急性实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠视网膜神经胶质原纤维酸性蛋白的表达

目的 研究急性实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠视网膜神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化及其对血-视网膜屏障(BRB)功能的影响.方法 建立大鼠急性EAE模型后8、14、21 d自股静脉注射伊凡思蓝(EB)了解BRB情况,并行视网膜免疫组织化学染色观察GFAP的表达变化. 结果在各时间点对照组大鼠视网膜内渗漏的EB含量明显低于EAE组大鼠(P<0.01);各时间点对照组大鼠视网膜仅在神经节细胞层及神经纤维层见GFAP阳性表达;EAE组在免疫后8 d视网膜神经纤维层、神经节细胞层内GFAP阳性表达增多,内丛状层出现少量表达,免疫后14 d GFAP不仅在神经纤维层及节细胞层中表达增加,内丛状层和内核层中GFAP也大量表达,甚至可见GFAP阳性染色呈丝状贯穿内外核层,免疫后21 d GFAP仍有大量阳性表达主要集中在神经纤维层、神经节细胞层、内丛状层及内核层.结论 急性EAE可导致大鼠BRB破坏,且BRB破坏可能与星形胶质细胞活化密切相关.     

咪唑克生对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓GFAP及mRNA表达的影响

目的探讨咪唑克生（Ida）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）Lewis大鼠脊髓内胶质纤维酸性蛋白（GFAP）蛋白及其mRNA表达的影响。方法将30只雌性Lewis大鼠分为三组：正常对照组、EAE组和Ida组。以豚鼠脊髓匀浆（GPSCH）诱发制备大鼠EAE模型,并于给予GPSCH当日开始分别腹腔注射10mg/kgIda（Ida组）和生理盐水（EAE组和对照组）连续10d,观察EAE症状并评分。用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法分别检测GFAP蛋白及mRNA在脊髓中的表达。结果10d后Ida组大鼠的临床症状和病理学改变减轻（〈0.05）。脊髓组织中GFAP蛋白及其mRNA的表达,EAE模型组显著高于对照组,Ida组较EAE组显著增高,差异有统计学意义（〈0.05）。结论Ida可促进GFAP在EAE大鼠脊髓中的表达,可能是其保护EAE大鼠的部分作用机制。     

阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的影响

目的 观察不同剂量阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓内核转录因子-κB(NF-κB)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,探讨阿托伐他汀对EAE发病的保护机制.方法 以豚鼠脊髓匀浆诱发Wistar大鼠建立EAE模型,采用量化评分法,比较不同剂量的阿托伐他汀对EAE发病率、潜伏期、临床症状和组织学的影响,并用免疫组化方法检测脊髓中NF-κB和GFAP的表达.结果 高剂量阿托伐他汀延长了大鼠发病的潜伏期,改善了大鼠发病的严重程度,下调NF-κB及上调GFAP在脊髓中的表达(P＜0.05).结论 高剂量阿托伐他汀对EAE大鼠有保护作用,可能与其对中枢神经系统的免疫机制有一定影响有关.     

2- BFI对EAE大鼠中枢神经系统内小胶质细胞及MCP-1的影响

目的：观察2-（2-苯并呋喃基）-2-咪唑啉[2-（-2- benzofuranyl）-2- imidazoline,2- BFI]对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠中枢神经系统内小胶质细胞及MCP-1的影响,并探讨其保护EAE大鼠的作用机制。方法50只雌性SD大鼠随机分为EAE组、2- BFI低剂量组、2- BFI中剂量组、2- BFI高剂量组及对照组,每组10只,采用豚鼠脊髓匀浆免疫诱导SD大鼠建立EAE模型,观察每组大鼠发病情况并进行临床症状评分;采用HE染色和LFB髓鞘染色观察中枢神经系统的病理变化,对其炎症浸润程度加以评分;用免疫组化法测定脑干中激活的小胶质细胞及MCP-1阳性细胞数量。结果与EAE组比较,大、中、小剂量2- BFI干预组大鼠EAE发病率下降,临床症状减轻,潜伏期延长,中枢神经系统内炎性细胞浸润减少,2- BFI中剂量组在EAE临床症状和病理学改变方面差异有统计学意义（P＜0.05）;免疫组化结果显示,与EAE组比较,2- BFI中剂量组的活化的小胶质细胞数及MCP-1阳性细胞数均减少（P＜0.05）。结论中剂量2- BFI对EAE大鼠具有神经保护作用,其作用机制可能与2- BFI抑制小胶质细胞的激活,减少MCP-1的表达有关。     

