RP - HPLC 法测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的含量简

目的 建立钩藤中钩藤碱和异钩藤碱含量测定方法.方法采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC法）测定,色谱柱为Phenomenex Luna C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈（A）和0.3‰三乙胺水溶液（B）,采用线性梯度洗脱：0 min：40% A,5 min：50% A,21 min：67% A,25 min：100% A;流速1 mL/min;柱温为室温.DAD检测器,检测波长 254 nm.进样量10 μL.结果 钩藤碱和异钩藤碱分别在10~80 μg/mL范围内,线性关系良好（r=0.9999,1.0）,钩藤碱的平均回收率为103.1%,RSD为2.7%（n=9）,异钩藤碱的平均回收率为99.2%,RSD为3.2%（n=9）.结论该测定方法操作简便、结果准确,可以用于钩藤药材的质量控制.     

中药钩藤中钩藤碱含量的测定

目的 建立优化钩藤药材中钩藤碱的提取及含量测定方法.方法 采用甲醇冷浸超声法处理钩藤药材,Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相及梯度:甲醇∶0.01 mol/L醋酸铵缓冲液(氨水调pH=6.0)0～20 min内比例由25∶75递增至50∶50;流速:1.0 ml/min;柱温:25 ℃;检测波长:245 nm;进样量:20 μl.结果 钩藤碱在0.25～64.0 μg/ml范围内线性良好,回归方程为y=3.64×104x-2.13×104(r=0.999 5),相对回收率为95.95%～114.40%,重复性试验RSD为6.50%,稳定性试验钩藤碱高、中、低浓度溶液室温5 d内RSD为4.62%、2.65%和4.58%.结论 本测定方法准确可靠,重复性好,可应用于钩藤药材中钩藤碱含量的测定.     

HPLC-ELSD法测定中药钩藤中钩藤碱的含量

目的建立中药钩藤中钩藤碱的高效液相色谱-蒸发散射检测器法(HPLC-ELSD)的测定方法。方法采用甲醇冷浸超声法处理钩藤药材,经0.22μm的滤膜过滤后进样分析;色谱柱为Diamonsil C18(4.6mm×200mm,5μm),流动相组成,乙腈:0.01mol/L醋酸铵=20∶80,采用梯度洗脱方式,乙腈比例在20min内从20%变为60%,流速为1.0mL/min,柱温为室温30℃,进样量为20μL。ELSD参数:飘移管温度105℃,载气(N2)流速3.0mL/min。结果钩藤碱测定的浓度范围内呈良好线性(r=0.999 0),加标回收率大于96.1%,日内、日间变异系数均小于8.0%,重复性试验RSD为4.7%,稳定性试验钩藤碱高、中、低浓度溶液室温48h内RSD为6.8%、7.2%、9.1%。结论该方法成功地应用于钩藤碱含量的测定,成为一个全面评价钩藤质量的新方法。     

RP-HPLC法测定钩藤煎剂中钩藤碱含量及变化

[目的]测定钩藤中钩藤碱在沸水后下煎药法中煎出量及变化规律。[方法]采用RP-HPLC法,HypersilBDSC18柱,(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇∶水(70∶30)为流动相,流速1.0ml/min,波长254nm,柱温25℃。[结果]钩藤碱在0.19μg～0.95μg范围内与峰面积线性关系良好r=0.9990。[结论]钩藤在沸水后下煎药法中,其钩藤碱在汤药中的含量在11.4min达高峰,其后汤药中钩藤碱的含量逐渐降低。     

钩藤药材中钩藤碱含量测定方法的建立

目的：建立钩藤药材钩藤碱含量HPLC测定方法。方法：分别对HPLC的色谱柱、流动相、检测波长等色谱条件进行摸索,对样品索式、回流和超声提取方法进行摸索,并采用正交设计的方法考察超声提取的药材破碎度、溶剂浓度、溶剂量和时间。结果：HPLC色谱条件为色谱柱：Gemini C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相∶甲醇—水（含0.002 mol/L三乙胺,冰乙酸调pH至7.5）（64∶36）,流速：1.0 mL/min,检测波长：254 nm。样品供试液制备方法为：药材破碎度为过60目筛的粉末,提取溶剂为75%甲醇,溶剂加入量为15 mL,超声处理40 min。该方法钩藤碱在0.020 9-1.672 0μg范围内有良好线性关系,平均回收率为98.96%,RSD=0.69%（n=6）。结论：建立的含量测定方法简易、准确,可作为钩藤药材钩藤碱含量测定方法。     

CZE测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱含量

目的：建立钩藤中钩藤碱和异钩藤碱含量测定的CZE分析方法,分析研究钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的含量.方法：采用50mmoL/L,pH =6.5的醋酸铵-甲醇溶液作为缓冲液,以二苯胍和奎宁分别为钩藤碱和异钩藤碱内标物的CZE内标法同时对钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的含量进行测定.结果：在选定条件下,钩藤中钩藤碱和异钩藤碱得到准确测定.结论：主产于贵州的钩藤药材中的钩藤碱和异钩藤碱含量普遍较低,有的甚至在该分析条件下未能检出,这一研究结果可为今后钩藤的研究提供参考依据.     

