Ac-SDKP抑制SPP1/TGF-β1信号拮抗实验性矽肺的机制

目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酰(Ac-SDKP)通过调节分泌性磷蛋白1(SPP1)/转化生长因子1(TGF-β1)信号,从而抑制实验性矽肺的作用及其机制.方法 Wistar大鼠分为对照24周组、矽肺24周组和Ac-SDKP治疗组.RWA264.7细胞分为对照组、SiO2诱导组和SiO2+Ac-S...     

红细胞生成素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用及对MCP-1和TGF-β1表达的影响

目的探讨红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteralobstruction,UUO)模型大鼠肾间质纤维化的作用及其对单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant pro-tein-1,MCP-1)和转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响。方法将60只雄性Wistar大鼠分为假手术组(20例),UUO对照组(20例)及EPO治疗组(20例),分别于手术后第3,7,14,21d处死动物留取肾组织标本。应用马松染色进行肾间质纤维化程度评分;应用免疫组化方法和Western blot方法测定肾组织中MCP-1、TGF-β1的表达程度。结果马松染色显示手术后第3,7d,EPO治疗组肾间质纤维化程度较UUO对照组明显减轻(P0.05)。手术后第3,7,14d,EPO治疗组MCP-1、TGF-β1的表达明显低于UUO对照组(P0.05)。结论 EPO可以减轻UUO模型大鼠早期肾间质纤维化程度,该作用可能与EPO抑制肾组织MCP-1和TGF-β1的表达有关。     

肾康注射液对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的研究肾康注射液对梗阻性肾病大鼠肾小管间质纤维化的防治作用。方法采用单侧输尿管梗阻(UUO)诱导肾间质纤维化的动物模型,以血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)作为阳性对照,将大鼠随机分为:模型组(UUO)、肾康组、缬沙坦组,术后第14天处死大鼠,收集血清测定肌酐、尿素氮水平,肾组织用HE染色及免疫组化半定量检测各组肾间质的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果肾康组、缬沙坦组的肾小管间质TGF-β1、α-SMA的表达均明显低于UUO组;两治疗组组间比较,肾康组对TGF-β1、α-SMA表达的抑制作用同于缬沙坦组。结论中药肾康可减轻肾间质纤维化。     

霉酚酸酯对UUO大鼠肾间质TGF-β_1、PAI-1表达的影响

目的:通过霉酚酸酯(MMF)干预单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠,动态观察转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤溶酶原激活抑制物-1(PAI-1)在梗阻侧肾组织中的表达,探讨MMF延缓肾间质纤维化进展的机制。方法:将54只大鼠随机分为假手术组、单侧输尿管结扎手术组和霉酚酸酯组。采用UUO模型,在     

亚硒酸钠对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化及其氧化损伤的影响

目的探讨亚硒酸钠对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾间质纤维化的作用及其对肾间质转化生长因子-β1(TGF-β1)表达及氧化应激指标变化的影响。方法以单侧输尿管结扎建立肾间质纤维化大鼠模型。将90只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、UUO组(B组)、UUO+硒组(C组)、UUO+硒及维生素E组(D组)、UUO+贝那普利组(E组),每组18只。C、D、E组分别给予亚硒酸钠(0.2mg.kg-1.d-1)、亚硒酸钠(0.2mg.kg-1.d-1)+维生素E(200mg.kg-1.d-1)和贝那普利(10mg.kg-1.d-1)灌胃。A、B组给予同等剂量生理盐水灌胃。术后第7、14、21天各组随机处死6只大鼠,肾组织行HE、Masson染色评定各组肾间质纤维化程度,免疫组织化学半定量法检测各组肾间质TGF-β1的表达。化学比色法检测肾组织匀浆中氧化指标谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。结果手术后第7、14、21天,C组肾间质纤维化程度较B组明显减轻(P<0.05),肾组织TGF-β1的表达强度明显低于B组(P<0.01或P<0.05),GSH-Px和SOD含量明显高于B组(P<0.05),MDA含量明显低于B组(P<0.05);而上述各项指标与D组和E组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论硒可能通过减轻肾组织氧化应激反应,下调TGF-β1表达,延缓肾间质纤维化,从而起到肾脏保护作用。     