电针激痛点对慢性肌筋膜疼痛综合征大鼠脊髓背角胶质细胞的影响

目的 探讨电针激痛点对慢性肌筋膜疼痛综合征（myofascial pain syndrome,MPS）大鼠L4～6脊髓背角星形胶质细胞神经胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）和小胶质细胞特异表达补体受体-3的单克隆抗体（OX-42）表达的影响。方法 将24只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组,每组8只。采用打击结合离心运动方式建立MPS模型。电针组选取激痛点,电针15min/次,1次/d,治疗7d。采用HE染色法观察大鼠激痛点处肌肉组织形态学变化;肌电图仪检测大鼠激痛点处自发电位变化;免疫组化法检测大鼠L4～6脊髓背角GFAP及OX-42的阳性细胞表达。结果 与正常组相比,模型组大鼠自发电位活动频率显著增多（P<0.05）;与模型组相比,电针组自发电频率显著下降（P<0.05）。与正常组比较,模型组GFAP、OX-42阳性细胞表达增多（P<0.05）;与模型组比较,电针组GFAP、OX-42阳性细胞表达减少（P<0.05）。结论 电针激痛点可降低MPS大鼠激痛点处自发电活动频率,抑制脊髓背角GFAP、OX-42阳性细胞过表达,其机制或与调节中枢敏化密切相关。     

脊髓损伤后胶质纤维酸性蛋白的表达及其意义

目的：研究脊髓损伤（SCI）后脊髓组织星形胶质细胞中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的变化，探讨反应性胶质化在脊髓损伤中的作用。方法：SD大鼠25只，随机分成5组（n＝5）；正常对照组，伤后1天组，伤后4天组，伤后7天组和伤后14天组，用免疫组织化学染色及图像分析的方法观察星形胶质细胞中GFAP的表达，和大量综合行为评分法（CBS）对各级大鼠神经功能评分。结果：SCI后星形胶质细胞中GFAP的表达与对照组比较明显增高（P＜0．01），1－14天内呈进行性增高趋势，损伤各组的CBS1－14天内呈降低趋势，两指标有显著的相关性（r=-0.775,P＜0．001）。结论：SCI后星形胶质细胞通过其反应性胶质化对脊髓的再生和自身修复起着重要作用。     

阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠血清TNF-α和IL-10的影响

目的探讨阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠血清TNF-α和IL—10的影响。方法120只雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组、EAE模型组、泼尼松治疗组及阿托伐他汀治疗组,每组30只,每组再分为免疫后第7、14、21天亚组,每亚组10只。正常对照组大鼠不造模及用药。后三组大鼠于四肢足垫皮下注射新鲜豚鼠全脊髓匀浆＋完全弗氏佐剂制作EAE模型。自免疫后第1天开始泼尼松治疗组按3．9mg／（kg·d）给予泼尼松灌胃,阿托伐他汀组给予阿托伐他汀10mg／（kg·d）灌胃,EAE模型组给予生理盐水灌胃。观察各组大鼠发病率及神经功能评分。各组大鼠于免疫后第7d、14d、21天处死,HE染色并于光镜下观察脊髓内病变情况,ELISA方法测定TNF—α和IL—10水平。结果与EAE模型组比较,阿托伐他汀治疗组及泼尼松治疗组大鼠的发病率均明显降低,神经功能评分、脊髓内病灶数减少,差异有统计学意义（P〈0．05）。阿托伐他汀治疗组及泼尼松治疗组免疫后第14、21天TNF-α表达水平较EAE模型组降低,免疫后第7、14、21天时IL—10表达水平较EAE模型组升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。阿托伐他汀治疗组与泼尼松治疗组在大鼠发病率、神经功能评分、病灶数、TNF-α和IL-10表达水平方面差异无统计学意义（P〉0．05）。结论阿托伐他汀能改善EAE大鼠的临床症状,抑制脊髓内炎症反应,其机制可能与降低血清TNF-α和升高IL-10水平有关。     

