间RSD均小于10%。主要药动学参数为cmax(0.765±0.158)μg/ml,tmax(3.67±0.47)h,t1/2(10.78±2.63)h,AUC0-36(7.66±1.63)μg·h·ml-1,AUC0-∞(8.46±1.79)μg·h·ml-1。     

HPLC荧光检测法测定人血浆中缬沙坦的浓度

目的:建立HPLC法测定人血浆中缬沙坦浓度的方法。方法:以厄贝沙坦为内标,血浆用液液萃取处理。采用AgilentZORBAXSBC18(150mm×4.6mm,5μm);柱温:室温;流动相:乙腈水磷酸三乙胺为40601.01.5(v/v);流速1.0ml·min-1;荧光检测激发波长为265nm,发射波长为378nm。结果:血浆内源性杂质对样品测定无干扰。缬沙坦最低定量浓度为25ng·ml-1,在25～2500ng·ml-1范围内线性关系良好(r=0.9996)。缬沙坦的日内、日间RSD均小于8%,样品多次冻融及提取后24h内稳定性良好。结论:该法快速、灵敏、准确,可用于缬沙坦的体内分析及临床药学研究。     

HPLC法测定血浆中盐酸依匹斯汀浓度

目的:建立测定人血浆中盐酸依匹斯汀浓度的HPLC方法。方法:采用Waters Symmetry shield C_(18)(150 mm×3.9 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.3%三乙胺(磷酸调pH为3.5)(22:78)为流动相;流速为1.0 ml·min~(-1);紫外检测波长为220 nm。结果:线性范围为2～200μg·L~(-1);最低检测浓度为2μg·L~(-1);方法回收率为98.17%～102.19%;日内RSD 6.87%～10.81%;日间RSD 3.6%～4.4%。结论:本方法灵敏、准确,可用于人血浆中盐酸依匹斯汀的浓度测定。     

HPLC法测定沙利度胺片中沙利度胺的含量

目的：建立沙利度胺含量的质量控制方法。方法：采用Waters Nova-Pak C18柱（150 mm×3.9 mm,4μm）,以水-乙腈-磷酸（85∶15∶0.1）为流动相,流速为2 ml/min,检测波长为237 nm。结果：对照品在10.055～150.825μg/ml范围内呈良好线性关系（r=1.000）,回收率平均为100.7%,RSD为0.3%。结论：HPLC法准确、灵敏、可靠,专属性强,可用于测定沙利度胺片中沙利度胺的含量。     

尼美舒利颗粒剂的人体生物等效性及相对生物利用度研究

目的 建立人血浆中尼美舒利的固相萃取结合HPLC-UV测定法,研究两种尼美舒利颗粒的生物等效性.方法 采用XB-Phenyl柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温为40℃,流动相为乙腈-30mM乙酸铵(44:56,v/v),流速为1.0ml·min-1,检测波长为350nm.18例男性健康志愿者自身对照随机交叉给药,分别单次口服不同厂家尼美舒利颗粒剂200mg,不同时间点取血,比较两药主要药动学参数的差异和相对生物利用度.结果 尼美舒利与血浆中内源性杂质分离完全,尼美舒利在0.092～15.300μg·ml-1内与峰面积比线性良好,血浆中尼美舒利最低定量浓度为0.092μg·ml-1.方法 的回收率为92.2%～102.2%,日内、日间精密度(RSD)均<8.0%.单剂量口服尼美舒利200mg后,两种制剂的AUC0→t为(83.51±23.34)μg·h-1·ml-1和(86.54±27.92)μg·h-1·ml-1;AUC0→∞为(87.00±26.23)μg·h-1·ml-1和(91.04±32.57)μg·h-1·ml-1;Cmax为(10.18±1.76)μg·ml-1和(10.60±1.62)μg·ml-1;tmax为(2.1±0.7)h和(2.0±0.8)h.结论 该方法简单快速,灵敏度高,可用于尼美舒利的体内过程研究.方差分析表明,两制剂之间药动学参数无显著差异,试验制剂与参比制剂为生物等效制剂.     