不同剂量氯沙坦对防治肾间质纤维化效果的影响

目的：观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂（ARBs）氯沙坦对大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）模型肾间质纤维化的影响．探讨超大剂量能否优于常规剂量起到更多的肾脏保护作用：方法：建立大鼠UUO模型，术后3d分为常规剂量治疗组、超大剂量治疗组、UUO组和假手术组。药物干预组分别每天给予氯沙坦50mg／kg、氯沙坦500mg／kg灌胃，假手术组及UUO组每天给予同体积生理盐水灌胃。观察模型第7、14和21天鼠尾袖带血压（TCP）、24h尿蛋白、肾小管损害程度、肾间质纤维化程度、肾间质巨噬细胞数和转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA的表达。结果：随着梗阻时间延长．UUO组TCP逐渐增高、24h尿蛋白、肾间质纤维化程度、肾小管损害程度及肾间质巨噬细胞浸润显著增加，TGF-β1 mRNA含量明显增加，与其余各组相比差异有显著性（P〈0.05）。同时，超大剂量氯沙坦相对于常规剂量，能更有效地控制血压、减少蛋白尿、减轻肾小管损害和肾间质纤维化、减少肾间质单核巨噬细胞浸润，显著抑制TGF-β1 mRNA表达。结论：超大剂量氯沙坦在UUO大鼠模型中较常规剂量起到了更多的肾脏保护作用.     

姜黄素对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化影响的研究

目的:探讨姜黄素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管上皮细胞转分化的作用。方法:采用UUO致肾间质纤维化大鼠模型。将24只大鼠随机均分为假手术组、模型组和姜黄素组。从制模后2 d起,姜黄素组给予100 mg.kg-1.d-1姜黄素腹腔注射。术后4周心脏穿刺抽血,测定各组大鼠血清尿素氮(BUN)和血肌酐(SCr)值。处死大鼠,用苏木素-伊红(HE)、Masson染色评定肾小管间质纤维化程度;用免疫组化方法检测肾组织内转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达部位及表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠BUN水平显著增加(P<0.01),肾间质纤维组织相对面积显著扩大(P<0.01),肾组织内TGF-β1、α-SMA和Vimentin的蛋白表达均显著上调(P均<0.01)。姜黄素干预后,上述上调指标都被显著抑制(P<0.05或P<0.01)。结论:姜黄素可能通过抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞转分化而减轻肾间质纤维化。     

福辛普利及霉酚酸酯对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏TGF-β1表达的影响

目的观察福辛普利及霉酚酸酯对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,及其对肾间质纤维化的作用.方法UUO大鼠分别给予霉酚酸酯[Mycophenolate mofetil 25 mg/(kg·d)]、福辛普利[fosinopril 10 mg/(kg·d)]、霉酚酸酯联合福辛普利混悬液灌胃,用RT-PCR的方法检测术后第7天、14天TGF-β1表达量的改变.结果与假手术组相比,UUO组及药物治疗组TGF-β1表达均增高,但UUO组显著高于各治疗组(P<0.05),且联合治疗组更低于单用药组.结论福辛普利及霉酚酸酯可通过下调TGF-β1表达,从而减轻UUO术后肾组织间质纤维化,且联合用药作用更优于单用药.     

促肝细胞生长素对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的干预作用

目的研究促肝细胞生长素（pHGF）对肾间质纤维化大鼠肾组织中HGF、TGF-β1的表达的影响及其改善肾小管间质纤维化可能的机制,为临床防治肾间质纤维化提供实验性理论依据。方法采用单侧输尿管结扎术（unilateral ureteral obstruction UUO）建立肾小管间质纤维化大鼠模型。将54只大鼠随机分为三组：假手术组,UUO组,pHGF干预组。术后3、7、14天分3批处死各组大鼠,分别经免疫组化方法观察各组大鼠肾组织HGF、TGF-β1的表达情况,HE及Masson染色评定各组肾小管间质损害程度。结果UUO组TGF-β1的表达及肾小管间质损伤程度明显高于假手术组（P〈0．05）;而pHGF干预组明显低于UUO组（P〈0．05）;UUO组HGF于第3天表达最高,第7天稍有回落,第14天表达最弱;pHGF干预组术后第3天、第7天、第14天HGF的表达均显著高于同时期UUO组（P〈0．05）,肾小管间质病变程度明显减轻,肾间质相对面积显著减小（P〈0．05）。结论pHGF能够减轻单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的程度,这种作用可能通过有效抑制肾间质中TGF-β1的过度表达、促进肾间质HGF的表达而实现。     

