中药部位复方DGH对STZ诱发的糖尿病大鼠早期视网膜形态学影响的实验研究

目的观察中药部位复方DGH对链脲佐菌素（STZ）诱发的糖尿病大鼠早期视网膜损害的形态学影响,探讨中医药治疗糖尿病视网膜病变的病理机制。方法采用STZ诱发的糖尿病大鼠模型,分为5组：空白对照组、递法明组和DGH低、中、高剂量组,另设有正常对照组。连续灌胃3个月处死大鼠,其中每只大鼠左眼做视网膜组织切片、右眼视网膜消化铺片。结果DGH各组血糖水平有不同程度的下降。空白对照组毛细血管基底膜边界模糊不清,可见毛细血管壁断裂、多处局灶性多形核白细胞阻塞管腔,偶见闭锁的毛细血管等;DGH高、中、低剂量组、递法明组对基底膜内皮细胞增殖,基底膜增厚等有不同程度的改善,其中以高剂量组显著。DGH低剂量组、递法明组大鼠视网膜毛细血管周细胞明显凋亡,可见毛细血管局部扩张、膨隆,微血管瘤形成及渗透性改变,DGH高、中剂量组毛细血管周细胞数目减少,但毛细血管管腔基本正常,血管走向平直。结论DGH能抑制视网膜周细胞丧失及基底膜增厚,对DM大鼠视网膜微血管形态学损害有一定的保护作用,并在一定程度上能调控STZ诱发的糖尿病大鼠的血糖水平。     

滋肾通窍饮对实验性糖尿病大鼠血清生长激素、视网膜毛细血管基底膜厚度的影晌

目的观察滋肾通窍饮对实验性糖尿病(DM)大鼠血清生长激素(GH)、视网膜毛细血管基底膜厚度的影晌,探讨滋肾通窍饮对非增殖性糖尿病视网膜病变的治疗作用。方法建立链脲佐菌素(STZ)诱导的DM大鼠模型。随机分为正常组、模型组、导升明组、滋肾通窍饮低剂量和滋肾通窍饮高剂量组,放射免疫测定血清GH,电镜下观察视网膜毛细血管基底膜厚度。结果与正常组比较,STZ诱导的模型组大鼠的血糖和GH的含量显著增加,而体质量显著降低,差异具有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,滋肾通窍饮高和低剂量组治疗后对DM大鼠的GH具有抑制作用,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,滋肾通窍饮高和低剂量组对DM大鼠的体质量有升高的趋势,但无统计学差异(P0.05)。滋肾通窍饮高和低剂量组对DM大鼠的血糖具有降低的趋势,但无统计学差异(P0.05)。与正常组比较,模型组电子密度不均匀,节段性结节样增厚。与模型组比较,滋肾通窍饮高剂量组电子密度较均匀,结构清晰,增厚不明显。结论滋肾通窍饮可降低DM大鼠的血清GH水平,并可抑制视网膜毛细血管基底膜增厚,对视网膜毛细血管起到保护作用。     

DM120方对糖尿病大鼠肾组织转化生长因子β_1表达的影响

目的观察DM120方对糖尿病大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型。随机分为正常组、模型组和DM120方组,干预8周,观察各组大鼠肌酐、尿素氮、24 h尿微量白蛋白排泄量、血糖、血脂的变化及肾脏的组织形态学变化,免疫组化方法检测肾脏中TGF-β1的蛋白表达情况。结果模型组大鼠肌酐、尿素氮、24 h尿微量白蛋白排泄量、血糖水平均较正常组明显升高;肾皮质TGF-β1蛋白表达增加,肾脏的病理形态改变明显。DM120方组大鼠肌酐、尿素氮、24 h尿微量白蛋白排泄量、血糖水平均较模型组有不同程度的改善,肾皮质TGF-β1蛋白表达减少,肾脏的病理形态改变亦减轻。结论早期应用DM120方对高脂饲料联合STZ诱导的糖尿病大鼠有保护肾功能的作用,其作用机制可能与抑制糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1表达有关。     

基于Ras/Raf-1/ERK信号转导通路调控VEGF的表达探讨活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜的影响

