中药提取组合物(胶囊)对念珠菌及曲霉的体外抗菌实验

目的 探讨中药提取组合物(桂皮油、藿香油)胶囊对致病性念珠菌、曲霉的体外抗菌活性.方法 应用试管药基法,测定中药提取组合物胶囊对念珠菌(白念、热带、克柔氏)曲霉(烟曲、黄曲)的最小抑菌浓度(MIC).结果 中药提取组合物MIC范围为白念珠菌(桂皮油0.06～0.52 mg/ml、藿香油0.03～0.26 mg/ml)、热带念珠菌(桂皮油0.13～1.03 mg/ml、藿香油0.06～0.52 mg/ml)、克柔氏念珠菌(桂皮油0.13～0.52 mg/ml、藿香油0.06～0.26 mg/ml)、烟曲霉(桂皮油0.13～0.52 mg/ml、藿香油0.06～0.26 mg/ml)、黄曲霉(桂皮油0.26～0.52 mg/ml、藿香油0.13～0.26 mg/ml).结论 中药提取组合物胶囊对致病性念珠菌(白念、热带、克柔氏)曲霉(烟曲、黄曲)体外均有很强的抗菌活性,为开发中药治疗侵袭性真菌病提供理论依据.     

3种植物药单体对肺曲霉生物活性实验

目的：探讨3种植物药单体有效活性成分的抗真菌作用,对肺曲霉进行体外生物活性的MIC和MFC实验。方法：采用试管药基法,将桂皮醛、丁香酚、藿香酮倍比稀释成2.5～0.0098μg/mL的浓度,对致病性肺曲霉（烟曲霉、黄曲霉）进行MIC和MFC实验观察。结果：桂皮醛对烟曲霉MIC均值为0.0391μg/mL,黄曲霉MIC均值为0.0781μg/mL,MFC均为0.0781μg/mL;丁香酚对烟曲霉、黄曲霉MIC均值为0.0781μg/mL,MFC0.1562μg/mL;藿香酮对烟曲霉、黄曲霉MIC均值为0.1562μg/mL,MFC0.3125μg/mL;对照组氟康唑对烟曲霉、黄曲霉MIC和MFC均〉2.5mg/mL。结论：3种植物药单体对烟曲霉、黄曲霉均显示有较强的生物活性,其生物活性依次为桂皮醛、丁香酚、藿香酮。氟康唑对烟曲霉、黄曲霉均显示耐药。     

复方桐叶烧伤油的抗菌作用研究

目的:探讨复方桐叶烧伤油的抗菌作用.方法:采用琼脂扩散法、试管法、点试法测定抑菌或杀菌浓度.结果:复方桐叶烧伤油对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌的最低抑菌浓度(MIC)依次为31.3mg/ml、31.3mg/ml、62.5mg/ml、125mg/ml、125mg/ml;对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌、乙型溶血链球菌的MBC均为62.5mg/ml;对革兰氏阴性菌绿脓杆菌、大肠杆菌的MBC均为125mg/ml;对真菌的MBC为125mg/ml.     

3种中药单体成分对肺念珠菌的抗菌活性

目的 观察3 种中药单体成分对肺念珠菌体外的抗菌活性.方法 采用试管药基法,将桂皮醛、丁香酚、藿香酮倍比稀释成2.5～0.019 5 μL/mL,对致病性肺念珠菌(白色念珠菌、热带念珠菌、克柔氏念珠菌)进行最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC)实验观察.结果 桂皮醛对白色念珠菌、热带念珠菌MIC 为0.019 5 μL/mL,克柔氏念珠菌为0.039 1 μL/mL;白色念珠菌、热带念珠菌MFC 为0.039 1 μL/mL,克柔氏念珠菌为0.078 11 μL/mL.丁香酚对3 种念珠菌MIC 为0.078 1 μL/mL,对白色念珠菌MFC 为0.078 1 μL/mL,热带念珠菌、克柔氏念珠菌为0.156 2 μL/mL;藿香酮对白色念珠菌、热带念珠菌MIC 为0.156 2 μL/mL,克柔氏念珠菌为0.312 5 μL/mL;对白色念珠菌MFC 为0.156 2 μL/mL,热带念珠菌、克柔氏念珠菌为0.312 5 μL/mL.对照组氟康唑对白色念珠菌、热带念珠菌MIC 为0.313 μL/mL,对克柔氏念珠菌为2.5 mg/mL.结论 3 种中药单体成分对念珠菌均有很强的抗菌作用,其抗菌作用由强到弱依次为桂皮醛、丁香酚、藿香酮.克柔氏念珠菌对氟康唑显示耐药.     

