8号染色体异常的急性白血病31例分析

【目的】探讨8号染色体异常在急性白血病中的检出率及预后。【方法】采用G显带常规技术对332例急性白血病患者的染色体核型进行分析。【结果】8号染色体异常患者31例,检出率为9．3％;t（8;21）18例,检出率为5．4％,其中15例完全缓解（CR）（83．3％）,与本科同期急性髓系白血病（AML）（不包括M3）相比差异有统计学意义（X^2=4．981,P=0．026）;8号三体8例,检出率为2．4％,其中5例CR（62．5％）,与本科同期AML（不包括M3）相比差异无统计学意义（X^2=0．005,P=0．942）,其余少见类型如t（8;13）、t（8;14）、t（8;20）、t（8;22）、8p^-,仅t（8;22）CR。【结论】t（8;21）是8号染色体异常中最常见的核型改变,预后良好;其次为8号三体,在AML中预后中等,而在急性淋巴细胞白血病（ALL）中预后差;其余少见异常多见于ALL且预后均差。     

急性白血病和骨髓增生异常综合症染色体-7/7q-异常的细胞遗传学和临床分析

本研究探讨染色体 - 7/ 7q -异常在恶性血液学疾病的发生、发展和预后中的作用。用细胞染色体显带技术分析 4 10例初发急性白血病 (acuteleukemia ,AL)、71例骨髓增生异常综合症 (myelodysplasticsyndrome ,MDS)和36例慢性粒细胞白血病 (chronicmyelogenousleukemia acceleratedphase ,CML AP)的细胞核型。结果表明 :染色体- 7/ 7q -异常在AL ,MDS和CML AP患者中的检出率分别为 4 .88% ,9.86 %和 8.33% ,在急性髓细胞白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病 (ALL)中均可检出染色体 - 7/ 7q -异常 ,检出率分别为 4 .70 %和 6 .2 5 % ,两者无明显差别 (P >0 .0 5 )。 9例具有单独染色体 - 7或 7q -异常 ,2 2例伴有其他染色体异常 ,如 -X、- 5、 8、t(3;3)、t(11;16 )、t(2 ;11)等。发现 1例MDS RAEB患者具有 - 7异常克隆 ,同时还有 7q -异常克隆出现 ,而且 - 7异常的细胞数高于 7q -异常的细胞数。接受化疗的 7例ALL中 4例获得完全缓解 ;13例AML患者中仅 2例获得完全缓解 ;7例MDS患者中 6例转化急性白血病 ;3例CML AP中无 1例缓解。结论 :染色体 - 7/ 7q -异常是恶性血液肿瘤常见的染色体异常 ,在髓系和淋巴细胞中均可出现 ,- 7异常和 7q异常可在同一患者共存 ;具有染色体 - 7/ 7q -异常的患者预后差。     

急性髓系白血病染色体核型异常分析研究

本研究旨在探讨急性髓系白血病染色体核型异常情况。采用直接法或短期培养法制备骨髓细胞染色体,并应用染色体R显带技术对379例患者进行常规细胞遗传学检测。结果表明：379例患者中共检出216例存在克隆性染色体异常,包括19种平衡易位和70种染色体缺失或获得,占所分析患者的56．99％。t（15;17）（95例）为最常见的染色体异常,-Y（22例）为最常见的数目异常,分别占所分析患者的25．86％和5．80％。90．9％的-Y异常与t（8;21）同时出现,占t（8;21）异常的40．81％。各FAB亚型间染色体核型异常存在统计学差异,M3组显著高于其它组（P〈0．05）。男女性别间统计无显著性差异（P〉0．05）。结论：应用R显带技术可检出56．99％的急性髓细胞白血病患者染色体异常,且主要为染色体特异性重排,部分核型异常与特定的FAB亚型相关,这可有助于急性髓系白血病的诊断及分型。     

成人t(8;21)急性髓系白血病M2型治疗方案及预后分析

目的探讨成人t(8;21)急性髓系白血病M2型(AML-M2)的生物学特征与疗效和预后的关系。方法采用COX回归模型和Kap lan-M e ier方法对1990年至2003年我所收治的54例初治成人t(8;21)AML-M2患者的预后影响因素进行了回顾性分析。结果160例可统计疗效的AML-M2患者的完全缓解(CR)率为81.9%,其中染色体未见异常组CR率82.4%,t(8;21)异常组CR率88.5%,二者差异无统计学意义(P>0.05)。在52例可统计疗效的t(8;21)患者中,28例单纯t(8;21)患者的CR率为100.0%,24例t(8;21)附加其他染色体异常患者的CR率为75.0%,二者差异有统计学意义(P<0.01)。实际的3年总体生存(OS)率:核型未见异常的AML-M2患者组为20.3%,t(8;21)患者组为25.0%(P>0.05);单纯t(8;21)患者组的3年无病生存(DFS)率为46.4%,有附加染色体异常患者组为0%(P<0.01)。多因素分析显示,是否有附加染色体异常是t(8;21)AML-M2独立的预后因素,对缓解率、DFS及OS均有不良影响。采用异基因造血干细胞移植(HSCT)和中或高剂量阿糖胞苷作为缓解后治疗患者的DFS率明显高于接受常规剂量阿糖胞苷者(P<0.01)。结论t(8;21)AML-M2也存在异质性,有附加染色体异常对预后有不良影响,采用HSCT和中或高剂量阿糖胞苷作为缓解后治疗有利于延长患者生存期。对于有高危险因素的患者,尤其是有附加染色体异常的患者,还是建议进行HSCT。     

