P85磷酯肌醇-3激酶-蛋白激酶C-ζ复合物对血管紧张素Ⅱ激活平滑肌细胞p70核蛋白体S6激酶的调节作用

作者以前的研究发现蛋白激酶Ｃ－ζ介导血管紧张素Ⅱ经Ｒａｓ－ＭＥＫ途径激活血管平滑肌细胞丝裂素活化的蛋白激酶ＭＡＰＫ或细胞外信号调节激酶ＥＲＫ１／２。本文研究了Ｐ８５磷酯肌醇－３激酶－蛋白激酶Ｃ－ζ复合物核蛋白体激酶ｐ７０Ｓ６激酶活性的调节作用及其信号传递途径。Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ分析显示正常培养的血管平滑肌细胞表达ｐ７０Ｓ６激酶、ｐ８５磷酸肌醇－３激酶和蛋白激酶Ｃ－ζ。１００ｎｍｏｌ血管紧张素     

热休克蛋白90对氧化应激激活的大鼠血管平滑肌细胞细胞外信号调节激酶的作用

目的探讨热休克蛋白90对氧化应激激活的细胞外信号调节激酶的作用。方法取SD雄性大鼠胸主动脉做原代平滑肌细胞培养。用1μmol/L可溶性鸟苷酰环化酶抑制剂6-Anilinoquinoline-5,8-quinolinedione(LY83583)处理4~12代大鼠血管平滑肌细胞不同时间,蛋白免疫印迹检测细胞内热休克蛋白90、磷酸化和未磷酸化细胞外信号调节激酶1/2。用格尔德霉素(热休克蛋白90的特异性阻断剂)预处理细胞30 min,再用LY83583处理120 min,免疫共沉淀和蛋白免疫印迹检测热休克蛋白90与细胞外信号调节激酶及磷酸化的细胞外信号调节激酶的结合,免疫荧光检测细胞核内磷酸化的细胞外信号调节激酶。结果LY83583处理120 min时细胞内热休克蛋白90表达达高峰,较0 min时增加9倍,与细胞外信号调节激酶1/2的第二个活化高峰一致。LY83583处理血管平滑肌细胞120 min后,热休克蛋白90与磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2结合较对照组升高了5.5倍(P<0.01),磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2的量增加了6.1倍(P<0.01),而细胞核内的磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2也明显增加;5μmol/L格尔德霉素预处理后,LY83583的这些效应则被阻断。结论氧化应激增加大鼠血管平滑肌细胞内热休克蛋白90,并增加其与细胞外信号调节激酶1/2及磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2的结合,促进磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2核转位。这可能是氧化应激激活大鼠中膜血管平滑肌细胞内细胞外信号调节激酶1/2信号通路活性的重要机制之一,为抗氧化应激引起的血管中膜平滑肌细胞增殖提供新的分子靶点。     

血管紧张素(1-7)阻断细胞外信号调节激酶1/2、核因子κB信号通路影响泡沫细胞内胆固醇含量

目的研究血管紧张素(1-7)对THP-1源性泡沫细胞中细胞外信号调节激酶1/2及核因子κB信号转导通路的影响,以进一步探讨血管紧张素(1-7)促进胆固醇逆转运的调节机制以及细胞外信号调节激酶1/2与核因子κB信号通路之间是否相互影响。方法采用体外培养的THP-1单核细胞构建泡沫细胞模型,用不同的干预方法处理细胞72 h,将细胞分为单核细胞(空白对照)组、泡沫细胞组、分别预先经10-6mol/L血管紧张素(1-7)、10μmol/L核因子κB特异性阻断剂、10μmol/L细胞外信号调节激酶1/2特异性阻断剂、10-6mol/L血管紧张素(1-7)+10μmol/L核因子κB特异性阻断剂、10-6mol/L血管紧张素(1-7)+10μmol/L细胞外信号调节激酶1/2特异性阻断剂干预的泡沫细胞组。油红O染色后显微镜下观察细胞形态;高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量的变化;免疫组化法检测细胞内核因子κB(p65)活性的表达;免疫印迹法检测磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白的表达。结果血管紧张素(1-7)显著降低了泡沫细胞内胆固醇的含量,下调了磷酸化细胞外信号调节激酶1/2、核因子κB(p65)活性的表达(P0.05),细胞外信号调节激酶1/2、核因子κB信号通路被特异性阻断后泡沫细胞内胆固醇含量降低(P0.05);血管紧张素(1-7)联用细胞外信号调节激酶1/2、核因子κB信号通路的特异性阻断剂后泡沫细胞内胆固醇含量显著降低(P0.01);核因子κB信号通路被阻断后核因子κB(p65)活性表达显著降低(P0.01),而磷酸化细胞外信号调节激酶1/2活性表达无明显降低(P0.05),细胞外信号调节激酶1/2信号通路被阻断后磷酸化细胞外信号调节激酶1/2和核因子κB(p65)活性表达均降低(P0.05)。结论血管紧张素(1-7)可能通过降低磷酸化细胞外信号调节激酶1/2、核因子κB(p65)的活性,减少细胞内胆固醇的蓄积;细胞外信号调节激酶1/2、核因子κB信号通路被特异性阻断后可减少泡沫细胞内胆固醇的含量;细胞外信号调节激酶可能是核因子κB(p65)信号通路的上游信号。     