目的：观察活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜血管形态的影响并探讨其可能的作用机制。方法：一次性腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ,65 mg/kg)诱导糖尿病大鼠模型,造模后随机分为模型组和活血解毒方组。另设正常对照组。药物干预12周后,应用视网膜消化铺片法观察视网膜血管形态;应用Western blot法检测视网膜VEGF蛋白的表达,应用Real-Time PCR法检测视网膜VEGF、Ras、Raf-1与ERK mRNA的表达。结果：模型组视网膜毛细血管面积密度及内皮细胞/周细胞比例与较正常组升高(P<0.001),VEGF蛋白及VEGF、Ras、ERKmRNA表达升高(P<0.05),Raf-1mRNA表达升高(P>0.05)。与模型组比较,活血解毒方组视网膜毛细血管面积密度和内皮细胞/周细胞比例降低(P<0.01和P<0.001),VEGF蛋白与VEGF、Ras、Raf-1、ERK mRNA表达下降(P<0.05)。结论：活血解毒方能明显抑制视网膜毛细血管和内皮细胞的增生,其机制可能是通过干预Ras/Raf-1/ERK信号转导通路,下调VEGF在视网膜中的表达,抑制血管新生,从而改善DR。     

黄连不同剂型对链脲佐菌素诱导的2型糖尿病大鼠血糖及胰岛素抵抗的影响研究

目的探讨黄连不同剂型及剂量对链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病(T2DM)大鼠血糖及胰岛素抵抗的影响。方法采用高脂高糖饲料联合STZ诱导建立T2DM大鼠模型,将90只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性给药组、汤剂大小剂量组、浸渍剂大小剂量组、粉剂大小剂量组。观察大鼠一般临床情况,检测空腹血糖、血清胰岛素,计算胰岛素抵抗指数。结果黄连各剂型均能改善大鼠临床症状;各给药组大鼠体重相较模型组有明显回升,胰岛素水平较模型组无明显差异,血糖、胰岛素抵抗指数明显改善。结论黄连不同剂型均对STZ诱导的T2DM大鼠一般情况、血糖、胰岛素抵抗具有显著治疗作用,从经济价值和治疗效果综合考量以黄连粉剂小剂量降糖效果最优。     

灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏VEGF表达的影响

目的:观察灯盏花素(breviscapine)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏VEGF表达的影响。方法:大鼠尾静脉注射STZ 45mg/kg建立糖尿病大鼠模型,将成模糖尿病大鼠随机分为糖尿病模型组、灯盏花素治疗组(10mg/kg剂量组;15mg/kg剂量组;20mg/kg剂量组),同时设立正常对照组。治疗8w后检测各组大鼠血糖(FBG)、肾指数(肾重/体重)、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、尿白蛋白排泄率(UAER)、光镜和电镜观察肾皮质形态学改变,免疫组化法和Western blot法检测VEGF定位和半定量表达。结果:与糖尿病模型组比较,3种不同剂量灯盏花素治疗组肾指数、UAER、s Cr、BUN明显降低,光镜及电镜下肾脏病理改变有明显改善,肾组织VEGF表达减少。结论:灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用,可能与其抑制糖尿病大鼠肾脏VEGF表达有关。     

补阳还五汤对糖尿病大鼠视网膜病变的干预研究

目的探讨补阳还五汤对实验性糖尿病大鼠视网膜血管病变的干预效果。方法STZ（链脲佐菌素）诱导糖尿病大鼠成功后,取55只糖尿病大鼠随机分成5组,N组：正常对照组;DM组：糖尿病非治疗组;BYHWT﹣H组：糖尿病大鼠接受补阳还五汤高剂量1800mg/（kg·day）治疗;BYHWT﹣M组：糖尿病大鼠接受中剂量900mg/（kg·day）治疗;BYHWT﹣L组：糖尿病大鼠接受低剂量450mg/（kg·day）治疗;DB组：糖尿病大鼠接受羟苯磺酸钙300mg/（kg·day）治疗。正常大鼠组n=9;其余各组动物数均为n=11。实验进行到第20周时,进行如下处理：①视网膜消化铺片研究,②石蜡切片常规染色及免疫组化检查VEGF表达,③透射电镜研究。④所有结果于SPSS统计软件下进行统计学分析。结果BYHWT-H、BYHWT-M、BYHWT-L和DB组动物与DM组相比：①微血管密度、血管相对面积有所下降,周细胞/内皮细胞（P/E）比值有所上升,三个指标与DM组对应指标相比差别具有统计学意义（P〈0.05）。②HE染色示视网膜各层病变较DM组明显减轻;免疫组化示视网膜VEGF阳性表达数目较DM组降低。（P〈0.001）③超微结构变化程度较DM组显著减轻,视杆细胞排列较DM组整齐,内节线粒体肿胀不明显,外核层细胞形态良好,间隙正常,毛细血管管腔无闭塞,基底膜增厚不明显。结论补阳还五汤能有效改善糖尿病大鼠视网膜微血管改变,减轻视网膜各层结构水肿、坏死情况,改善超微结构改变,抑制血管内皮生长因子过表达。有效的抑制VEGF过表达可能是补阳还五汤能有效改善糖尿病大鼠视网膜微血管病变的途径之一。     

