太子参多糖对LPS诱导原代培养心肌细胞损伤的保护作用

目的:研究太子参多糖对LPS诱导原代培养心肌细胞损伤的保护作用.方法:取新生1～3d的sD大鼠乳鼠制备原代培养心肌细胞,以50ng/ml LPS复制心肌细胞损伤模型,通过细胞线粒体琥珀酸脱氢酶活力(MSDH)、乳酸脱氢酶(LDH)外漏率、台盼蓝染色率、一氧化氮合酶(NOS)分型及NO研究太子参多糖对LPS诱导原代培养心肌细胞损伤的保护作用,分析其可能的作用机制.结果:太子参多糖能显著提高LPS诱导的心肌细胞损伤导致MSDH活力的降低、降低LDH外漏率及台盼蓝染色率,提高cNOS表达,降低eNOS表达与NO含量.结论:太子参多糖对LPS诱导心肌细胞损伤具有一定的保护作用,其作用机制与NOS的分型表达相关.     

丹参酮Ⅱ_A对过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用及机制研究

目的 观察丹参酮Ⅱ_A对过氧化氢诱导的心肌细胞损伤的保护作用及其机制.方法 采用差数贴壁法体外分离培养新生乳鼠心肌细胞,以200 μmol/L过氧化氢作用2 h 模拟心肌细胞氧化应激模型,分别以丹参酮Ⅱ_A高、中、低剂量在造模前干预24 h.采用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪Annexin V-PI双染法检测细胞凋亡率,检测心肌细胞总抗氧化能力(T-AOC)、LDH活性、MDA含量、SOD活力、GSH-Px活力、CAT活力.结果 模型组心肌细胞经200 μmol/L过氧化氢作用2h后,细胞活力显著降低,凋亡率显著增高.与模型组比较,丹参酮Ⅱ_A显著增加心肌细胞活力,降低细胞凋亡率.过氧化氢可导致心肌细胞LDH活性及MDA含量显著增加,并使总抗氧化能力(T-AOC)、SOD活力、GSH-Px活力、CAT活力显著降低,丹参酮Ⅱ_A可呈浓度依赖性显著降低LDH活性及MDA含量,增加总抗氧化能力(T-AOC)、SOD活力、GSH-Px活力、CAT活力.结论 丹参酮Ⅱ_A可以抑制过氧化氢诱导的心肌细胞损伤,这可能与其增强细胞抗氧化酶活力,降低脂质过氧化反应有关.     

参麦注射液对应激心肌细胞保护作用的实验研究

目的：探讨参麦注射液对应激诱发心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法：体外培养乳鼠心肌细胞,实验分为空白组、应激组和给药组,给药组以不同浓度的参麦注射液作用于NE诱发的心肌细胞,应用FITC-AnnexinⅤ与PI双染流式细胞技术检测细胞凋亡率,756可见紫外分光光度计检测LDH和MDA含量以及SOD活性。结果：与应激组相比,给药组心肌细胞凋亡率明显下降,有统计学意义。给药组心肌细胞LDH和MDA含量明显减少,有统计学差异,SOD活性显著增强（P〈0.05）。结论：参麦注射液对NE诱发心肌细胞损伤的具有一定保护作用,其保护作用可能是通过增强SOD的活性,减少心肌细胞MDA含量和LDH的漏出,抑制NE诱发的心肌细胞凋亡实现的。     

血府逐瘀汤对缺氧诱导心肌凋亡的干预作用研究

目的观察血府逐瘀汤对缺氧心肌细胞的保护作用.方法将培养乳鼠心肌细胞置于95%N2,5%CO2的缺氧环境中48h,采用血清药理学和直接加药的方法,通过形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳、末端脱氧核苷酸介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法(TUNEL)观察血府逐瘀汤对缺氧诱导心肌细胞凋亡的干预作用.结果血府逐瘀汤含药血清及浓缩水煎液均有保护心肌细胞,抑制细胞凋亡的作用,含药血清抑制细胞凋亡的作用更为明显.结论血府逐瘀汤可以减少缺氧诱导心肌细胞的凋亡细胞数量,对缺氧心肌细胞能起保护作用.     

