2型糖尿病大鼠心肌细胞超微结构改变及灵芝孢子的干预

目的:探讨2型糖尿病大鼠心肌细胞超微结构的改变情况及灵芝孢子对其改变的影响。方法:选Wistar大鼠50只,随机分3组(正常对照组,模型组,灵芝孢子组)。模型组及灵芝孢子组用链脲佐菌素(STZ)诱导成糖尿病大鼠动物模型,成功者改喂高脂高糖饮食,灵芝孢子组另加喂灵芝孢子粉(250m g.kg/d)持续10周。实验结束前一天做糖耐量试验,断头取血,用透射电镜观察糖尿病大鼠心肌细胞病理变化。结果:模型组肌原纤维边界不清,排列乱,有融解消失,线粒体肿胀变性,数目多,微血管内皮细胞肿胀,管腔窄;灵芝孢子组电镜下病变明显减轻。结论:灵芝孢子可以抑制糖尿病性心肌病时心肌细胞超微结构的改变,对心肌具有保护作用。     

罗格列酮对糖尿病大鼠血清高敏C反应蛋白和肾小球病理改变的影响

目的 探讨糖尿病肾病大鼠肾小球病理改变和血清中高敏C反应蛋白(hs-CRP)的变化及罗格列酮干预后的影响.方法 将40只SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、糖尿病组(DM组)和罗格列酮干预组(DR组).STZ诱导糖尿病大鼠模型,罗格列酮对DR组进行治疗性灌胃.10周后留取尿液测量尿微量白蛋白(MAU)、Glu、HbAlc、血脂采用ELISA法检测hs-CRP.在光镜、透射电镜下观察肾小球组织形态和超微结构的改变.结果 DM组和DR组Glu、HbAlc、血脂差别无统计学意义(P＞0.05).DM组和DR组血清hs-CRP、MAU较C组明显增高,DR组低于DM组,差别有统计学意义(P＜0.01).血清hs-CRP与MAU呈显著正相关(r＝0.725,P＜0.01).DR组肾小球病理改变较DM组明显改善.结论 hs-CRP的水平与糖尿病肾病的严重程度一致,罗格列酮可以通过减低血清hs-CRP的水平,减轻炎症反应,起到保护肾脏的作用.     

非酶糖化抑制剂对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡作用的研究

目的：观察非酶糖化抑制剂-氨基胍(AG)对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法：54只SD大鼠分为12周对照组(8只)，24周对照组(10只)；糖尿病12周组(8只)，糖尿病24周组(10只)；AG治疗12周组(8只)，AG治疗24周组(10只)，观察糖尿病大鼠心肌病变过程中(12周及24周)心脏肥厚、心功能指标及心肌细胞凋亡的改变一结果：链尿佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠12周时出现心功能异常并可见凋亡的心肌细胞，随心衰的加重，24周时凋亡细胞数目明显增多。透射电镜检查，发现糖尿病大鼠左室心肌组织中可见凋亡的心肌细胞(具有凋亡形态学特征)。AG治疗组大鼠心功能和心肌超微结构明显改善，心肌细胞凋亡数目减少、结论：心肌细胞凋亡在糖尿病心肌病发生发展过程中起着重要作用，AG可有效减少心肌细胞凋亡，改善心肌病理形态学异常。     

NF-КBP65在心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡中的表达及罗格列酮对其的影响

目的观察罗格列酮对心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡过程中NF-КBP65表达的影响。方法45只雄性wistar大鼠随机分为假手术组(B组,n=15)和心肌梗死组(n=30),通过结扎左冠状动脉前降支(LAD)制作急性心肌梗死模型。模型制作成功24h后,心肌梗死组再随机分为心肌梗死对照组(A组,n=15)和罗格列酮干预组(C组,n=15)。罗格列酮干预组每日给以罗格列酮灌胃(4mg/kg),假手术组和心肌梗死对照组每日给以等量生理盐水灌胃,持续8周。利用免疫组化法检测非梗死区NF-КBP65(nuclear factor-КBP65)的含量。结果给药8周后,A组非梗死区心肌中NF-КBP65的表达,心肌细胞凋亡率,左心重量指数与B、C组相比显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);C组与B组相比,非梗死区心肌中NF-КBP65的表达,心肌细胞凋亡率,左心室重量指数显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论罗格列酮可能通过抑制NF-КBP65的表达来改善大鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡。     

