补肾法对去卵巢大鼠骨组织中TGF-β1及Fas的影响

目的：观察中药补肾方对去卵巢大鼠骨组织中TGF—β1及Fas的影响。方法：复制骨质疏松症大鼠模型，假手术组仅摘除小段肠系膜。各组动物术后常规喂养3个月后，以补肾方为治疗药物，尼尔雌醇片为阳性对照，生理盐水为阴性对照，分别给药3个月后处死取材。应用免疫组化SABC法检测骨组织中的TGF—β1和Fas抗原的表达情况。结果：TGF—β1主要在成骨细胞的胞膜上和胞浆内表达、Fas抗原主要在破骨细胞的胞浆内表达。中药组骨组织中TGF—β1及Fas抗原表达的阳性颗粒的实面积、平均光度、阳性单位值较模型组明显增高(P＜0．05)；而与雌激素组、假手术组比较则无明显差异(P＞0．05)。结论：补肾法能促进成骨细胞骨形成活性、抑制破骨细胞骨吸收活性，其作用机理之一可能是通过调控某些影响骨形成及骨吸收的局部细胞生长因子及凋亡基因(如TGF-β1、Fas)而达到的。     

骨肽注射液对去卵巢大鼠骨组织中TGF-β1及Fas的影响

目的：观察骨肽注射液对去卵巢大鼠骨组织中转化生长因子-β（TGF—β1）及Fas的影响。方法：复制骨质疏松症大鼠模型，假手术组仅摘除小段肠系膜。各组动物术后，以骨肽为治疗药物，苯甲酸雌二醇注射液为阳性对照，生理盐水为阴性对照，分别给药3个月后处死取材。应用免疫组化sABC法检测骨组织中TGF—β1和Fas抗原的表达情况。骨肽高、低剂量组骨组织中TGF—β1及Fas抗原表达的阳性颗粒的平均灰度、阳性单位值较模型组明显增高（P〈0．05）；而与假手术组比较则无明显差异（P〉0．05）。结论：骨肽注射液能促进成骨细胞形成活性、抑制破骨细胞吸收活性，其作用机理之一可能是通过调控某些影响骨形成及骨吸收的局部细胞生长因子及凋亡基因而达到的。     

益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织TGF-β1mRNA表达的影响

目的:观察益骨胶囊预防和治疗用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织TGF-β1mRNA基因表达的影响,在分子水平上阐明益骨胶囊防治骨质疏松症的可能作用机制.方法:从72只10月龄SD雌性大鼠中随机抽取24只为假手术A和B组,余48只待手术造模后随机分为4组:模型A组、模型B组、预防组、治疗组,每组12只;以双侧卵巢切除法复制骨质疏松模型;预防各组均在手术后3天即开始灌胃,假A组、模A组灌胃NS 3 ml、预防组灌胃益骨胶囊水溶液3 ml,每天1次,共24周;治疗各组均在手术后第13周即开始灌胃,假B组、模B组灌胃NS 3 ml、治疗组灌胃益骨胶囊水溶液3 ml,每天1次,共12周.FQ-PCR方法检测骨组织TGF-β1mRNA基因表达.结果:大鼠造模24周时,益骨胶囊预防组和治疗组骨组织TGF-β1mRNA基因表达均明显高于模型组,与假手术组相近.结论:益骨胶囊能促进骨组织TGF-β1mRNA基因表达.     