慢性支气管哮喘模型大鼠气道中细胞外信号调节激酶1/2表达及活性变化的研究

细胞外信号调节激酶（ERK）属于有丝分裂原激活蛋白激酶（MAPK）家族，它是细胞内重要的信号传递分子，并有多种亚型，在平滑肌中主要有ERK1、ERK2（ERK1/2）两种，该通道在支气管哮喘（简称哮喘）病理生理发生和发展过程中的作用得到越来越多的关注。     

ERK反义寡核苷酸对支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

许多研究提示，气道平滑肌细胞（AMSC）增殖与凋亡的异常在支气管哮喘（以下简称哮喘）气道高反应性、气道重建、不可逆气流阻塞等方面起重要作用，但有关其细胞内信号调控机制目前尚未阐明。细胞外信号调节激酶（extracellular-signal regulated kinase, ERK）通道是一种重要的细胞内信号转导通道，在AMSC中，     

老年大鼠缺血／再灌注肾损伤修复时丝裂原活化蛋白激酶亚？…

目的 观察老年大鼠缺血／再灌注肾损伤修昨时细胞外信号调节激酶（ＥＲＫ）、ｃ－Ｊｕｎ氮基本端激酶（ＪＮＫ）的变化；探讨其与老年大鼠肾脏早期损伤修复的关系。方法 夹闭大鼠双能常造成急性缺血／再灌注肾损伤模型，电镜观察形态学改变，免疫组化检测增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达免疫学沉淀结合特异底物磷酸化法测定ＥＲＫ，ＪＮＫ生，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法测定二者表达量。结果 缺血／再灌注２ｈ老年鼠仅少数肾小管     

丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路与胰岛β细胞凋亡的关系

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路是真核细胞转导细胞外信号到细胞内的四大信号系统之一,包括细胞外信号调节激酶、c-Jun氨基末端激酶、p38MAPK和细胞外信号调节蛋白激酶5通路,参与了细胞增殖、分化、转化及凋亡.胰岛β细胞凋亡在糖尿病的病理生理机制中发挥重要作用,多种细胞因子及应激刺激都可通过一条或多条MAP...     

外源性同型半胱氨酸对肾小球系膜细胞的影响

目的：研究外源性同型半胱氨酸对体外培养的肾小球系膜细胞增殖，表型转化和产生细胞外基质的影响。方法：采用放射性同位素测定＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入和细胞外信号调节激酶活性，流式细胞仪分析细胞周期，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法进行α－平滑肌肌动蛋白检测，ＥＬＩＳＡ方法检测细胞上清液中细胞外基质含量。结果：不同浓度的同型半胱氨酸（０．００５，０．０５，０．５和１．０ｍｍｏｌ／Ｌ）不同作用时间（８，１６和２４ｈ）     

