治疗性HPV疫苗的研究进展

人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)引起包括宫颈癌等在内的多种疾病,如何预防和治疗已为人们所关注.已上市的疫苗主要用于预防HPV的感染,对已感染HPV人群的治疗效果未做进一步研究,而目前临床治疗效果不够理想,因此利用治疗性疫苗通过免疫学方法治疗HPV引起的疾病逐渐成为研究的热点.以HPV E6和E7为靶抗原的治疗性疫苗研究开始较早,研究最为深入,已经取得了一定的进展.同时近年来的研究发现,HPV其他的蛋白如E2、E5、L1和L2等也可作为治疗性疫苗的候选靶抗原,并显示出较好的应用前景.     

人乳头瘤病毒疫苗研究进展

某些型别的乳头瘤病毒(HPV)是肛生殖道癌及恶性疾病的主要病因,特别是子宫颈癌.虽然HPV免疫原性差,但已证实免疫系统能控制HPV的扩散及所致疾病的进展,癌细胞不断表达的病毒致癌蛋白E6、E7是淋巴细胞攻击靶子.几种治疗性疫苗在实验动物中已成功触发细胞介导的免疫应答,人的I期临床试验也取得相似效果.     

共表达HPV16型E6和E7突变基因重组痘苗病毒的构建及其抗肿瘤免疫效果的观察

目的：构建用于子宫颈癌治疗的HPV16型E6和E7重组痘苗病毒实验性疫苗株，并对其抗肿瘤免疫效果进行初步评价。方法：以痘苗病毒为载体、利用同源重组技术构建共表达HPV16 E6和E7基因的重组痘苗病毒。该病毒免疫C57BL／6小鼠后，检测其免疫原性和抗移植瘤生长情况。结果：PCR结果显示，重组病毒VmE6E7的TK基因内插入了分别由痘苗病毒早晚期启动子H6和7．5K表达的ME6和ME7－1基因。动物实验结果表明，rVmE6E7在C57BL／6小鼠体内可诱发E6和E7特异性抗体产生，被免疫小鼠能够抵抗HPV16 E6E7转化的同系肿瘤细胞的攻击。结论：获得1株用于宫颈癌治疗的HPV16型实验疫苗株，为进一步研制人用HPV16型疫苗株奠定了基础。     

子宫颈癌治疗性疫苗研究进展

子宫颈癌为妇女最常见的恶性肿瘤之一,其与人乳头瘤病毒(HPV)密切相关.HPV早期基因E6、E7的持续表达是维持癌细胞转化状态所必须的.因此,E6、E7可作为宫颈癌治疗的靶点.目前,针对HPV E66、E7的治疗性疫苗已取得了较大进展.本文就近年来子宫颈癌治疗性疫苗的最新进展进行了综述.     

治疗性人乳头瘤病毒疫苗研究进展

人乳头瘤病毒是以表皮细胞为感染对象的小型DNA病毒,HPV感染与子宫颈癌的发生、发展有着十分密切的关系.宫颈癌位居女性恶性肿瘤的第二位,且呈逐年上升的趋势.已上市的疫苗主要用于预防HPV的感染,对已感染HPV人群的治疗效果欠佳,治疗性疫苗可以通过诱导特异性的细胞免疫应答,阻止甚至清除HPV感染引起的病变及肿瘤.动物实验和临床试验结果显示,治疗性HPV疫苗在治疗HPV感染相关疾病有重要作用.因此,治疗性HPV疫苗的研制及应用已成为近年来研究热点.     

表达HPV18E7E6的重组痘苗病毒构建及免疫效果的初步研究

目的 构建表达HPV18E7E6融合蛋白的重组痘苗病毒,并对E7E6蛋白的免疫原性进行研究.方法 将去除了转化活性的HPV18E6、E7基因融合,插入痘苗病毒重组质粒,通过同源重组构建表达HPV18E7E6的重组痘苗病毒,观察其免疫效果.结果 构建了表达E7E6融合蛋白的重组痘苗病毒,PCR鉴定及测序表明融合基因序列与设计相符,正确插入到痘苗病毒TK区域;Western-Blot检测表明该重组病毒能表达HPV18E7E6融合蛋白.免疫后的小鼠可产生E6、E7特异性抗体,但ELISPOT没检测到E7肽库刺激小鼠脾细胞产生分泌IFN-丫的阳性反应.结论 构建了一株表达HPV18E7E6融合蛋白的重组痘苗病毒,可以有效诱发小鼠产生针对E6、E7的体液免疫,但不能诱发产生相应的细胞免疫,为进一步研究不同动物模型中HPV18E6E7的细胞免疫特点提供了实验基础.     