青藤碱抑制H2O2诱导乳鼠心肌细胞凋亡

目的:探讨青藤碱对H2O2诱导乳鼠心肌细胞凋亡的影响及其可能的作用机制.方法:在原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞上建立H2O2损伤模型,观察不同剂量青藤碱(10,30,100 μmol·L-1)对心肌细胞凋亡率、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、乳酸脱氢酶(LDH)活性及NF-KB蛋白表达的影响.结果:H2O2组与空白对照组相比,心肌细胞凋亡率显著增加(P<0.01),并随着时间的延长其凋亡率不断增高;青藤碱明显抑制H2O2所诱导各个时问段的心肌细胞凋亡率(P<0. 01),降低MDA含量,增加SOD,LDH活性,抑制NF-KB蛋白表达.结论:青藤碱对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞凋亡有抑制作用,其作用机制可能与其抗脂质氧化、抑制心肌细胞表达NF-KB有关.     

人参皂苷Rb1经ERK1／2对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的研究人参皂苷Rbl（Gs—Rbl）对H2O2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及可能的作用机制。方法原代乳鼠心肌细胞培养,H202诱导造成细胞损伤,实验分为6组,空白对照组、模型组、原花青素组（100／~mol／L）和Gs—Rbl低（50vmol／L）剂量、中剂量（100μmol／L）、高剂量（200／xmol／L）组。采用MTT法检测心肌细胞活性,Tunnel法检测心肌细胞凋亡率,Westernblot检测细胞外信号调节激酶（ERK）磷酸化表达水平。结果与空白对照组相比,模型组心肌细胞活力明显下降（P〈0．01）,细胞凋亡率显著升高（P〈0．01）,心肌细胞P—ERK1／2表达明显减少（P〈0．01）;与模型组比较,原花青素组以及Gs—Rbl低、中和高剂量组心肌细胞活力明显提高（P〈0．05）,细胞凋亡率显著下降（P〈0．05）,原花青素组和Gs—Rbl高剂量组心肌细胞P—ERKl／2表达明显增加（P〈0．05）。结论Gs—Rbl对H202诱导的乳鼠心肌细胞损伤有保护作用,其作用机制可能与激活ERK信号通路相关。     

酸枣仁皂苷A抗过氧化氢诱导心肌细胞凋亡的作用及机制研究

目的:观察酸枣仁皂苷A对过氧化氢诱导心肌细胞凋亡的保护作用及其机制。方法:采用差速贴壁法体外分离培养新生乳鼠心肌细胞,以500μmol/L过氧化氢作用4h建立心肌细胞氧化损伤模型,以酸枣仁皂苷A(20mg/L)在造模前干预24h。四唑盐(MTT)比色法检测心肌细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Caspase活性定量检测caspase-3及caspase-9的活性。结果:模型组经500μmol/L过氧化氢作用4h后,细胞活力显著下降,凋亡率显著增高。与模型组比较,酸枣仁皂苷A提高细胞活力及显著降低细胞凋亡率。模型组的caspase-3及caspase-9活性显著升高。与模型组比较,酸枣仁皂苷A组的caspase-3及caspase-9活性显著下降。结论:酸枣仁皂苷A可抑制过氧化氢诱导心肌细胞损伤,这可能与其抑制线粒体信号通路中caspase-3及caspase-9的活性有关。     

四逆汤抗氧化应激性损伤保护心肌细胞机制的探讨

目的:观察四逆汤在乳鼠心肌细胞氧化应激性损伤过程中的保护效应,探讨四逆汤抗氧化应激性损伤保护心肌细胞的机制.方法:采用H2O2诱导损伤制备SD乳鼠心肌细胞氧化应激性损伤模型,分别用含不同浓度的四逆汤含药血清DMEM培养基培养细胞,应用流式细胞仪检测培养细胞的存活率,用1 m mol/LH2O2处理心肌细胞,分别在处理0.5h,1 h,2 h,4 h和8 h后检测细胞的凋亡率和坏死率,同时检测细胞培养液中的乳酸脱氢酶(LDH)和细胞内丙二醛(MDA);对H2O2处理不同时间的心肌细胞线粒体膜电位进行检测.结果:采用含15%四逆汤含药血清的DMEM培养基是心肌细胞生长的合适浓度;四逆汤含药血清能降低细胞培养液中的LDH活性以及细胞内MDA的含量,减少细胞的凋亡率和坏死率;降低心肌细胞线粒体膜电位的下降速度.结论:四逆汤对于H2O2造成的心肌细胞损伤具有保护作用,这种作用与保护线粒体膜电位的稳定有关.     

