PCR检测HBVDNA的初步研究

在我国 ,ＨＢＶ是引起病毒性肝炎的主要病原之一。目前对其感染导致的乙肝特异性诊断仍以ＥＩＡ或ＲＩＡ为主。近年来 ,国内外学者一直尝试利用ＲＣＲ法检测ＨＢＶ。本文设计了一对ＨＢＶ引物 ,并对之检测ＨＢＶ的扩增产物进行了探讨。1　材料与方法1.1　标本来源用于确定ＰＣＲ产物分子量的ＨＢＶ阳性血清(ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＤＮＡＰ、ＨＢＶＤＮＡ均阳性 ) ,及ＨＢＶＤＮＡ阴性血清由北京医科大学肝病研究所惠赠。用于临床考核的ＨＢｅＡｇ阳性血清的来自本院门诊及住院病人 ,阴性血清取自健康献血员。1.2　引物通过计算机检索Ｇｅ…     

HBeAg阴性的慢性乙型肝炎血清HBV-DNA定量检测及意义

目的　为探讨ＨＢｅＡｇ 阴性ＣＨ－ Ｂ 患者血清ＨＢＶ－ ＤＮＡ 定量检测的意义。方法　应用定量ＰＣＲ法对经肝穿活检确诊的５２ 例ＨＢｅＡｇ 阴性,３３ 例ＨＢｅＡｇ 阳性ＣＨ－ Ｂ 血清进行了ＨＢＶ－ ＤＮＡ 含量检测,并将ＨＢｅＡｇ 阳性与阴性患者ＨＢＶ－ ＤＮＡ 含量、ＨＢｅＡｇ 阴性ＨＢＶ－ ＤＮＡ 高水平与低水平患者肝脏病理损害分别进行了比较。结果　ＨＢＶ－ ＤＮＡ 含量ＨＢｅＡｇ 阳性患者显著高于阴性患者,ＨＢｅＡｇ 阴性ＨＢＶ－ ＤＮＡ 高水平患者肝脏病理损害明显重于低水平患者（ 均Ｐ＜ ００５） 。结论　提示血清ＨＢｅＡｇ 阳性;确为判断ＨＢＶ 复制的良好指标; ＨＢｅＡｇ 阴性ＨＢＶ－ ＤＮＡ 高水平者,尤以重视,及时给予抗病毒等治疗实属必要。     

非放射性分子杂交法检测HBV感染

用非放射性标记的ＨＢＶ－ＤＮＡ探针检测３７１份至少有一项ＨＢＶ免疫学标志阳性血清和５１０份对照血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果表明：５１０份对照血清和７９份仅抗－ＨＢｓ阳性血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ均为阴性，８２份ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阳性血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率为１００％，１０３份ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阴性血清的检出率为７９．６％，７６份ＨＢｓＡｇ阳性。ＨＢｅＡｇ阴性、但抗－ＨＢｅ阳性血清的检出率为８０．３％，２９２份ＨＢＶ不同感染阶段血清总检出率为７５％。非放射性分子杂交法可直接检测出ＨＢＶ的复制，由于该法亦可定量，故还可用于判断血清传染程度和血清病毒的含量。     

晚期原发性肝癌患者血清PCR－HBV DNA的意义

目的：为进一步研究ＨＢＶ感染与原发性肝细胞癌的关系．方法：ＥＬＩＳＡ法检测血清中ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ，抗－ＨＢｃ和抗－ＨＢｓ；ＰＣＲ检测血清ＨＢＶＤＮＡ．结果：３７例晚期原发性肝癌患者血清ＨＢ－ｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ阳性者分别为１７例（４５．９５％），４例（１０．８１％），１６例（４３．２４％）和９例（２４．３２％），而抗－ＨＢｓ全部阴性．聚合酶链式反应检测ＨＢＶＤＮＡ，１８例（４８．６９％）阳性，非常显著地高于ＨＢｅＡｇ检出率（Ｐ＜０．０１）．抗－ＨＢｅ阳性中有７例ＰＣＲ－ＨＢＶＤＮＡ阳性．ＨＢＶ总感染率８９．１９％．结论：提示原发性肝癌发生与ＨＢＶ感染有关．     

乙肝血清免疫标志物与HBV-DNA的关系探讨

探讨乙肝血清免疫标志物与ＨＢＶ－ＤＮＡ之间的关系。方法：用射免疫方法检测乙肝血清免疫标志物,并与用聚合酶链反应检测ＨＢＶ－ＤＮＡ相对照。结果：在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ均阳性组,ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ均阳性组,ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ均阳性,ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｃ均阳性组,ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ均阳性组中,ＰＣ检出率分别为９４．３％、１００％、３０．６％、５５％、和９．１％。结     