人乳头状瘤病毒16型不同基因疫苗联合免疫的实验研究

目的 探索联合免疫策略在预防和治疗人乳头状瘤病毒16型（HPV16）相关肿瘤中的作用。方法 在C57BL／6动物模型中，观察了表达HPV16基因的融合蛋白L2E7疫苗和重组痘苗病毒mE67疫苗的不同联合免疫方式在预防和治疗HPV16相关肿瘤中的作用。用酶联免疫斑点（ELISPOT）和细胞毒T淋巴细胞（CTL）反应评价它们在诱发机体产生细胞免疫应答中的作用。结果 我们发现以HPV16 L2E7融合蛋白＋佐剂（CpG）初免，用重组痘苗病毒rVVmE67加强免疫的联合免疫方式在C57BL／6小鼠实验中可以有效预防和治疗HPV16相关肿瘤的攻击。ELISPOT可以检测到高水平的E749-57肽特异性，分泌IFN-γ的效应T细胞。CTL检测同样反应出这种联合免疫方式所诱发的CTL细胞可以有效识别并杀伤含HPV16E6／E7的靶细胞。结论 以HPV16L2E7融合蛋白＋CpG初免，用重组痘苗病毒rVVmE67加强的联合免疫策略可以有效防治HPV16相关肿瘤，为进一步研究提供了科学基础。     

共表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白的重组非复制型痘苗病毒构建及鉴定

目的构建共表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1、L2、E6、E7蛋白的非复制型重组痘苗病毒人用疫苗株。方法以痘苗病毒为载体、利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白的重组痘苗病毒并对其进行鉴定。结果该病毒在CEF细胞上连续传至第15代,经斑点杂交结果表明重组病毒基因组中有L1、L2、E6、E7基因插入;经WesternBlot检测,重组病毒能稳定表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白。结论非复制型重组痘苗病毒NTVJE6E7CKL1L2可作为预防和治疗HPV16相关肿瘤及其癌前病变候选疫苗。     

HPV与宫颈癌关系及疫苗研究进展

流行病学和病原学研究表明,人乳头瘤病毒(HV)感染是妇女发生宫颈癌重要的原因之一.HPV是无包膜的小型双链环状DNA病毒,不同基因型病毒对细胞的转化能力不同,其中HPV-16、18与子宫颈癌关系最密切.HPV诱发官颈癌的主要机制,是其E6和E7蛋白基因在宫颈细胞中的表达增加,产生的E6和E7蛋白两个癌蛋白分别与抑癌蛋白p53和pRb结合而诱导后两者降解.HPV疫苗包括预防性疫苗和治疗性疫苗两大类.本文对HPV感染与宫颈癌发生的关系、疫苗研究进展进行了系统的阐述.     

人乳头状瘤病毒DNA疫苗

人乳头瘤病毒 (HPV) ,尤其是HPV1 6型 ,是子宫颈癌的主要病原体。因此 ,通过引起病人适当的病毒特异性免疫反应可以预防或治疗HPV相关的子宫颈恶性肿瘤。在已经进行预防接种的个体中 ,包括L1和L2在内的HPV衣壳蛋白已经显示出能够产生对抗HPV颗粒抗体的抑制。此外 ,HPV致瘤性蛋白 ,例如E6蛋白和E7蛋白 ,在细胞转换的导入和维持方面是很重要的 ,在大多数包含HPV的癌症中它们也是共同表达的。它们为产生抗HPV感染和HPV相关肿瘤形成的治疗量的疫苗提供了理想的靶。针对这些蛋白的疫苗可能提供一个控制HPV相关恶性肿瘤的机会。拥有…     

