实时荧光PCR方法对乙肝病毒基因分型的检测及临床意义

[目的]了解乙肝患者的HBV基因分型特点及不同乙型肝炎病毒基因型对肝脏的损害程度,了解不同乙肝基因型的临床用药效果。[方法]随机选取乙型肝炎患者血清100例,已确诊的慢性乙肝血清50例,肝硬化患者的血清20例和追踪治疗的乙肝患者血清15例。用实时荧光PCR（RT-PCR）方法对其进行基因分型的检测。[结果]在100例乙肝患者中,B型20例,占20%;C型71例,占71%;BC混合型1例,占1%;非B非C型8例,占8%。肝硬化患者中,以C型为主。[结论]乙肝基因型主要以C型为主,B基因型与C基因型的临床治疗效果比其他基因型差,且C基因型感染的患者肝硬化发生率高。     

HBV基因分型及其临床意义

<正>乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)是严重危害人类健康的肝炎病毒之一,是重要的肝脏疾病致病因子。乙型肝炎病毒的传播途径有:输血传播、医源性传播、母-婴传播、接触传播及其他传播,如通过蚊子、臭虫和虱子等吸血昆虫传播。     

巢式PCR在乙肝病毒X基因检测中的应用

目的:探讨巢式PCR方法在乙肝病毒X基因(HBV X)检测中的意义.方法:随机抽取中国医学科学院肿瘤医院1998年1月至2000年12月的8例HCC标本石蜡切片,提取组织DNA,应用巢式PCR法进行HBV X基因检测.结果:在8例标本中,7例在200 bp～300 bp处出现条带,大小符合引物设计HBV X基因,检出率为87.5%.结论:应用巢式PCR法进行HBV X基因检测具有方法简单、敏感性高等特点,可用于石蜡切片等少量标本的检测.     

巢式PCR在乙肝病毒X基因检测中的应用

目的 :探讨巢式PCR方法在乙肝病毒X基因 (HBVX)检测中的意义。方法 :随机抽取中国医学科学院肿瘤医院 1 998年 1月至 2 0 0 0年 1 2月的 8例HCC标本石蜡切片 ,提取组织DNA ,应用巢式PCR法进行HBVX基因检测。结果 :在 8例标本中 ,7例在 2 0 0bp～ 30 0bp处出现条带 ,大小符合引物设计HBVX基因 ,检出率为 87.5 %。结论 :应用巢式PCR法进行HBVX基因检测具有方法简单、敏感性高等特点 ,可用于石蜡切片等少量标本的检测。     

乙肝病毒基因分型的临床意义

目的：分析广州地区HBV基因型的分布情况,及与临床类型、肝功能的关系.方法：对广州医学院第一附属医院感染科108例HBV DNA阳性患者采用PCR微板核酸杂交,ELISA技术进行基因分型,对其中的慢性乙肝患者同时检测肝功能,分析相互之间的关系.结果：检测到B型29例（26.9%）、C型51例（47.2%）、混合型（C＋D/B＋C）16例（14.8%）、D型4例（3.7%）,慢性乙型肝炎、肝硬化和原发性肝细胞癌C型比例显著高于B型,（均P＜0.05）.慢性乙型肝炎病人中C型ALT、AST、TBIL、γG、发病年龄等均高于B型（P＜0.05）.结论：广州地区HBV基因型以C型为主,B型次之.慢性乙肝组,C基因型肝脏损害比B型严重.     