聚合酶链反应检测血清HBVDNA及其临床意义

应用聚合酶链反应检测２８１例各型乙型肝炎血清ＨＢＶＤＮＡ，检出率为６１．９％。ＨＢｅＡｇ阳性其ＨＢＶＤＮＡ检出率为９０．６％，说明ＨＢＶＤＮＡ与ＨＢｅＡｇ有密切关系；抗ＨＢｅ阳性与抗ＨＢｓ阳性其ＨＢＶＤＮＡ检出率分别为３８．３％与３３．３％，提示ＨＢＶＤＮＡ并非完全消失，只是含量减少；ＨＢＶ－Ｍ均阴性者其ＨＢＶＤＮＡ检出率为５５．８％，表明在ＨＢＶ－Ｍ阴性的人群中亦可有ＨＢＶ感染。     

HBV DNA在HBsAg阴性的原发性胆管细胞性肝癌石蜡包埋肝组织中的检出

对２４例酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）ＨＢｓＡｇ阴性的原发性胆管细胞性肝癌的石蜡包埋肝组织，应用ＰＣＲ－ＥＢ法检测了乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，并与ＥＬＩＳＡ法检测的血清免疫学标志物（乙肝５项：ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ）结果进行对比。结果显示血清学乙肝５项均阴性的及ＨＢｓＡｇ阴性但其它４项中至少有１项阳性的胆管细胞性肝癌石蜡包埋肝组织中，ＨＢＶＤＮＡ阳性检出率分别为３８．９％和４５．８％，证实ＨＢｓＡｇ血清学阴性者肝组织中仍有ＨＢＶＤＮＡ存在     

聚合酶链反应在乙型肝炎病毒感染诊断中的意义

用ＰＣＲ法检测１６６例乙型肝炎病毒感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果显示：ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性，ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＥｂＡｇ阳性组，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为９６．２％、２８．６％、９３．５％、ＨＢｓＡｇ单项阳性者中，检出ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性７８例（孕妇占１９．２％），阳性率８１．３％。另外，在２０例血清标志物全部阴性对照组中发现ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１例，阳性率５．     

应用聚合酶链反应检测乙肝患者外周血单个核细胞HBV.DNA的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测６０例乙型肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及血清ＨＢＶ．ＤＮＡ阳性率分别为７６．７％和４５％，尤其在急性乙肝（ＡＨ）或抗ＨＢｅ阳性或抗ＨＢｓ阳性的患者中，ＨＢＶ．ＤＮＡ在ＰＢＭＣ中检出率显著高血清，提示ＨＢＶ．ＤＮＡ普遍存在乙肝患者甚至ＨＢｓＡｇ转阴的病人ＰＢＭＣ中，可能是肝脏病病变反复活动及病毒重复感染的来源。因此也导致既往有ＨＢＶ感染史的ＨＢｓＡｇ阴性献血员传     

乙型肝炎病毒DNA和血清标志物与肝癌相关性检测分析

目的 为了解乙型肝炎病毒ＨＢＶ ＤＮＡ和血清标志物与肝癌的关系。方法 对经影像及甲胎蛋白阳性诊断确诊的５８例肝癌患者，采用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ技术，分别进行了ＨＢＶ ＤＮＡ和血清标志物检测。结果 肝癌患者乙型肝炎标志物阳性为９４．８２％，标志物ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性组占２２．４１５。ＨＢＶ ＤＮＡ检测８例全部阳性；ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ阳性组占５５．１７％，ＨＢＶ ＤＮＡ检测１５例，     

220例适龄心肝炎患者血清HBV—DNA和HBVM的对比分析

本文对２２０例疑似肝炎患者进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＢＶＭ检测，并与２０例健康人作对照。结果ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及ＨＢｃＡｂ均阳性７２例中，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者有６９例（９５．８％）；２５例ＨＢｅＡｇ阴性、ＨＢｅＡｂ阳性９例单纯ＨＢ阳性，６例ＨＢｓＡｂ一及１０８例ＨＢＶＭ均阴性中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性阳性率分别为５２．０％、６６．７％、３３．３％和２５．０％，结果还表明，两各方法不可替代。     

PCR与ELISA法检测乙肝血清标志物对比分析

用ＰＣＲ技术检测４８例肝病患者，５５例非肝病患者血清ＨＢＶＤＮＡ，ＥＬＩＳＡ法检测其血清五项标志物，肝病组ＰＣＲ阳性率为３１．３％，非肝病组ＰＣＡ阳性率为１１．４％。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｂ阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ１００％阳性；ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｂ阳性、ＨＢｅＡｂ阳性或阴性组ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性５０％；单项ＨＢｓＡｂ阳性组ＨＢＶＤＮＡ阳性２０％；五项标志物全阴ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性４．７％。结果表明，ＰＣＲ技术特异性强、敏感度高，但两种方法各有所长，不宜取代。     

PCR检测HBV—DNA对HBsAg无症状携带者传染性的监测

用多聚酶链反应和斑点杂交技术检测了５０例ＨＢｓＡｇ无症状携带者血清中ＨＢＶＤＮＡ，检出率分别为５０％和５８％。抗－ＨＢｃ、抗－ＨＢｅ和ＨＢｅＡｇ阳性者ＨＢＶＤＮＡ的检出率高于阴性者．单项ＨＢｓＡｇ阳性无症携带者ＨＢＶＤＮＡ在血中呈不同程度地波动，其排毒情况无明显规律可循。     

