用单克隆抗独特型抗体检测肾综合征出血热患者外周血淋巴细胞表面特异抗原受体

用抗独特型抗体(Ab_2)检测细胞表面抗原受体是将Ab_2作为探针用于免疫学检测而出现的新方法。作者在制备了肾综合征出血热(HFRS)病毒Ab_2的基础上,应用单克隆抗独特型抗体(1B1)作间接免疫荧光试验,检测了HFRS患者外周血淋巴细胞表面特异抗原受体(SAR)。     

分泌肾综合征出血热病毒抗独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞系初步建立

作者采取肾综合征出血热(HFRS)患者抗体(Ab_1)免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/O-Ag14小鼠骨髓瘤细胞融合,制备了肾综合征出血热病毒(HFRSV)的McAb_2。初期融合实验中用ELISA间接法检测阳性克隆,阳性率为3.2％～7.4％。其中5株杂交瘤经克隆化后阳性率达到100％。特异性鉴定表明,5种McAb_2仅     

酶标抗免疫球蛋白单克隆抗体ELISA检测肾综合征出血热病毒抗体

早在1960年代已证实在灵长目的γ球蛋白之间存在共同的抗原。本文作者证实灵长目与非灵长目动物的γ球蛋白之间也存在抗原相似性,并制备出抗免疫球蛋白(Ig)种间交叉反应抗原单克隆抗体。在此基础上用辣根过氧化物酶(HRP)标记抗Ig单克隆抗体(单抗1B11和2A_4),并应用     

肾综合征出血热患者肾组织及血液中出血热病毒RNA的检测及临…

采用地高辛标记的出血热病毒ｃＤＮＡ探针，以原位杂交方法检测２１例肾综合征出血热中层得肾组织中出血热病毒核酸（ＨＦＶ－ＲＮＡ）及其分布，并与肾组织免疫组化方法检测出血热病毒及同期血清斑点杂交检测ＨＦＶ－ＲＮＡ结果进行对比。发现肾组织内ＨＦＶ－ＲＮＡ的检出率重型为６／７例，中型及轻型分别为２／９例及０，与病情严重成正比（Ｐ＜０．０１）；与免疫复合物的沉积不相平行；与血清中ＨＦＶ－ＲＮＡ的检出亦无直接关     

HFRS病毒单克隆抗体的抗独特型抗体的制备与初步鉴定

抗独特型抗体是由抗体(Ab_1)可变区上的独特型决定簇(Id)诱导产生的一种特殊的抗体(Ab_2)。由于Ab_2的可变区与Ab_1的Id在三维结构上相互补,或在部分一级结构上相类似,因此一部分Ab_2本身所具有的Id可以模拟始动抗原的作用。迄今尚未见到有关肾综合征出血热(HFRS)病毒Ab_2的研究报道。     

出血热病毒抗原与其抗独特型抗体基因的研究

为了解抗独特型抗体与抗原的基因特征和相互关系。方法采用基因工程方法，从分泌肾病综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）内影像型抗独特型人单克隆抗体杂交瘤细胞系（Ｃ８），克隆获得的抗ＨＦＲＳＶＩｄ人单克隆抗体重链和轻链可变区基因，并与出血热病毒基因进行了比较。结果抗Ｉｄ人单克隆抗体重链可变区第４５～５５位氨基酸序列和轻链可变区第５８～６８位氨基酸序列，均与出血热病毒Ｇ２膜蛋白的第４４７～４５７位氨基酸序列高度同源，而且同源区域具有相似的蛋白质二级结构。结论抗Ｉｄ人单克隆抗体模拟抗原具有一定的分子基础。     

流行性出血热病毒抗原抗体的不同检测法初探

流行性出血热病毒抗原抗体的不同检测法初探谭天祚，杭长寿，张全福，霍子威邯邢冶金矿山局总医院病理科（０５６００１）中国预防医学科学院病毒学研究所关键词流行性出血热病毒，抗原，抗体，免疫金银染色法，酶联免疫吸附试验，免疫荧光法为了探讨用免疫金银染色法（Ｉ...     

用原位杂交检测肾综合征出血热病毒RNA

作者应用生物素标记的肾综合征出血热(HFRS)R_(22)株病毒M片段cDNA为探针,通过原位杂交检测培养细胞中HFRS病毒RNA,获得了满意的结果。     

ELISA检测流行性出血热病毒抗体价值的探讨

为了探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断流行性出血热(出血热)的价值,我们应用本法,并用间接免疫荧光抗体法(IFAT)作对照,对同期出血热患者血清进行了出血热病毒抗体的检测。报告如下。材料和方法一、待检血清,采自1985年12月至1987年12月期间收入我院传染科,按1981年全国《流行性出血热防治(试行)方案》的诊断、分型标准确诊的不同病型、病日的出血热患者的血清367份。同时收集     