乙肝病毒基因分型检测芯片的构建及初步应用

目的:构建乙肝病毒(HBV)常见基因型的分型芯片,并应用分型芯片调查HBV基因型分布。方法:应用生物信息学软件针对乙肝病毒4种常见基因型的特征区域和保守区域分别设计分型探针和通用探针,在优化条件下通过重复杂交及分型测序检验芯片的重复性与可靠性后应用于临床,对150例不同类型的乙肝患者进行HBV基因分型。结果:分型探针和通用探针检测重现率分别为94.7%及100%,反馈的测序结果与芯片分型结果完全一致;经芯片分型发现辽宁省HBV基因型分别为C型占68.7%,B型占22.7%,B、C混合型占8.7%,未发现A、D型。结论:基因芯片技术为乙肝病毒基因分型提供了快速准确的检测方法,辽宁地区HBV基因型分布以B、C两型为主,C型占主要优势。     

宁夏地区乙肝病毒感染者HBV基因分型与临床意义

目的研究宁夏地区乙肝病毒（hepatitis B virus,HBV）感染者的HBV基因型的分布情况,探讨其与HBV感染者的性别、年龄、肝功能、HBV-DNA载量及血清标记物水平的关系。方法应用基因型特异性多对引物巢式PCR法对175例HBV感染者的血清标本进行HBV基因型检测,并针对不同的基因型进行性别、年龄、肝功能、HBV-DNA载量及血清标记物水平的相关性分析。结果宁夏地区175例HBV感染者的血清标本中（汉族136例,回族39例）有12例（6.9%）未检测出基因型。在已检测出基因型的163例样本中,B基因型84例（48%）,C基因型62例（35.4%）,B＋C混合基因型17例（9.7%）。B基因型在宁夏地区HBV感染者中占优势。HBV基因型与HBV感染者的ALT水平有关联（P〈0.05）,与年龄、性别、血清标记物水平等指标无关联性（P〉0.05）,C基因型在肝硬化和肝癌中所占的比例较B型和B＋C型差异有统计学意义（P均〈0.05）。结论宁夏地区HBV感染者的基因型包括B型、C型及B＋C混合基因型,其中以B基因型为主,其次为C基因型。HBV基因型与ALT水平有关联,与本研究中其他指标无相关性,C基因型较B型和B＋C型在肝硬化和原发性肝癌中所占比例增高。     

乙肝病毒基因型的研究进展及临床意义

乙肝病毒基因分型比血清亚型更能准确地反映原型病毒株之间的自然异质性, HBV基因分型方法有多种,以全基因测序为唯一参比标准。HBV基因型呈地理区域性分布,不同基因型致病性不同,因此,它对于HBV的基础研究、分子流行病学调查、临床诊治过程中出现的基因变异、对抗病毒治疗反应和病情预后评估均有重要意义,目前HBV已分为A~H 8种基因型。本文对乙肝病毒基因型研究进展及临床意义作一综述。1乙肝病毒基因型的发现和发展乙型肝炎病毒感染在世界各地均有不同程度的流行,但地区差异非常明显[1]。国家间和国内地区间流行程度的差异,除与卫生…     

PCR-RFLP与多引物对PCR乙肝病毒基因分型方法的比较

目的　PCR RFLP与多引物对PCR的乙肝病毒基因分型方法学比较。方法　自行设计利用限制性内切酶MboⅠ、BsTNⅠ、BsmAⅠ、HpaⅡ酶切S基因片段鉴定HBV基因型 (A～F)的PCR RFLP方法。分别利用该方法和多引物对PCR对贵州地区 14 9份HBsAg、HBVDNA阳性血清进行病毒基因分型。结果　 14 9份乙肝患者血清中PCR -RFLP方法成功分型 12 8份 (85 .91% ) ,多引物对PCR方法成功分型 10 8份 (72 .4 8% )。两种方法均能成功分型的标本 10 7份 ,其中B型 5 2份 ,C型 5 5份 ;两种方法分型结果完全一致。结论　本PCR RFLP基因分型方法与多引物对PCR方法的分型结果一致 ,但PCR RFLP方法的成功率及敏感度较高 ,图谱简单易读 ,适用于大样本筛检及临床应用     

乙肝病毒基因分型方法的研究进展及其意义

<正>乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)是已知的引起人类疾病的最小DNA病毒,HBV感染呈世界性分布,许多慢性感染者演变成慢性活动性肝炎、肝硬化、肝癌,威胁人类健康。过去不少学者对乙型肝炎病毒的血清型做了一些研究,近年来,人们开始注意其基因型的研究。我们复习有关乙肝病毒基因型研究方面的文献,并做简要综述。     