应用多重套式RT-PCR检测儿童急性淋巴细胞白血病的融合基因

目的　研究染色体结构易位所致的融合基因在儿童急性淋巴细胞白血病 (ALL)的表达。方法　采用多重套式RT PCR结合染色体R带或G带核型分析、流式细胞仪细胞免疫表型检测对 64例儿童ALL进行分析。结果　64例ALL患儿中 23例(36. 0% )具有 13种染色体畸变产生的融合基因,包括E2A/PBX1,E2A/HLF,TEL/AML1,TLS/ERG,MLL/AF4,MLL/AF9,MLL/AF10,MLL/AFX,MLL/AF6,MLL/ELL,dupMLL,TAL1D,HOX11。ALL患儿融合基因和染色体总畸变率为 67. 2%(43 /64)。结论　多重套式RT PCR结合染色体核型、免疫表型是儿童ALL临床诊断、治疗和预后判断的重要依据。     

The incidence of chromosome 9p21 abnormalities and deletions of tumor suppressor genes p15(INK4b)/p16(INK4a)/p14(ARF) in patients with acute lymphoblastic leukemia

Cytogenetic changes are of pivotal prognostic significance in patients with de novo acute lymphoblastic leukemia (ALL). However, in some cases leukemic blasts can harbor gene lesions on a submicroscopic level without evidence of a corresponding abnormality by conventional cytogenetic studies. This can result in failure to recognize chromosomal abnormalities and inappropriate evaluation with respect to therapy assignments. To study the discrepancy in the detection of deletions of the short arm of chromosome 9 and deletions of tumor suppressor genes p15/p16/p14 on chromosome 9p21, we analyzed bone marrow samples from 92 patients with ALL both by cytogenetic analysis and by Southern blot. In 41 patients (45%), we found deletions of p15/p16/p14, which were homozygous in 27 and hemizygous in 14. Cytogenetic analysis demonstrated abnormalities of the short arm of chromosome 9 in the form of 9p- or del(9p21-22) in only 5 of the 41 patients (12%). Only 2 of 51 patients without gene deletions as detected by Southern blot revealed a 9p- abnormality, which was found only in a subpopulation of the cells. We demonstrate that deletions of the p15/p16/p14 genes on chromosome 9p21 are more frequent than indicated by cytogenetic analysis. Molecular techniques in addition to cytogenetic studies are necessary to detect otherwise-unrecognized genetic lesions of the short arm of chromosome 9.     

t(8;21)急性髓性白血病特征和预后分析

t（8;21）是急性髓性白血病最常见的染色体异常之一.t（8;21）AML具有独特的临床特征,化疗缓解率较高,生存期较长,但亦有预后较差的报道.为进一步探讨中国人群t（8;21）AML的临床特征及预后因素,对75例t（8;21）AML患者,其中包括68例FAB-M2,5例M4,2例M5进行了回顾性分析.结果表明：39例患者骨髓中可见Auer小体（52%）,而骨髓嗜酸细胞增多（＞5%）见于5例（6.7%）;免疫分型高表达CD34和HLA-DR,仅有13例患者表达CD19（20.9%）;细胞遗传学分析示62.5%患者具有附加染色体异常,主要附加异常类型为性染色体丢失（LOS）,＋4,del（9q）及＋8;通过常规诱导化疗,完全缓解率82.7%;随访1-96月,19例复发,中位复发时间为10.5月（3-42月）,中位生存时间是20个月,5年预期生存率为32.3%;多因素分析显示染色体核型,髓外白血病,年龄及缓解后治疗方式是影响生存的主要预后因素;伴有附加染色体异常患者的生存期较单纯t（8;21）患者短（P=0.019）,而不同附加异常之间无明显差异;髓外白血病亦是不良的预后因素（P=0.012）,年龄≤15岁患者比年龄＞15岁者生存期长（P=0.045）;接受造血干细胞移植的患者的预后好于单纯化疗者（P=0.030）.结论：中国人群t（8;21）AML具有不同于其他人群的特性,其预后相对较差,尤其是伴有附加染色体异常及髓外白血病者预后更差;对于具有不良预后因素的t（8;21）AML患者应该建议接受造血干细胞移植.     

