大黄素对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响

目的：研究大黄素(emodin,EMO)对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响。方法：分离培养大鼠前体脂肪细胞,按照EMO添加剂量不同,把培养板中接种细胞的培养孔随机分为0,5,10,20,40,80,160 μmol·L^-1 处理组；采用MTT比色法和流式细胞术测定EMO对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响；采用油红O染色提取法,检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化；采用形态学观察,检测前体脂肪细胞分化的形态学变化。结果：20～160 μmol·L^-1 的EMO对大鼠前体脂肪细胞的增殖与分化呈剂量和时间依赖性地抑制作用,并可在一定程度上诱发前体脂肪细胞凋亡。结论：EMO具有潜在的减肥降脂作用。     

马钱苷对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响

目的探讨马钱苷对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响。方法原代培养大鼠前脂肪细胞,以四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测马钱苷对大鼠前脂肪细胞增殖的影响;以酶组织化学提取法检测其对大鼠前脂肪细胞分化过程中磷酸甘油脱氢酶(GPDH)的影响;以油红O染色方法检测其对大鼠前脂肪细胞分化过程中细胞内脂肪积聚的影响。结果8,16,32μmol/L的马钱苷能够促进大鼠前脂肪细胞的增殖,抑制其分化过程中GPDH的升高和脂肪积聚,作用呈明显量效关系。结论马钱苷具有促进大鼠前脂肪细胞增殖,抑制大鼠前脂肪细胞分化的作用。     

六味地黄丸对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响

目的探讨六味地黄丸对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响。方法原代培养大鼠前脂肪细胞,用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测六味地黄丸含药血清对前脂肪细胞的增殖情况,以酶组织化学法检测其对前脂肪细胞分化过程中的磷酸甘油脱氢酶(GPDH)的影响,油红O染色方法测定其对细胞内脂肪积聚的影响。结果10%以内六味地黄丸含药血清对大鼠前脂肪细胞的增殖有促进作用,对分化过程中的GPDH升高有抑制作用,而对于分化过程中的脂肪积聚则有促进分解的作用。结论六味地黄丸能促进大鼠前脂肪细胞的增殖,抑制大鼠前脂肪细胞的分化。     

不同剂型六味地黄方含药血清对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响

目的:比较六味地黄方各剂型(汤、丸、超微饮片)对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响.方法:原代培养大鼠前脂肪细胞,用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测六味地黄方含药血清对大鼠前脂肪细胞的增殖情况,以酶组织化学法检测其对前脂肪细胞分化过程中的磷酸甘油脱氢酶(GPDH)的影响,油红O染色方法测定其对细胞内脂肪积聚的影响.结果:10%以内六味地黄方含药血清对大鼠前脂肪细胞的增殖有促进作用;对分化过程中的GPDH的升高有抑制作用;而对于分化过程中的脂肪积聚则有促进分解的作用.结论:六味地黄汤、丸、超微饮片能促进大鼠前脂肪细胞的增殖,抑制其分化过程中的GPDH的升高和脂肪积聚;上述各作用皆以高剂量组为佳.     

中药复方益糖康对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响

目的：探讨中药复方益糖康对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响。方法：培养3T3-L1前脂肪细胞;以四甲基偶氮唑盐（MTT）的方法检测益糖康对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响,通过流式细胞仪检测细胞增殖的周期;以油红O染色异丙醇萃取的方法检测益糖康对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂肪积聚的影响。结果：10%含益糖康的大鼠血清,对3T3-L1前脂肪细胞的增殖影响最佳,细胞增殖在S、G2期与对照组比较增多;5%含益糖康大鼠血清抑制分化过程中的脂肪积聚最佳。结论：中药复方益糖康具有促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的作用。     

豆茶决明冲剂含药血清对3T3-L1前脂肪细胞分化的抑制作用

目的:探讨豆茶决明冲剂含药血清对前脂肪细胞增殖和分化的影响及其机制。方法:制备豆茶决明冲剂含药血清,培养3T3-L1前脂肪细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测豆茶决明冲剂含药血清(5%、10%、20%)对3T3-L1前脂肪细胞增殖过程的影响;采用油红O脂肪染色观察及评价细胞分化情况;异丙醇萃取法、甘油三酯(TG)试剂盒检测分析不同浓度豆茶决明冲剂含药血清对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂质合成的影响;采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测关键转录因子CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPβ、C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)mRNA表达水平;采用Western blot法检测关键转录因子C/EBPβ、C/EBPα、PPARγ蛋白表达水平。结果:与对照组(Control)相比,0.9g/kg豆茶决明冲剂含药血清(5%、10%、20%)对3T3-L1前脂肪细胞增殖无显著性影响;采用"鸡尾酒法"成功诱导前脂肪细胞成脂分化为成熟脂肪细胞,豆茶决明冲剂含药血清(5%、10%、20%)干预前脂肪细胞,分化后胞浆中脂滴数量显著性降低。脂滴中TG含量显著性下降,C/EBPβ、C/EBPα、PPARγmRNA和蛋白表达显著性降低。结论:豆茶决明冲剂含药血清对3T3-L1前脂肪细胞分化有抑制作用,其分子机制可能与下调PPARγ、C/EBPα和C/EBPβmRNA和蛋白表达相关。     

