HPLC-PAD测定刺五加中刺五加苷B与刺五加苷E的含量

 目的 研究HPLC同时测定刺五加中刺五加苷B与刺五加苷E的含量。方法 采用Agilent Zorbax SB-C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.5%磷酸（0~10 min,9∶91;10~30 min,9~20∶91~80）,流速1.0 mL·min-1,检测波长220 nm,柱温25 ℃。结果 刺五加苷B、刺五加苷E分别在0.35~34.83与0.69~69.20 μg·mL-1内线性关系良好,其相关系数分别为0.999 9与1.000 0;精密度RSD均为0.4%,小于2%;重复性RSD分别为1.4%与1.0%,稳定性RSD分别为3.1%与3.4%,均小于5%;平均回收率（n= 9）分别为97.4%（RSD为5.5%）和102.7%（RSD为4.3%）。结论 本方法操作简便,结果可靠,重复性好,可作为刺五加及其制剂的质量控制方法。     

药用植物刺五加内生真菌的分离及其抑菌活性研究

 目的研究药用植物刺五加内生真菌及其次生代谢产物的抑菌活性,旨在获得有良好抑菌活性的菌株,以寻找新型抗菌物质。方法以枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌、单增李斯特菌、酿脓链球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和白假丝酵母为实验菌株,用菌饼法及纸片法对分离的真菌及其次生代谢产物进行了抑菌实验。结果从药用植物刺五加中分离到42株内生真菌,其中有37株真菌对至少1种实验菌株有抑菌活性,占总分离菌株的88.10%;有12株内生真菌次生代谢产物对至少1种指示菌有抑菌活性,占总分离菌株的28.57%。结论药用植物刺五加的内生真菌及其次生代谢产物中存在着丰富的抑菌天然活性物质,这可为寻找新型抗菌物质提供资源。     

高效液相色谱法测定刺五加粉中刺五加苷B和苷E的含量

目的：建立刺五加及其制剂中刺五加苷B和刺五加苷E的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法测定刺五加苷B和刺五加苷E的含量。结果：在同一色谱备件下．刺五加苷B在1．4728～7．3640μg范围内线性关系良好，回收率100．7％，RSD为2．6％；刺五加苷E在1．3056～11．7504μg范围内线性关系良好．回收率为101．9％．RSD为2．O％。结论：该分析方法简便易行，重现性好。     

内生真菌对刺五加皂苷合成关键酶基因表达及 皂苷含量的影响

目的:分析刺五加内生真菌菌株P116-1a,P116-1b,P109-4,P312-1对刺五加中皂苷合成关键酶基因SS(squalenesynthase),SE(squalene epoxidase),bAS(β-amyrin synthase)表达量和皂苷含量的影响。方法:伤口法回接内生真菌。以GAPDH为内参照基因,Real time PCR法检测关键酶基因表达量的变化。分光光度法测定刺五加的总皂苷含量。结果:回接P116-1a和P116-1b 30 d,刺五加SS基因的表达量显著提高(P<0.05),P109-4和P312-1无显著变化,之后出现降低-相等-降低的变化趋势。回接菌株P312-1 30 d,刺五加SE的表达量显著提升(P<0.05),回接菌株P116-1b和P312-1 90 d,SE的表达量分别显著提升至对照的130%,161%(P<0.05)。回接120 d,4个菌株处理的SE表达量均显著高于对照(P<0.05)。各处理bAS的表达量在回接60～120 d时均显著高于对照(P<0.05)。4个菌株均显著提高了刺五加的皂苷含量(P<0.05)。结论:菌株P116-1a,P116-1b,P109-4,P312-1可显著影响刺五加SS,SE,bAS的表达量,进而影响刺五加的皂苷含量,其中bAS为主要靶点基因。     

HPLC法测定不同产地的刺五加中刺五加苷B和E含量

应用HPLC法测定不同产地的刺五加中刺五加苷B和刺五加苷E含量.YMC C18(150×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以0.1%磷酸水溶液和乙腈为流动相的梯度洗脱方法.本方法简便,重现性好,可作为刺五加药材的质量控制方法.     

