乳香提取物诱导急性非淋巴细胞性白血病细胞凋亡的实验研究

目的：研究乳香提取物诱导急性非淋巴细胞性白血病细胞凋亡作用。方法：应用形态学观察、ＤＮＡ电泳、ＤＮＡ片段百分率、流式细胞仪分析检测白血病细胞凋亡。结果：乳香提取物能诱导急性非淋巴性白血病细胞凋亡。结论：乳香提取物具有诱导急非淋白血病细胞凋亡作用     

乳香提取物对HL60细胞端粒酶活性影响的研究

为研究乳香提取物对ＨＬ６０细胞端粒酶活性影响,应用端粒酶重复序列扩增技术及聚丙烯胺凝胶电泳对ＨＬ６０细胞端粒酶活性的表达进行检测,并应用乳香提取物及全反式维甲酸下调ＨＬ６０细胞端粒酶活性。结果：乳香提取物能降低ＨＬ６０细胞端粒酶活性。其降低ＨＬ６０细胞端粒酶活性作用与全反式维甲酸相似。     

葛根提取物诱导急性非淋巴细胞性白血病细胞凋亡的实验研究

为了探讨葛根提取物诱导白血病细胞凋亡的作用及机制。以１８例急性非淋巴细胞性白血病（ＡＮＬＬ）患者骨髓及ＨＬ－６０细胞分别与葛根提取物、高三尖杉酯碱（ＨＨＴ）、阿糖胞苷（Ａｒａ－ｃ）及ＨＡ（ＨＨＴ＋Ａｒａ－ｃ）共同培养２４ｈ,应用细胞形态学、ＤＮＡ凝胶电泳、ＤＮＡ片段百分率测定等观察以上处理对白血病细胞凋亡的影响;对其中１０例处理前后的骨髓细胞用免疫组化法进行ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ（Ｂ细胞淋巴瘤／白     

中药"拮新康"对白血病细胞凋亡的影响

为探讨中药“拮新康”对白血病细胞凋亡的影响。采用形态学及DNA凝胶电泳方法观察其对白血病细胞株HL 6 0及K5 6 2细胞凋亡的影响 ,结果示 :①电镜观察可见凋亡细胞和凋亡小体 ,DNA凝胶电泳可见典型的梯形带改变 ;②一定浓度范围内的拮新康经适当作用时间后可诱导白血病HL 6 0 ,K5 6 2细胞凋亡 ,但诱导K5 6 2细胞凋亡所需时间较HL 6 0长且剂量较大。提示拮新康可诱导白血病细胞凋亡 ,与剂量和时间有一定的关系 ,为临床治疗白血病提供了实验依据。     

c—myc反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的影响

目的 研究c-myc反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的影响。方法 用针对c-myc mRNA 5'端非翻译区的一个18bp的反义寡核苷酸与HL60细胞、分离的急性粒细胞白血病病人白细胞共培养10h,用凋亡细胞计数、DNA凝胶电泳、ELISA、流式细胞仪等方法测白血病细胞的调亡。结果 c-myc反义寡核苷酸能够诱导HL60细胞凋亡,且此作用随着作用浓度的提高而增加;此反义核酸只诱导白血病患者的白血病细胞凋亡,对正常白细胞的凋亡无影响。结论 c-myc反义核酸可以通过诱导白血病细胞凋亡来治疗急性粒细胞白血症,且该作用的特异性好。     

铁超载与铁剥夺对Ara-C诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的 :探讨铁超载对铁剥夺对Ara C诱导HL 60细胞凋亡的影响。方法 :细胞培养法、台盼蓝活细胞拒染实验、细胞活力测定、光镜形态学观察、DNA琼脂糖电脉及流式细胞仪 (FCM )等方法检测HL 60细胞凋亡。观察不同浓度的三氯化铁 (FeCl3 )、铁剥夺剂 去铁胺 (DFO)等对HL 60细胞的作用 ,选择 10 0 μmol/LFeCl3 和 10 μmol/LDFO与Ara C共同作用于HL 60细胞 ,并以单用Ara C及生理盐水作对照。结果 :①FeCl3 (10 0 μmol/L) +Ara C(10 0 μg/ml) 6h ,12h ,2 4h ,APO %和Sub -G1%低于单用Ara C(10 0 μg/ml)组 ,两组相比有显著差异性 (P <0 0 5 )。②DFO(10 μmol/L) +Ara C(10 0 μg/ml)组APO %、DNA电泳ladder数目 ,FCM检测Sub -G1%均比单用Ara C高 (P <0 0 1)。③等摩尔的DFO与等摩尔FeCl3 共同作用于HL 60细胞 ,结果与生理盐水组相同 ;等摩尔DFO加等摩尔FeCl3 和Ara C(10 0 μg/ml)与单用Ara C(10 0 μg/ml)结果相同。 结论 :铁超载抑制化疗药物Ara C诱导HL 60细胞凋亡作用 ,铁剥夺 (DFO)可促进化疗药物Ara C诱导HL 60细胞凋亡作用。临床上可采用铁剥夺的方法协同治疗白血病 ,白血病患者补铁应慎重     