高效液相色谱法测定复方呋喃西林滴鼻液中主药的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定复方呋喃西林滴鼻液中呋喃西林和盐酸麻黄碱的含量.方法:采用HPLC,Agilent Eclipse×OB-C8色谱柱,乙腈:0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(22:78)为流动相,检测波长为255 nm.结果:呋喃西林在8～32μg·ml-1浓度范围内,盐酸麻黄碱在400～1600μg·ml-1浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,其相关系数分别为r=0.999 8和r=0.999 9,呋喃西林的平均回收率为99.66%(RSD为0.68%),日内RSD为0.38%;日间RSD为1.25%;盐酸麻黄碱的平均回收率为99.90%(RSD为0.44%),日内RSD为0.29%,日间RSD为1.12%.结论:本法简便、快速、结果准确,可用于测定复方呋喃西林滴鼻液的含量.     

葛根素微乳灌胃后大鼠血浆中葛根素的测定

目的建立反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中的葛根素,用于葛根素微乳在大鼠体内的生物利用度研究。方法取血浆样品,用乙腈沉淀蛋白,Phenomenex C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）分离,4-羟基苯甲醛为内标,乙腈-0.1%醋酸溶液（23∶77）为流动相,流速0.8 mL.min-1,紫外检测波长250 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果葛根素的线性范围为0.10～10.00μg·mL-1（r=0.999 6）,定量下限为0.10μg.mL-1,提取回收率〉79%,方法回收率〉92%,日内、日间精密度RSD〈6%。结论本方法灵敏度好、准确性高,可用于大鼠血浆中葛根素浓度的测定以及葛根素微乳在大鼠体内的生物利用度研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中比阿培南的浓度

目的建立人血浆中比阿培南的高效液相检测方法。方法色谱柱为Waters ACQUITY○RBEH C18柱（250×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈∶水（15∶85,v/v）;流速1.0 mL·min^-1;检测波长为300nm,血浆样品处理选用亚胺培南为内标,采用乙腈沉淀蛋白。结果比阿培南在0.05-25.0μg.mL-1范围内线性良好（r=0.9988,加权系数为1/C2）,HPLC测定定量限为0.05μg.mL-1,比阿培南浓度分别为0.1,5.0 and 20.0μg·mL^-1血浆样本绝对回收率分别为94.28%,95.07%,93.96%,相对回收率分别为99.87%,102.55%,98.64%,精密度试验日内和日间RSD均小于15%,稳定性试验结果表明血浆样品在样品处理过程中较稳定（RSD〈15%）。结论本方法灵敏度高,操作简便、快速,重复性好,适用于比阿培南血浆浓度测定。     

红净胶囊质量标准研究

目的建立红净胶囊的质量标准。方法采用显微鉴别法鉴别本制剂中的冰片和三七;采用薄层色谱法(TLC)鉴别丹参、冰片和三七;采用高效液相色谱法(HPLC)测定沙利度胺的含量,色谱柱为Inertsustain C18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(15∶85,v/v);检测波长为237 nm。结果在选定的薄层色谱条件下,斑点显色清晰,分离效果良好。沙利度胺浓度在40.32~141.12μg/m L范围内呈良好的线性关系(r=0.999 8);平均回收率为98.27%,RSD为1.44%(n=9)。结论该方法简便可行,专属性强,重现性好,可用于红净胶囊的质量控制。     

用HPLC法测定参维冻干蜂王浆片中维生素B1和维生素B2含量

目的 建立参维冻干蜂王浆片中维生素B1和维生素B2的含量测定方法.方法 用KANTO CHEMICAL Co.,Inc,Mightysil C18色谱柱(250×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.032%的辛烷基磺酸钠溶液(取辛烷基磺酸钠0.32g,加冰醋酸3ml和三乙胺3ml,加水溶解至1000ml)(10∶90)为流动相,流速1.0ml·min-1,检测波长为270nm,柱温为35℃.结果 维生素B1的线性范围为16μg·ml-1～800μg·ml-1(r=0.9999),平均回收率为99.4%,RSD=0.9%(n=9);维生素B2的线性范围为2μg·ml-1～104μg·ml-1(r=1.0000),平均回收率为99.6%,RSD=0.7%(n=9).结论 HPLC法适用于参维冻干蜂王浆片中维生素B1和维生素B2的含量测定.     