高血压病人小动脉中磷酸化细胞外信号调节激酶1/2及ets样基因1的蛋白表达

目的研究细胞外信号调节激酶系统（ERK）及其下游底物ets样基因1（E1k-1）在原发性高血压中的作用。方法采用免疫组织化学方法，对比观察高血压和非高血压病人胃肠小动脉血管平滑肌细胞及内皮细胞中细胞外信号调节激酶（ERK1／2）和ets样基因1（E1k-1）的磷酸化情况。结果高血压组胃肠小动脉血管平滑肌细胞中磷酸化ERK1／2染色阳性率（8．31％）明显高于非高血压组（0．53％），P〈0．05；高血压组内皮细胞中磷酸化ERK1／2的阳性率（4．97％）明显高于非高血压组（P〈0．05）。高血压组胃肠小动脉血管平滑肌细胞中磷酸化Elk-1染色阳性率（3．53％）明显高于非高血压组（0．27％），P〈0．05。在血管平滑肌细胞、血管内皮细胞中磷酸化ERK1／2与磷酸化E1k-1的表达均有正相关关系。结论原发性高血压患者的胃肠细小动脉血管平滑肌细胞以及内皮细胞中细胞外信号调节激酶及其下游底物Elk-1的磷酸化增加。     

经皮穿刺激光心肌血管建术后细胞外信号调节激酶的动脉变化

目的：探讨经皮穿刺激光心肌血管重建术（ＰＴＭＲ）后细胞外信号调节激酶的动脉变化。方法：实验组和对照组分别在猪心脏上进行ＰＴＭＲ和假手术，于ＰＴＭＲ和假手术后２、２４ｈ，３、７、１４ｄ取左室前壁心肌组织，分别以放射免疫法和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法测定其细胞外信号调节激酶（ＥＲＫｓ）活性和相对蛋白含量。结果：与假手术对照组比较，ＰＴＭＲ实验组心组织内ＥＲＫｓ于２ｈ开始激活，持续至２４ｈ；其蛋白含量于术后２４ｈ开始升高并持续至术后７ｄ。结论：ＰＴＭＲ激活ＥＲＫｓ并使其蛋白合成增加。     

Raf蛋白激酶与大肠癌的关系研究进展

细胞表面的外来刺激可引起一系列胞内信号，对促进细胞增值、分化和凋亡起重要的生理作用。而信号转导途径中的某个环节异常，可引起细胞异常增殖和细胞外基质过多集聚，这是肠道炎症和肿瘤的病理基础。促分裂原蛋白活化激酶（mitogen—activated protein kinases，MAPKs）是连接细胞膜表面受体和基因表达的重要信号调节酶，已发现哺乳动物肠道组织细胞内至少存在4种MAPKs，即ERK／MAPK（或称p44／42MAPK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK1／JNK2），p38MAPK（α，β）和ERK5／BMK。     

类风湿关节炎滑膜细胞酪氨酸激酶信号传导系统

多细胞生物中,细胞的生长分裂受到相邻组织甚至生物整体的调节控制。细胞怎样将外界刺激信号传递到细胞核内,一直是人们十分关心并不断探索的问题．生长因子则是实现这种调节的生物信号之一,其受体则是把信号介导到细胞内,引起细胞内酪氨酸激酶磷酸化,使信号向下游传...     

p38丝裂原活化蛋白激酶在心血管疾病中的作用

丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPKs）是细胞内的主要信息传递系统，可将细胞外信息传递至细胞核中，从而介导细胞产生各种反应。MAPK通路主要有4条途径：细胞外调节蛋白激酶（Ras／ERK）、c-jun氨基末端激酶（JNK）／应激激活的蛋白激酶（SAPK）、p38、ERK5，其中p38信号途径是MAPK家族中的重要组成部分，参与了多种细胞的胞内信号传递，现将在许多疾病的发生、发展过程中具有明显的调控作用。p38MAPK在心血管疾病中的作用论述如下。     

河南食管癌高发区居民食管癌组织p15INK4b和p16INK4a基因变化的研究

基因丢失导致ｐ１６ＩＮＫ４ａ和（或）ｐ１５ＩＮＫ４ｂ对ＣＤＫ激酶的抑制作用丧失,从而导致细胞增生调节失控［１－３］,目前在多种肿瘤中已发现存在ｐ１５ＩＮＫ４ｂ和ｐ１６ＩＮＫ４ａ的失活现象［４－６］．作者近年对河南食管癌高发区林州市居民的研究证实,肿瘤...     