灵芝复方诱导HL-60白血病细胞凋亡的研究

应用体外集落与液体培养、细胞形态学观察、ＤＮＡ片段凝胶电泳及ＤＮＡ片百分率测定等方法观察灵芝复方对人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ生长及ＨＬ－６０细胞增殖和凋亡的作用。发现灵芝复方在一定浓度范围内对人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ生长有促进作用，而对白血病系ＨＬ－６０细胞集落生长则表现了剂量依赖性抑制；细胞形态学经为芝复方对ＨＬ－６０细胞凋亡具有剂量和时间依赖性诱导作用。８和１６ｍｇ／ｍｌ灵芝复方作用４８ｈ，可使ＨＬ－６０细     

Wilms肿瘤基因反义寡苷酸对白血病细胞凋亡的影响

目的 了解Ｗｉｌｍｓ肿瘤基因（ＷＴ１）反义寡核苷酸（ＡＳＯ）对白血病细胞凋亡的作用。方法 应用ＷＴ１ＡＳＯ以及足叶乙甙（ＶＰ－１６）作用Ｋ５６２、ＨＬ－６０细胞系,然后应用流式细胞仪测定ＤＮＡ含量以确定白血病细胞的凋亡数。结果 Ｋ５６２细胞系经ＷＴ１ ＡＳＯ作用２４ｈ和６０ｈ后细胞凋亡数分别为１４．６％和２６．８％;而ＷＴ１有义寡核苷酸（ＳＯ）组分别为３．１％（２４ｈ）和３．９％（６０ｈ）;加入少     

水蛭提取物对人白血病HL60细胞体外抑制作用研究

目的：研究水蛭提取物对人白血病HL-60细胞的体外抑制作用.方法：用液氮快速冻融法制备水蛭提取物,将不同浓度提取物作用HL-60细胞,观察提取物对HL60生长与增殖的影响、诱导调亡效应、并计算出水蛭提取物作用HL-60的半数抑制浓度（IC50）.结果：浓度高于0.1mg/mL的水蛭提取物对HL60有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性;水蛭提取物作用HL60细胞48h的IC50为1.4mg/mL;另外水蛭提取物也具有诱导HL60细胞凋亡作用.结论：水蛭提取物可抑制HL60细胞增殖并诱导调亡.     

槲皮素对NB4,HL—60细胞形态、PML mRNA及蛋白表达的影响

目的 探讨槲皮素对NB4,HL-60细胞的形态、PML mRNA及蛋白的表达影响。方法 以NB4,HL-60细胞为研究对象,细胞形态学观察采用Wright′s染色法及荧光染色法;PML蛋白细胞内分布定位采用免疫荧光技术;PML mRNA表达采用RT-PCR法。结果 1）经槲皮素处理后,各组细胞形态学上均出现凋亡特征性改变。2）槲皮素处理后NB4细胞内融合蛋白降解,PML聚积于POD结构,随后降解;在HL-60细胞,PML发生相似改变。3）槲皮素处理后各组细胞PML mRNA表达均无显著影响。结论 在槲皮素诱导下,PML在蛋白水平参与诱导白血病细胞凋亡机制;槲皮素能诱导,NB4,HL-60细胞凋亡,抑制白血病细胞生长。     

中药“拮新康”对白血病细胞凋亡的影响

为探讨中药“拮新康”对白血病细胞凋亡的影响。采用形态学及ＤＮＡ凝胶电泳方法观察其对白血病细胞株ＨＬ－６０及Ｋ５６２细胞凋亡的影响,结果示：①电镜观察可见凋亡细胞和凋亡小体,ＤＮＡ凝胶电泳可见典型的梯形带改变;②一定浓度范围内的拮新康经适当作用时间后可诱导白血病ＨＬ－６０,Ｋ５６２细胞凋亡,但诱导Ｋ５６２细胞凋亡所需时间较ＨＬ－６０长且剂量较大。提示拮新康可诱导白血病细胞凋亡,与剂量和时间有一定的关     