大鼠脑出血灶周围细胞凋亡与胶质纤维酸性蛋白的表达

目的：观察大鼠实验性脑出血后神经细胞的凋亡及胶质纤维酸性蛋白（glial fibfillary acidic protein,GFAP）的表达。方法：将成年SD大鼠随机分为正常组、假手术组和脑出血组。脑出血组大鼠通过立体定向术向脑内注入自体动脉血制成脑尾壳核出血模型,并按不同的再喂养时间（1、3、7、14及30d）分为5个亚组。采用Hoechst和免疫组织化学染色分别观察各组大鼠出血灶周边区神经细胞凋亡和GFAP的表达。结果：与正常组和假手术组相比,脑出血组大鼠的细胞凋亡数显著增高（1-30d时P〈0．05）,并在3d时达高峰;脑出血1dGFAP表达开始增加,7d达高峰,以后逐渐下降,但30d时仍明显高于正常组和假手术组。结论：脑出血可诱导神经细胞凋亡,同时也促进出血灶周边区星形胶质细胞增生,这可能是脑出血后神经组织重塑的重要方式。     

雷公藤甲素对EAE大鼠视网膜神经节细胞的作用及机制

目的:观察雷公藤甲素(Triptolide ,TP)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠视网膜神经节细胞(Retinal ganglion cells,RGCs)的作用及可能机制 .方法:45只雌性SD大鼠随机分成3组:正常组、EAE组、TP组.豚鼠脊髓全匀浆加完全福氏佐剂免疫SD大鼠建立EAE模型,TP组于免疫当天至第14 d雷公藤甲素0.1 mg /kg每日腹腔注射,分别于EAE大鼠发病后第1 d(初期)、7 d(高峰期) 、14 d及30 d (恢复期),观察各个时间段大鼠视神经的病理变化,免疫组化法检测视网膜单核细胞趋化因子-1(Monocyte chemokine protein-1,MCP-1)、胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP) 的表达, TUNEL法检测RGCs凋亡.结果:EAE大鼠在发病后第7 d左右达到高峰,MCP-1发病初期出现在EAE大鼠视网膜上,发病后第7 d开始明显下降,病理改变视神经可见炎性细胞侵润及脱髓鞘,TP组大鼠MCP-1及GFAP表达较EAE组降低(P<0.01),神经节细胞凋亡数量与EAE组比较无明显差别(P>0.05).结论:雷公藤甲素能减轻视神经的炎症反应,下调视网膜MCP-1及GFAP的表达,但不能直接减少视网膜神经节细胞凋亡.     

Fasudil对EAE小鼠脊髓内细胞ROCK-Ⅱ表达的影响

目的探讨Fasudil对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠脊髓内细胞及血管内皮细胞ROCK-Ⅱ表达的影响。方法雌性C57BL/6小鼠随机分为佐剂组、EAE组和Fasudil干预组。EAE和Fasudil组小鼠用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55（MOG35-55）进行免疫,佐剂组小鼠以生理盐水代替MOG35-55作为EAE的对照。Fasudil干预组于免疫后第7d腹腔给予Fasudil（50mg/kg/d）,连续14d。佐剂组和EAE组给与等量生理盐水作为对照。免疫后隔天观察各组小鼠临床评分和体重变化。在免疫4周后处死动物,取小鼠脊髓腰膨大处,进行HE和免疫荧光染色,观察各组小鼠脊髓的病理变化与ROCK-Ⅱ的表达情况。结果 Fasudil能够改善EAE的临床症状（P〈0.05）,减轻炎性细胞浸润（P〈0.05）,同时减少EAE小鼠脊髓及其血管内皮细胞ROCK-Ⅱ的表达。结论 EAE小鼠脊髓及其血管内皮细胞ROCK-Ⅱ的表达明显上调,推测可能与炎性细胞浸润和疾病的发生发展有关。Fasudil可以改善EAE的临床症状,可能与脊髓及其血管内皮细胞ROCK-Ⅱ降低,及由此引起的炎性细胞浸润减少有关。     