肉桂油微乳中桂皮醛含量的高效液相色谱法测定

目的建立高效液相色谱法测定肉桂油微乳中桂皮醛含量的方法。方法色谱柱为C18,柱温25℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(33∶67),检测波长285 nm,流速1.0 ml.min-1。结果桂皮醛在28.8~100.8μg/ml(R2=0.999 9)浓度范围内线性关系良好。平均回收率为101.29%,RSD为1.45%。结论HPLC测定桂皮醛方法便捷、准确、重复性好,可用于肉桂油微乳含量的测定。     

HPLC法测定广藿香油中广藿香酮的含量

目的 建立广藿香油中广藿香酮的高效液相色谱测定法.方法采用高效液相色谱法.色谱柱为YMC-Pack C18色谱柱(250×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.2％磷酸溶液(60:40,V/V);检测波长:310 nm;流速:1 mL·min-1;柱温:35℃.结果广藿香酮在0.25～5 μg范围内呈良好线性关系,r=1.0000,平均回收率为101.16％,RSD=1.49％(n=6);10批样品中广藿香酮含量在3.54～40.19 mg·g-1范围内.结论此法简便快速、准确可靠,可用于广藿香油含量的测定和质量监控.     

广藿香油体外抗呼吸道病毒效果研究

目的:研究广藿香油体外抗流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、柯萨奇病毒及单纯疱疹病毒的效果,为抗病毒性感冒新药研发提供依据。方法:建立流感病毒感染MDCK细胞、呼吸道合胞病毒和腺病毒感染Hep-2细胞、柯萨奇病毒感染Hela细胞模型和单纯疱疹病毒感染Vero细胞模型,以细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)法作为观察和检测指标,了解不同浓度药物体外抗病毒效果及药物对细胞的毒性,实验中分别以利巴韦林和阿昔洛韦作为对照药。结果:广藿香油对MDCK、Hep-2、Vero和Hela细胞的TC50浓度均为0.101mg/ml,TC0浓度为0.092mg/ml。广藿香油能明显抑制柯萨奇病毒和腺病毒所致的细胞病变,IC50分别为0.081mg/ml、0.084mg/ml,治疗指数(TI)分别为1.25、1.20;可抑制流感病毒,IC50为0.088mg/ml,TI为1.15;对呼吸道合胞病毒作用很低,IC50为0.092mg/ml,TI为1.10;对单纯疱疹病毒几乎没有抑制作用。结论:体外抗病毒实验广藿香油显示出抗柯萨奇病毒、抗腺病毒、抗甲型流感病毒和抗呼吸道合胞病毒的作用,但不具有抗单纯疱疹病毒的作用。     

人工合成家蝇抗真菌肽MAF-1A体外抗真菌效果及扫描电镜观察

目的探讨人工合成家蝇抗真菌肽MAF-1A结构特点及其抗真菌效果。方法运用生物信息学软件分析人工合成MAF-1A的结构特征;采用液体微量稀释法、MTT法和沙氏琼脂平板培养计数法分别检测MAF-1A对白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌和新生隐球菌的抗菌活性及最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并绘制时间-杀菌曲线;采用扫描电镜观察在MIC浓度下对白色念珠菌超微结构的影响。结果生物信息学软件分析结果显示MAF-1A为一阳离子多肽,分子量3022.5Da,pI值9.23,碱性氨基酸含量26.9%,带2个正电荷,结构较为稳定,脂肪指数71.54,其总平均疏水性数-1.081,预测为一非跨膜多肽,二级结构以α螺旋结构为主的线状肽结构。MAF-1A对白色念珠菌敏感株及耐药株均显示出抗菌活性,对检测酵母菌的MIC值在0.1~0.8mg/ml、MBC值在0.2~0.9mg/ml;杀菌曲线显示,MIC浓度MAF-1A作用真菌2h至14h逐渐发挥杀菌活性。扫描电镜显示MAF-1A作用白色念珠菌后形态发生改变,菌体表面粗糙,可见细胞穿孔样变,严重病变细胞表面呈碎片状,刺状突起,胞质流失至细胞皱缩死亡。结论 MAF-1A为阳离子α-螺旋结构线性多肽,对常见的致病性念珠菌包括耐药性菌株具有抗菌活性,可通过破坏真菌细胞表面结构发挥杀菌作用。     

