中性环糊精毛细管电泳法手性拆分氧氟沙星对映体的对比

目的:比较在毛细管电泳中不同中性环糊精(CD)及其衍生物对氧氟沙星对映体的手性拆分能力,并提出可能的手性识别机制. 方法:分别以α-CD,β-CD,γ-CD,HP-β-CD和DM-β-CD为手性选择剂,采用毛细管电泳法研究CD种类及其浓度、分离电压、温度对氧氟沙星对映体分离的影响. 结果:在50 mmol/L磷酸缓冲液(pH 3.0),15 kV分离电压、柱温25℃的基本优化条件下,分别以25 mmol/L DM-β-CD或50 mmol/L HP-β-CD 25 mmol/L γ-CD为手性选择剂,氧氟沙星对映体得到基线分离,分离度(Rs)分别达2.0和1.7. 结论:CD空腔大小和空腔边缘作用对于手性识别有重要选择性,该毛细管电泳法操作简单方便,手性分离效果良好,可用于氧氟沙星对映体药物的分离.     

高效毛细管电泳法分析D-苯丙氨酸与D-N-乙酰苯丙氨酸的对映体杂质含量

目的:建立高效毛细管电泳法 (HPCE) 测定不对称合成D-苯丙氨酸和D-N-乙酰苯丙氨酸对映体杂质含量的新方法.方法:采用HPCE法对苯丙氨酸和N-乙酰苯丙氨酸对映体的分离条件进行优化,并将该HPCE方法用于样品测定.结果:在40 mmol/L Tris-H3PO4 (pH=2.5),60 g/L S-β-CD,-15 kV分离电压,20℃柱温的优化条件下,苯丙氨酸和N-乙酰苯丙氨酸对映体得到基线分离.在药物浓度为0.01～0.20 g/L的考察范围内,浓度和峰面积呈良好线性,L-苯丙氨酸和L-N-乙酰苯丙氨酸的回归方程分别为:Y=1065.42X 31.02(R2=0.9989)和Y=996.02X 34.44(R2=0.9984),其中,Y为校正峰面积A/t,X为浓度(g/L).结论:该HPCE方法简单、准确,可用于苯丙氨酸和N-乙酰苯丙氨酸对映体的手性拆分和对映体杂质含量的测定.     

佐米曲普坦与其右旋对映体的毛细管电泳手性分离

目的 建立手性分离方法并检查佐米曲普坦光学纯度.方法 通过手性拆分剂种类及浓度、缓冲液pH及浓度、温度及电压的优化,选择最佳的手性分离条件.结果 最佳分离条件缓冲液为200 mmol/L磷酸盐缓冲液(用磷酸调pH值为2.3,内含21 mmol/L三甲基-β-环糊精);检测波长为214 nm;电压为12 kV;温度为22℃,基线分离了佐米曲普坦及其对映体.结论 建立的毛细管电泳法可用于佐米曲普坦的手性分离,为产品的质量控制提供了可靠的分析方法.     

毛细管电泳法检测左旋普拉克索中右旋普拉克索杂质的研究

目的:建立毛细管电泳法,对左旋普拉克索中右旋普拉克索进行杂质检查。方法:分别以β-环糊精(β-CD)、羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)、硫酸酯-β-环糊精(SBE-β-CD)和二甲基-β-环糊精(DM-β-CD)为手性选择剂,考察手性选择剂的浓度、pH、柱长和柱内径对分离选择性的影响,采用未涂渍熔融石英毛细管47 cm ×50 μm(有效长度40 cm),背景电解质溶液:40 mmol/L柠檬酸三钠缓冲液,含有0.5% SBE-β-CD,用磷酸调节pH值到4.0,柱温:30℃,检测波长254 nm,电压16 kV。 结果:2种旋光异构体的分离度良好(Rs>2.5),样品中右旋普拉克索的含量均小于0.5%。结论:所建立的方法简单可靠、专属性强,可以作为常规的杂质检查手段。     

