复方苦参注射液对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡及Caspase-3蛋白表达的影响

目的探讨复方苦参注射液对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡及Caspases-3蛋白表达的影响。方法体外培养人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞,应用MTT法检测细胞增殖;AnnexinV/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;ELISA法检测Caspases-3蛋白表达。结果复方苦参注射液对ACC-2细胞的体外增殖具有抑制作用,量效关系显著,与对照组比较有统计学差异(P<0.01),半数抑制浓度(IC50)为0.84g/ml。经流式细胞仪检测表明,复方苦参注射液能使ACC-2细胞G0-G1期逐渐增加,G2-M期和S期逐渐减少,并且随着剂量的增加,ACC-2细胞凋亡率明显增加(P<0.05或P<0.01)。复方苦参注射液能增强ACC-2细胞Caspases-3蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),并呈剂量依赖性。结论复方苦参注射液能有效抑制人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞Caspases-3蛋白表达,诱导ACC-2细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。     

苦参碱对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡及Survivin基因表达的影响

目的:探讨苦参碱对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制.方法:应用不同浓度的苦参碱作用于人宫颈癌Hela细胞,采用MTT法检测细胞增殖;Annexin V FITC/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;RT-PCR和Western blotting分析Survivin基因表达.结果:苦参碱对Hela细胞的体外增殖具有抑制作用,量效关系显著,与对照组比较有统计学差异(P＜0.01),半数抑制浓度(IC50)为2.60 g·L-1.经流式细胞仪检测表明,苦参碱能使Hela细胞G0-G1期逐渐增加,G2-M期和S期逐渐减少,并且随着剂量的增加,Hela细胞凋亡率明显增加(P＜0.01).苦参碱对Hela细胞Survivin 基因表达有一定的抑制作用(P＜0.01),并呈剂量依赖性.结论:苦参碱能有效抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制Survivin基因的表达有关.     

复方苦参注射液对宫颈癌细胞体外放射增敏作用研究

目的研究复方苦参注射液对人宫颈癌Hela细胞株的体外放射增敏作用并初步探讨其作用机制。方法克隆形成法检测放射增敏作用及给药时序、浓度对细胞存活率的影响;DAPI染色法镜下观察细胞凋亡情况;流式细胞法检测细胞周期分布情况;Western blot法检测bcl-2、bax蛋白表达情况。结果复方苦参注射液与射线单独或联合作用后细胞存活率均较单纯放射组明显降低(P均0.05),不同浓度、不同时序处理后细胞存活率比较差异有统计学意义,先照射后给药效果优于先给药后照射(P0.05);复方苦参注射液与射线均能使Hela细胞阻滞于G2/M期,联用阻滞效果更加显著(P0.05);复方苦参注射液与射线均能破坏细胞核,联用后细胞核皱缩、碎裂更加显著;复方苦参注射液与射线单独及联用均能上调bax蛋白表达(P均0.05),下调bcl-2蛋白表达(P均0.05)。结论复方苦参注射液可通过阻滞宫颈癌Hela细胞周期于G2/M期,下调bcl-2/bax的比值来诱导细胞发生凋亡并增强其对放射线的敏感性。     

茶氨酸对人宫颈癌Hela细胞增殖作用的影响

目的研究茶氨酸对人宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法 MTT法测定茶氨酸不同浓度不同时间对Hela细胞增殖活性的影响;荧光显微镜观察Hela细胞的形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果茶氨酸对Hela细胞具有显著增殖抑制作用,并呈浓度和时间依赖性;荧光显微镜观察发现茶氨酸处理组的Hela细胞有典型的凋亡特征;流式细胞仪检测结果显示,与空白组比较,茶氨酸处理后的Hela细胞的凋亡率显著增加(P<0.01)。结论茶氨酸对人宫颈癌Hela细胞的增殖具有抑制作用,且其与诱导Hela细胞凋亡有关。     