左旋咪唑对实验性变态反应性脑脊髓炎星形细胞反应的影响

目的：观察左旋咪唑对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）中枢神经系统星形胶质细胞的影响。方法：用豚鼠全脊髓匀浆免疫Wistar大鼠建立EAE动物模型，应用免疫组化法观察左旋咪唑在不同给药方式（1次给药或3次给药）和不同剂量（分别为5、10、30mg/kg）的情况下对EAE大鼠炎性脱髓鞘病灶内或周围星形胶质细胞数量和形态影响的变化。结果：左旋咪唑可提高Wistar大鼠EAE的发病率，加重其临床症状，在免疫后16d，炎性脱髓鞘病灶内和周围星形胶质细胞数量增多，胞体肥大，其中3次给药的作用强于1次给药，在3次给药时剂量为10mg/kg时最重。结论：左旋咪唑可加重EAE星形胶质细胞反应。     

Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型的建立

目的：利用豚鼠脊髓匀浆建立Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（ EAE）的动物模型,为中枢神经系统脱髓鞘性疾病的研究提供实验依据。方法：以豚鼠全脊髓匀浆（ GPSCH）与完全弗氏佐剂（ CFA）的混合乳剂一次性给予大鼠足垫皮下注射,同时大鼠足背注射百日咳杆菌原液,建立EAE模型。结果：在免疫后12天开始出现肢体瘫痪,双后肢拖动等EAE临床症状。光镜下可见脑和脊髓组织中有大量炎性细胞浸润,炎性细胞聚集在血管周围呈典型的“袖套”样改变。结论：利用豚鼠脊髓匀浆制备Wistar大鼠EAE模型方法简单,稳定、可靠、发病率高。     

糖尿病小鼠海马星形胶质细胞GFAP表达的变化

目的观察糖尿病小鼠海马星形胶质细胞及胶质酸性蛋白的变化.方法用四氧嘧啶对ICR小鼠造成糖尿病模型,利用免疫组织化学方法结合图像分析仪观察海马CA1、CA2、CA3和CA4区星形胶质细胞数目密度及胶质酸性蛋白表达的变化情况并与生理盐水组对照.结果 GFAP阳性细胞在海马各区均有分布.除CA2区外,糖尿病组GFAP阳性细胞在CA1、CA3和CA4区的密度较生理盐水组增加（P〈0.01）,GFAP阳性细胞的平均光密度值在各区均高于生理盐水组（P〈0.01）.结论糖尿病时海马星形胶质细胞数量及其胶质酸性蛋白表达增加,可能是星形胶质细胞对糖尿病糖代谢改变的一种保护性反应.     

中枢神经系统非典型畸胎瘤样/横纹肌样瘤临床病理分析

目的:探讨中枢神经系统非典型畸胎瘤样/横纹肌样瘤(AT/RT)的临床病理特征、诊断及鉴别诊断。方法:应用光镜、免疫组化染色观察1例12岁儿童大脑AT/RT的病理组织学特点,结合国内外文献进行讨论。结果:肿瘤含有特征性横纹肌样细胞,伴有多少不等的原始神经外胚叶、上皮和间质成分。免疫组化染色Vim、CK、EMA、GFAP、NSE、Syn、S-100蛋白、CD99及SMA均呈阳性表达,HMB45及Desmin呈阴性反应。结论:AT/RT是中枢神经系统罕见的高度恶性肿瘤,好发于儿童,偶见于成人。其诊断主要依靠组织病理学和免疫组织化学表型,同时需与脑内其他肿瘤如髓母细胞瘤、原始神经外胚叶肿瘤(PNET)及生殖细胞肿瘤等鉴别。AT/RT组织发生尚未定论,多数患者在诊断后1年内死亡。     

黄芪对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎小鼠的治疗作用及机制研究

目的：观察中药黄芪对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎（EAE）小鼠的治疗作用,并探讨其免疫调节机制。方法：建立C57BL／6小鼠EAE模型,通过5级临床症状评分观察黄芪对EAE小鼠的治疗作用;HE染色观察黄芪对EAE小鼠脊髓炎症细胞浸润的影响;CCK-8法检测脾脏髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）多肽MOG35-55特异性T细胞增殖情况;ELISA法检测脾脏MOG35-55特异性T细胞培养上清液中IFN-γ、TNF—α、IL-17、IL-4的水平。结果：黄芪能够有效抑制EAE小鼠的临床症状,减轻中枢神经系统的炎性反应,抑制MOG35-55特异性T细胞增殖及IFN-γ、TNF-α、IL-17的分泌,促进IL-4的分泌。结论：黄芪能够有效抑制中枢神系统的自身免疫反应,这种作用与其抑制MOG35-55特异性T细胞增殖,减少Th1、Th17型细胞因子分泌,促进Th2型细胞因子分泌相关。     