毛细管电泳法检查盐酸左西替利嗪片中右旋异构体杂质

目的：建立毛细管电泳法检查盐酸左西替利嗪片中右旋异构体杂质。方法：用磺酸化-β-环糊精（S-β-CD）作为手性选择剂,考察了S-β-CD浓度、pH值和缓冲盐浓度对分离的影响。结果：在30 mmol/L磷酸盐运行缓冲液(含20 g/L S-β-CD,pH 7.0)中,西替利嗪对映体在分离电压为15 kV的条件下得到良好分离,并满足对盐酸左西替利嗪片检查右旋异构体杂质所需要的条件。结论：本实验建立的方法灵敏、可靠,可用于左旋西替利嗪中右旋异构体杂质的检查。     

毛细管区带电泳同时分离维拉帕米和去甲维拉帕米对映体

目的 :建立同时分离维拉帕米 ( VPM )和去甲维拉帕米 ( NVPM )对映体的高效毛细管电泳方法。　 方法 :采用毛细管区带电泳模式 ,以三甲基 -﹀-环糊精 ( TM-﹀- CD )为手性选择剂 ,考察了毛细管柱、进样方式、运行电压、缓冲液 p H值、溶剂等因素对峰迁移、分辨率、灵敏度的影响 ,选择优化的电泳条件用于标准溶液的分离和测定。　 结果 :用 p H为 2 .5,含 60 mmol/ LTM-﹀- CD的 60 mmol/ L磷酸盐缓冲液为手性拆分剂 ,在 30 cm× 75︼m ( id)的聚内酰胺涂渍柱(柱温 2 0℃ )上 ,采用 12 k V( 7s)电迁移进样 ,运行电压为 14k V,紫外检测波长 2 0 0 nm,能在 11min内将内标 ( Gallopamil)、R- VPM、S- VPM、R- NVPM和 S- NVPM完全分离 ,并用各对映体与内标的峰面积比为定量指标进行水标溶液的浓度测定 ,定量检测限为 2 5ng/ ml,日间变异小于10 % ,线性关系良好。　 结论 :毛细管区带电泳方法能快速、高效地分离 VPM和 NVPM对映体 ,为 VPM和 NVPM对映体的测定及质量控制提供新的方法 ,为生物体液中 VPM及其代谢物NVPM对映体的测定、为开展 VPM对映体特异性的药代动力学和药效学研究打下基础     

磺丁基醚-β-环糊精流动相添加法拆分尼莫地平对映体

目的采用磺丁基醚-β-环糊精(SBE-β-CD)作为流动相添加剂,建立反相色谱法分离尼莫地平对映体的方法。考察了环糊精的种类、浓度、有机改性剂的种类和浓度、pH值、柱温、流速等因素对对映体分离的影响。方法采用HypersilBDSC8色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为水(pH2.5,含25mmol·L~(-1)SBE-β-CD)-乙腈(58:42,V/V);流速0.8 ml·min~(-1);检测波长为235nm;进样量为20μl;柱温20℃。结果在优化的色谱条件下,尼莫地平对映体达到完全分离,分离度R为1.6,分离因子α为1.1。结论该方法操作简单,比手性固定相法更经济适用。并拓展了SBE-β-CD在HPLC中作为手性流动相添加剂拆分对映体的应用。     

盐酸西布曲明对映体的毛细管电泳手性拆分

目的：以磺化-β-环糊精（S-β-CD）作为手性选择剂,用毛细管区带电泳法对手性药物盐酸西布曲明进行了拆分研究.方法：考察了背景电解质溶液的pH值、S-β-CD的浓度、缓冲液浓度及电压等对分离的影响.结果：在背景电解质为含5％S -β-CD的15 mmol/L磷酸-三乙醇胺（H3 P04-TEA）（pH 4.0）体系,电压30 kV,温度为16℃,检测波长为223 nm条件下,盐酸西布曲明可以得到良好分离,分离度为5.6.结论：该方法可用于盐酸西布曲明的拆分,具有快速、便捷、准确性好等优点.     