复方苦参注射液对人肝癌细胞SMMC-7721增殖与细胞周期的影响

目的：观察复方苦参注射液对人肝癌SMMC．7721细胞增殖与细胞周期的影响。方法：采用MTF法观察复方苦参注射液对SMMC．7721细胞增殖的影响;应用流式细胞术分析对SMMC-7721细胞周期的影响。结果：复方苦参注射液对SMMC-7721细胞有明显的抑制增殖的作用（P〈0．05）,该作用具有时间、剂量依赖性;流式细胞术分析显示,复方苦参注射液可使G0／G1期细胞比例升高,S期细胞比例下降,即细胞被阻滞于G0／G1期。结论：复方苦参注射液能抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,并且将细胞阻滞于G0／G1期。     

竹节参水提物对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

目的探讨竹节参水提物对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法0(阴性对照)、50、100、150μg/mL竹节参水提物作用于宫颈癌Hela细胞中后培养48 h。采用一步法TUNEL染色测定细胞凋亡,流式细胞计数仪测定宫颈癌Hela细胞周期,Hoechst 33342荧光染色观察不同浓度下细胞形态,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定凋亡相关基因P53、Bax、Caspase-3 mRNA表达水平。结果竹节参水提取物对宫颈癌Hela细胞增殖具有明显的抑制作用,呈浓度依赖性,36 h时竹节参水提取物对宫颈癌Hela细胞增殖抑制基本达到50.0%以上。竹节参水提取物作用于宫颈癌Hela细胞G0/G1期与S期,随着其质量浓度升高,它对于宫颈癌Hela细胞作用集中于G0/G1期。未加入竹节参水提物时Hela细胞形态均一且结构相对完整,而在50、100、150μg/mL下Hela细胞开始出现凋亡,能增加凋亡相关基因P53、Bax、Caspase-3 mRNA表达。结论竹节参水提物体外能抑制宫颈癌Hela细胞增殖,诱导癌细胞的自噬与凋亡,可能与调控凋亡相关基因mRNA表达有关。     

复方三金胶囊抗乳腺癌细胞增殖作用的体外研究

目的:观察复方三金胶囊对人乳腺癌(MCF-7)细胞生长的抑制作用并探讨其作用机制。方法:采用MTT法检测复方三金胶囊对MCF-7细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测复方三金胶囊对MCF-7细胞凋亡和周期的影响,Western-blot法检测复方三金胶囊对MCF-7细胞中凋亡相关蛋白PLK1的表达。结果:复方三金胶囊对MCF-7细胞增殖有明显抑制作用,IC50值为390.38μg·ml-1;复方三金胶囊诱导细胞凋亡作用明显,并呈现明显的量效关系;复方三金胶囊对细胞周期的影响主要表现在低浓度时为S期阻滞,高浓度时为G0/G1期阻滞;复方三金胶囊可明显抑制MCF-7细胞中PLK1蛋白的表达。结论:复方三金胶囊体外实验可明显抑制MCF-7细胞的增殖,其抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡,改变细胞周期分布,抑制PLK1蛋白表达有关。     

天花粉蛋白对子宫颈癌Hela细胞Survivin基因的影响

目的:研究天花粉蛋白(TCS)对子宫颈癌Hela细胞Survivin基因表达的影响,以探讨TCS诱导Hela细胞凋亡的机制。方法:MTT法检测TCS对Hela细胞增殖的影响,倒置显微镜观察细胞形态;RT-PCR和Western blot分析TCS对Hela细胞Survivin基因表达的影响;流式细胞仪分析TCS对Hela细胞周期的影响。结果:①TCS显著性抑制Hela细胞增殖;②TCS处理后Hela细胞Survivin mRNA水平无明显改变,但蛋白表达水平显著降低;③TCS降低Hela细胞周期中G2/M期细胞比率,但增加S期细胞的数量。结论:通过下调凋亡抑制因子Survivin的表达而诱发Hela细胞凋亡,可能是TCS抑制Hela细胞增殖的分子机制。     