急性白血病患者染色体核型分析

目的联合细胞形态学、免疫分型检测手段探讨染色体分析在急性白血病AL诊断及预后判断中的价值。方法 310例AL患者于治疗前采用骨髓直接法和(或)短期培养法,按常规进行染色体制备,用G显带技术分析中期细胞数10-30个,平均每例分析细胞20个,核型按《人类细胞遗传学国际命名法体制(ISCN)1995》进行描述。结果急性髓系白血病(AML)异常核型中,以t(8;21)和M2最多见,其次是t(15;17)和M3、inv(16)和M4Eo、t/del(11q23)和M5等。急性淋巴细胞系白血病(ALL)患者中异常检出率最高的是t(9;22),数目异常以超二倍体、多倍体常见。结论联合细胞形态学、免疫表型分析、染色体检查技术对于白血病的准确诊断、靶向治疗、判断预后具有重要意义。     

荧光原位杂交技术检测骨髓增生异常综合征患者5、7、8号染色体异常及临床意义

目的用荧光原位杂交（FISH）技术分析骨髓增生异常综合征（MDS）患者的染色体改变及预后。方法用常规细胞遗传学分析和FISH法分析37例MDS患者8、5、7号染色体的异常变化。用SPSS11．5统计软件，对患者的遗传学异常与疾病转归、预后之间关系进行相关性检验。结果检出染色体异常21例（56．8％），其中复杂异常6例（16．2％），8号染色体异常9例（24．3％），-5／5q-异常2例（5．4％），-7／7q-异常2例（5．4％）。平均随访12个月，1例失访，22例存活，14例死亡，12例转变为急性白血病。复杂核型与MDS的急性白血病转化及死亡密切相关；8号染色体三体和-7／7q-与死亡相关。结论FISH能敏感地检测出小克隆的异常，应用多种探针并结合染色体检测能较准确判断MDS患者的预后，异常核型比例高提示预后差。     

Radiation-related CML]

The clinical, cytogenetic and molecular-genetic findings of 55 patients with radiation related chronic myelocytic leukemia(CML) among the Hiroshima atomic bomb survivors were compared with 167 CML patients without a history of the radiation exposure. The retrospective analysis of the hematological data kept at the laboratory center where the survivors had been examined twice a year revealed a possible chronologic sequence in appearance of clinical and laboratory findings characteristic of CML. No particular differences were observed between the two groups in the incidence of Philadelphia chromosome and break points of the BCR gene, contrasting with those of radiation-related acute myelocytic leukemia which showed complex chromosome abnormalities without specific type of translocations, especially of 8;21 and 15;17, and a high incidence of genetic instability of the leukemic cells.     

BCR-ABL融合蛋白多样性及其与白血病表型的关系

本文报告了BCR-ABL融合蛋白及其与白血病表型的关系。首先报告BCR-ABL融合基因的结构及其转录本,其中包括这些融合基因可分为M-bcr,m-bcr和u-bcr三种类型及其见于那些白血病;其次报告了BCR断点位置的变化,ABL的特殊断点,BCR-ABL信息RNA的拼接,BCR-ABL融合蛋白的结构与白血病表型的关系;此外,还介绍了BCR/ABL细胞有染色体的其它异常和Ph染色体的变种等;最后论述了BCR/ABL融合蛋白起源于何种细胞系,何种成熟阶段。少数文献报告此蛋白起始于多能干细胞。     

一株新的急性髓系白血病细胞系SH-2的建立及其鉴定

目的 采用自体骨髓基质细胞与原代白血病细胞加rhIL-3后共培养的方法建立1株新的人急性髓系白血病(AML)细胞系SH-2,并对其生物学特征进行全面鉴定.方法 采集1例经联合化疗和异基因外周血干细胞移植末缓解的AML-M2a型患者骨髓,分离单个核细胞,加入含20%胎牛血清的IMDM培养基内置37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱中传代培养,培养过程中保留自体骨髓基质细胞,同时加入细胞因子rhIL-3,长期体外培养成功建立伴有-Y,der(16)t(16;17)(q24;q12),-17,+19和p53突变的AML细胞系SH-2,并通过细胞学、遗传学、免疫学、分子学和小鼠致瘤实验等多种方法对SH-2细胞的生物学特征进行全面鉴定.结果 SH-2细胞已在体外持续生长3年余而不需加用生长因子和基质细胞.其EB病毒、支原体检测均为阴性.SH-2细胞具有和原代白血病细胞相同的髓系细胞形态学特点,伴有自然杀伤相关抗原表达的AML免疫表型(CD13+、CD33+、CD56+、CD16/56+)和45,X,-Y,der(16)t(16;17)(q24;q12),-17,+19的亚二倍体核型,后者逐渐被伴有上述染色体异常的近四倍体核犁所取代.荧光原位杂交(FISH)和多色FISH证实了以上异常,并揭示-17导敛1个p53基因丢失.DNA序列分析揭示另1个p53等位基因第5号外显子的576编码子点突变(CAC→CAT).RT-PCR显示除了表达于细胞因子(SCF)外,其余细胞因子均不表达;不表达多药耐药基因而表达凋亡相关基因,如bcl-2、Fas、GST-1T和p21.短串联重复序列PCR证明了SH-2细胞和患者门血病细胞的同源性.SH-2细胞有一定的集落形成能力并能在裸鼠皮下及SCID小鼠内脏成瘤.结论 SH-2是一株新的具有明晰生物学背景的AML细胞系,为白血病研究提供了又一有用工具.     