乳香提取物诱导Jurkat细胞凋亡的实验研究

检测不同浓度、不同时间作用了下乳香提取物对人急性Ｔ淋巴细胞血病细胞株Ｊｕｒｋａｔ细胞的促凋亡作用。方法：用琼脂糖凝胶电泳技术、透射电子显微镜（ＴＥＭ）和流式细胞仪（ＦＣＭ）分别检测Ｊｕｒｋａｔ细胞的ＤＮＡ梯状带,形态学改变及凋亡峰与药物作用的细胞周期。     

乳香提取物诱导Jurkat细胞凋亡的实验研究

目的 :检测不同浓度、不同时间作用下乳香提取物 (BCBE)对人急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞的促凋亡作用。方法 :用琼脂糖凝胶电泳技术、透射电子显微镜 (TEM)和流式细胞仪 (FCM)分别检测Jurkat细胞的DNA梯状带 ,形态学改变及凋亡峰与药物作用的细胞周期。结果 :在一定作用时间和剂量下BCBE能诱导Jurkat细胞凋亡 ,电泳出现典型的限制性降解片段梯带 ;TEM发现胞浆浓缩 ,并有大量空泡染色质聚集 ,有凋亡小体形成 ;FCM发现sub G1 凋亡峰 ,并有时间依赖性 ,G1 期细胞增多 ,S期细胞减少。结论 :BCBE能诱导Jurkat细胞凋亡 ,其作用在一定范围内呈现药物浓度与时间的依赖性     

细胞因子调节脐血CD3AK细胞诱导HL-60细胞凋亡

目的 :探讨重组肿瘤坏死因子α(rhTNF α,TNF α)、重组粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF ,G CSF)对脐血CD3AK细胞诱导HL 6 0细胞凋亡的影响。方法 :用细胞形态学观察 ,DNA琼脂糖电泳 ,原位末端标记法检测HL 6 0 ,CD3AK细胞诱导的HL 6 0 ,TNF α诱导的HL 6 0 ,CD3AK与TNF α共同诱导的HL 6 0 ,CD3AK与G CSF共同诱导的HL 6 0进行检查分析。结果 :HL 6 0自然凋亡率 (4.6 0± 1.71) % ,;CD3AK细胞诱导的HL 6 0凋亡率 (15 .6 0±3.2 1) % ;TNF α(5ng/ml)诱导的HL 6 0的凋亡率 (5 .2 0± 2 .0 7) % ;CD3AK与TNF α共同诱导的HL 6 0凋亡率 (36 .70± 4 .4 0 ) % (F =94 ,P <0 .0 1)。CD3AK与G CSF共同诱导的HL 6 0凋亡率 (4.88± 2 .2 3) % (F =5 8,P <0 .0 1)。结论 :TNF α协同CD3AK细胞诱导HL 6 0凋亡 ;G CSF抑制CD3AK细胞诱导HL 6 0凋亡。     

急性白血病骨髓基质细胞对HL-60细胞增殖、分化的影响

目的 为探讨急性白血病骨髓基质对HL-60细胞的影响。方法 骨髓基质与白血病细胞共培养，采用MTT检测基质对白血病细胞的粘附，流式细胞仪检测粘附的HL-60细胞周期，非特异性酯酶及过氧化物酶染色观察白血病细胞分化及绘制白血病细胞生长曲线。结果 白血病骨髓基质对HL-60细胞的粘附率及粘附的白血病细胞处于G0／G1期比例均明显高于正常骨髓基质；正常骨髓基质对HL-60细胞的生长抑制作用及诱导分化作用均明显强于白血病基质。结论 急性白血病骨髓基质对HL-60细胞的增殖、分化作用均存在异常。     

TNF-α,G-CSF调节CD3AK细胞诱导的HL-60凋亡

目的 :探讨肿瘤坏死因子α(TNF α) ,粒细胞集落刺激因子 (G CSF)对CD3AK细胞诱导HL 6 0细胞凋亡的影响。方法 :用细胞形态学观察 ,DNA琼脂糖电泳 ,原位末端标记法分别检测HL 6 0自然凋亡率、CD3AK细胞诱导的HL 6 0凋亡率、TNF α和CD3AK诱导的HL 6 0凋亡率、G CSF和CD3AK诱导的HL 6 0凋亡率。结果 :HL 6 0细胞自然凋亡率 (4.6 0± 2 .17) % ;CD3AK细胞诱导HL 6 0细胞凋亡率 (2 7.38± 4 .91) % ;TNF α和CD3AK诱导的HL 6 0凋亡率 (33.0 9± 5 .2 2 ) % ;G CSF和CD3AK(7.35± 2 .2 6 ) % (F =96 .80 ,P <0 .0 1)。结论 :TNF α加强CD3AK细胞诱导的HL 6 0凋亡 ,G CSF抑制CD3AK诱导的HL 6 0凋亡     