HPV11型L2E7融合蛋白的原核表达及其免疫效果观察

目的构建人乳头瘤病毒11型L2E7原核表达系统pET9aHPV11L2E7，并纯化蛋白进行小鼠免疫效果研究。方法从尖锐湿疣组织中扩增人乳头瘤病毒11型12、E7基因片段，构建DET9aHPV11L2E7原核表达重组质粒并测序，在大肠埃希菌宿主菌BL21（DE3＋）中经IPTG诱导表达融合蛋白L2E7（553个氨基酸），经SDS—PAGE电泳和Western Blot进行鉴定。CM离子交换介质纯化蛋白免疫BALB／c小鼠，进行细胞免疫水平和体液免疫水平的检测。结果成功构建了pET9 aHPV11L2E7原核表达系统，纯化获得的HPV11L2E7蛋白免疫BALB／c小鼠后能检测到针对HPV11E7特异性的细胞免疫，血清中能检测到高效价抗HPV11L2E7抗体。结论纯化的HPV11L2E7融合蛋白能够引发特异性细胞和体液免疫反应，能作为尖锐湿疣免疫治疗候选疫苗。     

HPV与宫颈癌关系及疫苗研究进展

流行病学和病原学研究表明,人乳头瘤病毒（HV）感染是妇女发生宫颈癌重要的原因之一.HPV是无包膜的小型双链环状DNA病毒,不同基因型病毒对细胞的转化能力不同,其中HPV-16、18与子宫颈癌关系最密切.HPV诱发官颈癌的主要机制,是其E6和E7蛋白基因在宫颈细胞中的表达增加,产生的E6和E7蛋白两个癌蛋白分别与抑癌蛋白p53和pRb结合而诱导后两者降解.HPV疫苗包括预防性疫苗和治疗性疫苗两大类.本文对HPV感染与宫颈癌发生的关系、疫苗研究进展进行了系统的阐述.     

HPV感染对男性的危害与HPV疫苗接种对男性的保护

人乳头瘤病毒（HPV）是全球最常见的性传播病毒之一，可引起男性的生殖器疣、男性不育、口咽癌、肛门癌、阴茎癌等疾病，严重影响了男性的生活质量。目前，HPV疫苗在保护女性健康方面已经取得了巨大成就。近些年来，已有指南推荐男性注射HPV疫苗，并且它的有效性和安全性得到肯定。有研究表明，HPV疫苗对男性特别针对特殊人群具有保护作用。澳大利亚、美国等一些国家已经开展男性HPV疫苗的注射，男性HPV感染及其相关疾病的发病率有所下降。可见，男性接种HPV疫苗的益处已经很明确，提高男性HPV疫苗的覆盖率是一种趋势。     

HPV树突状细胞疫苗研究进展

人乳头瘤病毒(HPV)感染在人群中非常普遍，尚无有效预防和治疗办法。本文概述了以树突状细胞(DC)为基础的HPV疫苗研究现状，包括病毒蛋白及肽段负载的DC疫苗、HPV-DNA、RNA、病毒样颗粒刺激的DC疫苗及肿瘤细胞与DC融合疫苗等，并讨论了其在尖锐湿疣防治中的可能应用。     

子宫颈癌人乳头状瘤病毒疫苗的研究进展

宫颈癌是全世界妇女第三大常见肿瘤 ,每年大约有 3 70 0 0 0新诊断的病例 [1]。尽管目前临床上应用手术或放疗治疗早期宫颈癌治愈率已达 90 %以上 ,但对中晚期病人的治疗仍比较困难 ,还有 3 5%病人没有有效地治疗的办法而发展为持续性或转移性疾病。故对宫颈癌的治疗和预防需要发展更有效的或辅助治疗。在所有宫颈癌细胞中几乎都有人乳头瘤病毒(HPV) DNA和病毒转化蛋白的表达 ,表明这一病毒在疾病的发病中起重要作用。高危 HPV的感染是宫颈癌的必然起因 ,这为发展治疗性疫苗来治疗早期和晚期宫颈癌提供了的机会。HPV预防性疫苗的发展也…     

