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目的 研究构建模拟角膜基质创伤修复过程中转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)空间动态分布的体外三维培养系统。方法 从新鲜牛眼中分离角膜基质细胞,用含体积分数10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的DMEM/F12培养基进行培养,而后构建Pellet体外三维培养模型进行培养。将Pellet分为有透析袋组和无透析袋组,置入Transwell小室系统上下室中培养48 h后换液,上室为0.50 μg·L-1TGF-β1+0.25 μg·L-1TGF-β2+体积分数10%FBS,下室为体积分数10%FBS,分别于培养后72 h观察Pellet培养模型的形态变化并采用Real-time PCR法分别检测2组上下室Pellet中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ,Col Ⅰ)和Col Ⅲ mRNA相对表达量。结果 培养后72 h Pellet均呈团状生长。有透析袋组Transwell小室系统上、下室α-SMA mRNA表达量分别为1.595±0.025、1.148±0.009,FN mRNA表达量分别为1.090±0.011、0.844±0.015,Col Ⅰ mRNA表达量分别为1.445±0.035、1.165±0.008,Col Ⅲ mRNA表达量分别为1.726±0.031、1.314±0.020,Col Ⅲ/Col Ⅰ比值分别为1.126±0.019、0.957±0.013,上下室各项指标比较差异均有统计学意义(均为P=0.000)。无透析袋组Transwell小室系统上、下室α-SMA mRNA表达量分别为1.363±0.018、1.360±0.002,FN mRNA表达量分别为0.946±0.017、0.952±0.012,Col Ⅰ mRNA表达量分别为1.261±0.011、1.258±0.029,Col Ⅲ mRNA表达量分别为1.459±0.027、1.462±0.033,Col Ⅲ/Col Ⅰ比值分别为1.157±0.029、1.163±0.090,上下室各项指标比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。无透析袋组上室细胞中α-SMA、FN、Col Ⅰ和Col Ⅲ mRNA的相对表达量与有透析袋组上室、有透析袋组下室比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。无透析袋组下室细胞中α-SMA、FN、Col Ⅰ和Col Ⅲ mRNA的相对表达量与有透析袋组上室、有透析袋组下室比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 Transwell小室系统与透析袋相结合可构建模拟TGF-β空间动态分布的体外三维培养系统。 相似文献
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转化生长因子-β对角膜伤口愈合的调节 总被引:1,自引:0,他引:1
细胞生长因子在机体伤口愈合过程中具有重要的调节作用,由于角膜的特殊结构和功能,其伤口愈合的调节显得至关重要,且被人们所重视。本文叙述了转化生长因子-β(TGF-β)及其受体的结构和作用,TGF-β的激活和其在角膜细胞成分中的表达情况,同时讨论了TGF-β在角膜伤口愈合过程中的作用。 相似文献
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转化生长因子-β与翼状胬肉 总被引:3,自引:4,他引:3
转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-beta,TGF-β)具有多种生物学作用,翼状胬肉中也有其异常表达。TGF-β在翼状胬肉发病中的作用主要表现为:①能促进翼状胬肉上皮细胞,成纤维细胞的增殖和新生血管形成。②能促进多种细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)的合成。③对翼状胬肉中的炎症和免疫反应也有介导作用。 相似文献
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角膜损伤后的纤维化修复是角膜瘢痕形成的主要原因.转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)在角膜的稳态平衡中起着至关重要的作用,是角膜损伤修复的重要参与者.同时,角膜上皮基底膜是角膜创伤修复过程中角膜上皮与基质相互作用的重要屏障.角膜损伤修复的不同阶段,各亚型TGF-β在角膜各种细胞及各个不同部位存在着分布差异,角膜上皮基底膜是否完整是影响该过程的重要因素.TGF-β不同亚型在时间和空间上的分布差异及变化与角膜的创伤修复过程中细胞的迁移、增殖、表型变化及细胞外基质沉着都紧密相关,是瘢痕愈合及无瘢痕愈合的细胞分子生物学基础.本文就TGF-β的生物学功能及其亚型在角膜损伤修复中的时间和空间分布情况作一综述. 相似文献
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转化生长因子β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)是一种多功能的细胞因子。体外和多种动物模型中研究已证实在角膜TGF-β是主要参与角膜损伤后启动瘢痕化的重要生长因子。近年来针对TGF-β抗瘢痕化研究已取得一些进展。本文综述了TGF-β分子结构、生物学功能,角膜损伤修复中瘢痕形成过程中基质细胞在TGF-β调控下的变化及TGF-β治疗角膜瘢痕的进展。 相似文献