罗格列酮对糖尿病大鼠大血管中磷酸化IKK和IκBα表达的影响

目的探讨罗格列酮对糖尿病大鼠大血管组织中磷酸化核因子-κB(NF-κB)抑制蛋白激酶(IKK)及其下游作用物NF-κB抑制蛋白(IκBα)表达的影响。方法将48只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A)、糖尿病组(B)和罗格列酮治疗组(C),C组给予5mg·kg-1·d-1罗格列酮生理盐水混悬液灌胃,A组和B组给予等体积生理盐水灌胃,用免疫组织化学检测8周和12周后颈动脉中磷酸化IKK和磷酸化IκBα表达的改变,光镜、电镜观察各组颈动脉形态的改变。使用图像分析系统分析颈动脉内中膜厚度(IMT),分离血清测血糖、血脂以及C肽。结果与正常对照组相比,糖尿病组及罗格列酮治疗组IKK及IκBα表达增加,IMT增加(P<0.05);而罗格列酮治疗组IKK及IκBα表达低于糖尿病组,IMT下降(P<0.05)。结论罗格列酮可通过抑制IKK活化,进而抑制IκBα降解,降低NF-κB活化水平,从而减轻大血管病变。     

罗格列酮对糖尿病大鼠心肌纤维化及核因子κB、结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨罗格列酮对糖尿病大鼠心肌纤维化及心肌核因子κB(NF-κB)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型。30只大鼠分为3组:正常对照组(n=8)、模型组(n=11)和罗格列酮组(n=11)。罗格列酮组每日予罗格列酮5 mg·kg~(-1)灌胃,其余2组予同体积生理盐水,共12 wk。采用Masson染色检测左室心肌胶原含量、免疫组化法检测心肌NF-κB的表达、Western印迹技术检测心肌CTGF蛋白质表达。结果与正常对照组相比,模型组大鼠左室心肌组织胶原含量明显升高(10±s 3)%vs(16.2±2.4)%,P<0.0l;NF-κB、CTGF蛋白质表达水平亦明显升高,P<0.01。与模型组比较,罗格列酮组大鼠左室心肌组织胶原含量有所下降(16.2±2.4)%vs (12±3)%,P<0.05;NF-κB、CTGF蛋白质表达水平明显减少,P<0.01。结论罗格列酮可抑制糖尿病大鼠心肌纤维化及心肌NF-κB、CTGF的蛋白表达。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠心脏组织脂联素受体2单核趋化蛋白-1表达的影响

目的探讨罗格列酮对2型糖尿病大鼠心脏组织中脂联素受体2(AdipoR2)、单核趋化蛋白(MCP)-1表达影响。方法 36只雄性Wistar大鼠,随机分为3组:健康对照组(A组,10只),糖尿病组(B组,13只)和罗格列酮治疗组(C组,13只),采用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素(STZ)的方法诱导糖尿病模型。用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法测定大鼠心肌AdipoR2mRNA、MCP-1mRNA的表达,用免疫组织化学法检测心脏组织中AdipoR2蛋白的表达。结果与A组比较,B组糖尿病大鼠心质量/体质量增加,MCP-1表达增加,血浆脂联素水平、心肌AdipoR2mRNA和蛋白表达显著降低。经罗格列酮治疗后,C组大鼠心质量/体质量、MCP-1mRNA降低,血浆脂联素水平、心肌AdipoR2mRNA和蛋白表达增加。结论 2型糖尿病大鼠心肌Adi-poR2表达水平降低,MCP-1的表达水平升高,罗格列酮上调2型糖尿病大鼠心肌AdipoR2的表达,并抑制MCP-1的过度表达从而延缓糖尿病心肌病的进展,可能是其心脏保护作用机制之一。     

转化生长因子β_1在糖尿病心肌病变中作用的研究

目的:观察链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病(T1DM)大鼠体内血清和心肌局部转化生长因子β1(TGFβ1)在糖尿病心肌病变发生发展病程中含量的变化和心肌结构的改变,探讨TGFβ1在糖尿病心肌病变中的作用。方法:采用双抗体夹心ELISA法进行血清TGFβ1测定,用免疫组织化学测定心肌TGFβ1的变化,光镜下观察心肌细胞形态学改变,电镜下观察心肌线粒体的超微结构变化及毛细血管基底膜的改变。结果:糖尿病大鼠较正常大鼠血清和心肌组织中TGFβ1含量增加(P<0.01),且随着病程的进展而升高;光镜下可见心肌细胞肿胀,排列紊乱;电镜下可见心肌细胞线粒体肿胀,毛细血管内皮细胞基底膜增厚。结论:糖尿病大鼠TGFβ1浓度变化趋势与心肌病变程度相一致,其浓度变化可反映T1DM心肌病的病变程度,在T1DM心肌病变中起促进作用。     