β-环糊精硫酸酯的合成及其在舒必利毛细管电泳拆分中的应用

目的:合成β-环糊精硫酸酯并以其作为毛细管电泳手性添加剂对舒必利进行手性拆分研究.方法:以三氧化硫吡啶复合物作为硫酸酯化试剂合成β-环糊精硫酸酯.以合成的β-环糊精硫酸酯作为手性添加剂利用毛细管电泳对舒必利进行手性拆分.结果:对不同反应温度(60、80、100、120℃)下产物的纯度进行了初步分析,表明在80℃条件下,以吡啶作溶剂、三氧化硫吡啶复合物作为硫酸酯化试剂合成β-环糊精硫酸酯条件易于控制,产物纯度较好.用合成的β-环糊精硫酸酯作为毛细管电泳手性添加剂,采用未涂渍熔融石英毛细管50 μm×58.5 cm (有效长度50 cm),优化选择50 mmol/L Tris缓冲液含1.3% β-环糊精硫酸酯(1% H3PO4溶液调节pH 3.7),温度20℃,操作电压24 kV,正极进样50 mbar×3 s(1 bar=105 Pa),在检测波长214 nm条件下对舒必利的D、L-型对映体进行分离,结果分离度良好(Rs>2.5).结论:探索得到了一条较为稳定的β-环糊精硫酸酯的合成路线,合成的β-环糊精硫酸酯作为毛细管电泳手性添加剂分离舒必利的D、L-型对映体拆分效果较好.     

草珊瑚药材毛细管电泳指纹图谱条件探索

目的:本试验对草珊瑚药材指纹图谱电泳条件进行摸索。方法:主要对电泳缓冲液的组成,缓冲液pH值,分离电压,分离温度,进样量和添加剂进行考察。结果:草珊瑚药材毛细管指纹图谱的电泳条件为:电泳缓冲液7.5 mmol/L硼砂-磷酸二氢钠-8%乙腈-0.8 mmol/Lβ-环糊精(β-CD),进样量2.76 kPa(3s),分离电压17kV,柱温15℃,检测波长340 nm。结论:通过对电泳条件的全面摸索,得到草珊瑚药材毛细管电泳指纹图谱的最佳分离条件。     

羧甲基-β-环糊精取代度对毛细管电泳手性拆分普罗帕酮和普萘洛尔对映体的影响

目的：研究羧甲基-β-环糊精取代度对毛细管电泳手性拆分普罗帕酮和普萘洛尔对映体的影响。方法：在氢氧化钠溶液中β-环糊精被氯乙酸直接羧甲基化,很方便地合成了不同取代度的羧甲基-β-环糊,并应用红外光谱和核磁共振对它们的平均取代度和取代位置进行表征,以不同取代度的羧甲基-β-环糊精为手性选择剂,系统考察运行缓冲液的浓度和pH值、手性选择剂浓度、石英毛细管温度和运行电压等因素对毛细管电泳手性拆分的影响。结果：随着羧甲基-β-环糊精取代度的增大,普罗帕酮和普萘洛尔对映体的分离随之改善;在优化条件下,两个消旋化合物都获得很好的拆分。结论：羧甲基-β-环糊精的取代度对毛细管电泳手性拆分和运行缓冲液的离子强度有重要影响,因此在手性分离中使用表征清晰的环糊精衍生物是非常重要的。     

高效毛细管电泳法同时测定人血浆D,L-乳酸对映体

目的:用高效毛细管电泳法测定血浆中D,L-乳酸对映体。方法:以2-羟丙基-β-环糊精(2-HP-β-CD)作为手性选择剂,采用阳离子表面活性剂十四烷基三甲基溴化铵(TTAB)改变电渗流的方向,应用未涂层毛细管分离测定D,L-乳酸对映体。生物样品的处理为乙腈沉淀蛋白后干燥浓缩,超纯水25μL溶解进样。结果:乳酸对映体约42min分离结束,其分辨率≥1.25。不经过浓缩处理直接进样的D,L-乳酸标准溶液的检测限分别为80μmol/L和50μmol/L(S/N=3),在空白血浆中加入D,L-乳酸,经样品浓缩步骤处理,其检测限分别为20μmol/L和15μmol/L(S/N=3)。D-乳酸标准工作液浓度范围为0.025～2.50mmol/L,相关系数0.9969;L-乳酸标准工作液浓度范围为0.025～5.0mmol/L,相关系数0.9952。D,L-乳酸峰面积及迁移时间的相对标准偏差(RSD)小于6.27%,样品回收率大于68.2%。结论:该法适合临床样品检测,结果令人满意。     