沙利度胺联合甲氨蝶呤对关节炎大鼠炎症及细胞因子的影响

目的：研究沙利度胺联合甲氨蝶呤对大鼠Ⅱ型胶原诱导型关节炎症及细胞因子的影响。方法：建立类风湿性关节炎大鼠模型,自造模次日治疗组分别给予沙利度胺（150mg·kg^-1·d^-1）联合甲氨蝶呤（0．2mg·kg^-1·d^-1）和甲氨蝶呤（0．2mg·kg^-1·d^-1）单用,疗程均为6周。各组大鼠每周进行一次关节炎指数（AI）评分,于造模第6周取血清进行Western Blot检测大鼠体内IL-1β、TNF-α的表达并计算相对含量。结果：沙利度胺联合甲氨蝶呤、单用甲氨蝶呤均能降低模型大鼠AI评分,沙利度胺联合甲氨蝶呤作用强于单独使用甲氨蝶呤,使AI评分明显下降。沙利度胺联合甲氨蝶呤、甲氨蝶呤均可抑制IL-1β、TNF-α的表达,治疗后两种因子表达均与模型组有统计学差异（P〈0．05）,但仍不能达到正常水平（P〈0．05）。结论：沙利度胺联合甲氨蝶呤可能通过抑制IL-1β、TNF-α的表达而达到抗关节炎症的作用,沙利度胺与甲氨蝶呤有协同作用。     

积雪草酸大鼠体内药动学考察

目的建立大鼠血浆中积雪草酸(asiatic acid,AA)的柱前衍生化HPLC,探讨AA在大鼠体内的药动学。方法 SD大鼠,♂,尾静脉注射AA(10mg·kg-1),于给药后不同时间采取血浆,经DIKMA Proelut PLS柱固相萃取,柱前衍生化HPLC测定血浆中AA浓度(以甘草次酸为内标),药物统计软件(PKS 1.0)拟合统计药动学参数。结果血药浓度在0.1~20μg·m L-1内线性良好(r=0.999 6),平均提取回收率为71.1~79.9%,日内、日间精密度RSD均<13%,样品在-20℃放置,经2次冻融循环后基本稳定。AA在大鼠体内药-时曲线符合一室开放模型,主要药动学参数为:tmax=2.0min,Cmax=14.7μg·m L-1,t1/2=35.1min,AUC0-t=217.0μg·min·m L-1,AUC0-∞=234.3μg·min·m L-1。结论 AA在大鼠体内消除迅速,所建立的提取及柱前衍生化HPLC适用于体内AA的测定。     

静脉注射沙利度胺及其前药和美014后大鼠体内药动学研究

目的:研究沙利度胺及其前药和美014经静脉注射给药后沙利度胺在大鼠体内的药动学情况。方法:大鼠单次尾静脉注射给予等摩尔数的沙利度胺或和美014后,采集不同时间点的血液样品及注射和美014后各组织样品,用高效液相色谱法测定血浆和组织中的沙利度胺的浓度,用3p97药动学程序拟合并计算、比较药动学参数。结果:大鼠静脉注射沙利度胺或和美014后体内沙利度胺t1/2β约为159～170min,表观分布容积Vd约为0.758～1.062L·kg-1,各药动学参数两两比较无明显差异。沙利度胺在大鼠体内各组织中分布广泛,其中以在肝、肠、肾、脑等组织中浓度较高。结论:大鼠静脉注射沙利度胺或和美014后药动学特征无明显差异,和美014在体内可快速完全转化成沙利度胺,沙利度胺在大鼠体内分布快、广。     

UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中甘草次酸的浓度及其药动学评价

目的建立超高效液相色谱串联质谱法测定大鼠血浆中甘草次酸的质量浓度,并将其用于甘草次酸原料药及其磷脂复合物在大鼠体内的药动学评价。方法采用沉淀蛋白法对血浆样品进行预处理。以熊果酸作为内标,色谱柱为Waters C_(18)(50 mm×2.1 mm,2.6μm),流动相为乙腈-水(5 mmol·L~(-1)乙酸铵)(体积比85∶15),流速为0.15 mL·min~(-1),采用电喷雾电离(ESI)源,以选择性离子监测、负离子模式进行检测。结果线性范围为0.5～5 000μg·L~(-1),最低定量下限为0.5μg·L~(-1),日内、日间精密度的RSD在2.6%～7.2%内,准确度的RE在-13.1%～2.2%内,提取回收率在87.8%～95.0%内,内标归一化的基质因子在93.9%～103.1%内,RSD在5.7%～7.1%内。结论该方法符合生物样品的测定要求,适用于甘草次酸原料药及其磷脂复合物在大鼠血浆的质量浓度测定及其药动学评价。     