厄贝沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠基质金属蛋白酶-2的影响

目的:观察厄贝沙坦对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的影响并探讨其可能机制。方法:采用UUO肾间质纤维化模型。将24只大鼠随机分为3组,每组8只,即假手术组、UUO组、厄贝沙坦组。厄贝沙坦组给予厄贝沙坦10mg/(kg·d)治疗。术后2周处死大鼠,光镜下观察Masson和HE染色肾间质纤维化指数,观察肾组织病理改变,并应用免疫组织化学方法检测肾组织MMP-2的表达。结果:(1)UUO组与假手术组相比,血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平均显著增加(P<0.05)。(2)与假手术组相比,肾组织行HE染色UUO组可见弥漫的肾小管上皮细胞空泡变性、扩张、部分萎缩,偶见坏死,肾间质增宽,大量的炎细胞浸润和间质纤维化,肾小球病理改变不明显,厄贝沙坦组上述改变均有所减轻。(3)与假手术组相比,Masson染色结果显示UUO组可见肾间质增宽、有大量胶原纤维增生,肾小球病变不明显,厄贝沙坦组上述改变均有所减轻。(4)MMP-2在假手术组大鼠肾间质中呈棕黄色颗粒状表达,UUO组中大鼠肾间质仅有少量表达且着色稀疏,厄贝沙坦组MMP-2表达较假手术组轻,但仍高于UUO组(P<0.05)。结论:...     

1,25-二羟维生素D3对单侧输尿管梗阻模型大鼠E-钙黏素表达的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3对单侧输尿管梗阻大鼠E-钙黏素表达的影响。方法清洁级SD大鼠96只随机分为正常组、模型组、假手术组、干预组,各24只,模型组与干预组大鼠建立单侧输尿管梗阻模型,假手术组开腹后仅游离左输尿管。干预组于建模起给予1,25-二羟维生素D30.5μg/mL灌胃,1次/d,连用14d;余3组给予花生油1mL/d,1次/d,灌胃。4组分别于术后1,3,7,14d各处死6只大鼠,取左侧肾脏标本,观察肾脏病理改变及间质纤维化损害程度,免疫组织化学法检测4组大鼠E-钙黏素和转化生长因子-β1的表达情况。结果与对照组比较,模型组E-钙黏素阳性表达量减少,转化生长因子-β1表达增多（P〈0.01）;干预组E-钙黏素表达量增多,TGF-β1表达减少（P〈0.05）。肾小管间质病理损伤程度与E-钙黏素呈负相关（r=-0.833,P〈0.01）,与转化生长因子-β1呈正相关（r=0.806,P〈0.01）;E-钙黏素和转化生长因子-β1的表达间呈负相关（r=-0.871,P〈0.01）。结论 1,25-二羟维生素D3可能通过维持肾组织E-钙黏素的表达、抑制肾组织转化生长因子-β1的表达来减轻肾脏纤维化。     