滋阴活血方对糖尿病大鼠视网膜瘦素表达的影响

目的:观察滋阴活血方对糖尿病大鼠视网膜瘦素表达的影响。方法:SD大鼠尾静脉注射4.5%链脲佐菌素诱导糖尿病模型。实验分为正常组、模型对照组、多贝斯治疗组、滋阴活血方组,灌胃治疗6周。取各组大鼠眼球组织,分别用免疫组织化学染色、免疫印迹方法检测各组大鼠眼球视网膜瘦素的表达。结果:免疫组化检测结果显示:糖尿病模型组大鼠视网膜各层瘦素染色程度较正常组明显增加为中度(++),多贝斯治疗组和滋阴活血方治疗组的染色程度则为轻度(+)。免疫印迹结果显示:糖尿病大鼠视网膜瘦素相对表达量较正常组明显升高(P<0.01),而多贝斯对照组、滋阴活血方治疗组的表达量较模型对照组明显下降(P<0.01)。结论:滋阴活血方可降低糖尿病大鼠视网膜瘦素表达,对糖尿病视网膜病变起到一定的改善作用。     

二精方对Ⅱ型糖尿病氧化应激作用实验研究

目的:探讨二精方对Ⅱ型糖尿病(T2DM)模型大鼠氧化应激损伤的保护作用.方法:通过高脂高糖饲料喂养以及腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方式构建Ⅱ型糖尿病大鼠模型,随机分为空白对照组、模型组、二甲双胍组及二精方提取液低、中和高剂量组.其中,模型组、空白对照组分别给予生理盐水10 mL/kg灌胃,二精方提取液低、中、高剂量组...     

糖网一号对糖尿病大鼠早期视网膜毛细血管病变的影响

目的观察糖尿病大鼠视网膜毛细血管超微结构的病理改变及中药复方糖网一号对毛细血管超微结构的影响.方法链尿佐菌素(STZ)致糖尿病大鼠随机分为糖尿病模型组(M)、二甲双胍组(A)、糖网一号小剂量组(B)及糖网一号大剂量组(C)(n=12),并设正常对照组(CON).每日灌药1次,6个月后测血流变指标,取视网膜行视网膜血管铺片及透射电镜观察.结果糖网一号和二甲双胍组血流变检测,两药相比,前者优于后者,糖网一号大剂量疗效优于小剂量用药.糖尿病6个月时模型组大鼠的血液有高凝、高粘现象,并出现了影周细胞、周细胞减少、微血管瘤等早期糖尿病视网膜病变的特征性改变.其余各组视网膜病变与模型组相比明显较轻,大剂量用药组接近正常.结论大鼠糖尿病早期眼底和视网膜微血管超微结构已有改变,中药糖网一号对早期糖尿病大鼠视网膜病变具有良好的防治作用.     