单克隆抗体ELISA法对肝癌患者HBV基因分型的初步探讨

目的　初步探讨单克隆抗体法对肝癌患者血清中HBV基因分型的意义。方法　用反向被动血凝法(ReversedPassiveHemagglutination ,RPHA)筛选肝癌患者血清中的乙型肝炎病毒 (HBV)的表面抗原 (HBsAg) ,再以日本学者最近新开发的单克隆抗体ELISA法 (mAbsELISA)对HBV进行基因分型。结果　 2 2例肝癌患者中有 14例( 63 6% )HBsAg阳性 ,基因分型均为C型 ( 10 0 % ) ,没有发现其它基因型。结论　C基因型是HBV相关肝癌的主要病毒基因型。mAbsELISA法操作简单 ,适于大规模研究。     

乙型肝炎病毒基因分型及对肝病的影响

乙型肝炎病毒(HBV)属于肝DNA病毒属,它的遗传变异性很高,可分为8种基因型,大多数基因型能进一步分成亚型。而HBV基因型之间的重组增加了HBV的变异性。本文概述了当前乙型肝炎DNA病毒属基因变异的流行病学知识,另外因为这一领域的快速进展,更新了一些有关HBV基因型和基因亚型的最近综述,并阐述了HBV基因型与肝病的关系。     

实时荧光PCR法分析浙江省乙型肝炎病毒基因型的分布

目的 研究浙江省各地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布状况.方法 采用实时荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)检测240例HBVDNA病毒含量＞105拷贝/毫升的浙江籍(杭州、湖州、金华、绍兴、台州、宁波各40例)HBV感染者的基因型.结果 240例HBV感染者中基因B型82例占34.17%,基因C型140例占58.33%,基因B,C混合型15例占6.25%,基因D型3例占1.25%,未捡出基因型A、E、F.结论 浙江地区HBV基因以B、C型为主,B、C混合型次之,D型基因偶见.各地区间基因型分布未见差异.     

乙型肝炎病毒基因型的临床意义

乙型肝炎病毒的基因分型对乙型肝炎病毒感染的临床有独特的意义,在致病力方面:D基因型较A基因型的致病力强,预后差,C基因型较B基因型的致病力强,预后差。在治疗方面:C基因型干扰素抗病毒疗效优于B基因型,A基因型干扰素抗病毒疗效优于D基因型;A、B基因型拉米夫定抗病毒疗效优于D、E、C基因型等。可见乙型肝炎病毒的基因分型与乙型肝炎病毒感染的临床密切相关。     

厦门市乙型肝炎病毒基因型分子流行病学研究

目的采用多对型特异性51物,通过巢式PCR法检测厦门市乙型肝炎病人血清中乙型肝炎病毒（HBV）基因型的分布情况。方法自HBV前S1基因和S基因中区域内设计出10条内外51物,并将其中8条型特异性内引物分成A、B两组,分别扩增A、B、C和D、E、F型HBV,然后将第2轮PCR产物以用3％琼脂糖进行电泳,根据PCR产物片断大小直接判定HBV基因型。应用此法检测了154例厦门市慢性乙型肝炎病人对血清中的HBV基因型,了解厦门HBV基因型分布情况。结果厦门市乙型肝炎病人HBV基因分型结果为B型60例（39．0％）、C型53例（34．4％）,B／C混合型41例（26．6％）。HBeAg阳性者中以B基因型占63．3％,B／C型混合感染22．0％（P〈0．005）;HBeAb阳性者中以B／C型混合感染63．4％,B型25．0％（P〈0．005）。各基因型在疾病谱分布中无明显差异。结论本研究提示厦门市乙型肝炎病人HBV基因型B、C型者的患病率大致相同;B／C混合感染是一个值得重视的问题。     