毛细管区带电泳法拆分盐酸舍曲林对映体

目的:研究影响盐酸舍曲林对映异构体分离的因素,比较不同种类环糊精对盐酸舍曲林对映异构体的手性选择性,建立拆分盐酸舍曲林对映异构体的毛细管区带电泳分离方法.方法:以15 mg/mL 羧甲基-β-环糊精(CM-β-CD)为手性添加剂,采用30 mmol/L四硼酸钠(pH 11)为背景电解质,操作电压为15 kV,柱温为20 ℃,波长为210 nm的条件下,分离了盐酸舍曲林对映异构体.结果:盐酸舍曲林对映异构体在15 min内达到基线分离.结论:阴离子环糊精对盐酸舍曲林对映异构体的手性选择性比中性环糊精高.     

β-环糊精羧甲醚的合成及其在特布他林毛细管电泳拆分中的应用

目的:合成β-环糊精羧甲醚并以其作为毛细管电泳手性添加剂对特布他林进行手性拆分研究.方法:在碱性体系氢氧化钠溶液中以氯乙酸作为羧甲醚化试剂合成β-环糊精羧甲醚.以合成的β-环糊精羧甲醚作为手性添加剂利用毛细管电泳对特布他林进行手性拆分.结果:对不同反应温度(60℃,80℃,100℃)下合成产物的纯度进行了初步探索,结果表明在80℃条件下,以水作溶剂,在碱性体系氢氧化钠溶液中以氯乙酸作为羧甲醚化试剂合成β-环糊精羧甲醚条件易于控制,用反相渗透法纯化产物,所得产品回收率及纯度重现性较好.用合成的β-环糊精羧甲醚作为毛细管电泳手性添加剂,采用未涂渍熔融石英毛细管75 μm×58.5 cm(有效长度50 cm),优化选择25 mmol/L Tris缓冲液含1.0% β-环糊精羧甲醚(25 mmol/L H3PO4调节pH 2.5),温度20℃,操作电压20 kV,正极进样5 kPa×3 s,检测波长204 nm,在此条件下对特布他林D-、L-型对映体进行分离,分离度良好(Rs>2.5).结论:探索到一条较为稳定的β-环糊精羧甲醚的合成路线,所合成的β-环糊精羧甲醚作为毛细管电泳手性添加剂用于拆分特布他林D-、L-型对映体效果较好.     

毛细管电泳法检测美普他酚手性拆分中的光学纯度

目的 建立测定二对甲苯甲酰酒石酸美普他酚对映体的毛细管区带电泳法,并检测其光学纯度。方法 采用72 cm×50 μm未涂层石英毛细管,30 mmol／L磷酸缓冲液(pH 8.05,内含0.5％TM-β-CD,乙腈12％),运 行电压20 kV,毛细管柱温20℃,压力进样3 kPa×3 s,检测波长200 nm。结果 在选定的实验条件下二对甲苯 甲酰酒石酸美普他酚对映体达到基线分离。两对映体在0.10-0.80 mg/mL的浓度范围内,浓度与峰面积的响 应均呈良好的线性关系,相关系数分别为:0.999 6和0.999 8。迁移时间的RSD在3％以内,峰面积的RSD在 10％以内,左旋体的加样回收率为100.26％(n=6),最低检测浓度为0.02 mg／mL。测定3批样品的光学纯度 分别为84.10％、92.54％、≥99.60％。结论 本法适用于实验室中二对甲苯甲酰酒石酸美普他酚光学纯度的常 规测定。     