TNF-α在糖尿病心肌病变中的表达

目的:观察链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在血清、心肌组织中的表达水平及心肌细胞结构改变,探讨TNF-α在糖尿病心肌病变发生、发展中的作用。方法:建立糖尿病大鼠模型(实验组),分别于6周、10周、14周,在光镜、电镜下观察心肌结构,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清TNF-α水平,免疫组化方法检测心肌组织TNF-α表达,并与对照组对比。结果:TNF-α在实验组较对照组表达增加(P<0.01),并随病程进展增加。光镜、电镜下可见糖尿病心肌细胞肿胀、肌丝稀疏,线粒体肿胀、破裂。结论:TNF-α在糖尿病大鼠心肌中表达增强,促进糖尿病心肌病变进展。     

氨基胍对糖尿病大鼠心脏功能及心肌超微结构的影响

目的 :探讨非酶糖化抑制剂 氨基胍 (amin oguanidine ,AG)对链尿佐菌素 (streptozotocin ,STZ)糖尿病大鼠心肌的保护作用 ,为糖尿病心肌病的防治提供参考。方法 :建立STZ糖尿病大鼠模型 ,随机分为对照组、糖尿病组和氨基胍治疗组 ,AG剂量为15 0mg·kg-1·d-1。 12周时测定大鼠血清果糖胺含量、心脏重量指数、左室内压最大上升和下降率 (±dp dtmax)值 ,电镜观察心肌超微结构 ,测量心肌毛细血管基底膜厚度。结果 :糖尿病组大鼠血清果糖胺含量、心脏重量指数明显增高 ,±dp dtmax降低 ;超微结构显示心肌肌原纤维排列紊乱 ,线粒体肿胀变性 ,间质胶原增生 ,微血管内皮细胞肿胀、基底膜明显增厚。氨基胍治疗组血清果糖胺含量降低、心脏重量指数明显下降、±dp dtmax 值上升 ,微血管基底膜增厚减轻 ,间质胶原减少 ,心肌细胞超微结构异常减轻。结论 :糖尿病时存在心脏功能异常、心肌肥厚和超微结构的改变 ,早期应用AG在一定程度上可阻抑糖尿病心肌病变的发展。     

罗格列酮对糖尿病大鼠骨骼肌损害防护作用的机制研究

目的探讨罗格列酮对糖尿病大鼠骨骼肌损害防护作用的机制。方法用链脲佐菌素(STZ)将39只10周龄雄性Wistar大鼠诱导成糖尿病大鼠模型,分为胰岛素治疗组、罗格列酮治疗组、未治疗组(每组13只),并以13只正常大鼠作对照。于第16周末抽取各组大鼠心脏血测定TNF-α、IL-6、C-反应蛋白、SOD、P物质水平,并处死取股二头肌进行病理学观察;用免疫组织化学染色观察骨骼肌中晚期糖基化终末产物(AGEs)与过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)含量的变化。结果未治疗组血清IL-6、TNF-α、C-反应蛋白水平均明显高于正常组(P<0.05),胰岛素组和罗格列酮组则与正常对照组比较无差异;未治疗组血清SOD、SP水平与正常组相比明显降低(P<0.01),胰岛素组和罗格列酮组的SOD和P物质二者显著高于糖尿病组(P<0.01,P<0.05)。组织学观察:糖尿病组骨骼肌普遍萎缩,肌纤维横截面积明显缩小;部分肌纤维变性,间质水肿,炎细胞浸润;胰岛素组和罗格列酮组骨骼肌有部分轻度萎缩,间质轻度水肿,少量淋巴细胞浸润。免疫组织化学显示:AGEs蛋白、PPAR-γ蛋白均呈棕黄色颗粒状,弥漫或斑片状沉积于骨骼肌细胞胞浆中;在糖尿病组AGEs最高,PPAR-γ最低。结论糖尿病大鼠受损的骨骼肌中有AGEs蓄积和血清炎症因子增高,罗格列酮对糖尿病大鼠骨骼肌损害具有防护作用。     