黄芪甲苷减轻异丙肾上腺素诱导H9c2细胞肥大损伤的机制研究

目的:探讨黄芪甲苷减轻异丙肾上腺素(ISO)诱导H9c2心肌细胞肥大损伤的保护作用及潜在机制。方法:以100μmol/L ISO作用H9c2细胞建立细胞肥大损伤模型。将细胞分为正常对照组、模型组及黄芪甲苷6.25、12.5、25μmol/L组,黄芪甲苷预给药2 h,ISO作用24 h。CCK-8法检测细胞活力,荧光染色测定细胞表面积,Hoechst 33342和TUNEL染色测定细胞凋亡率。比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,荧光探针DCFH-DA检测活性氧(ROS)水平,WST-8法测定超氧化物歧化酶(SOD)水平。q RT-PCR检测Bcl-2、Bax、P62、LC3 m RNA水平。Western Blot检测Sirt1、P62、Caspase-3、Beclin、P53蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平。结果:黄芪甲苷能显著减轻ISO诱导的H9c2细胞肥大损伤,减少心肌细胞表面积及LDH的释放,降低细胞凋亡率及细胞内ROS水平,升高SOD水平,上调自噬相关m RNA及蛋白的表达,下调凋亡相关m RNA及蛋白的表达。结论:黄芪甲苷能有效抑制ISO诱导的H9c2细胞肥大及凋亡,其机制可...     

地黄多糖对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制研究

目的:研究地黄多糖(rehmannia polysaccharide)对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制研究。方法:无菌环境下分离并培养SD大鼠乳鼠心肌细胞72h后随机分为:空白对照组、H_2O_2干预组、地黄多糖(10、20和40μg/ml)+H_2O_2干预组和舒血宁注射液(SXN,100μg/ml)+H_2O_2干预组(阳性对照组),每组设10个复孔。各组细胞经药物干预6h后,通过光学纤维镜观察细胞形态并采用MTT法检测细胞存活率;检测培养液中心肌酶:谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;测定细胞中抗氧化酶:超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;通过酶联免疫(ELISA)法测定培养液中炎症因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)含量水平;通过Flow Cytometry检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,通过RT-PCR检测细胞中AKT mRNA、bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值。结果:较H_2O_2干预组,地黄多糖(20、40μg/ml)+H_2O_2干预组乳鼠心肌细胞形态明显好转,细胞存活率显著升高,培养液中AST、CPK、LDH活性显著降低,细胞中SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,培养液中TNF-α、IL-1、IL-6含量显著降低,细胞凋亡状况明显改善、凋亡率显著降低,bcl-2 mRNA表达显著上调且Bax mRNA表达显著下调、bcl-2/Bax表达比值显著升高,其中地黄多糖40μg/ml+H_2O_2干预组AKT mRNA表达显著上调。结论:地黄多糖能够有效改善H_2O_2诱导损伤的乳鼠心肌细胞生存状态、提高细胞存活率、降低细胞凋亡率,提示地黄多糖对H_2O_2诱导损伤的乳鼠心肌细胞具有保护作用;其作用机制可能与地黄多糖能够有效改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤,调节凋亡相关基因表达,抑制炎症反应相关。     

西红花酸对羟自由基损伤的原代心肌细胞的保护作用

目的　研究西红花酸 (crocetin)对羟自由基 (OH· )损伤的原代培养心肌细胞的保护作用。方法　培养的原代心肌细胞加入不同浓度的西红花酸后 ,用 0 .5 mm ol/ L OH·损伤原代培养的心肌细胞 ,检测细胞培养上清液中的乳酸脱氢酶 (L DH)、心肌细胞线粒体琥珀酸脱氢酶 (MSD)的活性 ,心肌细胞线粒体膜电位 (MMP)的变化 ,并用流式细胞仪及 DNA梯度电泳检测细胞凋亡。结果　 0 .5 mm ol/ L OH·使细胞培养上清液中 L DH活性增加、MSD的活性降低、MMP降低、心肌细胞凋亡率增加。西红花酸 1.0 ,0 .1μmol/ L 明显降低培养上清液中 L DH活性、提高 MSD的活性及 MMP、降低心肌细胞凋亡率 ,与模型组比较差异显著 (P<0 .0 5 )。结论　西红花酸对OH·所致的心肌细胞损伤 (凋亡 )具有保护作用     