补肾法对去卵巢大鼠骨组织中TGF-β1及Fas的影响

目的观察中药补肾方对去卵巢大鼠骨组织中TGF-β     

益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织Ⅰ型胶原mRNA表达的影响

目的：观察益骨胶囊治疗用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织Ⅰ型胶原mRNA表达的影响，以探讨益骨胶囊治疗骨质疏松症的可能机理。方法：36只10月龄SD雌性大鼠随机抽取12只为假手术组，剩余24只待手术造馍后随机分为2组：模型组、益骨胶囊组；以双侧卵巢切除法复制骨质疏松模型：采用RT—FQ—PCR方法检测骨组织Ⅰ型胶原mRNA的表达。结果：益骨胶囊组骨组织Ⅰ型胶原mRNA表达明显高于模型组（P〈0．05），与假手术组相近（P〉0．05）。结论：益骨胶囊能促进骨组织Ⅰ型胶原mRNA基因表达。     

针刺对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞Fas、Bcl-2 mRNA表达的影响

目的从细胞凋亡角度研究针刺治疗围绝经期综合征的作用机制。方法将围绝经期大鼠随机分为围绝经期组、针刺组和药物组,并设青年对照组。围绝经期组大鼠不治疗,作为空白对照;针刺组大鼠针刺肾俞、足三里、三阴交治疗;药物组大鼠采用更年安药物治疗;青年对照组大鼠不治疗。应用原位杂交法检测卵巢颗粒细胞Fas、Bcl-2 mRNA表达,并进行图像分析。结果与青年对照组比较,围绝经期组大鼠卵巢颗粒细胞Fas mRNA表达明显升高(P<0.01),Bcl-2 mRNA表达明显降低(P<0.01);针刺治疗后围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞Fas mRNA表达明显降低(P<0.01),Bcl-2 mRNA表达明显提高(P<0.01)。结论针刺能够下调围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞Fas mRNA表达,上调Bcl-2 mRNA表达。     

针灸对糖尿病造影剂肾病大鼠肾脏细胞凋亡基因Fas/FasL的影响

目的:通过观察针灸对糖尿病造影剂肾病大鼠肾脏细胞凋亡基因Fas/FasL的影响,探讨针灸对糖尿病造影剂肾病的保护机制。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、针刺组、艾灸组、联合组,每组8只。采用腹腔注射链脲佐菌素法制备糖尿病造影剂肾病大鼠模型。针刺组、艾灸组及联合组分别给予针刺、艾灸及针刺+艾灸联合治疗,3组均选取"三阴交""肾俞""脾俞",每日1次,连续7d。用HE染色法观察大鼠肾脏病理形态,醋酸铀-柠檬酸双染色法观察大鼠肾脏超微结构,脲酶法测定大鼠血清尿素氮(BUN)含量,苦味酸法测定大鼠血清肌酐(Scr)含量,氧化还原法检测大鼠肾脏组织一氧化氮合酶(NOS)活性,黄嘌呤氧化酶法检测大鼠肾脏组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法检测大鼠肾脏组织丙二醛(MDA)含量,比色法检测大鼠肾脏组织总抗氧化能力(T-AOC),Western blot法及荧光定量PCR法检测大鼠肾脏组织Fas、FasL蛋白及mRNA表达水平。结果:光学显微镜下,对照组大鼠肾小球、肾小管及间质无明显病理改变;模型组大鼠肾小球呈分叶状,肾小管上皮细胞多有局部坏死、空泡样变性。电镜下模型组大鼠肾小球血管袢基底膜增厚,肾小管上皮细胞胞质见大量空泡,线粒体严重肿胀,线粒体嵴排列紊乱、断裂或消失,可见凋亡样改变的细胞。针刺组和艾灸组肾脏病理改变基本同模型组;联合组大鼠肾脏病理改变有所改善。与对照组比较,模型组大鼠血清BUN、Scr含量明显升高(P<0.01);与模型组比较,艾灸组大鼠血清BUN含量明显降低(P<0.05),针刺组、联合组大鼠血清BUN、Scr含量明显降低(P<0.05);与针刺组比较,联合组大鼠血清BUN含量明显降低(P<0.05);与艾灸组比较,联合组大鼠血清BUN、Scr含量明显降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠肾脏NOS、SOD、T-AOC活性明显降低(P<0.05)、MDA含量明显升高(P<0.01);与模型组比较,针刺组、艾灸组大鼠肾脏NOS活性明显升高(P<0.01,P<0.05)、MDA含量明显降低(P<0.05),联合组大鼠肾脏NOS、SOD、T-AOC活性明显升高(P<0.01,P<0.05)、MDA含量明显降低(P<0.05);与针刺组和艾灸组比较,联合组大鼠肾脏NOS、SOD、T-AOC活性明显升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠肾脏Fas和FasL蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,艾灸组大鼠肾脏FasL蛋白及mRNA表达水平均降低(P<0.05),针刺组和联合组大鼠肾脏Fas和FasL蛋白及mRNA表达水平均降低(P<0.05,P<0.01);与针刺组和艾灸组比较,联合组大鼠肾脏Fas和FasL蛋白及mRNA表达水平均明显降低(P<0.05)。结论:针刺、艾灸均可降低糖尿病造影剂肾病大鼠肾脏的氧化应激反应,下调Fas/FasL表达,减少肾细胞凋亡,减轻肾损伤;针刺联合艾灸具有协同增效作用。     