密蒙花方对缺氧状态下人血管内皮细胞细胞周期的影响

目的探讨密蒙花方对缺氧状态下人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vascular endothelialcell,HUVEC)细胞周期的影响。方法体外培养HUVEC,采用二氯化钴(CoCl2)建立细胞化学缺氧模型,采用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测不同浓度密蒙花方水提液(10、20、40 mg/ml)对缺氧状态下HUVEC细胞周期的影响。结果①缺氧组较正常组G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增高,差异具有统计学意义(P<0.01);②各密蒙花方组均较缺氧组G0/G1期细胞比例增高,S期细胞比例减少(P<0.01),组间具有浓度依赖关系(P<0.01);③密蒙花方组在G0/G1期前还出现了指示细胞凋亡的亚G1期凋亡峰,表明密蒙花方对缺氧状态下的HUVEC具有促凋亡作用。结论密蒙花方抑制HUVEC增殖的作用与阻滞细胞由G1期进入S期,促进细胞凋亡有关。     

清热活血解毒复方对体外培养HaCaT细胞增殖和凋亡的影响

目的观察中药清热活血解毒复方对人永生化角质形成细胞株(HaCaT)增殖、凋亡和细胞周期的影响,探讨其治疗银屑病可能的作用机制。方法将不同浓度的清热活血解毒复方水提物分别作用于体外培养的HaCaT细胞,采用CCK-8法检测药物对细胞增殖的抑制作用及药物的有效浓度;采用倒置显微镜观察药物处理前后细胞的形态学改变;流式细胞术检测细胞周期的变化及凋亡率。结果清热活血解毒复方以时间和浓度依赖性方式抑制HaCaT细胞增殖,作用24、48 h其半抑制浓度(IC50)分别为23.40、20.24 mg/m L。细胞形态学和流式细胞仪检测发现药物以浓度依赖性方式干扰细胞周期,诱导细胞凋亡,细胞分裂周期阻滞于G0/G1期。结论清热活血解毒复方可能通过抑制HaCaT细胞增殖、诱导凋亡、影响细胞周期而发挥治疗银屑病的作用。     

隐丹参酮对宫颈癌Hela细胞增殖及细胞凋亡的影响

目的:研究隐丹参酮对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响。方法:MTT法检测不同浓度隐丹参酮分别在24,48,72 h对Hela细胞的抑制作用;流式细胞仪(FCM)检测隐丹参酮对Hela细胞周期和凋亡的影响;Western blot法检测E6,p53,p21蛋白的表达。结果:不同质量浓度(0.5~16 mg.L-1)隐丹参酮对Hela细胞的毒性均有明显剂量和时间依赖性,其24,48,72 h的IC50值分别为17.8,8.17,6.55 mg.L-1;隐丹参酮可使Hela细胞细胞周期的构成发生明显的变化并诱导细胞凋亡。Western blot表明,隐丹参酮作用Hela细胞后HPV E6的蛋白水平表达逐渐降低,p53和p21的蛋白水平表达逐渐升高。结论:隐丹参酮对宫颈癌Hela细胞有较强的细胞毒性,其作用机制可能是使Hela细胞生长停滞在G0/G1期并诱导细胞凋亡,使S期细胞比例降低;抑制HPV E6的蛋白的表达,使p53功能恢复,启动凋亡,从而起到杀伤肿瘤的作用。     

木犀草素抑制人胃癌BGC-823细胞增殖作用的研究

目的研究木犀草素(Luteolin,Lu)对人胃癌BGC-823细胞增殖的体外抑制作用及其机制。方法 DPPH法测定Lu抗氧化活性;MTT法测定Lu对BGC-823细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期分布影响及诱导凋亡的作用;倒置显微镜下观察细胞形态学变化。结果 Lu清除自由基的能力与其浓度呈正相关(r2=0.979);5,10,20,40μmol/L的Lu作用48 h后对BGC-823细胞增殖抑制率分别为5.08%,7.09%,25.27%和53.77%,半数抑制浓度(IC50)为(37.88±5.81)μmol/L;Lu以浓度依赖性阻滞细胞周期在G2/M期,且S期细胞比例呈下降趋势。40μmol/L的Lu作用72 h后,BGC-823细胞凋亡率显著增高(P<0.01);镜下观察发现经Lu处理后细胞固缩并伴随细胞膜破裂的现象。结论 Lu在体外对人胃癌BGC-823细胞增殖有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性;抗氧化、改变细胞周期及诱导细胞凋亡是其抗肿瘤作用的机制。     