内生真菌对刺五加种子萌发过程激素及酶含量变化的影响

目的研究内生真菌破除刺五加种子休眠的方法及其内源激素和酶的变化规律。方法用内生真菌侵染刺五加种子后对种子进行变温层积处理,利用高效液相色谱法测定刺五加种子中内源激素赤霉素(GA3)、脱落酸(ABA)、吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)及水杨酸(SA)的含量,并且检测体内酶[过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、丙二醛(MDA)]活力变化。结果 5株刺五加内生真菌对种子萌发有明显的促进作用,在变温层积过程中,GA3、IAA、IBA、SA均有不同程度的上升,ABA呈现明显的下降趋势。POD活力和MDA水平显著下降,CAT和SOD的酶活力显著上升。结论内生真菌可调控刺五加种子激素和酶的含量,促进种子萌发。     

不同产地刺五加中刺五加苷E含量的高效液相色谱测定

目的 建立刺五加中刺五加苷E含量的测定方法,并比较不同产地的刺五加中刺五加苷E含量,为进一步研究不同品系的刺五加中刺五加苷E的含量与其遗传学的关系奠定基础.方法 刺五加苷E的提取采用超声提取法;选用YMC ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm),检测波长220 nm,以0.1%磷酸水溶液-乙腈(89∶11)为流动相,体积流量1.0 ml/min.结果 超声波提取法对刺五加苷E提取率稍低于溶剂提取法,但操作简便,耗时较短.刺五加苷E的线性范围为0.625～10.004 μg(r = 0.999 92);平均回收率为100.64%,RSD为2.97%.结论 建立的刺五加苷E提取和测定方法适合于快速准确地分析大量样品.     

刺五加根及根茎中紫丁香苷、刺五加苷E的提取工艺

目的:优选刺五加的最佳提取工艺。方法:采用正交设计法,以HPLC测定提取物中紫丁香苷、刺五加苷E的含量。结果:最佳提取工艺为10倍量的80%乙醇回流提取3次,每次2h。结论:该提取工艺稳定,设计合理,重现性好,可为生产实践提供理论依据。     

刺五加叶绿体的超微结构与刺五加苷B、E含量的关系

目的分析不同产地刺五加叶绿体超微结构特征及其与刺五加苷B、E含量的相关性。方法取野生刺五加叶片,利用超薄切片进行透射电镜观察叶绿体超微结构,测量叶绿体长、宽、周长和面积,HPLC法测定刺五加苷B、E含量。结果不同产地刺五加叶绿体超微结构间存在较大差异,叶绿体平均长、宽、周长分别为3.72μm、1.62μm、9.63μm,面积为5.17μm2,叶绿体宽与茎中刺五加苷E含量呈正相关关系,相关系数达0.819 38。结论叶绿体超微结构及其长、宽、周长、面积可以作为鉴定刺五加产地来源的指标,叶绿体宽度可作为茎中刺五加苷B含量的早期鉴定指标。     

基于网络药理学的刺五加总苷抗疲劳作用机制研究

目的 基于网络药理学方法探究刺五加总苷抗疲劳的潜在作用机制.方法 以刺五加总苷中7种主要活性成分为研究对象,利用Swiss Target Prediction网络平台预测其作用靶点;通过GeneCards、OMIM、DiGseE数据库获取与疲劳有关的靶标,借助Cytoscape 3.7.2软件构建"活性成分-抗疲劳靶点...     

温莪术内生真菌的分离及其分类鉴定

目的 对温莪术不同部位内生真菌进分离和分类鉴定.方法 采用内生菌常规分离法对健康温莪术根、茎和叶的内生真菌进行了分离和鉴定.结果 从温莪术中分离得到了99株内生真菌,经鉴定为21属,其中根部42株涉及11属,茎部12株涉及4属,叶部45株涉及12属.结论 温莪术的不同部位内生真菌的数量、分布和种群存在差异.     

厚朴内生真菌的研究(Ⅰ):菌种分离及其鉴定

从两个不同来源的厚朴Magnolia officinalisRehd.etW ils.的茎中,分离获得内生真菌48株,经显微形态观察,鉴定为1纲、3目、6科、16属。不同来源的厚朴内生真菌的种群、数量及分布部位存在显著差异。     

杜仲内生真菌的分离鉴定及抗菌活性筛选

目的从药用植物杜仲的根茎叶中分离内生真菌,并进行初步鉴定和抗菌活性筛选。方法经显微形态观察进行内生真菌的分离鉴定,采用菌饼法和纸片法进行抗菌活性筛选。结果从杜仲植物中分离获得62株内生真菌,有47个菌株至少对1种指示菌具有抗菌活性,40株的代谢产物至少对1种指示菌具有抗菌活性,青霉属(Penicinium)的抗菌活性高且抗菌谱广。结论杜仲植物内生真菌中广泛分布着有抗菌活性的菌株。     