羟苯磺酸钙对糖尿病大鼠肾脏表达E-选择素的影响

目的探讨羟苯磺酸钙对肾小球E-选择素(E-selectin)表达的影响和对糖尿病肾病大鼠的保护作用。方法22只大鼠行左肾切除术后,取6只作为正常对照组,另外16只单次腹腔注射1%链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型。其中12只大鼠造模成功,并将其随机分成糖尿病对照组和羟苯磺酸钙治疗组各6只,羟苯磺酸钙治疗组灌胃给予羟苯磺酸钙100mg.kg-1.d-1,正常对照组和糖尿病对照组每天灌胃给予相同体积的纯化水。用免疫组化和Westernblot法检测12周后E-selectin表达的改变。结果与正常对照组比较,糖尿病对照组和羟苯磺酸钙治疗组E-selectin表达增加(P<0.01);而羟苯磺酸钙治疗组E-selectin表达显著低于糖尿病对照组(P<0.01)。结论羟苯磺酸钙可抑制糖尿病大鼠E-selectin的表达,延缓糖尿病肾病的发生、发展。     

罗格列酮对兔心肌缺血再灌注损伤保护机制的研究

目的通过研究过氧化物酶体增殖物激活受体y（PPAR-γ）激动剂对心肌缺血-再灌注损伤兔模型梗死面积及组织病理学改变的影响,探讨PPAR-γ介导心脏保护作用的可能机制。方法新西兰白兔40只随机分为5组,包括：假手术组、模型组、罗格列酮低剂量组、罗格列酮高剂量组及罗格列酮高剂量＋GW9622组。假手术组只开胸穿线不结扎心脏,其余组兔冠状动脉左前降支结扎30min,再灌注120min。建立心肌缺血再灌注模型后1h分别检测血清一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（T-SOD）浓度;ELISA法检测血清炎症因子白介素-6（IL-6）浓度;术后取兔心脏,硝基四氮唑蓝（NBT）染色后评价心肌梗死面积;做HE染色切片及电镜片观察组织及超微结构改变。结果与模型组和罗格列酮高剂量＋GW9622组相比,罗格列酮低剂量组、罗格列酮高剂量组血清NO含量降低,IL-6浓度显著降低,血清T-SOD浓度显著升高（P〈0．01）;心肌梗死面积明显下降,心肌病理结构改变较轻,心肌细胞超微结构损坏破坏程度也明显减轻。结论罗格列酮通过提高血清T-SOD水平减轻氧化应激,抑制炎症因子IL-6的生成减轻炎症反应,起到减轻心肌损伤,降低心肌梗死面积的保护作用。     

硫氢化钠对糖尿病心肌病大鼠心脏保护作用及对JNK/FoxO1/Bcl-2信号通路的影响

摘要： 目的 观察外源性硫化氢的供体硫氢化钠 （NaHS） 对糖尿病心肌病 （DCM） 大鼠模型心肌损伤的保护作用及相关机制。方法 运用糖尿病饮食及链脲佐菌素 （STZ） 腹腔注射法建立DCM大鼠模型; 选取DCM大鼠16只, 正常大鼠16只, 随机分为DCM+0.9%氯化钠组 （DCM+Saline组）、 DCM+硫氢化钠组 （DCM+NaHS组）、 正常大鼠+0.9%氯化钠组 （Control+Saline组）、 正常大鼠+硫氢化钠组 （Control+NaHS组）, 每组8只; 予以DCM+NaHS组、 Control+NaHS组腹腔注射NaHS溶液100 mmol/ （kg·d）（浓度12 mmol/L, 体积8.3 mL/kg）, DCM+Saline组、 Control+Saline组大鼠腹腔注射等量生理盐水, 持续12周。实验结束行心脏超声测定左室射血分数 （LVEF） 及左室缩短分数 （LVFS）, 随后取左室心肌组织, 采用HE染色及Masson染色观察心肌组织病理改变, Western blot实验检测B淋巴细胞瘤-2基因 （Bcl-2）、磷酸化氨基末端蛋白激酶 （p-JNK）、 磷酸化叉头蛋白家族1 （p-FoxO1） 蛋白的表达。结果 糖尿病及硫氢化钠对大鼠心功能指标、 p-JNK、 p-FoxO1及Bcl-2蛋白有影响, 除外Bcl-2蛋白均存在交互作用 （P＜0.05）; 其中, DCM大鼠 LVEF及LVFS下降、 心肌细胞肥大及心肌间质纤维化, Bcl-2、 p-FoxO1蛋白表达下降、 p-JNK蛋白表达增加 （P＜ 0.05）; NaHS可以使DCM大鼠心功能指标、 病理组织变化得到改善, Bcl-2、 p-FoxO1蛋白表达增加、 p-JNK蛋白表达减少 （P＜0.05）。结论 DCM心肌损伤与细胞凋亡相关, 硫氢化钠可以减轻DCM心肌损伤保护心脏功能, 可能通过作用于JNK/FoxO1/Bcl-2发挥作用。     