密蒙花方对缺氧状态下人血管内皮细胞的作用及机理研究

目的探讨密蒙花方对缺氧状态下人脐静脉血管内皮细胞（Human Umbilical Vascular Endothelial Cell，HUVEC）增殖的抑制作用。方法体外培养HUVEC，采用二氯化钴（Cocl2）建立细胞化学缺氧模型，采用WST-8法观察密蒙花方对缺氧状态下HUVEC的作用。并进一步采用流式细胞仪（Flow Cytometry，FCM）检测密蒙花方对缺氧状态下HUVEC增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）蛋白表达的影响。结果①在Cocl2所诱导的化学缺氧下，HUVEC增殖明显。密蒙花方可抑制缺氧状态下HUVEC的增殖，并呈剂量一效应关系；②密蒙花方对HUVEC内PCNA蛋白表达有明显的下调作用，低、中、高不同浓度的密蒙花方作用24h后，其PCNA蛋白表达率分别为（62．377±3．200）％，（43．707±3．195）％、（27．621±3．622）％与缺氧组（90．600±3．694）％比较差异有统计学意义（P〈0．01）；随着密蒙花方浓度升高，PCNA蛋白表达率下降，呈剂量-效应关系（P〈0．01）。结论上述结果提示，密蒙花方有抑制新生血管发生的作用，有望成为防治增殖性糖尿病视网膜病变的有效药物。     

通络方剂对1型糖尿病大鼠模型肾脏保护作用的形态学研究

目的观察通络方剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病大鼠肾脏病理改变的影响。方法SD大鼠给予STZ以50 mg/kg腹腔注射建立1型糖尿病大鼠模型,随机分成糖尿病组、通络方剂治疗组。另选9只大鼠作为正常对照组。通络方剂治疗组给予通络方剂1.0 g/(kg.d)灌胃,其余大鼠予以等量蒸馏水灌胃,3组大鼠在相同环境条件下饲养。6周后处死,取肾脏行HE染色以及透射电镜观察肾皮质组织病理改变。结果糖尿病组大鼠与正常对照组大鼠相比,光镜及电镜下已出现糖尿病肾病病理改变,而通络方剂组肾皮质病理病变较轻。结论通络方剂对STZ诱导的1型糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用。     

密蒙花方对缺氧状态下人血管内皮细胞细胞周期的影响

目的探讨密蒙花方对缺氧状态下人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vascular endothelialcell,HUVEC)细胞周期的影响。方法体外培养HUVEC,采用二氯化钴(CoCl2)建立细胞化学缺氧模型,采用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测不同浓度密蒙花方水提液(10、20、40 mg/ml)对缺氧状态下HUVEC细胞周期的影响。结果①缺氧组较正常组G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增高,差异具有统计学意义(P<0.01);②各密蒙花方组均较缺氧组G0/G1期细胞比例增高,S期细胞比例减少(P<0.01),组间具有浓度依赖关系(P<0.01);③密蒙花方组在G0/G1期前还出现了指示细胞凋亡的亚G1期凋亡峰,表明密蒙花方对缺氧状态下的HUVEC具有促凋亡作用。结论密蒙花方抑制HUVEC增殖的作用与阻滞细胞由G1期进入S期,促进细胞凋亡有关。     

芪黄明目胶囊对糖尿病小鼠视网膜黏附分子的作用及其机制

目的 观察芪黄明目胶囊对糖尿病小鼠视网膜黏附分子的作用并探讨其机制.方法 KK/Upj-Ay小鼠随机分为模型组,芪黄明目高、中、低剂量组,另设C57B L/6小鼠对照组.灌胃给药3个月,观察一般情况,测定空腹血糖(FBG);光镜及电镜观察视网膜形态学变化;Real Time PCR (qPCR)和Western blot法测定视网膜细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、E-选择素(E-selectin)和核因子-κB(NF-κB)表达.结果 芪黄明目能不同程度改善模型小鼠症状,降低FBG;改善视网膜病理损伤;降低视网膜ICAM-l、VCAM-1、E-selectin和NF-κB mRNA和蛋白的表达.结论 芪黄明目降低糖尿病小鼠视网膜黏附分子ICAM-1、VCAM-1、E-selectin的表达与下调NF-κB有关.     