大黄酸对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化及相关基因表达的影响

目的:研究大黄酸(1,8-dihydroxy-3-carboxyanthraquinone,Rhein,Rh)对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化及相关基因表达的影响,从分子生物学角度探讨大黄酸降脂的作用机理。方法:体外培养3T3-L1前脂肪细胞,采用噻唑蓝法(MTT)研究大黄酸(5、10、20、40、80、160μM)对3T3-L1前脂肪细胞增殖活性的影响;大黄酸(20、40、80μM)干预3T3-L1脂肪细胞诱导分化,油红O染色分析大黄酸对3T3-L1脂肪细胞分化过程中胞浆脂滴积累的影响;生化法检测大黄酸对3T3-L1脂肪细胞中甘油三酯(Triglyceride,TG)的影响;实时荧光PCR法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma,PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT/enhancer binding protein",C/EBPα)、脂肪酸合成酶(Fatty acid synthetase,FAS)mRNA的表达水平。结果:大黄酸160μM对3T3-L1前脂肪的增殖有显著的抑制作用,大黄酸20、40、80μM剂量依赖地降低3T3-L1脂肪细胞中脂滴的积累,同时显著降低3T3-L1脂肪细胞中TG含量,并且下调3T3细胞中脂肪分化相关基因PPARγ、C/EBPα、FAS mRNA的表达。结论:大黄酸能够抑制3T3-L1脂肪细胞的诱导分化,降低细胞内TG含量,其作用机制可能与下调脂肪分化相关基因PPARγ、C/EBPα、FAS mRNA的表达有关。     

黄芩水提液对3T3-L1脂肪细胞增殖、诱导分化及脂联素启动子荧光素酶活性的影响

目的：本研究旨在观察黄芩水提液（Scutellaria Baicalensis Water Extract,SBWE）对3T3-L1前体细胞增殖、分化,对脂肪细胞因子脂联素表达以及脂联素（Adiponectin,ADP）启动子荧光素酶活性的影响,从分子生物学角度阐述SBWE降脂作用的可能机理。方法：通过体外培养3T3-L1细胞,采用MTT法检测SBWE对3T3-L1细胞增殖能力的影响;通过诱导脂肪细胞分化成为成熟脂肪细胞,观察SBWE对脂肪形成的影响;化学发光法检测脂联素启动子双荧光素酶报告基因活性;荧光定量PCR法检测脂联素mRNA（Adipoq）表达。结果: 与正常组相比,给予3T3-L1细胞0.01、0.1、1 mg?mL^-1浓度的SBWE 24 h,可显著抑制细胞的增殖活性（P<0.05）;0.1、1 mg?mL^-1浓度的SBWE能够降低3T3-L1细胞分化为脂肪细胞的数量,并减少细胞内脂滴聚集,但无明显剂量依赖性;0.01、0.1 mg?mL^-1浓度SBWE能显著提高脂联素基因启动子荧光素酶活性,与空载体比较差异有统计学意义（P<0.05）;与正常组相比,给予3T3-L1细胞0.1 mg?mL^-1 SBWE 24 h,诱导前后的脂肪细胞Adipoq表达均明显增加 （P<0.05）。结论: SBWE可有效抑制3T3-L1脂肪细胞的增殖、分化,同时增加脂联素基因表达,这可能是通过增强脂联素基因启动子荧光素酶活性实现,这些为黄芩水提液减肥的作用机制提供一定的基础。     

白芦藜醇影响前脂肪细胞增殖与分化及调控相关信号通路的研究

目的:探讨白芦藜醇(Resveratrol)对于小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响及其调控相关信号通路的研究。方法:培养小鼠3T3-L1前脂肪细胞,添加不同剂量的白芦藜醇处理24、48 h,用MTT法检测细胞增殖;在诱导3T3-L1前脂肪细胞分化的过程中添加100μmol·L~(-1)白芦藜醇处理48 h,继续培养6 d后油红O染色观察脂肪细胞的分化程度;采用荧光定量PCR技术检测与分化相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白-α(C/EBPα)和Notch1,炎症相关基因单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和瘦素(Leptin)的mRNA表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)分析3T3-L1分化过程中白芦藜醇对MCP-1蛋白分泌的影响。结果:白芦藜醇显著抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖,并呈现一定的时间、剂量依赖效应。与对照组相比,白芦藜醇通过抑制脂肪细胞中分化相关基因(PPARγ、C/EBPα和Notch1)mRNAs表达水平,抑制3T3-L1细胞分化过程中脂滴的合成;白芦藜醇可以促进3T3-L1前脂肪细胞向脂肪细胞分化过程中炎症相关因子MCP-1的mRNA表达和蛋白分泌,白芦藜醇致成熟脂肪细胞中Leptin mRNA表达水平在第2天降低,但第4天升高。结论:白芦藜醇可以抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖,及前脂肪细胞分化,其机制可能是通过抑制PPARγ、C/EBPα和Notch1的表达。在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中,白芦藜醇可以促进脂肪细胞分化过程中MCP-1的表达及分泌,及增加Leptin基因表达,调控炎症状态影响肥胖。     