C型凝集素16A在中枢神经系统炎症中的表达意义

目的探讨C型凝集素16A（CLEC16A）在中枢神经系统（CNS）炎症中的表达变化及细胞定位。方法应用SD大鼠侧脑室内注射脂多糖（LPS）建立脑炎症模型,利用PCR及Western blot检测术后大脑皮层中CLEC16A在mRNA水平及蛋白水平的表达变化;免疫荧光检测CLEC16A在侧脑室内注射LPS后的定位、细胞分布及细胞的状态。结果在大鼠脑炎症模型中CLEC16A mRNA和蛋白水平均有明显变化,分别在注射后9或12 h开始增加,并一直维持在较高水平。免疫荧光双标发现表达较高CLEC16A主要定位与大鼠脑中的星形胶质细胞及神经元中。同时检测脑中星形胶质细胞活化的情况发现表达增多的CLEC16A主要定位于增殖的星形胶质细胞。结论CLEC16A可能参与星形胶质细胞的增殖,在神经系统炎症反应过程中发挥着重要的作用。     

钩吻素子对小鼠自主行为、协调平衡和巴比妥阈下催眠作用的影响

目的 目的 观察钩吻素子对小鼠自主行为、协调平衡和巴比妥阈下催眠等中枢神经系统作用的影响. 方法 小鼠灌胃给予钩吻素子2,10,50 mg/kg,分别观察其在2h内的自主行为活动和协调平衡运动能力的影响,以及对阈下剂量戊巴比妥钠小鼠的催眠协同作用. 结果 50 mg/kg钩吻素子增加小鼠的自主行为活动（P＜0.05）,10 mg/kg钩吻素子促进阈下剂量戊巴比妥钠小鼠的睡眠作用（P＜0.05）,钩吻素子对小鼠协调平衡运动能力无影响. 结论 钩吻素子在治疗范围的较高剂量下能引起小鼠中枢神经系统的抑制作用,超过治疗剂量范围的一定时间内则产生兴奋作用.     

康脑液对脑缺血再灌注大鼠神经再生相关因子的影响

目的：观察康脑液对脑缺血再灌注大鼠神经再生相关因子的影响。方法：150只健康雄性SD大鼠随机分组为高剂量康脑液组（Kangnaoye high dose group, KNYH）、中剂量康脑液组（Kangnaoye middle dose group, KNYM）、低剂量康脑液组（Kangnaoye low dose group, KNYL）（分别为24、12、6 g·kg^-1·d^-1）,假手术组(sham group)及模型组(model group)。用线栓法制备大脑中动脉闭塞模型,于缺血后2 h再灌注,24 h后TTC染色测各组脑梗死体积;在1、3、7、14 d时处死大鼠采集标本,用免疫组织化学法观察脑缺血区生长相关蛋白（growth associated protein-43,GAP-43）和勿动蛋白(outgrowth inhibitor-A,NOGO-A) 的表达情况;同时分别于再灌注后2 h、24 h、3d、7d、14d评价动物神经功能。结果：各剂量康脑液组大鼠神经功能评分明显低于模型组:差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,各剂量康脑液组大鼠的梗死体积明显小于模型组,差异有统计学意义（P<0.01）;高、中剂量康脑液组梗死灶周边区脑组织GAP-43表达较模型组显著升高,NOGO-A表达较模型组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论：康脑液可促进脑缺血再灌注大鼠的神经再生,从而改善脑梗死大鼠运动功能。     

囊尾蚴病诱发的细胞凋亡

囊尾蚴病由猪带绦虫囊尾蚴感染引起,可寄生于人或猪皮下和肌肉组织,也可侵入中枢神经系统导致脑囊虫病,以后者对人类健康威胁更大。细胞凋亡是多细胞生物调控生物体的发育、细胞更新和维持内环境稳定的一种重要机制。现对主要的细胞凋亡蛋白(FAS、caspase-3、P53)在中枢神经系统的凋亡与非凋亡功能、相关信号通路及囊尾蚴病中细胞凋亡相关性进行综述。