抵挡汤对糖尿病模型大鼠下肢血管病变影响研究

目的：探讨抵挡汤对糖尿病模型大鼠下肢血管病变的影响机制。方法：利用链脲佐菌素（STZ）尾静脉注射,配合高脂饲料饮食制备糖尿病模型大鼠模型,将大鼠分为正常对照组、模型对照组、抵挡汤组、辛伐他汀组、罗格列酮组,给药12周后取股动脉免疫组化染色观察细胞间粘附分子-1（ICAM-1）及血管细胞间粘附分子-1（VCAM-1）的阳性表达。结果：与正常对照组比较,模型对照组大鼠下肢动脉血管ICAM-1和VCAM-1表达增多。而与模型对照组比较,抵挡汤组、辛伐他汀组和罗格列酮组的大鼠动脉血管免疫组化染色ICAM-1和VCAM-1表达减少。结论：抵挡汤抑制糖尿病大鼠下肢血管ICAM-1．zLVCAM-1表达,可能是其防治糖尿病下肢血管病变发生发展的机理之一。     

抵挡汤对糖尿病肾病大鼠肾脏ICAM-1作用的影响

目的:探讨抵挡汤对糖尿病大鼠肾脏细胞间黏附分子-1( ICAM-1)的影响.方法:利用链脲佐菌素(STZ)尾静脉注射,配合高脂饲料饮食制备糖尿病大鼠模型,将大鼠分为正常对照组、模型对照组、抵挡汤组、罗格列酮组,连续灌胃给药12周,模型组、正常组给子等量生理盐水.治疗第12周末测定各组大鼠血糖、血肌酐水平及24尿蛋白,免疫组化染色观察各组大鼠肾脏细胞间黏附分子-1( ICAM-1)的阳性表达.结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠肾脏ICAM-1表达增多;而与模型对照组比较,抵挡汤组和罗格列酮组的大鼠肾脏免疫组化染色ICAM-1表达减少.结论:抵挡汤抑制糖尿病大鼠肾脏ICAM-1表达,可能是其防治糖尿病肾病发生发展的机制之一.     

知芪益肾汤对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子β_1的影响

目的探讨知芪益肾汤对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法腹腔注射链尿佐菌素(STZ)建立糖尿病模型。随机分为模型组、知芪益肾汤组和正常组,实验第8周,观测各组大鼠体质量、肾质量、肾质量/体质量、血糖、血尿素氮、血肌酐(Cr)2、4 h尿白蛋白排泄率的变化及肾脏的组织形态学变化,免疫组化法检测肾脏中TGF-β1的蛋白表达情况。结果知芪益肾汤组肾功能明显改善,肾皮质TGF-β1蛋白表达减少,肾脏的病理形态改变亦减轻。结论早期应用知芪益肾汤对STZ诱导的糖尿病大鼠有肾保护作用,其作用机制可能与抑制糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1表达有关。     

葛芪达络汤对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经脑源性神经因子表达的干预作用

目的观察葛芪达络汤对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠脑源性神经因子(BDNF)表达的干预作用,探讨葛芪达络汤防治DPN的可能机制。方法以链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,中药汤剂灌胃,观测体质量、血糖、糖化血红蛋白的变化,坐骨神经的组织形态学改变。用免疫组化方法检测坐骨神经BNDF蛋白表达量。结果中药组大鼠坐骨神经病变比模型组减轻,轴突变性萎缩改变轻、髓鞘脱落较少,坐骨神经BDNF蛋白表达与模型组相比明显增多(P0.05)。结论葛芪达络汤能上调DPN大鼠坐骨神经BNDF蛋白的表达,表明其对实验性DPN有一定的防治作用。     

芪藤通络饮对实验性糖尿病周围神经病变大鼠的防治机制

目的:探讨芪藤通络饮对糖尿病周围神经病变大鼠(diabetic perineuralpathies,DPN)的可能防治机制。方法:链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠给予中药汤剂灌胃治疗,连续8周,观测体重、血糖、糖化血红蛋白的变化,观察药物对糖尿病大鼠坐骨神经形态学改变、用免疫组化的方法检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在坐骨神经中的蛋白表达量。结果:中药组大鼠坐骨神经病变比模型组轻,轴突变性萎缩、髓鞘脱落较少,IGF-1在坐骨神经中的的表达与模型组相比显著性增高(P<0.05)。结论:本中药可改善糖尿病大鼠周围神经组织的代谢功能,提高神经元的存活,有利于神经的再生和修复,其作用可能是通过提高大鼠坐骨神经IGF-1蛋白的表达量来实现的。