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转化生长因子-β(TGF-β)是一种具有多种生物学功能的多肽类生长因子。TGF-β在肿瘤的发生过程中起着双向调节作用,同时TGF-β对细胞的增殖与分化、细胞外基质的产生、血管的生成及机体免疫系统均起着重要作用。近年研究TGF-β的异常过表达以及信号传导通路的异常与葡萄膜黑色素瘤生长和侵袭转移能力密切相关。就TGF-β的结构、功能以及它在葡萄膜黑色素瘤发生过程中的作用进行综述。 相似文献
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细胞凋亡与角膜创伤修复 总被引:2,自引:0,他引:2
角膜细胞凋亡影响着包括屈光性角膜手术在内的创伤修复过程。本文就角膜创伤修复中细胞凋亡的概况、形态特征、相关基因调控、与上皮-基质细胞因子关系、生物学及临床意义进行了综述。 相似文献
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目的:探讨转化生长因子β2(TGF-β2)对大鼠角膜针刺损伤愈合的影响。方法:雄性wistar大鼠20只,均取右眼制造角膜针刺创伤模型后随机分成实验组和对照组,实验组用转化生长因子β2(TGF-β2)点眼,对照组用生理盐水点眼,每日6次、至创面愈合止。计算剩余损伤面积、行组织学检查及透射电镜观察。结果:术后两组创面愈合面积比较实验组均快于对照组,且差异显著,组织学检查及电镜观察均显示两组差异。结论:TGF-β2有促进角膜损伤愈合的作用,其可能的机制为TGF-β2是胶原溶酶的主要抑制剂,可抑制基质中胶原酶的合成,降低胶原分解,促进胶原的分泌。 相似文献
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后发性白内障(PCO)是现代白内障术后常见的并发症,白内障术后残留的晶状体上皮细胞(LECs)增生、迁移、上皮-间质转化(EMT)、胶原沉积、残留LECs向晶状体纤维的再生和转化是形成PCO的主要原因.转化生长因子-β(TGF-β)是目前已知的与诱导LECs转分化和组织病理性纤维化关系最为密切的细胞因子,许多研究已经证实Smad经典通路参与了TGF-β诱导的EMT过程,但越来越多的研究结果显示多条非Smad通路共同参与TGF-β诱导的EMT过程,包括磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3 K/Akt) Akt激酶、Rho、Wnt和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路等.就参与PCO病理过程的TGF-β信号通路的研究进展进行综述. 相似文献
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转化生长因子β1对牛角膜内皮细胞外基质合成的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的观察转化生长因子β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)对体外培养的牛角膜内皮细胞细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)合成的影响。方法将体外培养的牛角膜内皮细胞分为实验组和对照组,经0μg·L-1(对照)、0.1μg·L-1、1.0μg·L-1、10.0μg·L-1、100.0μg·L-1浓度的TGF-β1处理48h后,用SABC免疫组化法分别检测角膜内皮细胞纤维连接蛋白和层粘连蛋白的合成情况。结果与对照组相比,一定浓度(1.0μg·L-1及10.0μg·L-1)的TGF-β1能明显促进体外培养的角膜内皮细胞纤维连接蛋白及层粘连蛋白的合成,且呈剂量依赖性。但浓度为0.1μg·L-1及100.0μg·L-1的TGF-β1组OD值与对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。结论一定浓度(1·0μg·L-1及10.0μg·L-1)TGF-β1能促进牛角膜内皮细胞ECM的合成,提示TGF-β1可能在角膜内皮细胞损伤修复中扮演重要角色。 相似文献
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背景 临床研究表明多数角膜营养不良的发病与转化生长因子β诱导(TGFBI)基因突变有关,但其发病的分子机制尚不完全清楚. 目的 研究TGFBI基因在人角膜组织及体外培养的角膜上皮细胞和基质细胞中的表达,为进一步研究角膜营养不良的发病机制奠定基础. 方法 对人角膜上皮细胞和基质细胞进行培养和传代,应用逆转录聚合酶链反应( RT-PCR)法检测TGFBI mRNA在人角膜组织及细胞中的表达,将供体角膜组织制成石蜡包埋切片,利用免疫组织化学法检测TGFBI蛋白在角膜组织、人角膜上皮细胞和角膜基质细胞中的表达,采用免疫荧光技术检测TGFBI蛋白在细胞爬片的表达. 结果 RT-PCR检测显示人角膜组织和基质细胞中在1274 bp处可见TGFBI mRNA的清晰条带,而角膜上皮细胞中亦有TGFBImRNA表达.免疫组织化学检测显示,TGFBI蛋白在人角膜组织中基质细胞的细胞质中呈阳性表达,但人角膜上皮细胞中未见TGFBI蛋白表达.免疫荧光检测技术显示,人角膜基质细胞胞质中TGFBI蛋白呈红色荧光,而角膜上皮细胞未见TGFBI蛋白表达. 结论 TGFBI主要在人角膜基质层表达,而在上皮层几乎不表达,有助于进一步研究TGFBI在角膜营养不良发病机制中的作用. 相似文献