反相高压液相色谱法测定家猫异钩藤碱的药动学及其代谢物

目的 :以家猫为实验动物模型 ,以高压液相色谱法测定异钩藤碱的药代动力学及其代谢产物。方法 :以SUPELCOSILC18柱分离 ,甲醇∶水 ( 75∶2 5 )为流动相 ,检测波长UV 2 5 4nm ,建立猫血浆异钩藤碱 (Isorhy)浓度及其代谢产物的反相高压液相色谱测定方法。结果 :异钩藤碱的血药浓度在 0 .0 5～ 5 0 0 μg/ml范围内呈线性关系 (r =0 .9997) ,血浆最低检测浓度为 0 .0 1μg/ml ,绝对回收率为 86 .3%～ 92 .9%。结论 :猫静脉注射异钩藤碱 5mg/kg及 10mg/kg的药代动力学过程符合二室开放模型 ,在猫体内血药浓度按一级动力学消除 ,T1/ 2 β分别为 2 .0 5h和 1.6 1h ;Isorhy代谢产物的保留时间tR 为 ( 8.2± 0 .1)min[Isorhy的tR 为 ( 11.9± 0 .1)min]。     

HPLC-MS法同时测定钩藤药材中四种生物碱含量

目的:建立钩藤药材中四种生物碱的高效液相色谱-质谱联用含量测定方法。方法:色谱条件:HaloC_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm),1%乙酸-水(氨水调pH=5.5)-甲醇-乙腈为流动相,梯度洗脱,流量0.3 mL·min~(-1),柱温35℃。质谱条件:电喷雾离子源,正离子检测方式,多反应监测模式,干燥气温度350℃,干燥气流量9 L·min~(-1),雾化器压力35 psi,毛细管电压4 000 V。结果:钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱和异去氢钩藤碱含量分别为355.5μg·g~(-1)、143.9μg·g~(-1)、93.3μg·g~(-1)、202.7μg·g~(-1)。结论:该方法结果准确,重现性好,可用于测定钩藤药材中的生物碱含量。     

广西不同产地及不同时期无柄果钩藤中钩藤碱含量分析

目的:评价广西不同产地无柄果钩藤药材质量和确定药材最佳采收期.方法:应用HPLC测定15批不同产地和3个产地不同时期无柄果钩藤钩藤碱的含量.色谱柱:Gemini C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相:甲醇-水(含0.002 mol/L三乙胺,冰乙酸调pH至7.5)(64∶36),流速:1.0 mL/...     

不同干燥方法对钩藤药材中钩藤碱含量的影响

目的：考察不同干燥方法对钩藤药材中钩藤碱含量的影响。方法：采用HPLC法,以钩藤中钩藤碱含量为指标,测定不同干燥方法中钩藤药材钩藤碱的含量。色谱条件：Intertsil ODSSP C18柱（4．6mm×250mm,5μm）;流动相：甲醇-水（含0．002mol／L三乙胺．用冰醋酸调pH到7．O）一70：30;流速：1mL／min;检测波长：254nm。结果：阴干与阳光下暴晒的样品中钩藤碱含量较其他方法干燥的样品高,分别为0．416％和0．408％,且含水量均达到2010年版《中国药典》的要求。结论：钩藤药材宜采用阴于或暴晒的干燥方法,尽量避免长时间高温干燥。     

HPLC测定大鼠血浆中钩藤碱的浓度

目的建立HPLC测定大鼠血浆中钩藤碱浓度的方法。方法色谱柱为ZORBAX SB C18柱（150mm×4.6 mm,5 m）。以甲醇-水（80：20）（含0.0025 mol.L-1三乙胺,冰乙酸调pH至7.5）为流动相,检测波长为254 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,进样量为20 l。结果钩藤碱与内源性杂质有较好分离度,钩藤碱在0.39~12.50g/ml浓度范围内呈良好线性关系;最低检测浓度为0.39 g/ml;回收率大于95%;日内和日间RSD均小于7%。结论此方法准确可靠,可用于测定钩藤碱的血药浓度。     

RP-HPLC法测定马钱子胶囊中士的宁与马钱子碱的含量

目的:建立自制中药制剂马钱子胶囊中士的宁与马钱子碱的RP-HPLC测定方法。方法:色谱柱:Diamonsi1 ODS-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相:乙睛-0.01 mol/L庚烷磺酸钠与0.02 mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液(用10%磷酸调节pH值2.8)(23:77),流速1.0 mL/min,检测波长260nm,柱温25℃。结果:士的宁与马钱子碱的线性范围分别是0.1226μg~2.452μg(r=0.99998)、0.1074μg~2.148μg(r=0.99994)。平均加样回收率分别为101.11%、99.83%,RSD分别是1.97%、2.13%。结论:本法操作简便、快速、准确、重现性好,可用于马钱子胶囊的质量控制。     