Expression and Fuactional Role of HERG1, K~+ Channels in Leukemic Cells and Leukemic Stem Cells

In order to investigate the expression and functional role of HERG1 K channels in leukemic cells and leukemic stem cells (LSCs), RT-PCR was used to detect the HERG1 K channels expression in leukemic cells and LSCs. The functional role of HERG1 K channels in leukemic cell proliferation was measured by MTT assay, and cell cycle and apoptosis were analyzed by flow cy- tometry. The results showed that herg mRNA was expressed in CD34 /CD38-, CD123 LSCs but not in circulating CD34 cells. Herg mRNA was also up-regulated in leukemia cell lines K562 and HL60 as well as almost all the primary leukemic cells while not in normal peripheral blood mononuclear cells (PBMNCs) and the expression of herg mRNA was not associated with the clinical and cytoge- netic features of leukemia. In addition, leukemic cell proliferation was dramatically inhibited by HERG K channel special inhibitor E-4031. Moreover, E-4031 suppressed the cell growth by induc- ing a specific block at the G1/S transition phase of the cell cycle but had no effect on apoptosis in leukemic cells. The results suggested that HERG1 K channels could regulate leukemic cells prolif- eration and were necessary for leukemic cells to proceed with the cell cycle. HERG1 K channels may also have oncogenic potential and may be a biomarker for diagnosis of leukemia and a novel potential pharmacological target for leukemia therapy.     

反义bcl─2RNA促进HL─60细胞的凋亡

目的：分析反义ｂｃｌ－２对ＨＬ－６０细胞凋亡的作用，为进一步研究凋亡机制打基础．方法：我们用ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将插有反义ｂｃｌ－２基因片段的重组逆转病毒载体ｐＤＯＲ－ＡＢ转染ＨＬ－６０细胞，用核酸打点杂交方法检测转染效果和载体表达效果，用流式细胞仪检测ｂｃｌ－２的改变及细胞周期的变化，用光镜和电镜观察转染细胞的形态学改变，并用转染的细胞对足叶乙甙敏感性的变化间接证明反义ｂｃｌ－２的作用．结果：ｐＤＯＲ－ＡＢ转入ＨＬ－６０细胞并表达ｂｃｌ－２反义ＲＮＡ；细胞内Ｂｃｌ－２蛋白含量明显下降；细胞周期分析可见凋亡峰；电镜下可见凋亡细胞；ＤＮＡ凝胶电泳出现梯状电泳带．结论：反义ｂｃｌ－２瞬时表达可促进ＨＬ－６０细胞的凋亡，ｂｃｌ－２在ＨＬ－６０细胞凋亡的调节中起重要作用     

足叶乙甙诱导HL－60急性早幼粒白血病细胞程序化死亡的实验研究

目的：用不同剂量的ＶＰ－１６诱导急性早幼粒白血病细胞程序化死亡（ＰＣＤ）。方法：通过细胞培养技术获取ＰＣＤ细胞，以ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳确定细胞ＰＣＤ的发生，苔盼蓝拒染法检测细胞活力。结果：不同浓度的ＶＰ－１６在试验条件下于４ｈ内均能诱导ＨＬ－６０细胞发生ＰＣＤ。结论：本实验建立的研究细胞ＰＣＤ的方法可靠，ＶＰ－１６具有良好的诱导细胞产生ＰＣＤ的作用     

Terminal deoxynucleotidyl transferase in various immunophenotypic cells in leukemia]

The staining results of terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) in leukemic cells of peripheral blood or bone marrow in 55 patients showed that 22 (40%) patients were found positive for TdT staining: 17 patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL), 2 acute non-lymphocytic leukemia (ANLL) and 3 hybrid acute leukemia (HAL). The positive rate of ALL (17/21) was significantly higher than that of ANLL (2/21, P < 0.005). The leukemic cells of HLA-DR+CD19+TdT- were demonstrated to express some of myeloid restricted antigens (HI98, HIM 4, HIM 5) (3/3), which suggested that these cases were leukemias of myeloid origin. None of the 8 patients with M 0/M 1 ANLL was positively stained for the enzyme. Our results showed that TdT detection is of great value in the diagnosis and differentiation of both poorly differentiated and hybrid acute leukemia.