反相高效液相色谱法测定新月见草油丸中维生素E的含量

目的:探讨测定新月见草油丸中维生素E含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱:ApolloC18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相:100%甲醇,检测波长为210nm,流速1ml/min,室温,进样10μl。结果:维生素E在0.01029-0.08234mg/ml浓度范围内与峰面积呈良好线性关系,测得样品平均回收率为98.28%,RSD为1.54%,样品中维生素E含量分别为0.257、0.248、0.251mg/粒。结论:反相高效液相色谱法操作简便快捷,结果准确可靠,适用于新月见草油丸中维生素E的含量测定。     

薏苡仁油中甘油三酯含量的快速测定

目的 建立薏苡仁油中甘油三酯含量的快速测定方法.方法 以甘油三油酸酯为对照品,采用紫外-可见光谱法在412 nm处测定薏苡仁油中甘油三酯的含量.结果 甘油三油酸酯在0.202～1.010 mg/ml范围内线性关系良好,R2=0.9966,甘油三酯平均回收率为101.20%,RSD为1.47%.结论 该方法 简便、快速、结果 准确,适用于薏苡仁油中甘油三酯含量的快速测定.     

桂皮醛对免疫抑制BALB/c小鼠肺白念珠菌细胞壁(1,3)-β-D葡聚糖的影响

目的 侵袭性肺念珠菌感染发病率高、治疗棘手、预后差、死亡率高,研究桂皮醛对白念珠菌细胞壁(1, 3)-β-D-glucans的影响,为研发新型靶向抗真菌药物提供依据。方法 对免疫抑制BALB/c小鼠经鼻腔灌注1x107 cfu/ml 50ul白念珠菌菌悬液,口服桂皮醛240mg.kg-1. d-1,连续14d后,取肺组织标本进行 (1, 3)-β-D-glucans测定及透射电镜观察,以氟康唑为对照。结果 肺组织 (1, 3)-β-D-glucans（1160.62±89.65 pg/ml）,氟康唑对照组（4285.87±215.62 pg/ml）,两组之间对比较P＜0.01有统计学差异。肺组织电镜显示, 白念珠菌细胞壁外2-3层（1,3）-β-D葡聚糖层,胞壁溶解脱落,导致胞壁严重缺损,但细胞膜清晰、完整。结论 桂皮醛对肺白念珠菌细胞壁（1, 3）- β-D-glucans具有显著影响,但细胞膜不受影响。说明,桂皮醛有独特的抗白念珠菌细胞壁(1, 3)-β-D -glucans效应。     

广藿香油及其主要成分对斑马鱼胚胎发育毒性的比较研究

目的:观察和比较广藿香油及其主要成分广藿香醇、广藿香酮对斑马鱼胚胎发育的毒性。方法:分别将发育10h的胚胎置于梯度浓度的广藿香油、广藿香醇和广藿香酮中培养,于24h、48h、72h、96h观察和统计各组斑马鱼胚胎的死亡率、畸形率、胚胎形态、摆尾次数和心率。结果:随作用时间延长,三种药物毒性表现越明显;24h时广藿香醇和广藿香酮对斑马鱼的LD50分别为50.3、12.9mg/L,广藿香油组无明显致死现象;96h时广藿香油、广藿香醇和广藿香酮对斑马鱼胚胎的LC50分别为21.22、12.863、11.76mg/L。对比12mg/L浓度下三种药物的毒性,广藿香醇和广藿香酮在24h时主要表现为生长缓慢、止于体节期,96h时表现为导致幼鱼脊柱侧弯,心脏肿大,卵黄囊肿大、摆尾次数和心率明显下降等现象;广藿香油在各时间点主要表现为延缓黑色素的生成和轻微的心脏毒性;对比结果表明,广藿香酮毒性最明显。结论:广藿香油、广藿香醇和广藿香酮对斑马鱼均有胚胎发育毒性,毒性大小:广藿香酮>广藿香醇>广藿香油。     