肾复宁颗粒对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏TGF-β1mRNA及细胞凋亡基因Fas/FasL表达的影响

目的:观察肾复宁颗粒对慢性肾功能衰竭大鼠的作用及可能机制。方法:SD大鼠采用右肾切除左肾外动脉分支结扎方法建立CRF模型,随机分为模型对照组、雷公藤多甙片组(0.006g/kg)、肾复宁颗粒组(9g/kg)、肾复宁颗粒组(6g/kg)、肾复宁颗粒组(3g/kg),各15只,另设假手术组15只,连续给药8周,观察血清Scr、BUN、Cys-C含量及肾脏组织中TGF-β1mRNA、细胞凋亡基因Fas/Fas L表达水平。结果:治疗后,治疗组及雷公藤多甙片组大鼠血清中Scr、BUN、Cys-C水平明显下降,大鼠肾脏组织中TGF-β1 mRNA、Fas/Fas L表达减少,尤以肾复宁颗粒(9g/kg)显著。结论:肾复宁颗粒通过抑制慢性肾功能衰竭大鼠肾脏TGF-β1mRNA、Fas/Fas L表达,调控肾实质细胞调亡,从而改善肾功能,达到延缓肾脏纤维化作用,其疗效具有一定剂量依赖性。     

补经合剂对初老大鼠卵巢细胞Fas、Caspase-3表达的影响

目的:补经合剂具有补肾益精、养血益气的功效,临床上用于治疗月经后期或伴量少属肾虚血亏者。本研究着重以该方对大鼠卵巢卵泡细胞凋亡的影响,拟从分子生物学水平探讨该方的作用机理。方法:以雌性初老大鼠为自然肾虚模型,采用免疫组织化学方法观察了补经合剂对肾虚大鼠卵巢的卵泡细胞 Fas表达、凋亡蛋白酶 Caspase-3表达的影响。结果:补经合剂高剂量组(相当于原生药31g/kg)能抑制肾虚大鼠卵巢的卵泡细胞凋亡蛋白酶 Caspase-3表达(P<0.05);同时中成药乌鸡白凤丸也具有相似的作用。结论:补经合剂临床上用于治疗月经后期或伴量少的机理,可能与该药抑制肾虚大鼠卵巢的卵泡细胞凋亡蛋白酶Caspase-3表达水平有关。     