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转化生长因子β1对角膜碱烧伤后机体免疫细胞功能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对角膜三烧伤机体巨噬细胞和淋巴细胞功能的影响。方法 Balb/c鼠单眼角膜2度碱烧伤,治疗级于模型制作后1小时内球后注射TGF-β150ng联合腹腔注射TGF-β1 30ng。动态观察腹腔巨噬细胞天噬功能和循环淋巴细胞对促分裂原刺激的转化功能,并与对照组进行对照组(P〈0.05),淋巴细胞转化在植物血凝素(PHA)刺激时,3周内显著了低(P〈0.05),但 相似文献
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转化生长因子—β对角膜上皮细胞体外生长的调节作用 总被引:4,自引:0,他引:4
转化生长因子-β(TGF-β)是一种多功能多肽,对许多类型细胞的增殖和分化,以及组织的创伤修复反应具有重要的调节作用。本实验观察了TGF-β及其联合表皮生长因子(EGF)或碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对离体兔角膜上皮细胞生长影响。结果显示:TGF-β可降低剂量相关的上皮细胞的增殖能力:EGF和bFGF可显著刺激上皮的增殖;TGF-β可部分地对抗EGF和bFGF的作用。提示:TGF-β对角膜上 相似文献
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目的观察转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGFβ1)对体外培养的角膜成纤维细胞结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)的诱导表达作用。方法体外培养的角膜成纤维细胞分实验组和对照组,对照组弃原培养液,加无血清培养液继续培养,实验组用不同浓度的TGFβ1(0.1μg·L-1、1μg·L-1、10μg·L-1)处理24h,用RTPCR方法检测角膜成纤维细胞CTGFmRNA的表达情况。结果1μg·L-1和10μg·L-1TGFβ1处理组CTGF/GAPDH像素比值分别为0.35±0.05和1.25±0.10,均较对照组高(0.13±0.02),差异具有统计学意义,同时CTGF/GAPDH比值随TGFβ1浓度增加而增加。结论TGFβ1可以诱导角膜成纤维细胞CTGF的表达,在角膜成纤维细胞中CTGF也可能是TGFβ1对细胞起作用的下游信号分子。 相似文献
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吴静 《国外医学:眼科学分册》1996,20(6):345-349
转化生长因子-β(TGF-β)是一个具有多向生物效应的细胞调节因子,它可作为促进细胞增殖的信号,又能抑制细胞增殖。TGF-β在传递生物信息、肿瘤发生、创作修复、多方位控制细胞功能以及免疫调节等方面起着关键的调控作用。近两年来,在眼科领域也对TGF-β进行了较多的探讨。它不仅是正常眼内组织代谢及功能的基本因素,在许多眼内病程过程中它也起着一定的作用,特别应该指出的是:它是眼角膜能够处于相对免疫赦免状 相似文献
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TGF-β与角膜内皮 总被引:1,自引:1,他引:1
角膜内皮细胞(corneal endothelial cells,CECs)不仅能合成转让长生因子-β(transforming growth factor,TGF-β),而且细胞膜对其3种受体均有表达。TGF-β通过与细胞表面受体的结合激活Smad蛋白介导的细胞内信号传导系统发挥其生物学作用。TGF-β对CECs的主要作用表现为促进CECs合成细胞外基质和阻止CECs从G1期向S期的转化。 相似文献
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白内障囊外摘除术后,由于组织修复反应,房水中活性转化生长因子β(TGF-β)增加,致使残留的晶状体上皮细胞移行,分化和细胞外基质的沉积从而引起上皮-间质转化,导致后囊膜混浊形成后发性白内障(PCO)。当抗TGF-β抗体或一些蛋白竞争性拮抗TGF-β活性时可以阻止后发性白内障的发生。本文就TGF-β在PCO中发挥的作用机制进行综述以指导临床上开发防治PCO的特效低毒药物。 相似文献
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转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一个多功能的生长因子,对角膜上皮、内皮和基质细胞均有影响。TGF-β与免疫抑制有着密切的联系,当在培养液内添加TGF-β1时,可使CD69+CD25+和CD25+CD4+、CD25+CD8+、CD71+CD4+、CD71+CD8+的表达受到抑制。有实验证明:局部应用TGF-β1对大鼠的移植排斥反应具有抑制作用,TGF-β1治疗组移植片比对照组透明时间长。用猪角膜作载体,体外构建TGF-β1转基因后板层角膜植片移植给兔,结果表明:角膜内皮细胞内高表达TGF-β1,可抑制免疫排斥反应的发生和延长移植片的成活时间。初步应用TGF-β1滴眼液治疗角膜与免疫相关疾病结果证实,TGF-β1能够提高这些眼病的治愈率,缩短其病程。 相似文献