消渴丸主要化学成分对胰岛素抵抗脂肪细胞糖脂代谢的影响

目的:观察消渴丸主要化学成分对3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化及对胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖消耗、游离脂肪酸的影响。方法:培养3T3-L1前脂肪细胞,药物干预48 h后,采用MTT法检测消渴丸主要化学成分对其增殖的影响,采用油红O染色法观察对其分化的影响。取分化成熟的脂肪细胞,建立胰岛素抵抗模型,采用葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)检测培养液中葡萄糖消耗量;比色法检测游离脂肪酸浓度。结果:与溶媒对照组比较,部分消渴丸主要化学成分能显著促进前脂肪细胞增殖及分化(P0.05或P0.01);与溶媒对照组比较,大多数消渴丸主要化学成分能明显促进胰岛素抵抗细胞的葡萄糖消耗、抑制游离脂肪酸的产生(P0.05或P0.01)。结论:部分消渴丸的提取物能够促进前脂肪细胞增殖以及分化,多数消渴丸的提取物能够改善胰岛素抵抗。     

地黄寡糖对3T3-L1脂肪细胞增殖及胰岛素抵抗的作用

目的：探讨地黄寡糖对脂肪细胞增殖和胰岛素抵抗的影响。方法：培养3T3-L1前脂肪细胞,用四甲基偶氮唑盐（MTT）方法检测3T3-L1前脂肪细胞及脂肪细胞的增殖情况,同时采用地塞米松诱导3T3-L1脂肪细胞建立胰岛素抵抗模型,检测地黄寡糖对细胞培养基中葡萄糖浓度的影响。结果：在DMEM高糖培养基中,地黄寡糖可促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,抑制3T3-L1脂肪细胞增殖,作用呈明显量效关系；使3T3-L1前脂肪细胞及3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗量增加,呈明显量效关系；地黄寡糖能明显增加胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞培养基中的葡萄糖消耗量,增强对胰岛素的敏感性。结论：地黄寡糖可以促进前脂肪细胞的增殖,抑制脂肪细胞的增殖,地黄寡糖对地塞米松诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗具有明显的改善作用。     

Inhibition of preadipocyte differentiation and lipid accumulation by Orengedokuto treatment of 3T3-L1 cultures

Obesity is a major cause of metabolic syndrome and is due to an increase in the number and hypertrophy of adipocytes. Accordingly, inhibition of the differentiation and proliferation of adipocytes may be used in the treatment and prevention of metabolic syndrome. This study investigated the effects of 50 commonly used Kampo medicines on the differentiation of 3T3-L1 preadipocytes to search for a drug with an antiobesity effect. Kampo medicines were screened, and the strongest differentiation-inhibitory effect was noted with Orengedokuto. To explore the active ingredients in Orengedokuto, the effects of four crude drug components of Orengedokuto were investigated. It was found that the differentiation-inhibitory effect of Orengedokuto was accounted for by Coptidis rhizome and Phellodendri cortex. Furthermore, berberine, a principal ingredient common to Coptidis rhizome and Phellodendri cortex, showed a differentiation-inhibitory effect. The effect of berberine involves an inhibition of the mRNA and protein expression of peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) and CCAAT/enhancer binding protein α (C/EBPα). Moreover, berberine inhibited lipid accumulation in adipocytes. These findings suggest that an antiobesity effect could be a new indication for Orengedokuto and that its active ingredient is berberine, with a mechanism involving the inhibition of PPARγ and C/EBPα expression.     