补肾、活血复方对老年大鼠T细胞凋亡相关基因Fas、FasL转录的影响

目的 :探讨补肾复方下调老年大鼠T细胞凋亡的分子机理。方法 :采用RNA酶保护技术 ,测定各组Fas、FasL基因的mRNA水平 ,并以GAPDH为内对照基因 ,对各组Fas、FasL基因的转录进行半定量分析。结果 :老年对照组Fas/GAPDH、FasL/GAPDH的积分光密度值分别为 0 81± 0 17、0 84± 0 12 ;年轻对照组分别为 0 36± 0 16、0 2 6± 0 12。两组比较差异有显著性。活血复方组Fas/GAPDH、FasL/GAPDH的积分光密度值分别为 0 99± 0 36、0 94± 0 33,与老年对照组比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5) ;两个补肾组Fas/GAPDH为 0 78± 0 11和 0 78± 0 2 0 ,与老年对照组比较差异无显著性 (P >0 0 5) ;而两个补肾组FasL/GAPDH的积分光密度值为 0 71± 0 2 1和 0 68± 0 15,低于老年对照组 (P <0 0 1)。结论 :补肾复方对T细胞FasL基因的转录具有一定的负调控作用 ,这是补肾复方下调老年大鼠T细胞过度凋亡的分子机理之一     

金刚健骨片对去卵巢模型鼠TGF-β1及IGF-1表达的影响

目的:观察金刚健骨片对去卵巢大鼠骨组织中TGF-β1及IGF-1表达的影响,进一步探讨金刚健骨片治疗绝经后骨质疏松症的作用机制。方法:将健康清洁级雌性SD大鼠40只随机分为5组,即假手术(A)组、金刚健骨片大剂量(B)组、金刚健骨片小剂量(C)组、雌激素(D)组、模型(E)组。所有大鼠常规饲料喂养,造模成功后使用对应药物灌胃治疗12周。治疗结束后处死大鼠采集第三腰椎为标本,采用免疫组化法检测TGF-β1及IGF-1在骨组织中的表达。数据使用SPSS16.0软件统计,检验水准α=0.05.结果:①TGF-β1在骨组织中的表达,B组、D组与E组比较差异有统计学意义(P<0.05);B组与D组比较其差异无统计学意义(P>0.05)。C组与E组比较其差异无统计学意义(P>0.05);C组、E组与A组比较其差异均有统计学意义(P<0.01)。②IGF-1各组间比较差异无统计学意义。结论:①金刚健骨片能使TGF-β1在骨组织中的表达增强,其治疗作用与雌激素治疗相仿,并能修复或者改善骨组织微细结构。②骨组织中IGF-1含量与雌激素关联不明显,金刚健骨片可略提高IGF-1的表达,但无统计学意义。     

前列回春对实验性大鼠前列腺组织Fas表达及细胞凋亡的影响

目的 :探讨前列回春对实验性大鼠前列腺组织Fas表达及细胞凋亡的影响。方法 :采用大鼠去势后注射丙酸睾酮引起前列腺增生法造模 ,灌胃给药 30d后 ,处死大鼠取前列腺组织并称湿重 ,用免疫组化方法检测前列腺组织中Fas阳性细胞的表达率 ,用流式细胞术检测细胞凋亡率和观察细胞凋亡峰。结果 :前列回春各组前列腺组织湿重与模型组比较差异非常显著 (P<0.01) ;前列回春各组和雌二醇组前列腺组织中Fas表达率明显高于模型组 (P<0.05,P<0.01) ;与正常组和模型组比较 ,前列回春和雌二醇组的细胞凋亡率明显提高 ,差异有显著性(P<0.01)。结论 :前列回春可增加实验性大鼠前列腺组织中Fas的表达 ,促进大鼠前列腺组织细胞凋亡 ,降低大鼠前列腺组织的重量 ,而且呈明显量效关系 ,表明前列回春可抑制前列腺增生。     