广枣总黄酮抗氧化作用的实验研究

目的研究广枣总黄酮(TFFC)抗自由基、抗氧化的作用。方法在     

川芎嗪对脂多糖诱导巨噬细胞环氧化酶-2表达和心肌细胞凋亡的影响

目的观察川芎嗪对脂多糖(LPS)诱导RAW264．7小鼠巨噬细胞环氧化酶-2(COX-2)基因表达和活性的影响,进一步研究川芎嗪对脂多糖诱导乳鼠心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法采用RT—PCR和免疫印迹检测巨噬细胞COX-2基因表达,酶联免疫分析其活性,并应用荧光显微镜技术对乳鼠心肌细胞凋亡进行检测,荧光分光光度计测定细胞内钙离子浓度。结果10～mol／L,10^-5mol／L和10^-4mol／L川芎嗪可显著减少LPS刺激的巨噬细胞COX-2 mRNA和蛋白的表达(P<0．05,P<0．01),但不同浓度川芎嗪对COX-2活性无明显作用;10^-5mol／L川芎嗪可显著降低心肌细胞内钙浓度,拮抗LPS诱导的乳鼠心肌细胞凋亡(P<0．05)。结论川芎嗪具有抑制LPS诱导巨噬细胞COX-2表达和乳鼠心肌细胞凋亡的药理学效应。     

蕨麻正丁醇部位对缺氧损伤心肌细胞的保护作用

[目的]研究蕨麻正丁醇部位对缺氧损伤心肌细胞的保护作用.[方法]建立大鼠原代培养心肌细胞缺氧损伤模型,采用噻唑蓝(MTT)法检测心肌细胞代谢活力;胎盼兰染色法检测细胞成活率;比色法测定细胞外乳酸脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK)活性及细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.[结果]与模型组比较,蕨麻正丁醇提取部位各剂量组细胞代谢活力及细胞成活率显著提高(P<0.01),并均可显著减少缺氧损伤引起的LDH、CK的外漏量(P<0.01),提高细胞SOD活性(JD<0.01),减少MDA的产生(P<0.01或P<0.05).[结论]蕨麻正丁醇部位具有抗心肌缺氧损伤作用,其途径之一可能与其抗自由基氧化的能力有关.     

三七总皂苷抗缺氧缺糖再给氧诱导大鼠海马神经细胞凋亡的研究

目的 :以原代培养的大鼠海马神经细胞缺氧 /缺糖再给氧为模型 ,观察三七总皂苷对神经细胞凋亡的抑制作用。方法 :流式细胞仪检测凋亡细胞百分率 ,激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内Ca²⁺浓度 ,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死细胞百分率 ,同时 ,测定细胞乳酸脱氢酶 (LDH)的释放。结果 :神经细胞缺氧 /缺糖 5h后再给氧可诱导神经细胞凋亡和细胞坏死 ,并显著增加细胞内Ca²⁺浓度和LDH的释放 ,并随再给氧时间的延长而增加。三七总皂苷能降低神经细胞凋亡及坏死的百分率 ,降低细胞内Ca²⁺浓度 ,减少LDH的释放 ,三七总皂苷的作用随剂量增加而作用增强。结论 :三七总皂苷对缺血再灌注损伤后海马神经元的凋亡过程具有抑制作用 ,这种作用可能与其能降低细胞内Ca²⁺浓度有关。     

