甜菜碱的提取分离及测定方法研究进展

通过总结甜菜碱的提取、分离及测定方法的研究进展,为甜菜碱本身药理作用及其相关中药有效成分的深入研究提供参考。甜菜碱的提取方法大致可分为水提和醇提;分离方法主要有薄层层析法、离子交换法;含量测定方法多样,高效液相色谱法操作简便、高效。     

银杏叶中有效成分的提取及鉴定

目的：研究银杏叶有效成分的提取方法。方法：采用正交试验研究提取的最佳条件。提取的银杏叶浸膏,用薄层色谱法及紫外光谱法分离鉴定。结果：薄层色谱法分离所提取的银杏双黄酮的Rf值与日本资料报导的相一致;再经对光谱鉴定其浸膏中的银杏双黄酮类与银杏叶制品天力晶相一致,结论：根据研究的最佳提取条件能有效地提取出争杏叶中的银杏双黄酮类物质。     

丹参酮ⅡA的提取与分离

目的建立丹参中有效成分丹参酮IIA的提取与分离方法。方法用乙醇作为溶剂,采用超声波提取技术,对中药丹参中的脂溶性有效成分总丹参酮进行了提取,然后利用硅胶柱层析技术对总丹参酮进行了分离,得到了其中三种有效成分丹参酮I、丹参酮IIA和隐丹参酮结晶。结果经浓硫酸显色反应和薄层色谱定性鉴定;紫外光谱和高效液相法确定了丹参酮IIA的纯度。结论此方法制得的丹参酮IIA纯度较高,且简单易行,是适用于工业化生产的有效方法。     

车前子苷的提取分离

目的：从中药车前子寻找特异性有效成分。方法：在药理筛选和高效液相色谱指纹图谱识别的基础上进行色谱层析。结果：确定车前子的醋酸乙酯部位具有镇咳、祛痰的作用，并从中分离出具有该作用的化合物—车前子等。结论：采用药理实验和高效液相色谱指纹图谱指导下的提取分离对寻找有效成分有重要意义。     

白鲜皮主要成分分离

目的：利用柱层析和高效液相在酒精提取的白鲜皮氯仿层中分离梣酮、黄柏酮、白鲜碱。方法利用柱色谱分离手段分离梣酮、黄柏酮、白鲜碱,之后用核磁、高效液相色谱等方法进行验证。结果所提取物质谱图与相关文献一致鉴定为梣酮、白鲜碱、黄柏酮。结论分离方法可行。     

丁香油提取方法研究

目的：在几种常规提取方法中筛选出提取丁香挥发油的工艺。方法：采用高效液相色谱法对丁香酚进行含量测定,确定丁香油的提取工艺。结果：丁香油的提取方法为乙醇回流提取法。结论：采用高效液相色谱法能准确测定丁香酚的含量,进而确立丁香油的提取方法。     

益母草中阿魏酸的分离和色谱鉴定

目的 自益母草中提取、分离出“阿魏酸”,并对其进行色谱鉴定。方法 提取出益母草中的有机酸成分,采用制备薄层分离出“阿魏酸”,再采用薄层色谱法、高效液相色谱法对该成分进行鉴定。结果 自益母草中所分离出的“阿魏酸“的薄层色谱和高效液相色谱图谱与阿魏酸对照品的一致。结论 初步确定益母草中含有游离的阿魏酸。     

高效液相色谱串联质谱法鉴定山银花水提取液的化学成分

目的建立快速、准确分析山银花水提取液的化学成分的高效液相色谱串联质谱方法。方法采用水为溶剂加热回流提取法提取山银花药材,提取液采用高效液相色谱串联质谱法对其主要的化学成分进行分离和鉴定。结果在负离子模式下,21个主要的化学成分得到了较好的分离,其中16个通过串联质谱进行了结构鉴定,10个通过对照品得到了确证。结论高效液相色谱串联质谱法可有效用于山银花药材的化学成分的分析鉴定。     

某中药制剂中掺加物盐酸普罗帕酮的鉴定及其含量测定

目的对某中药制剂中掺加物盐酸普罗帕酮进行分离鉴定，并对其进行含量测定。方法用柱层析法分离纯化掺加物盐酸普罗帕酮，用化学方法、色谱法及光谱法进行鉴定，采用高效液相色谱法确定其掺加量。该液相色谱法采用ApolloC18色谱柱，以甲醇-0．01mol·L^-1磷酸氢二氨溶液（3：1）为流动相，流速1.0ml·min^-1，检测波长248nm。结果该中药制剂中含有盐酸普罗帕酮成分，每g含盐酸普罗帕酮4mg。结论用化学方法、色谱法及其光谱法多种方法确证了该中药制剂中掺加了盐酸普罗帕酮，用高效液相色谱法确认其含量，亦为药品打假提供有益思路及方法上的借鉴。     