复方丹皮酚纳米乳对人肺癌A549细胞增殖、周期及凋亡作用的研究

目的探讨复方丹皮酚纳米乳对A549细胞增殖、周期及凋亡的影响。方法以A549细胞作为研究对象,给予不同浓度的药物处理。镜下观察细胞的形态变化,应用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。结果MTT结果显示,一定质量浓度的复方丹皮酚纳米乳可显著抑制A549细胞的增殖,且呈时间-剂量依赖性。与丹皮酚纳米乳、丹皮酚溶液相比,差异有统计学意义。流式结果显示复方丹皮酚纳米乳可诱导细胞周期停滞在G0/G1期,并诱导A549细胞凋亡,且G0/G1期细胞比例的增加和凋亡率均呈剂量依赖性。结论复方丹皮酚纳米乳可抑制A549细胞的增殖,诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡。     

蜈蚣提取物抗肺癌活性的体内外实验研究

目的探讨蜈蚣提取物对人肺癌A549细胞的增殖抑制、凋亡诱导及裸小鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法采用酶解法合丙酮沉淀法分离纯化蜈蚣提取物处理人肺癌A549细胞,MTT法检测细胞增殖抑制并计算半数抑制率(IC50),流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化,Hoechst荧光染色观察细胞凋亡的形态变化。制备人肺癌细胞裸小鼠皮下移植瘤模型,随机分为模型组、对照组和蜈蚣提取物组,每组10只,观察裸小鼠皮下移植瘤瘤体体积、质量及抑瘤率变化。结果体外实验结果显示,蜈蚣提取物对人肺癌A549细胞有明显的增殖抑制作用,IC50为0.603 mg/m L;蜈蚣提取物作用48 h后,细胞周期表现为G0/G1期细胞比例下降,S期与G2/M期细胞比例均升高,与对照组比较差异有统计学意义(P0.01);Hoechst荧光染色可观察到明显的凋亡细胞及凋亡特征性的形态学改变;动物体内抑瘤实验结果发现,经蜈蚣提取物治疗后,瘤体质量与体积显著减少,与模型组比较差异有统计学意义(P0.01)。结论蜈蚣提取物对人肺癌A549细胞具有浓度依赖性增殖抑制作用,可诱导细胞凋亡,使A549细胞停滞于G2/M期,并能有效抑制人肺癌裸小鼠皮下移植瘤的生长。     

痛痹颗粒对兔软骨细胞凋亡和细胞周期的影响

目的:观察中药复方痛痹颗粒对体外一氧化氮(NO)诱导的兔软骨细胞凋亡和细胞周期的影响。方法:采用流式细胞仪的Annexin V和DNA分析方法分别检测各组的细胞早期凋亡和细胞周期百分率。结果:硝普钠和痛痹颗粒混合培养的软骨细胞组的早期凋亡率与模型组(P<0.01)和空白对照组(P<0.05)比较显著下降,S期细胞百分率较模型组、空白组显著升高(P<0.05)。G0/G1期细胞百分率则显著低于模型组(P<0.01)。结论:痛痹颗粒能明显降低体外NO诱导的兔软骨细胞凋亡,并有促进软骨细胞增殖的作用。     

痛痹颗粒对兔软骨细胞凋亡和细胞周期的影响

目的:观察中药复方痛痹颗粒对体外一氧化氮(NO)诱导的兔软骨细胞凋亡和细胞周期的影响。方法:采用流式细胞仪的Annexin V和DNA分析方法分别检测各组的细胞早期凋亡和细胞周期百分率。结果:硝普钠和痛痹颗粒混合培养的软骨细胞组的早期凋亡率与模型组(P<0.01)和空白对照组(P<0.05)比较显著下降,S期细胞百分率较模型组、空白组显著升高(P<0.05)。G0/G1期细胞百分率则显著低于模型组(P<0.01)。结论:痛痹颗粒能明显降低体外NO诱导的兔软骨细胞凋亡,并有促进兔软骨细胞增殖的作用。     