当归红芪超滤膜提取物对急性心肌缺血大鼠AST、LDH和LDH1的影响

目的:探讨当归红芪超滤物对急性心肌梗死大鼠天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotrans-ferase,AST),乳酸脱氢酶(actate dehydrogenase,LDH)和乳酸脱氢酶同工酶(lactate dehydrogenase,LDH1)活性的影响,阐明当归红芪超滤物对缺血心肌的保护作用。方法:结扎左前降支建立大鼠心梗模型。将80只雄性Wistar大鼠随机分成5组,每组16只,分别为造模组(myocardial infarction,MI)、假手术组(sham-operation,SH)、低剂量组(low-dose drug,LD)、中剂量组(middle dose group,MD)、高剂量组(high-dose drug,HD),分别检测给药24h和72h后外周血AST、LDH和LDH1的活性。结果:与SH组比较,MI组大鼠可见血清AST、LDH及LDH1活性明显增高(P0.05);与MI组比较,药物各剂量组AST、LDH及LDH1活性明显降低(P0.05),且峰值前移。结论:当归红芪超滤物可通过抗氧化作用降低AST、LDH及LDH1活性从而抗心肌缺血损伤,对大鼠心肌有明显的保护作用,且与用药时间及剂量密切相关。     

三七总皂苷对大鼠海马神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用

目的观察三七总皂苷对大鼠海马神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用.方法建立缺氧/缺糖再给氧模型,模拟缺血再灌注损伤.流式细胞术检测凋亡细胞百分率,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死细胞百分率,同时,测定细胞乳酸脱氢酶(LDH)的漏出和一氧化氮(NO)的产生量.结果神经细胞缺氧/缺糖5h后再给氧可诱导神经细胞凋亡和细胞坏死,并显著增加LDH的漏出和NO的产生,并随再给氧时间的延长而增加.三七总皂苷能降低神经细胞凋亡及坏死的百分率,减少LDH的漏出和NO的过量产生,三七总皂苷的作用随剂量增加而增加.结论三七总皂苷具有拮抗海马神经细胞凋亡的作用,这种作用可能与降低或抑制一氧化氮合酶(NOS)活性,减少NO的过量产生有关.     

淫羊藿苷对缺氧诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 研究淫羊藿苷(icariin,ICA)对缺氧所致血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)损伤的影响。方法 建立体外细胞缺氧模型,用MTT法观察ICA对缺氧损伤的血管内皮细胞活性的影响,测定细胞中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及乳酸脱氢酶(LDH)活力,并对细胞进行Hoechst33342荧光染色、电镜观察细胞超微结构,运用流式细胞仪及DNA琼脂糖凝胶电泳分析DNA断裂情况,以观察ICA对缺氧诱导的内皮细胞凋亡的影响。结果 ICA能抑制缺氧引起的血管内皮细胞的减少,降低LDH活力,并抑制缺氧条件下MDA生成,提高SOD活力;缺氧能诱导血管内皮细胞凋亡,表现为细胞核浓缩,沿核膜排列成块状,DNA琼脂糖凝胶电泳显示典型“梯形条带”,流式细胞仪分析呈现典型凋亡亚二倍体峰。ICA能显著抑制缺氧诱导的内皮细胞凋亡。结论 ICA具有保护缺氧诱导的血管内皮细胞损伤的作用,其作用机制与抗脂质过氧化物产生、提高SOD活力以及抗细胞凋亡有关。     

复方丹参注射液对兔急性心肌梗塞细胞凋亡的影响

目的探讨复方丹参注射液对兔急性心肌梗塞细胞凋亡的影响.方法采取末端脱氧核苷酸转换酶介导的dUTP生物素平移末端标记技术对兔实验性急性心肌梗塞时不同损伤区心肌细胞凋亡情况进行研究,同时观察外周血超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果对照组(急性心肌梗塞后静滴生理盐水)、用药组(急性心肌梗塞后静滴复方丹参注射液)的梗死区和再灌注区(梗死区边缘)心肌细胞凋亡阳性细胞数与阳性率均高于假手术组(不结扎冠脉静滴生理盐水)(P＜0.001,用药组再灌注区心肌细胞凋亡阳性细胞数与阳性率低于对照组(P＜0.05).血浆SOD活性,用药组高于对照组(P＜0.05),两组均低于假手术组(P＜0.001).血清脂质过氧化物产物加MDA含量,用药组低于对照组(P＜0.05),两组均高于假手术组(P＜0.01).结论复方丹参注射液可能通过减少血清MDA含量、提高血浆SOD活性来减少急性心肌梗塞时再灌注区的心肌细胞凋亡数.