不同提取方法对蟾酥有效成分的影响

目的：考察无水乙醇、80％乙醇、甲醇等溶剂和回流提取法、超声提取法对蟾酥中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基成分的提取差异。方法：采用高效液相色谱法对不同溶剂提取得的蟾酥样品进行测定。结果：不同溶剂和提取方法对蟾酥有效成分提取存在明显影响，影响大小为：加热回流〉超声，80％乙醇〉甲醇〉无水乙醇〉氯仿〉二氯甲烷〉乙酸乙脂。结论：提取工艺对蟾酥有效成分存在影响，以80％乙醇对蟾酥药材进行加热回流提取效率最高。     

骆驼刺中异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷对照品的制备研究

目的建立骆驼刺中异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷对照品的制备分离方法。方法取骆驼刺药材醇提浸膏的正丁醇萃取部分,用硅胶柱色谱分离,依次用氯仿-甲醇（90：10～70：30）、氯仿-甲醇-水（70：30：10～60：40：10）梯度洗脱,收集异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷富集流份,继续采用凝胶柱色谱及制备HPLC进行分离纯化,通过NMR、MS等波谱方法鉴定化合物结构,经TLC、HPLC等技术进行质量分数检测。结果从骆驼刺中制备分离的异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷对照品,质量分数〉99％。结论本法得到的异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷对照品符合中药化学对照品的相关技术要求,为骆驼刺药材和的骆驼刺成方制剂的质量控制及药效物质基础研究提供化学对照品。     

检测中草药提取物中黄曲霉毒素的高灵敏方法

目的建立中草药提取物中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的高灵敏测定方法。方法样品经提取和过滤后用免疫亲和柱净化和衍生,然后采用不同比例(15%~30%)乙腈/水梯度洗脱,用具荧光检测器的高效液相色谱仪检测。结果检出限:黄曲霉素G1为0.09 ppb;B2为0.02 ppb;B1为0.03 ppb;G2为0.04 ppb,均低于文献报道的检出限,样品加标回收率为90%~103.2%。结论该方法简单、快速、准确、灵敏度高,可用于中药中黄曲霉毒素含量的测定。     

乳癖康胶囊提取工艺研究

目的：筛选研究乳癖康胶囊的最佳提取工艺。方法：采用正交设计试验法,以橙皮苷含量和干膏得率为指标,以HPLC为测定方法。结果：乳癖康胶囊最佳提取工艺条件是：加10倍量水,提取2次,每次2h。结论：该工艺稳定可靠,符合传统中医药理论和实际生产情况。     

Screening of immune cell activators from Astragali Radix using a comprehensive two-dimensional NK-92MI cell membrane chromatography/C18 column/time-of-flight mass spectrometry system

Astragali Radix (AR) is a clinically used herbal medicine with multiple immunomodulatory activities that can strengthen the activity and cytotoxicity of natural killer (NK) cells. However, owing to the complexity of its composition, the specific active ingredients in AR that act on NK cells are not clear yet. Cell membrane chromatography (CMC) is mainly used to screen the active ingredients in a complex system of herbal medicines. In this study, a new comprehensive two-dimensional (2D) NK-92MI CMC/C₁₈ column/time-of-flight mass spectrometry (TOFMS) system was established to screen for potential NK cell activators. To obtain a higher column efficiency, 3-mercaptopropyltrimethoxysilane-modified silica was synthesized to prepare the NK-92MI CMC column. In total, nine components in AR were screened from this system, which could be washed out from the NK-92MI/CMC column after 10 min, and they showed good affinity for NK-92MI/CMC column. Two representative active compounds of AR, isoastragaloside I and astragaloside IV, promoted the killing effect of NK cells on K562 cells in a dose-dependent manner. It can thus suggest that isoastragaloside I and astragaloside IV are the main immunomodulatory components of AR. This comprehensive 2D NK-92MI CMC analytical system is a practical method for screening immune cell activators from other herbal medicines with immunomodulatory effects.     