高效液相色谱法测定甲硝唑诺氟沙星栓的含量

建立甲硝唑诺氟沙星栓中甲硝唑、诺氟沙星含量的HPLC测定方法.色谱柱为SUNTEK Kromasil C18柱;流动相为0.025mol·L-1磷酸溶液(用三乙胺调节pH值至3.0±0.1)-乙腈(80:20),流速为1.0ml·min-1,检测波长为278nm,线性范围为甲硝唑2.5～20μg·ml-1,r=0.9999,诺氟沙星2.5～20μg·ml-1,r=0.9999,平均回收率甲硝唑为97.55%,RSD为0.6%,诺氟沙星为97.96%,RSD为0.8%.方法准确可靠,简单易行,适用于甲硝唑诺氟沙星栓中甲硝唑、诺氟沙星的含量测定.     

HPLC法测定大鼠血浆中川续断皂苷Ⅳ的浓度

目的：建立了高效液相色谱测定大鼠血浆中川续断皂苷Ⅳ浓度的方法。方法：血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,采用HPLC法测定。色谱柱为Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相为乙腈-甲醇-水（32：17：51,v/v）;检测波长205nm;柱温为室温;流速1.0mL·min-1。动物实验使用Wistar大鼠6只,采用腹腔注射给药（55mg·kg-1）,进行血药浓度测定和药动学参数计算。结果：大鼠血浆内源物质对药物测定无干扰,在血药浓度5.0～500.0μg·mL-1范围内,浓度对峰面积有良好的线性关系（r=0.9946）,定量下限为5.0μg·mL-1;低、中、高3种浓度样品的回收率分别为85.0%、83.6%和86.6%,平均为85.0%;日内、日间精密度RSD均小于7.8%（n=9）。采用非房室模型分析方法进行数据处理,所得参数符合药物动力学变化趋势。结论：该法准确、简便,可用于川续断皂苷VI在大鼠血浆中的浓度测定和药物动力学研究。     

HPLC法同时测定清热灵颗粒中黄芩苷和连翘苷含量

目的:建立同时测定清热灵颗粒中黄芩苷和连翘苷含量的HPLC方法。方法:色谱柱:Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm)。流动相:乙腈-0.5%三乙胺水溶液(磷酸调pH至3.05)(30:70)。检测波长为277nm,流速:1.0ml·min-1;柱温:25℃。结果:黄芩苷线性范围为1.65～105.57μg·ml-1(r=0.9999),平均回收率为98.94%,RSD为0.39%(n=6);连翘苷线性范围为1.63～104.55μg·ml-1(r=0.9999),平均回收率为99.00%,RSD为0.46%(n=6)。结论:方法简便可靠,结果重现性好,为控制清热灵颗粒的内在质量提供了科学依据。     

高效液相色谱法测定血浆中沙利度胺的浓度

目的建立测定人血浆中沙利度胺浓度的高效液相色谱法。方法采用蛋白沉淀法对血样进行预处理,以外标法计算浓度。色谱条件：Hypersil ODS色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相为11 mmol.L-1四丁基溴化胺溶液-乙腈（84∶16,含2.5%三乙胺,冰醋酸调pH为3.12）,紫外检测波长为237 nm,柱温：流速为1.0 mL.min-1。结果沙利度胺保留时间为12.34 min,最低定量浓度为0.66μg.mL-1,线性范围为0.66～84.48μg.mL-1,绝对回收率〉67%。结论该方法专属性强、灵敏度高,适合沙利度胺的血浆浓度测定及药动学研究。     

HPLC法测定复合维生素注射液(13种)中4种脂溶性维生素的含量

目的建立HPLC法同时测定复合维生素注射液(13种)中4种脂溶性维生素的方法.方法采用固相萃取法,分离4种脂溶性维生素,色谱柱Inetsil ODS2 C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-甲醇一二氯甲烷(801010),检测波长265 nm,流速1.0 ml·min-1,柱温30℃.结果维生素D3、维生素E、维生素K1及维生素A的线性范围分别为0.82～1.2μg·ml-1(0.999 6),1.65～2.48 mg·ml-1(0.999 8),240～360μg·ml-1(r=0.999 7)及O.16～0.24 mg·ml-1(r=0.999 5),平均回收率为100.7%(RSD1.2%),101.5%(RSD 1.9%),100.7%(RSD 1.1%)及99.3%(RSD0.9%)(n=9).结论方法简单、快速、重复性好,可用于该该剂的质量控制.