黄芩油纱条在肛瘘术后换药作用的疗效观察

目的:探讨肛瘘术后创面局部应用黄芩油纱条换药作用并观察其疗效。方法:将符合纳入标准的60例肛瘘术后患者随机分为两组,以黄芩油纱条为治疗组治疗患者30例,以0.5mg/L甲硝唑溶液纱条为对照组治疗患者30例,观察两组患者术后疼痛、分泌物、创缘水肿及愈合时间等情况。结果:术后肛门疼痛、创缘水肿、分泌物疗效及愈合时间治疗组均优于对照组(P0.05)。结论:临床观察未发现毒副作用及不良反应,黄芩油纱条在肛瘘术后的换药作用中效果满意。     

高效液相色谱法测定香附油中α-香附酮的含量

目的:建立香附油中α-香附酮的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Merck LichrocartC18(5 μm,200mm ×4.6 mm),以甲醇-水(68:32)为流动相,检测波长为241 nm,流速为1.0 ml/min.结果:α-香附酮在0.081～0.81μg/ml范围内呈良好的线性关系,r=0.9998,平均回收率为99.1%,RSD为2.2%.     

GC法测定椒目仁油中油酸、亚油酸及α-亚麻酸

目的 建立测定椒目仁油中油酸、亚油酸及α-亚麻酸的方法.方法 采用十四酸作为内标物,使用氢氧化钾甲醇溶液将椒目仁油中不饱和脂肪酸甲酯化,再用气相色谱法测定椒目仁油中油酸、亚油酸及α-亚麻酸.结果 油酸、亚油酸及α-亚麻酸浓度分别在0.92 ～13.60 mg/mL(r =0.999 9)、1.15 ～16.96 mg/mL(r =0.999 9)、2.02～29.94 mg/mL(r =0.999 9)mg/mL范围内呈良好的线性关系;油酸、亚油酸及α-亚麻酸平均加样回收率及RSD值分别为98.34％与0.26％、98.43％与0.56％、98.35％与0.43％(n=6);3批椒目仁油中油酸、亚油酸及α-亚麻酸的平均质量分数分别为19.25％、27.22％、33.26％.结论 本方法简便易行,准确稳定可靠、重复性好,因此,可以作为椒目仁油的质量控制方法.     

鸦胆子油微囊中油酸与亚油酸含量的气相色谱法测定

目的 建立气相色谱法测定鸦胆子油微囊中油酸、亚油酸含量的方法.方法 采用气相色谱法,色谱柱为中等极性的OV-17(苯基甲基硅酮)(30 m×0.32 mm×0.50 μm)毛细管柱,采用恒温检测,柱温220℃,进样器温度230℃,氢火焰检测器温度240℃.结果 油酸甲酯在5.94～380 μg/ml浓度范围内,呈良好线性关系,线性方程为:Y=0.990 4X-0.501 2,相关系数R<'2>=0.999 9;亚油酸甲酯在5.37～340 μg/ml范围内,线性方程为:Y=0.837 5X-0.548 5,相关系数R=0.999 9.油酸甲酯和亚油酸甲酯的平均回收率分别为97.8%(RSD=1.5%)和98.0%(RSD=1.8%).结论 该方法可用于鸦胆子油微囊中油酸、亚油酸的含量测定.     