五株流行性出血热病毒单克隆抗体的建立及其特性的研究

<正> 流行性出血热(EHF)是世界分布较广的传染病之一。多年来,国内外学者已经从不同地区、不同宿主分离出流行性出血热病毒,并且发现它们都具有共同的和差异较大的抗原成份。EHFV的抗原比较复杂,对其不同抗原决定簇的性质还认识不够,尚不能用抗原性作EHFV的分型。单克隆抗体是研究病毒抗原的一种良好工具,我们用从人血清中分离的陈株病毒免疫Balb/c小鼠制备了5株McAb,现将建株及其特性研究的初步结果报告如下。材料与方法一、细胞和病毒:骨髓瘤细胞sp~2/0—Ag14,曾经8—氮杂鸟嘌呤(8—Azaguanine)处理过,用含20％胎牛血清(FCS)的RPMI     

抗肾综合征出血热病毒McAb1A8单链抗体基因的构建及表达产物的检测

我们将抗肾综合征出血热（HFRS）病毒MCAbIA8重链可变区（VH）基因的3’端与轻链可变区（VI＿）基因的5’端用一编码《｝Iv。Ser）3的基因连接于（I。Inker）连接，构建f单链抗体（SCFV）表达载体，转化至五．V；；人．＊MIO9中，用辅噬菌体超感染后，用EI。ISA间接夹心法检测，结果表明在噬菌体表面成功地表达了可与HFRS病毒抗原特异结合的单链抗体。l材料和方法l．IVH和VI。基因IASVHPUC和IASVI。PUC分别为本室克隆的含抗HFRS病毒NICAbIA8的VH基因和VI。基因。l．2VH基因与l。nil’er的连接以lASVI4PUC为…     

兔中性粒细胞防御素的抗出血热病毒研究

从新西兰白兔的中性粒细胞胞浆颗粒中提取兔防御素，测定其体外抑制流行性出血热病毒（ＥＨＦＶ）的活性实验，结果表明：兔防御素对ＥＨＦＶ感染Ｖｅｒｏ细胞无阻断作用，而对ＥＨＦＶ有直接杀灭作用，２０μｇ／ｍｌ时其抗病毒指数为１．９６。同时，兔防御素对ＥＨＦＶ在Ｖｅｒｏ中的增殖有抑制作用，４０μｇ／ｍｌ时其抗病毒指数为２．０８。     

肾综合征出血热病毒在体外培养的人肾小球系膜细胞中的复制

为探讨肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）能否感染体外培养的人肾小球系膜细胞及在其中复制，能否引起细胞病变，方法：用ＨＦＲＳＶ７６－１１８株，ＳＲ－１１株和陈株分别攻击体外传代培养的人肾小球系膜细胞。结果：于培养第一代即在受染细胞的胞浆中检出特异性病毒抗原，阳性细胞数及胞浆内抗原的含量随传代次数的增加而增加，感染细胞在光镜下未见明显病理损害，结论：ＨＦＲＳＶ可以感染体培养的人肾小球系膜细胞并可以在其中     

分泌带有PGL-I末端三糖内影像的单克隆抗独特型抗体杂交瘤的建立

用抗-PGL-Ⅰ末端三糖的单克隆抗体E_(10)F_1(MAb_1)免疫BALB/c鼠,取脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,建立了两株分泌抗PGL-Ⅰ末端三糖的抗独特型抗体杂交瘤,命名为F_7B_7和F_7B_9。对F_7B_7做了鉴定,得以下结果:①F_7B_7能与E_(10)F_1发生特异反应;②交叉ELISA中和试验呈阳性反应:抗三糖阳性血清与含在半合成抗原NT-O-BSA中的三糖结合时受F_7B_7的抑制,其抑制程度呈剂量依赖关系;抗三糖阳性血清与F_7B_7的结合受NT-O-BSA的抑制,其抑制程度也呈剂量依赖关系。以上结果提示:杂交瘤F_7B_7是能分泌带有PGL-Ⅰ上三糖内影像的单克隆抗独特型抗体。对F_7B_7为替代抗原,作麻风病患者的血清学诊断的可能性和优越性进行了讨论。     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的研究与应用

作者概要地报道我室近年来对肾综合征出血热病毒单克隆抗体(McAb)的研究与应用,包括:①肾综合征出血热病毒及其血凝素抗原McAb杂交瘤细胞系的建之与鉴定,②选择其中高效优质的McAb进行病毒的抗原性分析;③以McAb亲和层析纯化病毒结构蛋白及其分析鉴定,④纯化HFRS-McAb及其应用;⑤以Mcab-IFAT检验HFRS患者外周血白细胞中的病毒抗原;⑥建立了McAb-ELISA间接夹心法检测HFRS病毒抗原、检测不同疫区人和动物血清中特异性抗体(IgM和IgG)、患者血清中血凝抑制抗体等。并已应用于研究HFRS病毒结构及其特征、纯化病毒抗原组份及保护性抗原,对本病的早期快速检验诊断、流行病学调查、研究疫苗及免疫治疗等都有重要意义。