没食子儿茶素促进脂肪细胞吸收葡萄糖研究

目的探讨没食子儿茶素对脂肪细胞在高浓度葡萄糖条件下吸收葡萄糖的作用。方法应用3T3-L1前脂肪细胞分化模型,测定在脂肪细胞中没食子儿茶素对葡萄糖吸收的作用和对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。结果没食子儿茶素可促进脂肪细胞中高浓度葡萄糖(30 mmol/L)条件下由胰岛素刺激的葡萄糖吸收,加快3T3-L1前脂肪细胞的分化。结论没食子儿茶素可增加脂肪细胞葡萄糖吸收并促进3T3-L1前脂肪细胞分化,提示没食子儿茶素可有效改变血糖浓度和改善胰岛素抵抗。     

梓醇和小檗碱及其配伍对脂肪细胞糖代谢和分化的影响

目的:观察中药提取物梓醇和小檗碱及其配伍对3T3-L1脂肪细胞增殖,葡萄糖代谢及细胞分化的影响,初步探讨药物改善胰岛素抵抗(IR)的可能机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测3T3-L1前脂肪细胞的增殖;以葡萄糖氧化酶法检测药物干预后培养液中葡萄糖消耗量,并以油红O染色检测细胞分化过程中胞浆脂质的堆积。结果:与对照组比较,小檗碱组使前脂肪细胞MTT值增加29%,而小檗碱加梓醇组、梓醇组均无差异;梓醇、小檗碱及其配伍组分别使成熟脂肪细胞的葡萄糖消耗增加64%、76.5%和98%;小檗碱处理脂肪细胞胞浆脂质堆积明显低于对照组,梓醇组与对照组无差异。结论:小檗碱能促进前脂肪细胞增殖,增加葡萄糖消耗,抑制脂肪细胞分化;梓醇能促进葡萄糖吸收;其作用均不依赖胰岛素的存在。直接增加葡萄糖的吸收可能是这两种药物降低血糖,改善胰岛素抵抗的机制之一。     

丹参酮ⅡA在3T3-L1脂肪细胞中促进脂联素的组装(英文)

目的:研究丹参酮IIA对3T3-L1脂肪细胞中脂联素表达和蛋白多聚化的作用。方法:用油红染色鉴定3T3-L1脂肪细胞的分化状态。用Real-time PCR检测基因的mRNA表达水平。用2%15%梯度SDS-PAGE及Western blot检测脂联素三种聚体。用siRNA技术进行基因沉默。结果:本研究发现传统中药丹参中的萘醌二萜类成分丹参酮IIA在脂肪细胞中激活AMPK通路,同时抑制脂肪细胞分化,降低脂联素的表达。而在前体脂肪细胞分化过程或成熟脂肪细胞中加入丹参酮IIA进行处理,均明显促进脂联素的多聚化,增加高聚体的浓度。抑制AMPK通路能够解除丹参酮IIA对脂联素的作用。结论:丹参酮IIA通过激活AMPK在3T3-L1脂肪细胞中促进脂联素的组装。     

黄连解毒汤及其拆方含药血清对前脂肪细胞增殖和分化的影响

目的 探讨黄连解毒汤（Huanglian Jiedu Decoction,HJD）及其拆方含药血清对前脂肪细胞增殖和分化的影响及其机制。     

葛根素对3T3-L1前脂肪细胞分化及胰岛素抵抗模型糖代谢的影响

目的:研究葛根素(Pur)对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响,以及在胰岛素抵抗状态下对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖代谢的影响。方法:不同浓度Pur干预3T3-L1细胞,MTT法检测其对细胞增殖的影响;油红O染色法检测其对前脂肪细胞分化过程及成脂的影响;地塞米松诱导3T3-L1细胞建立胰岛素抵抗模型,用不同浓度Pur进行干预,测定细胞的葡萄糖消耗量。结果:Pur(3～300μmol/L)对3T3-L1前脂肪细胞增殖无明显影响;Pur(30～300μmol/L)促进3T3-L1细胞的分化成脂,增加胰岛素抵抗状态下3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖代谢,且具有量效关系。结论:Pur能够促进3T3-L1细胞的分化成脂,增加胰岛素抵抗状态下3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖代谢,改善胰岛素抵抗。     

Ajoene exerts potent effects in 3T3‐L1 adipocytes by inhibiting adipogenesis and inducing apoptosis

This paper describes effects of several sulfur‐containing compounds from garlic on the cell viability, apoptosis and adipogenesis in 3T3‐L1 adipocytes. In both preadipocytes and mature adipocytes, 100 and 200 µM ajoene significantly decreased cell viability and increased apoptosis. The effect on apoptosis was further confirmed with Hoechst staining. In contrast, diallyl sulfide, diallyl disulfide, diallyl trisulfide, deoxyalliin, and allyl methyl sulfide had no significant effect on cell viability or apoptosis in either preadipocytes or mature adipocytes. In maturing preadipocytes ajoene significantly decreased lipid accumulation in a dose‐dependent manner and these results were further confirmed by a decrease in lipid droplet number and lipid content through Oil Red O staining. There was no significant change in lipid accumulation in maturing preadipocytes treated with other garlic derivatives. Thus, despite the same source of origin, garlic, ajoene was the only one with potent effects on cell viability, apoptosis and adipogenesis in 3T3‐L1 adipocytes. Copyright © 2008 John Wiley & Sons, Ltd.