大肠癌组织中人乳头瘤病毒16,18型感染的初步研究

迄今为止,已发现至少67种人乳头瘤病毒(HPV),其中大约只有20种与人类疾病有关。HPV 16,18型属于“高危险”组中的两型,与某些有高度恶变倾向的良性肿瘤和恶性病变有关。目前有关大肠癌中HPV感染的报道极少。我们对大肠癌中HPV 16,18型感染进行了初步探讨。 选用HPV 16 E6片段、HPV 18 E6/E7片段序列作为引物,对50例大肠癌组织(30例新鲜组织,20例石蜡包埋标本)中HPV 16,18分别进行PCR扩增,电泳后观察结果。同时,用Dig-DNA检测试剂盒(Boehringer Mannheim Inc.)标记HPV 16 E6、HPV 18 E6/E7片段     

人乳头状瘤病毒DNA疫苗

人乳头瘤病毒(HPV)，尤其是HPVl6型，是子宫颈癌的主要病原体。因此，通过引起病人适当的病毒特异性免疫反应可以预防或治疗HPV相关的子宫颈恶性肿瘤。在已经进行预防接种的个体中．包括L1和L2在内的HPV衣壳蛋白已经显示出能够产生对抗HPV颗粒抗体的抑制。此外，HPV致     

腺病毒伴随病毒表达载体表达人乳头瘤病毒18型E6E7基因构建及其转化作用的鉴定

目的：探讨人乳头瘤病毒（HPV）的E6E7基因在细胞恶性转化中所起的作用。方法：将人乳头瘤病毒（HPV）的E6E7基因克隆至腺病毒伴随病毒表达载体中，通过包装的重组病毒感染，将E6E7基因导入并整合到永生293细胞的基因组中。结果：本研究成功地构建了HPV18 E6E7 AAV病毒并感染了永生293细胞，PCR／Southern杂交分析表明E6E7基因在转化细胞293TL中确有表达，转化细胞293TC和293TL具有明显的转化表型，和亲本293细胞相比，生长速度快，接触抑制消失，集落形成率提高20倍，且集落明显增大，形成时间短。结论：成功地构建了HPV18 E6E7 AAV病毒，HPV18 E6E7基因引起永生化人上皮细胞293的恶性转化。此病毒可用于感染正常上皮细胞，研究其致癌机制。     

HPV16/18E6/E7蛋白抗原表位理论预测与分子模拟研究

目的人乳头瘤病毒(HPV)与全球约4.5%的癌症密切相关,与几乎所有宫颈癌相关,其中HPV16和HPV18约占70%。方法鉴于E6/E7蛋白是维持HPV阳性癌细胞恶性表型的关键因素,是开发治疗性HPV疫苗的潜在靶标,通过分子模拟理论预测潜在抗原表位可以为疫苗开发提供理论指导。结果本研究利用在线工具预测HPV16、HPV18 E6/E7蛋白的潜在抗原表位,通过分子动力学模拟获得表位与MHC结合的稳定构象,结合自由能计算结果显示表位KLPDLCTEL(-31.02 kcal/mol)、TLQQDIVLHL(-31.33 kcal/mol)、YMLDLQPET(-34.09 kcal/mol)与HLA-A*0201具有潜在结合能力。结论通过分析表位与MHC结合模式,为表位的改造与HPV治疗性疫苗研究提供了理论线索。     

人乳头瘤病毒16型E6和E7基因突变体表达蛋白的稳定性和抗原性分析

目的 筛选适合于宫颈癌治疗性疫苗研制的人乳头瘤病毒16型（HPV16）E6和E7突变基因。方法 采用定点诱变技术对E6和E7基因进行改造，得到几种E6和E7基因的突变体；构建成表达野生型和突变型E6与E7的重组痘苗病毒，对这些重组痘苗病毒表达的E6和E7蛋白的稳定性及其免疫原性进行了比较研究。结果 E6蛋白第50位氨基酸的突变、E7蛋白第24和26位氨基酸的突变都不影响蛋白的稳定性和抗原性，但E7蛋白第91位氨基酸的突变使E7蛋白的稳定性和抗原性大大减弱。结论 证实了E7蛋白C－末端的锌指结构对E7蛋白结构的完整性和稳定性是非常重要的。