蓖麻根提取物对HepG2.2.15HBsAg和HBeAg表达和抗菌作用的研究

目的 探讨蓖麻根提取物对HepG2.2.15细胞株HBsAg和HBeAg表达的影响与抗菌作用.方法 采用HepG2.2.15细胞系培养系统检测蓖麻根提取物对HBsAg和HBeAg表达的影响;用平板法对提取物连续稀释测定其最低抑菌浓度.结果 蓖麻根两种醇提物孵育HepG2.2.15细胞株72 h后均能抑制HBsAg和HBeAg的表达(与正常对照组比较P<0.05或P<0.01),其抑制效应呈浓度依赖性,其中50%醇提物在200 mg/L和100 mg/L抑制HBsAg的表达分别为100%和67.2%.蓖麻根提取物的最低抑菌浓度(MIC), 以50%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌第3和4株、表皮葡萄球菌、大肠杆菌第2株的抑制作用较强(MIC均为19.5 μg/ml).其次是金黄色葡萄球菌第2株、大肠杆菌第3株、甲型和乙型链球菌、酿脓链球菌、肺炎链球菌、铜绿假单胞菌(MIC均为39.1 μg/ml),而95%醇提物的抑菌作用较弱.结论 蓖麻根醇提物具有体外抗乙肝病毒和抑菌作用.     

鸦胆子油乳脂质纳米粒对A549细胞抑制作用的研究

目的探讨鸦胆子油乳脂质纳米粒对人非小细胞肺癌A549细胞株的抑制、凋亡作用及其机制。方法用MTT法检测设不同浓度实验组(30、60、90、120 mg/L)及不同作用时间(24、48、72 h)药物对细胞的抑制率;用流式细胞仪检测药物浓度60 mg/L作用24、48、72 h后实验组细胞的凋亡率;RTPCR检测Caspase-3 mRNA的表达。结果不同浓度、时间鸦胆子油乳脂质纳米粒对A549细胞增殖的影响:细胞增殖抑制率在一定剂量范围内随浓度的增加而增加,具有剂量依赖性,用相同浓度鸦胆子油乳脂质纳米粒(60 mg/L)干预A549人肺腺癌细胞24、48、72 h,抑制率在一定时间范围内随时间的延长而增加,具有时间依赖性。用相同浓度鸦胆子油乳脂质纳米粒(60 mg/L)干预A549人肺腺癌细胞24、48、72 h凋亡率分别是:48.67%±1.42,64.82%±1.46,68.25%±1.32。RT-PCR结果提示鸦胆子油乳脂质纳米粒上调了Caspase-3 mRNA的表达。结论鸦胆子油乳脂质纳米粒可以抑制人肺腺癌A549细胞增殖和诱导凋亡,并呈时间-剂量关系,其机制可能与上调Caspase-3的表达有关。     

气相色谱法测定牡荆油胶丸中β-丁香烯

目的 建立气相色谱法测定牡荆油胶丸中β-丁香烯的方法 .方法 用气相色谱法.色谱条件:色谱柱为HP-5石英毛细管柱(30.0 m×320μm×0.25μm);进样口温度:230℃;恒流:1 mL/min;分流比10:1;检测口温度:260℃;进样量1μL;程序升温,起始温度80℃,以8℃/min升至200℃,保持5 min.结果 β-丁香烯在0.002～0.16 mg/mL呈良好的线性关系,回归方程为y=0.055 1 X-0.008,r=0.999 9,平均回收率为99.32%,RSD为1.56%.结论 采用气相色谱法对牡荆油胶丸中β-丁香烯进行测定,方法 简便、快速、准确、重复性好.     

薏苡仁油对人原位胰腺癌BxPC-3细胞生长及VEGF和bFGF表达的影响

目的研究薏苡仁油(康莱特注射液)体外对人原位胰腺癌BxPC-3细胞生长和血管生长因子的影响,探讨薏苡仁油抗肿瘤作用机制。方法薏苡仁油作用BxPC-3细胞后,经瑞氏染色观察细胞形态,Hoechst 33258荧光染色、DNA梯度电泳观察细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期的变化;ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(bFGF)的变化。结果薏苡仁油(2 mg/mL,20μL/mL)作用于BxPC-3细胞后,瑞氏染色可见细胞出现典型的凋亡小体,Hoechst33258荧光染色可见BxPC-3细胞出现特征性凋亡变化,琼脂糖电泳观察到明显的细胞凋亡特征性DNA梯形条带;细胞周期阻滞在G0/G1期;细胞上清液中VEGF、bFGF的表达水平明显下调。结论薏苡仁油能影响BxPC-3细胞生长周期,导致细胞周期阻滞,下调VEGF和bFGF的表达水平,可能对抑制胰腺癌细胞的扩散产生一定作用。