特异性敲除Apelin基因对单侧输尿管梗阻小鼠肾间质纤维化的影响

目的观察多肽Apelin基因缺失对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾间质纤维化的影响,探讨在梗阻性肾病肾纤维化形成中Apelin的作用和可能机制。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Apelin基因敲除小鼠(KO)共20只,同时选取野生型小鼠(WT)20只,均为8周龄雄性C57BL/6J种系,采用随机数字表法分为:KO+Sham组、KO+UUO组、WT+Sham组、WT+UUO组,每组各10只。分别对小鼠行单侧输尿管结扎(UUO)或假手术(Sham)。术后2周将小鼠处死,取血浆和手术侧肾脏进行检测。采用Masson染色观察肾脏纤维化程度,免疫组织化学染色检测肾脏基质成分纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(Col-I)的分布和表达情况。采用Western blotting法检测肾小管上皮标志物E-钙黏素(E-cadherin)、间充质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),以及致纤维化细胞因子--转化生长因子-β1(TGF-β1)及其受体TGFβ-R1的蛋白表达量。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血浆肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平。结果KO+UUO组小鼠肾脏可见明显的肾小管萎缩和肾间质纤维化,基质成分FN和Col-I表达量显著升高。WT+UUO组小鼠肾脏的纤维化程度和基质的表达量均低于KO+UUO组,差异具有统计学意义(P<0.05)。KO+Sham组和WT+Sham组肾脏无明显的纤维化改变和基质的沉积。KO+UUO组小鼠,可见显著的肾小管上皮-间充质转分化(EMT)表现,E-cadherin减少,α-SMA增多,TGF-β1和TGFβ-R1受体的表达量也明显升高。与KO+UUO组相比,WT+UUO组肾小管上皮E-cadherin的表达较多,α-SMA、TGF-β1和TGFβ-R1受体的表达均较低,差异具有统计学意义(P<0.05)。而WT+Sham组和KO+Sham组小鼠上述标志物的表达趋于正常水平。KO+UUO组小鼠血浆Cr、BUN的水平最高,WT+UUO组小鼠上述标志物的水平均低于KO+UUO组,差异具有统计学意义(P<0.05)。KO+Sham组小鼠血浆Cr、BUN与WT+Sham组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Apelin在正常状态下对肾功能无明显影响,但在输尿管梗阻状态下其基因缺失可能是引起肾间质纤维化加重的因素。     

NGAL在肾间质纤维化不质阶段的表达及意义

目的动态观测单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾组织中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白分子（NGAL）的表达变化,探讨NGAL在肾小管间质纤维化发展中的作用机制。方法48只SPF级雄性SD大鼠随机分为UUO模型组及假手术（SOR）组,每组24只,UUO组行左侧输尿管梗阻术,SOR组仅游离左侧输尿管不结扎。术后第1、4、7、14天分别处死每组6只大鼠,取左。肾行HE和Masson染色,并用免疫组化ELiVision^TM—plus法检测肾组织NGAL的表达。结果HE、Masson染色切片示：UUO组间质损伤指数与肾纤维化程度在术后不同时间点明显高于SOR组（P〈0．05）。免疫组化结果显示：SOR组大鼠肾组织中肾小管有一定量NGAL表达,UUO组术后第l天NGAL表达显著升高,第4天与其相比,差异无统计学意义,术后第7天表达量下降,术后第14天时明显低于第7天（P〈0．05）,但仍高于SOR组（P〈0．05）。结论实验大鼠梗阻侧肾组织中NGAL的表达在梗阻早期明显上升,并保持一定高表达状态,但随着梗阻时问延长而下调,提示NGAL可能在肾间质纤维化早期起负向调节作用。     

柚皮素对单侧输尿管梗阻致肾间质纤维化大鼠 KIM-1表达水平的影响

目的：观察柚皮素对单侧输尿管梗阻致大鼠肾间质纤维化肾损伤因子-1（KIM-1）表达水平的影响。方法将24只SD 大鼠随机分为假手术组（Sham 组）、模型组（UUO 组）、柚皮素组（Nar 组）,每组8只。UUO 组及 Nar 组行左侧输尿管结扎术, Sham 组只游离但不结扎和剪断输尿管。造模后分别给予生理盐水、柚皮素25 mg/（kg·d）。14 d 后处死大鼠,处死前收集24 h尿液,ELISA 法检测大鼠尿液 KIM-1水平,取梗阻侧肾制作标本,行 HE 及 Masson 染色,光镜下观察肾间质纤维化程度并半定量对肾小管间质损伤指数进行积分;免疫组化法检测肾间质 KIM-1的表达。结果与 Sham 组比较,UUO 组肾小管间质损伤指数（TDI）升高,差异有统计学意义（P ＜0．05）,尿液、肾组织中 KIM-1水平均升高,差异也有统计学意义（P ＜0．05）。与 UUO 组比较,Nar 组 TDI 降低,差异有统计学意义（P ＜0．01）,尿液、肾组织中 KIM-1水平降低,差异有统计学意义（P ＜0．05）。相关性分析示24 h 尿液及肾组织 KIM-1水平与 TDI 呈正相关（r 分别为0．862、0．866,P 均小于0．01）。结论柚皮素可减轻肾间质纤维化,降低 KIM-1的表达。     