六味地黄汤对糖尿病大鼠心肌病变的影响

目的 通过研究六味地黄汤对糖尿病大鼠心肌细胞病理变化的影响,为其治疗糖尿病心脏并发症的药理作用提供实验依据.方法 随机将大鼠分为正常组、糖尿病组、六味地黄汤低、中、高剂量组(100、200和400mg.·kg-1·d-1)和罗格列酮组(100 mg·kg-1·d-1).除正常组外,其余各组采用腹腔注射链脲佐菌素法诱发糖尿病大鼠模型,造模成功后饲养4周,然后连续灌胃给药4周.于末次给药12 h后取材,观察大鼠心肌细胞的形态学变化及细胞凋亡指数.结果 与罗格列酮干预组相比,高剂量六味地黄汤能显著抑制糖尿病大鼠心肌细胞的形态学病变及细胞凋亡(P＜0.01),中剂量组亦具有一定抑制作用.结论 六味地黄汤对糖尿病心肌细胞的病理变化具有一定的抑制作用,可治疗该并发症.     

曲尼司特对糖尿病大鼠心肌纤维化的作用

目的探讨曲尼司特对糖尿病大鼠心肌纤维化的作用及其可能机制。方法健康♂SD大鼠一次性尾静脉注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病组(DM组),曲尼司特低剂量组(Tra1)及高剂量组(Tra2),造模成功72 h后每天ig给予曲尼司特100 mg.kg-1.d-1及200 mg.kg-1.d-1,同时设立对照组(NC组)。饲养12周。测量血糖、心脏质量指数、血浆及心肌血管紧张素Ⅱ水平;Masson染色观察心脏形态学变化,免疫组化法和Western印迹法检测心肌组织CTGF、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达。结果①与NC组相比,DM组大鼠心脏质量指数、血浆及心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平明显升高(P<0.01),心肌间质纤维化明显,心肌CTGF蛋白、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达增加;②与DM组比较,Tra1、Tra2组大鼠心脏质量指数、血浆及心肌AngⅡ水平均明显下降(P<0.05),心肌间质纤维化减轻,心肌CTGF、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达减少。结论曲尼司特能降低糖尿病大鼠心肌AngⅡ水平,减少CTGF、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达,从而抑制糖尿病大鼠心肌纤维化。     

罗格列酮对胰岛素治疗不佳的2型糖尿病病人疗效及安全性评价

目的：观察罗格列酮对胰岛素治疗后血糖控制不良的2型糖尿病(2-DM)病人的疗效及安全性。方法：64例胰岛素治疗后血糖控制不良的2-DM病人分为罗格列酮组(R组)和对照组(C组)，随访12周，观察血糖、糖化血红蛋白、体重、血压、血脂、血常规、肝肾功能以及平均日胰岛素用量等变化。结果：R组血糖水平在治疗第2周起即出现显下降，第12周时有18例病人(58．1％)空腹血糖降至7．0mmol／L以下；HbA1c在6～12周后才有明显降低，至第12周时降幅为1．5％；第12周时，R组平均日胰岛素用量较初访时减少18U，而C组则较初访时增加lOU；R组最常见的不良反应为低血糖和下肢水肿，发生率分别为45．2％和9．7％，均较C组有显差异。结论：罗格列酮能有效地在减少每日胰岛素用量的基础上降低胰岛素治疗后血糖控制不良的2一DM病人的血糖水平，但应注意水肿和联合治疗时的低血糖现象。