黄芪失笑散对急性心肌梗死大鼠Fas、FasL表达的影响

目的:观察不同剂量黄芪失笑散对急性心肌梗死大鼠梗死边缘区细胞凋亡及Fas、FasL蛋白表达的影响.方法:取雄性SD大鼠60只,随机分为黄芪失笑散高剂量组、黄芪失笑散中剂量组、黄芪失笑散低剂量组、模型组和对照组.连续灌胃7d后,结扎冠状动脉左前降支造成急性心肌梗死模型,对照组不结扎.手术后4.5h留取心脏标本,采用原位末端标记染色法(TUNEL)检测细胞凋亡指数,采用Western blot法检测Fas、FasL蛋白表达量.结果:与对照组比较,黄芪失笑散各组可明显降低心肌细胞凋亡指数和Fas、FasL的蛋白表达量(P＜0.01).不同剂量组间差异无统计学意义(P＞0.05),且黄芪失笑散大剂量组效果最好.结论:黄芪失笑散能够保护急性心肌梗死大鼠的缺血心肌,其作用机制可能与降低梗死边缘区Fas、FasL蛋白表达水平从而抑制心肌细胞凋亡有关.     

宁神温胆汤对精神分裂症大鼠海马凋亡蛋白Fas、FasL表达的影响

目的:探讨宁神温胆汤对精神分裂症大鼠海马凋亡蛋白Fas、Fas L的表达影响。方法:随机将40只SD大鼠分为4组:正常组、模型组、宁神温胆汤组、氯丙嗪组。正常组、模型组给予生理盐水,宁神温胆汤组给予中药药液,15.2 g生药·kg-11次/d,共21 d;氯丙嗪组先连续灌胃等容量生理盐水14 d,1次/d,最后7 d腹腔注射盐酸氯丙嗪4.5 mg·kg-1。各组最后一天给药1 h后,正常组腹腔注射生理盐水2 mg·kg-1外,其它3组腹腔注射阿扑吗啡2 mg·kg-1,观察15 min大鼠刻板行为,然后断头处死,免疫组化检测Fas、Fas L。结果:与模型组相比,氯丙嗪组在5、10、15 min刻板行为明显减少,宁神温胆汤组在10、15 min刻板行为出现减弱,差异有统计学意义(P<0.01);宁神温胆汤组、氯丙嗪组Fas、Fas L表达降低,差异具有统计学意义(P<0.01~0.05)。结论:宁神温胆汤组有一定的抗精神分裂症作用,可能通过对抗外源性刺激导致的细胞凋亡发挥其神经保护作用。     

温心胶囊对大鼠实验性缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Fas蛋白表达的影响

目的：探讨临床有效中药复方温心胶囊防治冠心病心肌缺血的分子作用机制。方法：采用盐酸异丙肾上腺素连续多点皮下注射制备大鼠心肌缺血模型。运用透射电镜技术及TUNEL法,观察温心胶囊对缺血损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响,并运用免疫组化的方法观察其对细胞凋亡相关基因Bcl-2、Fas蛋白表达的影响。结果：异丙肾上腺素所致心肌缺血损伤可明显诱导大鼠心肌细胞发生凋亡,显著引发Fas基因蛋白表达增强,并轻度引发Bcl-2基因蛋白表达增强,温心胶囊可显著下调Fas基因的蛋白表达,上调Bcl-2基因的蛋白表达,明显抑制和阻断心肌细胞发生凋亡。结论：通过调节缺血心肌Bcl-2、Fas基因的蛋白表达从而抑制和阻断细胞凋亡的发生,可能是中药复方温心胶囊防治冠心病心肌缺血损伤的分子作用机制之一。     

卡维地洛对心衰大鼠心肌细胞凋亡和Fas/Fas L基因表达的影响

目的 探讨卡维地洛对心力衰竭大鼠心肌凋亡的发生及Fas/Fas L基因及蛋白表达的影响.方法 取SD雄性大鼠,采用结扎前降支方法建立慢性心力衰竭模型,将存活动物随机分为假手术组、心力衰竭组、卡维地洛组.观察血流动力学变化、心肌细胞凋亡、Fas/Fas L基因表达情况.结果 较心力衰竭组相比较,卡维地洛可显著降低心率、LVEDP、±dp/dt（P〈0.05）;同假手术组相比较心力衰竭组凋亡指数、Fas/Fas L蛋白表达明显升高,Fas/GAPDH明显增加（P〈0.05）.而卡维地具有降低凋亡和Fas/Fas L基因及蛋白表达的作用（P〉0.05）.结论 慢性心力衰竭大鼠的心肌中Fas/Fas L有蛋白和基因水平上调,心肌凋亡指数升高;而卡维地洛可有效抑制有Fas/Fas L蛋白和基因水平的上调而降低心肌细胞凋亡的发生,卡维地洛可能通过抑制心肌细胞凋亡途径而起到保护心功能的作用.     