不同内生真菌对菊花产量和品质的影响

目的:探讨利用内生真菌促进菊花生产的措施。方法:以内生真菌球毛壳菌(编号C4)、葡萄孢真菌(编号C1)共生培养菊花,检测其产量和品质。结果:与对照相比,C4菌处理组鲜菊花和干菊花产量分别增加24.81%、7.59%,C1菌处理组鲜和干产量分别增加17.08%、6.87%。C4、C1菌处理组菊花中总黄酮含量比对照组分别增加31.79%、8.55%,且C4菌处理组与对照组相比达到显著水平。菊花中粗挥发油含量比对照组分别增加13.21%、18.19%。经气相色谱检测发现内生真菌C4、C1菌处理组样品中占总挥发油含量大于1%各组分含量总和分别比对照增加10.42%、8.90%,且内生真菌处理组与对照组之间各组分含量存在差异。结论:内生真菌与菊花建立共生关系后,可以提高菊花产量和品质。     

川芎内生真菌种群稳定性研究

目的 探讨四川产区川芎内生真菌种群组成情况.方法 采用纯培养法对川芎根茎中的内生真菌进行分类鉴定.结果 从4个产地的川芎中共分离得到内生真菌64株,经显微鉴定为1纲、3目、4科、17属;两年分离的内生真菌共有7个,其菌株数量占总菌株数的81.3%.结论 四川产区川芎内生真菌种群结构基本稳定.     

抑制乙酰胆碱酯酶活性的蛇足石杉内生真菌筛选

目的筛选具有乙酰胆碱酯酶抑制活性的蛇足石杉内生真菌菌株。方法采用DTNB显色法,优化条件后筛选;对蛇足石杉的29株内生真菌菌株发酵液醇提物进行了酶抑制活性的初步筛选。结果xg,g8,g5,xgc2,xy7对乙酰胆碱酯酶具有较高的抑制率,其IC50分别是285.62,293.53,434.17,668.82,856.21μg/ml。结论蛇足石杉内生真菌xg,g8,g5发酵醇提物能够较为显著地抑制乙酰胆碱酯酶,为寻找具有乙酰胆碱酯酶抑制作用的药用资源开辟了一条新的途径。     

药用植物内生真菌的分离及其次生代谢产物的生物活性研究

目的：从4种植物的内生真菌中筛选对单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶具有抑制活性的提取物。方法：用组织块法分离4种植物中的内生真茵;对分离出的纯内生真菌用液体培养基发酵培养,用等体积乙酸乙酯萃取发酵液并用乙醇对茵丝体进行回流提取,得到各组分提取物;用酶标法测定提取物的单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶抑制活性。结果：共分离出36株内生真菌,其中有16种内生真菌提取物有不同程度的抑制单胺氧化酶活性,其中GT-7茵液萃取物抑酶活性最强。2种内生真菌提取物有乙酰胆碱酯酶抑制活性。结论：药用植物中存在丰富的内生真菌,其代谢产物具有一定的单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶抑制活性,可作为筛选单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶抑制剂的新资源。     

药用植物内生真菌的分离及其次生代谢产物抗乙酰胆碱酯酶活性研究

目的:从4种植物的内生真菌中筛选对乙酰胆碱酯酶具有抑制活性的提取物。方法:用组织块法分离4种植物中的内生真菌;对分离出的纯内生菌用液体培养基发酵培养,用等体积乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取发酵液并用乙醇对菌丝体进行索氏提取,得到各组分提取物;用改良的Ellman法测定提取物的乙酰胆碱酯酶抑制活性。结果:共分离出53株内生真菌,其中有7种内生真菌萃取物有不同程度的抑制乙酰胆碱酯酶活性,其中以XX-10的正丁醇组份的抑酶活性最强。结论:药用植物中存在丰富的内生真菌,其代谢产物具有一定的抗乙酰胆碱酯酶活性,可作为筛选乙酰胆碱酯酶抑制剂的新资源。     

刺五加多甙对胃缺血再灌注损伤防护作用的实验研究

目的:观察刺五加对胃缺血再灌注损伤的防护作用。方法:采用家兔胃缺血再灌注模型。结果:刺五加维持缺血及再灌注期 SOD 活力,减少 MDA 含量,减轻缺血再灌注后胃粘膜病理损伤。结论:刺五加通过消除和抑制胃缺血再灌注时氧自由基产生,提高组织抗氧化能力,对胃缺血灌注损伤起到保护作用。     

皖贝母产生物碱内生真菌的筛选与鉴定

目的：从皖贝母中分离产生物碱的内生真菌。方法：采用组织块法、薄层层析、高效液相色谱-旋转蒸发光检测器法以及形态学和分子生物学方法从皖贝母鳞茎中筛选出产生物碱的内生真菌。结果：从皖贝母中分离出1株产生物碱的内生真菌,并鉴定为极细链格孢菌（Alternaria tenuissima）。结论：从皖贝母中分离到了一株产生物碱内生真菌bm-2 ,为解决皖贝母药用资源匮乏的问题提供理论依据。