不同浓度的胡桃醌对宫颈癌HeLa细胞的细胞毒作用研究

目的测定不同浓度的胡桃醌对宫颈癌细胞HeLa生长增殖的影响,探讨胡桃醌的抗肿瘤作用。方法体外培养人宫颈癌细胞系HeLa,通过倒置显微镜观察细胞的形态学变化,用MTT试验观察细胞生长增殖状况,流式细胞仪检测细胞周期以及细胞凋亡。结果不同浓度的胡桃醌可导致细胞形态学发生变化。MTT试验显示,与空白对照组比较,不同浓度的胡桃醌对HeLa细胞的增殖数差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);流式细胞仪检测表明,胡桃醌培养24 h后HeLa细胞出现G2/M期阻滞,其细胞凋亡率明显增加,与对照组比较,不同浓度的胡桃醌差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。Caspase-3活性检测结果显示,与空白对照组比较,不同浓度的胡桃醌可使Caspase-3的活性增加,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);以上全部结果具有剂量依赖性。结论不同浓度的胡桃醌可以抑制HeLa的增殖,且具有剂量依赖性。     

柴胡皂苷-D抑制宫颈癌Hela细胞的分子机制研究

目的:宫颈癌是女性常见恶性肿瘤之一,严重影响女性健康。柴胡皂苷是中药柴胡抗炎、抗肿瘤等作用的主要成分,其中柴胡皂苷D效果尤为明显。研究探讨柴胡皂苷D对宫颈癌细胞的作用的分子机制。方法:采用CCK-8法检测柴胡皂苷D对Hela细胞增殖的影响,利用流式细胞仪检测柴胡皂苷影响Hela细胞凋亡和细胞周期,同时利用定量PCR法检测细胞周期及凋亡相关基因的表达水平。结果:与对照相比,柴胡皂苷D能够显著抑制Hela细胞的增殖(P0.01),通过流式细胞检测,发现柴胡皂苷D能够增加细胞凋亡比例(P0.05),将Hela细胞阻滞在细胞周期G1期。进一步实验发现,柴胡皂苷D能够降低周期素Cyclin D1和Cyclin E,进而影响细胞周期;同时增加凋亡促进基因Bax表达,降低凋亡抑制基因Bcl-2基因表达,从而影响细胞凋亡。结论:柴胡皂苷D通过周期蛋白阻滞Hela细胞周期停滞在G1期,通过影响凋亡相关蛋白诱导Hela细胞凋亡。     

茅苍术提取物对胃癌BGC-823和SGC-7901细胞增殖抑制作用研究

目的探讨茅苍术提取物对胃癌细胞株BGC-823和SGC-7901的增殖抑制效应。方法采用不同浓度(0.625,1.25,2.55,10 mg.mL-)1茅苍术水提物处理胃癌BGC-823和SGC-7901细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测药物对细胞的抑制作用;倒置显微镜下观察细胞的形态学改变;Hoechst 33342染色,荧光显微镜观察细胞凋亡形态;应用流式细胞仪观察凋亡过程中的细胞周期变化。结果茅苍术提取物对胃癌BGC-823和SGC-7901细胞增殖均有明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性;光镜下可见凋亡细胞的形态学特征性改变;流式细胞仪检测表明经茅苍术提取物处理,BGC-823细胞周期阻滞于S期,SGC-7901细胞周期阻滞于G0/G1期。结论体外实验显示茅苍术提取物能抑制胃癌BGC-823和SGC-7901细胞增殖,可以诱导胃癌细胞凋亡。     

蜈蚣多糖对Hela细胞的增殖抑制作用研究

目的 研究蜈蚣多糖对人宫颈癌细胞Hela细胞的抑制作用及作用机制.方法 用MTT法检测蜈蚣多糖对Hela细胞生长的抑制作用;流式细胞仪和Annexin V-FITC/PI双荧光染色分别检测蜈蚣多糖对Hela细胞周期及凋亡情况的影响.结果 在一定浓度范围内蜈蚣多糖可显著抑制Hela细胞的增殖,改变Hela细胞的细胞周期,使细胞阻滞于G2/M期,并能诱导细胞凋亡.结论 蜈蚣多糖可能通过改变Hela细胞的细胞周期,诱导细胞凋亡,从而对Hela细胞的增殖有一定的抑制作用.