广西孕妇乙型肝炎病毒宫内感染及其危险因素的研究

目的：为深入揭示乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）宫内感染及其危险因素。方法：采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）结合酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）对广西１１６例ＨＢｓＡｇ阳性和５２例ＨＢｓＡｇ阴性孕妇外周血及其引产胎儿胎心血进行ＨＢＶ血清学樗狐和ＨＢＶ ＤＮＡ检测。结果：ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ双阳性、ＨＢＶ ＤＮＡ阳性孕妇肺儿ＨＢＶ ＤＮＡ检出率（５１．３％、９０．２％、８３．８％）均分别显著高于对照组     

湖南地区输血传播肝炎病毒感染者的初步观察

为观察湖南地区输血传播病毒（ＴＴＶ）的感染情况,合成了特异性引物,采用巢式聚合酶链反应两次扩增血清ＴＴＶＤＮＡ。共检测７０例肝炎病人血清和４３例献血员血清。结果显示：在３８例血清ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ阴性的病人中,１０例ＴＴＶＤＮＡ阳性（２６．３％）,ＡＬＴ平均为（４５２±２３６）Ｕ·Ｌ＾－１;３２例血清甲－戊型和庚型肝炎标志物的阴性的病人中,１２例ＴＴＶＤＮＡ阳性（３７．５％）     

定量PCR检测慢性HBV感染者血清HBV-DNA含量

目的 了解不同慢性乙型肝炎病毒感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量并探讨其临床意义 。方法 应用荧光能量转移定量聚合酶链反应检测２４５例不同临床类型慢性ＨＢＶ感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量。结果 ＨＢｅＡｇ阳性患者ＨＢＶ－ＤＮＡ含量显著高于ＨＢｅＡｇ阴性／抗－ＨＢｅ阳性患者的含量;     

生物素探针分子杂交试验检测乙型肝炎患者血清HBV－DNA的意义

用生物素探针分子杂交试验检测６１７例临床各类型乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，总阳性率为３５．６６％（２２０／６１７），各临床类型间无差异性。ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率：在ＨＢｅＡｇ阳性患者中为６７．０２％（１８７／２７９），而ＨＢｅＡｇ阴性患者中为９．７６％（３３／３３８）；在ＨＢｓＡｇ阳性患者中为３９．１５％（２１１／５３９），而ＨＢｓＡｇ阴性患者中为１１．５４％（９／７８）；抗－ＨＢｅ阳性者为８．１７％（１７／２０８）；抗－ＨＢｓ阳性者为１２．５％（５／４０）。２３例非乙型肝炎患者均未检出血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。检测结果表明本方法是一种快速、简便、特异、敏感、无同位素污染的方法。     

乙肝病毒复制是慢性肝病活动的直接原因

聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测４８例ＨＢｓＡｇ（＋），抗ＨＢｅ（＋）慢性肝病患者血清ＨＢＶＤＮＡ，３８例阳性，１０例阴性．１０例ＰＣＲ阴性产物用狄高辛素标记探针进行斑点杂交，又检出６例ＨＢＶＤＮＡ阳性，ＨＢＶＤＮＡ总阳性率为９２％，ＨＢＶＤＮＡ阳性患者丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）水平均增高，而阴性患者ＡＬＴ在正常水平。结果表明，此类病人体内存在ＨＢＶ复制，导致病变持续活动甚至加重。     

PCR检测HBVDNA对HBsAg无症状携带者传染性的监测

用多聚酶链反应和斑点杂交技术检测了５０例ＨＢｓＡｇ无症状携带者血清中ＨＢＶＤＮＡ，检出率分别为５０％（２５／５０）和５８％（２９／５０）。抗－ＨＢｃ、抗－ＨＢｅ和ＨＢｅＡｇ阳性者ＨＢＶＤＮＡ的检出率高于阴性者。单，ＮＨＢｓＡｇ阳性无症状携带者ＨＢＶＤＮＡ在血中呈不同程度地波动，其排毒情况无明显规律可循。     

乙型肝炎血清学标志物阳性母亲初乳中HBV-DNA检测

目的探讨乙型肝炎血清学标志物阳性产妇的初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出与其血清中ＨＢＶ标志物携带状态的关系。方法对５１例乙型肝炎血清学标志物阳性产妇的血清及初乳，用酶免法检测ＨＢＶ－Ｍ，用ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与２０例正常组进行对照。结果发现母血中传播性大的３项标志物：乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、乙型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）及乙型肝炎核心抗体（抗－ＨＢＣ）中后两项易进入乳汁。３项阳性及ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ两项阳性产妇的初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率都高，而前者出现的例数更多（８／１０）。初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者母血中的ＨＢｅＡｇ均为阳性。结论对乙型肝炎血清学标志物阳性的产妇，最好直接检测其乳汁中的乙肝三项及ＨＢＶ－ＤＮＡ，以指导哺乳。