1,25-二羟维生素D3对单侧输尿管梗阻模型大鼠E-钙黏素表达的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3对单侧输尿管梗阻大鼠E-钙黏素表达的影响。方法清洁级SD大鼠96只随机分为正常组、模型组、假手术组、干预组,各24只,模型组与干预组大鼠建立单侧输尿管梗阻模型,假手术组开腹后仅游离左输尿管。干预组于建模起给予1,25-二羟维生素D30.5μg/mL灌胃,1次/d,连用14d;余3组给予花生油1mL/d,1次/d,灌胃。4组分别于术后1,3,7,14d各处死6只大鼠,取左侧肾脏标本,观察肾脏病理改变及间质纤维化损害程度,免疫组织化学法检测4组大鼠E-钙黏素和转化生长因子-β1的表达情况。结果与对照组比较,模型组E-钙黏素阳性表达量减少,转化生长因子-β1表达增多(P<0.01);干预组E-钙黏素表达量增多,TGF-β1表达减少(P<0.05)。肾小管间质病理损伤程度与E-钙黏素呈负相关(r=-0.833,P<0.01),与转化生长因子-β1呈正相关(r=0.806,P<0.01);E-钙黏素和转化生长因子-β1的表达间呈负相关(r=-0.871,P<0.01)。结论 1,25-二羟维生素D3可能通过维持肾组织E-钙黏素的表达、抑制肾组织转化生长因子-β1的表达来减轻肾脏纤维化。     

银杏达莫对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化中TGF-β_1表达的影响

目的研究银杏达莫对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化的作用及作用机制。方法通过单侧输尿管结扎,建立梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化模型,将其随机分成对照组和银杏达莫干预组。用免疫组化半定量分析的方法分别检测术后2周、3周、4周各组大鼠TGF-β1表达的水平。结果随梗阻时间的延长,银杏达莫干预组大鼠TGF-β1表达的水平较对照组明显降低。结论银杏达莫能延缓肾间质纤维化的进展,其机制之一是抑制TGF-β1的表达。     

分泌型Klotho蛋白抑制肾间质纤维化的机制研究

目的 研究分泌型Klotho蛋白抑制肾间质纤维化的机制,为治疗慢性肾脏病提供理论基础和新思路。方法 通过单侧输尿管梗阻（UUO）诱导C57BL/6小鼠肾纤维化,并分5组处理：假手术[Sham+磷酸盐缓冲液（PBS）]组、模型（UUO+PBS）组、UUO+Klotho组、UUO+Klotho+胰岛素组、UUO+Klotho+胰岛素样生长因子-1（IGF-1）组。检测小鼠左肾组织活性氧水平,并用HE及Masson染色评估肾脏病理改变及纤维化程度。实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法以及免疫荧光化学检测肾组织中超氧化物歧化酶2 （SOD2）、纤连蛋白和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达水平,此外用蛋白免疫印迹法检测磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、AKT、磷酸化磷脂酰肌醇（-3）激酶（p-PI3K）、PI3K、胰岛素受体底物-1（IRS-1）蛋白表达水平。结果 成功建立了UUO小鼠模型。与UUO+PBS组比较,UUO+Klotho组小鼠肾组织的纤维化缓解（P <0.001）,且肾纤维化标志物纤连蛋白和α-SMA mRNA及蛋白的表达降低（P均 < 0.001）,保护因子SOD2 mRNA及蛋白表达升高（P均 < 0.001）。胰岛素及IGF-1可激活肾组织IRS-1/PI3K/AKT通路并破坏Klotho对肾脏的保护作用（P均 < 0.001）。结论 Klotho通过抑制胰岛素下游IRS-1/PI3K/AKT信号通路从而缓解肾脏的纤维化。