降钙素基因相关肽抑制血管平滑肌细胞能量代谢的AMP激活蛋白激酶信号通路

目的观察降钙素基因相关肽对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖过程中能量代谢的影响及机制,探索细胞外信号调节激酶和AMP激活蛋白激酶相关信号蛋白在该作用中的地位。方法组织贴块法体外培养SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,取第3～10代用于实验。分别用降钙素基因相关肽或/和血管紧张素Ⅱ处理细胞。MTT法及细胞计数法观察降钙素基因相关肽对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响;詹纳斯绿B染色观察细胞线粒体形态及体积;ATP检测试剂盒检测细胞内ATP水平;Western Blotting检测细胞磷酸化AMP激活蛋白激酶的表达。结果降钙素基因相关肽预处理能降低血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠血管平滑肌细胞的增殖(P<0.05),同时拮抗血管紧张素Ⅱ引起细胞内线粒体肿胀、ATP水平升高,在此过程中伴随细胞内磷酸化AMP激活蛋白激酶表达下调(P<0.05);降钙素基因相关肽受体拮抗剂CGRP8-37能拮抗降钙素基因相关肽对血管紧张素Ⅱ促增殖和促代谢的抑制作用(P<0.05);细胞外信号调节激酶抑制剂PD98059能部分拮抗降钙素基因相关肽对磷酸化AMP激活蛋白激酶的抑制作用(P<0.05)。结论降钙素基因相关肽能显著抑制血管紧张素Ⅱ诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖过程中的能量代谢,其细胞内信号通路可能涉及到降钙素基因相关肽/降钙素基因相关肽1型受体-丝裂原细胞外激酶/细胞外信号调节激酶-磷酸化AMP激活蛋白激酶信息传递链。     

转化生长因子β1和磷酸化细胞外信号调节激酶在胃癌中的表达

转化生长因子β1（TGF-β1）是一种具有多种生物活性的多肽，与肿瘤的发生及发展密切相关。细胞外信号调节激酶是丝裂素活化蛋白激酶家族的一个亚族，磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）是其活化形式。我们应用免疫组化技术检测TGF-β1和p-ERK蛋白在胃癌中的表达情况，旨在探讨它们与胃癌发生及发展的关系。     

氧化型低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞小凹蛋白1表达的抑制作用及其与信号调节激酶的关系

目的 观察氧化型低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞小凹蛋白1表达的抑制作用及其与细胞外信号调节激酶活性的关系.方法 50 mg/L 氧化型低密度脂蛋白处理血管平滑肌细胞不同时间,或同时加入25 μmol/L细胞外信号调节激酶信号通路的特异性阻断剂,Western 印迹检测血管平滑肌细胞小凹蛋白1和细胞外信号调节激酶的变化.结果 50 mg/L氧化型低密度脂蛋白作用细胞24 h后小凹蛋白1的表达明显下降,细胞外信号调节激酶磷酸化活性显著增高,阻断氧化型低密度脂蛋白对细胞外信号调节激酶的激活可显著促进小凹蛋白1的表达.结论 血管平滑肌细胞源性泡沫细胞小凹蛋白1的表达下调与氧化型低密度脂蛋白激活细胞外信号调节激酶及其介导的信号传导密切相关.     

Raf/MEK/ERK信号转导通路在糖尿病肾病发生发展中的作用

丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）广泛存在于真核细胞内,在上游蛋白Ras蛋白、蛋白激酶C作用下将细胞外有关信号转导到细胞核内部而引起多种细胞反应。Raf／MAPK／细胞外信号调节激酶通路是MAPK家族中的重要一员,糖尿病状态下高血糖、血流动力学异常、肾素一血管紧张素系统激活、内皮素（ET）-1以及转化生长因子（TGF）-β、血小板源性生长因子等均可使之激活,诱导肾小球系膜细胞肥大,细胞外基质合成增加,降解减少,从而参与和促进糖尿病肾病的发生、发展。     

细胞外信号调节激酶/丝裂原激活的蛋白激酶细胞信号转导通路与类风湿关节炎研究现状

在细胞生命活动的过程中,不同的细胞相互问通信协调,将外界的信号传递至效也细胞胞内,启动特定的生理功能.传递信号的通路种类繁多,有其各自功能,也互相交义影响,而细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinaaes,ERK)通路就是将细胞外信号传递至细胞内的信号通路之一.     

细胞外信号调节激酶/丝裂原激活的蛋白激酶细胞信号转导通路与类风湿关节炎研究现状

在细胞生命活动的过程中,不同的细胞相互问通信协调,将外界的信号传递至效也细胞胞内,启动特定的生理功能.传递信号的通路种类繁多,有其各自功能,也互相交义影响,而细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinaaes,ERK)通路就是将细胞外信号传递至细胞内的信号通路之一.