铁脚草的化学成分研究

目的：研究铁脚草的化学成分。方法：采用90%乙醇冷渗漉提取,经硅胶柱色谱和凝胶柱色谱Sephadex LH-20进行分离纯化,并采用理化方法和波谱数据分析进行结构鉴定。结果：从铁脚草的90%乙醇提取物中分离并鉴定7个化合物,分别为α-菠菜甾醇、香草醛、槲皮素、木栓酮、丁香脂素、齐墩果酸与α-菠甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。结论：化合物香草醛、槲皮素、木栓酮、丁香脂素、齐墩果酸与α-菠甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷均为首次从该植物中分离得到。     

山茱萸中马钱素标准品的制备研究

目的测定山茱萸药材中马钱素的含量,以控制其产品质量。方法将山茱萸药材的95%乙醇提取物利用大孔吸附树脂富集、硅胶柱色谱、制备高效液相色谱法分离纯化,通过13CNMR波谱学方法对其分离产物进行结构鉴定,确定化合物结构,同时用归一化法定量。结果质量分数均大于98%。结论此方法简便可行,所得马钱素可作为中药定性、定量分析使用的对照品。     

排脓散活性成分对小鼠的抗炎作用及其配伍的定量研究

目的：观察排脓散各药味部分活性成分的抗炎作用,并对其不同配伍进行定量研究。方法：选择排脓散中的部分活性组分芍药苷、柚皮苷加新陈皮苷、桔梗皂苷,用正交设计法安排实验,剂量两水平分别为用药和不用药。选择醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进为急性炎症模型,以阿司匹林和生理盐水为对照,以对毛细血管通透性影响作为炎症指标,定量分析各药味活性成分的抗炎作用及相互作用。结果：全方活性成分组合（柚皮苷加新陈皮苷、芍药苷、桔梗皂苷）对醋酸所致炎症渗出的抑制效果与阿司匹林组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）,药效模拟结果提示为最大效应组合。与生理盐水组比较,排脓散中各药味活性成分及其他不同配伍组合均不同程度抑制炎症的渗出（P〈0．01）。复方配伍的预测效应区间为0．115-0．170（光密度值）,全部活性成分组合呈现协同作用;各活性成分对复方的贡献按重要程度排列为：芍药苷〉柚皮苷加新陈皮苷〉桔梗皂苷。结论：排脓散各药味活性成分对抑制小鼠腹腔毛细血管通透性均呈正性作用,芍药苷贡献度最大,全方活性成分组合抑制作用最强。采用正交模拟法对复方配伍进行定量分析,有可能挖掘出更多的复方配伍信息。     

不同炮制方法对连翘中连翘苷及连翘酯苷A含量的影响

目的考察蒸汽、水煮杀青方式与生晒对于连翘中连翘苷、连翘酯苷A含量的影响,为产地加工和药材质量控制提供指导。方法采用高效液相色谱法,对山西陵川和河南辉县采集的10份样品分别进行检测,以R软件对不同炮制组连翘苷和连翘酯苷A含量进行统计学分析。结果除生晒组连翘苷含量低于《中华人民共和国药典》规定外,其余各组均合格;蒸汽、水煮组有效成分含量明显高于生晒组,具有统计学意义(P0.001)。结论连翘产地加工可以水煮杀青作为蒸制加工的替代方式,生晒致使有效成分含量大幅降低而严重影响药材质量。     

关于控制中药饮片质量标准的思考

中药饮片质量优劣对于保证临床用药安全至关重要,控制中药饮片质量标准具有重要意义。临床疗效是建立中药饮片质量标准的基础;中药饮片的外观指标、洁净度指标、水分含量指标、辅料质量指标、有效成分含量指标、有毒成分限量指标及含菌数指标的制定,对于控制中药饮片质量指标具有指导意义。     

钩藤药材中钩藤碱含量测定方法的建立

目的：建立钩藤药材钩藤碱含量HPLC测定方法。方法：分别对HPLC的色谱柱、流动相、检测波长等色谱条件进行摸索,对样品索式、回流和超声提取方法进行摸索,并采用正交设计的方法考察超声提取的药材破碎度、溶剂浓度、溶剂量和时间。结果：HPLC色谱条件为色谱柱：Gemini C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相∶甲醇—水（含0.002 mol/L三乙胺,冰乙酸调pH至7.5）（64∶36）,流速：1.0 mL/min,检测波长：254 nm。样品供试液制备方法为：药材破碎度为过60目筛的粉末,提取溶剂为75%甲醇,溶剂加入量为15 mL,超声处理40 min。该方法钩藤碱在0.020 9-1.672 0μg范围内有良好线性关系,平均回收率为98.96%,RSD=0.69%（n=6）。结论：建立的含量测定方法简易、准确,可作为钩藤药材钩藤碱含量测定方法。