乙型肝炎病毒基因型别及X基因变异的研究进展

乙型肝炎病毒是一个以RNA为中间体的反转录复制病毒,由于RNA聚合酶缺乏校正功能,这使其突变率明显高于一般的DNA病毒,随着分子生物学研究技术的进展,不断有新的HBV基因型和亚型被发现。对和疾病进程、治疗相关的HBV基因型和X基因变异进行研究,有助于对疾病的控制和治疗提供更好的理论依据,在控制HBV感染上具有重要的意义。     

B1细胞与乙型肝炎病毒及丙型肝炎病毒的感染

病毒性肝炎的发病机制迄今为止尚未完全明确,乙型肝炎病毒(HBV)及丙型肝炎病毒(HCV)所致肝炎可能是肝脏细胞免疫防御反应病毒入侵的结果。B1细胞是新近认识的一种B细胞亚群,CD5分子是其特征性分子标志。CD5+B1细胞是机体防御肝炎病毒入侵的重要天然免疫细胞。CD5+B1细胞与机体内HBV感染的慢性化密切相关。CD81与CD5间通过分子串话机制直接参与HCV对宿主细胞的感染。     

乙型肝炎病毒C基因启动子变异与基因型和肝硬化的关系

目的 研究HBV C基因启动子(CP)和前C基因变异与HBV基因型和病情的关系。方法 通过DNA扩增、基因序列分析检测44例慢性乙型肝炎(CH)，29例肝硬化(LC)患者的血清HBV S基因序列以确定其基因型，测定HBVCP和前C区序列以确定其变异状况。结果 (1)CP双变异(nt 1762A→T和1764G→A)的发生率肝硬化组为75．9％，慢性乙型肝炎组为45.5%，两组间差别有显著性意义(P＜0.05)。(2)LC患者的C基因型检出率为69．0%，CH患者的C基因型检出率为43.2％，二者间差别有显著性意义(P＜0.05)。(3)C基因型HBV感染者CP双变异发生率为69.2％，B基因型HBV感染者CP双变异发生率为44．1％，二者间差别有显著性意义(P＜0.05)。结论 CP双变异与C基因型密切相关，并且导致病情向肝硬化发展。     

两种HBV-DNA荧光定量PCR检测比较

目的优化HBV—DNA特异性定量检测方法。方法采用荧光定量PCR检测法，用10份正常血清、10份HBV高滴度（10^6 IU／mL）血清和梯度稀释的HBV克隆质粒标准品，验证两种检测方法的重复性、特异性和灵敏度；并将结果进行配对检验。结果10份正常血清标本均无假阳性HBV—DNA检测结果，特异性极好；10份HBV高滴度血清中检出1份YMDD变异，灵敏度均可达到10^3 IU／mL，重复性和灵敏度两者之间无显著性差异（t=0．702，P〉0．05）。结论该方法特异性和灵敏度高，可用于HBV的临床检测和科学研究。     

山西省地区乙型肝炎病毒基因分型及临床意义

目的了解山西省地区乙型肝炎病毒（HBV）基因型的分布特征,探讨HBV各基因型与血清HBV-DNA水平的关系以及各基因型与疾病的进展和转归的临床意义。方法法随机收集山西省HBV阳性病例128例,包括慢性乙型肝炎78例,肝硬化34例,急性肝炎8例,重型肝炎患者8例。取其外周静脉血,采用型特异性引物巢式PCR方法对血清中的HBV进行基因分型,并结合临床资料进行统计学分析结果山西省地区乙型肝炎患者HBV基因分型存在B型、B＋C混合型和C型,以C型和B＋C型为主;基因型C型的HBV-DNA载量的均值水平为2×108,显著高于其他型（p〈0.05）;C型HBeAg阳性率较B型和B＋C型高（p〈0.05）;混合型及C基因型与较严重的肝脏疾病有关,更易发生重症肝炎、肝硬化。结论山西省地区基因型以C型和B＋C型为主;基因型C的HBV-DNA载量水平均值显著高于其他型;混合型及C型与较严重的肝脏疾病有关。