六味地黄丸对去卵巢高血脂大鼠雌激素受体α、βmRNA表达的影响

目的观察六味地黄丸(地黄丸)对去卵巢高血脂大鼠雌激素受体α、β(ER α、β)mRNA 表达的影响。方法采用8周龄雌性大鼠建立去卵巢高血脂模型,将24只大鼠随机分为3组:去卵巢加六味地黄丸组(地黄丸组),去卵巢加苯甲酸雌二醇组(雌二醇组),去卵巢加生理盐水组(对照组),每组8只,地黄丸组用六味地黄丸每天每只2.4g,分2次灌胃,共6周;雌二醇组用苯甲酸雌二醇注射液按每鼠每3天1次皮下注射0.2mg,共12次;对照组给予生理盐水,早晚各1次灌胃,共6周。RT-PCR 法分析 ERα、ERβmRNA 表达。结果 ERα、ERβ mRNA 表达均明显高于对照组(P<0。01)。结论六味地黄丸具有调高去卵巢高脂大鼠主动脉 ERα、ERβ mRNA 的表达的作用,该作用为其在绝经女性防治动脉粥样硬化和冠心病等应用提供了依据。     

针刺对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的:探讨针刺治疗围绝经期综合征的作用机制。方法:将围绝经期大鼠随机分为针刺组、药物组和围绝经期组,分别进行针刺治疗、更年安药物治疗和空白对照,并与青年大鼠作对照。测定各组大鼠的卵巢颗粒细胞凋亡,检测卵巢颗粒细胞Bcl-2、Fas蛋白表达。结果:与青年大鼠比较,围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡显著增加(P<0·01),Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0·01),Fas蛋白表达明显升高(P<0·01)。针刺治疗后围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡减少(P<0·05),Bcl-2蛋白表达提高(P<0·05),Fas蛋白表达明显降低(P<0·01);更年安药物治疗后,卵巢颗粒细胞凋亡亦有降低但图像分析结果无统计学意义(P>0·05),Bcl-2蛋白表达提高(P<0·05),Fas蛋白表达明显降低(P<0·01)。结论:针刺能够抑制围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡,上调卵巢颗粒细胞Bcl-2蛋白表达、下调Fas蛋白表达。     

冠心合剂对大鼠心肌梗死心功能、边缘区凋亡及对Fas、FasL蛋白表达的影响

目的 观察不同剂量冠心合剂对大鼠急性心肌梗死边缘区细胞凋亡及探讨可能作用途径.方法 取雄性SD大鼠80只,随机分为模型组、冠心合剂高剂量组[28 g/(kg·d)]、中剂量组[14g/(kg·d)]、低剂量组[7g/(kg·d)]和对照组.连续灌胃7d后,结扎冠状动脉左前降支造成急性心肌梗死模型,对照组不结扎冠状动脉左前降支,手术后4.5 h留取心脏标本.检测心功能、梗死边缘区细胞凋亡以及Fas、FasL蛋白表达量.结果 与模型组比较,冠心合剂组可明显提高梗死大鼠心功能、减少心肌细胞凋亡,并能减少Fas、FasL的蛋白表达量.其中冠心合剂大剂量组减少心肌细胞凋亡效果最明显.结论 冠心合剂能够提高梗死大鼠心功能、保护缺血诱导的心肌细胞凋亡,其作用机制与降低Fas、FasL蛋白表达水平有关.