HPLC法测定天仙子东莨菪碱和莨菪碱的含量

目的建立天仙子药材中东莨菪碱和莨菪碱的高效液相测定方法。方法采用Symmetrix ODS-H色谱柱,以乙腈-0.1%三氟乙酸水(14∶86)为流动相,检测波长210nm,流速1.0mL/min,测定天仙子药材中东莨菪碱和莨菪碱的含量。结果氢溴酸东莨菪碱和硫酸阿托品的线性范围分别为4.02~513.64μg/mL(r=0.999 9)和4.00~512.00μg/mL(r=0.999 8),平均回收率分别为98.41%和98.79%。结论 HPLC法测定准确、可控,能快速、简便地控制天仙子药材的质量。     

高效毛细管电泳法测定莱菔子中芥子碱含量

目的:测定中药莱菔子中芥子碱的含量。方法:采用高效毛细管电泳法,电泳条件为石英毛细管柱(75μm×90cm,实际长度81cm),运行缓冲液为0.02mol/L Na2HPO4:0.02mol/L NaH2PO4=1:1(25℃时pH=6.89),分离电压为25kV,压力进样30mbar×8s,温度为25℃,检测波长为326nm。结果:芥子碱在0.2～1.0mg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9995),平均回收率为99.50%,RSD为1.21%。结论:高效毛细管电泳法可用于测定莱菔子中芥子碱的含量。     

高效液相色谱法测定青藤碱微乳中青藤碱含量

目的:探讨建立高效液相色谱法测定青藤碱微乳中青藤碱含量的方法。方法:采用ODS-C18色谱柱,以乙腈-0.01%磷酸二氢钾溶液(用三乙胺调pH至7.8)(40∶60)为流动相,检测波长为262 nm,流速1.0 mL/min,柱温为室温,进样量为20μL。结果:青藤碱在40.6~203μg/mL范围内线性关系良好,线性回归方程:A=9 934.5C+9 839.8(r=0.9999),平均回收率为102.36%(RSD=4.02%)。结论:高效液相色谱法简便、快速、灵敏、重复性好,可作为青藤碱微乳含量测定方法。     

高效液相色谱法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度

目的:用高效液相色谱法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度。方法:采用转篮法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度,以高效液相色谱法定量。色谱柱为RP-C18柱(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相为0.033 mol/L,磷酸二氢钾-乙腈(60∶40);流速为1.0 mL/min;检测波长265 nm;进样量为10μL。结果:盐酸小檗碱在0.992~9.920μg/mL范围内有良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为100.2%,RSD=0.38%(n=9),3批样品45 min溶出度均在75%以上。结论:高效液相法测定溶出度简便、准确、灵敏度高,可用于复方黄连素片中盐酸小檗碱溶出度的测定。     

去氢钩藤碱与异去氢钩藤碱在大鼠体内的生物转化

目的 探讨去氢钩藤碱与异去氢钩藤碱在大鼠体内的生物转化.方法 去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱对大鼠经口投药30 min内收集到的胆汁样品进行高效液相色谱串联质谱仪(LC-MS)测定.结果 发现去氢钩藤碱的底物和2个Ⅰ相代谢物、2个Ⅱ相代谢物可以检出,而异去氢钩藤碱的Ⅰ相代谢物没有检出,但Ⅱ相代谢物检出4个.结论 分析结果显示这2个四环氧化吲哚生物碱的代谢与钩藤碱、异钩藤碱的肝脏代谢非常相似,并且都存在经口投药之后的肝首过效应.体外实验验证了以上代谢过程的结论,并显示是肝微粒体酶CYP450对去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱在肝脏的生物转化起催化作用.     

贵州野生和栽培钩藤药材中表儿茶素的含量测定

目的:为了深入研究钩藤药材质量,测定并比较贵州产钩藤、华钩藤、毛钩藤和攀枝钩藤的野生及栽培品种中表儿茶素的含量.方法:采用反相高效液相色谱法测定.结果:本法在0.125～4.000μg范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9998),平均回收率为102.87%,RSD为0.99%(n=6).结论:该方法准确可靠、简单快...     

HPLC测定天麻钩藤饮中松脂醇二葡萄糖苷的含量

目的:建立天麻钩藤饮的含量测定方法.方法:采用ODS(250mm ×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.2％磷酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为1.2mL/min,检测波长220nm,柱温30℃.结果:松脂醇二葡萄糖苷在6.12～61.2μg线性关系良好(r =0.9999),平均回收率为98.5％.结论:本方法简便、准确,可测定天麻钩藤饮中松脂醇二葡萄糖苷的含量.     

HPLC法测定辣椒碱的含量

目的:建立HPLC法测定辣椒碱的含量.方法:采用C18B反相柱(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,甲醇-乙腈-0.01%磷酸(18:2:1;v/v)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为280nm,柱温为30℃.结果:辣椒碱在线性范围8.9～87μg/mL内线性关系良好,r=0.9998,平均回收率为98.15%,RSD=0.27%.结论:所建方法准确可靠,操作简便,稳定性好,可用于辣椒碱生产的质量控制.