盐酸左西替利嗪对映体杂质的高效毛细管电泳法检查

建立盐酸左西替利嗪中对映体杂质检查的毛细管电泳方法。采用石英毛细管柱(50 cm×50 μm,有效长度41.5 cm),以40 mmol/L磷酸二氢钠为背景缓冲液,85 mg/mL磺丁基-β-环糊精和85 mg/mL羟丙基-β-环糊精的二元体系为手性拆分剂,pH为 5.5,运行电压20 kV,检测波长230 nm,压力进样(5 Pa,10 s)。盐酸左西替利嗪对映体杂质的检测限和定量限分别为2.0 μg/mL和5.0 μg/mL。该方法可用于盐酸左西替利嗪原料药和片剂的对映体杂质检查。并通过析因实验考察二元体系中磺丁基-β-环糊精和羟丙基-β-环糊精之间的相互作用对西替利嗪手性分离的影响,探讨发现负电性的环糊精与电中性环糊精所构成的二元体系的协同作用仅表现在表观淌度的影响上。     

亲和毛细管整体柱在牛血清白蛋白与奈福泮对映体相互作用研究中的应用

利用胃蛋白酶键合的有机聚合物整体柱在电色谱中对手性药物奈福泮的拆分能力,采用前沿分析法同时对奈福泮的两个对映体与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用情况进行了考察。经过优化后建立的电色谱条件为:胃蛋白酶修饰的聚(甲基丙烯酸环氧丙酯-乙二醇二甲基丙烯酸酯)毛细管整体柱作为分离通道(32 cm×75 μm,有效长度22 cm),运行缓冲液为pH 5.5的15 mmol/L醋酸铵,样品溶剂为pH 7.4的50 mmol/L醋酸铵,运行电压为5.0 kV,电压进样10 kV×6 s,检测波长为215 nm。此时奈福泮两个对映体平台峰彼此完全分离,结合体系中BSA对对映体在电色谱中的分离和检测均无影响,测得两个对映体与BSA的结合常数分别为443和527 L/mol,结合位点数均为1.0,结合位点为Sudlow site Ⅱ。     

氯苄律定对映体的毛细管电泳分离及其在家兔体内手性药代动力学研究*

目的：建立氯苄律定（CBTHB）对映体的毛细管电泳分离方法,研究家兔体内CBTHB的手性药代动力学特征。方法：通过羧甲基环糊精手性识别作用和其他电泳条件的比较,确定CBTHB对映体毛细管电泳体内分析方法,由统计矩方法计算家兔口服CBTHB后的药代动力学参数。结果：CBTHB两个对映体获得理想分离。家兔口服150 mg/kg CBTHB后体内过程存在着立体选择性差异,其中R-CBTHB与S-CBTHB的平均血浆浓度比值为(1.43±0.21)。两个对映体血浆浓度之间存在非常显著性差异（t = 4.14,P＜0.01 ）,R-CBTHB的AUC0？τ 和AUC0？∞也明显大于S-CBTHB（P＜0.05）。结论：手性毛细管电泳分析方法成功地应用于CBTHB对映体的药代动力学研究。     

CHIRALPAK AD-RH手性柱直接拆分普罗帕酮对映体

目的：建立普罗帕酮对映体的反相高效液相拆分方法,为研究普罗帕酮手性异构体药代动力学提供依据。方法：在Chiralpak AD-RH柱上,考察流动相pH值、流速、乙腈比例、缓冲盐浓度、柱温对普罗帕酮手性异构体拆分的影响。结果：以20mmol/L磷酸盐缓冲液（pH8.5）-乙腈为流动相,流速0.5mmol/L,柱温25℃,在Chiralpak AD-RH手性柱上成功拆分普罗帕酮对映体。结论：普罗帕酮对映体在Chiralpak AD-RH手性柱上获得基线拆分。     

牛血清白蛋白手性毛细管整体柱的分离性能

以牛血清白蛋白为手性选择器,基于甲基丙烯酸酯整体柱表面所带环氧基团具有较强反应活性的特征,采用一步法将牛血清白蛋白直接键合到其表面上,制备成牛血清白蛋白手性固定相毛细管整体柱。在毛细管电色谱模式下,进行柱分离性能研究。在-5 kV的分离电压、214 nm紫外检测波长、5 s进样时间、10 mmol/L磷酸盐流动相分离条件下,成功拆分了4种对映体和手性药物华法令,分析时间均小于15 min,分离度大于1.90,最大达到8.81。