Cytogenetic studies in 174 consecutive patients with preleukemic or myelodysplastic syndromes

Routine cytogenetic studies were done in 174 consecutive patients with preleukemic or myelodysplastic syndromes (PL/MDS): 5 had the 5q - syndrome, 2 had refractory cytopenia, 43 had refractory anemia, 38 had refractory anemia with ringed sideroblasts, 69 had refractory anemia with excess blasts, 6 had refractory anemia with excess blasts in transition, and 11 had chronic myelomonocytic leukemia. Successful chromosome studies were accomplished in 167 patients (96%); 64 (37%) had a chromosomally abnormal clone. Abnormal clones were most common among patients who had refractory anemia with excess blasts (45%), refractory anemia with excess blasts in transition (60%), and chronic myelomonocytic leukemia (45%); they were least common among patients with refractory anemia (32%) and refractory anemia with ringed sideroblasts (21%). The two patients with refractory cytopenia had normal cytogenetic results. Each patient with the 5q - syndrome had a 5q-chromosome, as this is a prerequisite for the diagnosis. The two most common structural abnormalities were deletion of part of a chromosome 5 long arm (17 patients) and deletion of part of a chromosome 20 long arm (8 patients). Nonspecific structural abnormalities of chromosomes 1, 3, 6, and 17 were also common. The most common numeric abnormalities were monosomy 5 (7 patients), monosomy 7 (4 patients), loss of the Y chromosome (9 patients), and trisomy 8 (20 patients). No chromosome abnormalities were specifically associated with any PL/MDS classification.     

细胞遗传学与荧光原位杂交对急性髓性白血病染色体异常的研究

目的:比较常规细胞遗传学G显带与荧光原位杂交(FISH)对急性髓白血病染色体异常的研究。方法:所有患者初诊时均做常规G显带,根据G显带结果选用相关的特异性探针进行荧光原位杂交。结果:行G显带检测的142例患者中124例获得染色体核型,18例失败。1例正常核型和3例无可供分析的分裂相的患者FISH均检出异常克隆。FISH辨别出2例t(8;21)变异易位。结论:对于有足够可分析分裂相的患者,常规细胞遗传学G显带是检测白血病染色体异常核型的可靠工具。对可疑有变异易位或因染色体形态差难以辨认的核型,或因细胞分裂指数低而分裂相少或无分裂相的患者,FISH检测是重要的补充。     

135例非单纯Ph染色体的慢性髓系白血病细胞遗传学分析

本研究探讨135例非单纯Ph染色体慢性髓系白血病（CML）的染色体检查结果并进行细胞遗传学分析：135例CML染色体均采用骨髓细胞直接法和／或短期培养法制备，应用R显带技术对其进行显带分析。结果表明：经染色体检测的1210例的CML中135例有非单纯Ph染色体异常。本组135例非单纯Ph染色体CML中，慢性期87例、加速期21例、急变期27例.87例慢性期患者中，14例伴简单变异易位，22例伴复杂变异易位，其余的伴其他染色体异常，其中伴8号染色体三体4例，伴双Ph4例，伴i（17）5例；在21例加速期患者中，伴8号染色体三体4例，伴双Ph4例，伴i（17）3例；在27例急变期患者中，2例伴简单变异易位，3例伴复杂变异易位，其余的伴其他染色体异常，其中伴8号染色体三体5例，伴双Ph5例，伴i（17）2例。本组常见额外染色体异常检出率高低依次为＋Ph、＋8、i（17）、-Y、＋19和＋21。本组有16例伴简单变异易位，25例伴复杂变异易位。结论：CML是起源于多能干细胞的恶性血液病．染色体核型分析对CML的诊断、预后、发病机制的探讨和治疗方案的选择都具有重要的价值。     

伴复杂核型异常的髓系恶性血液病8号染色体异常分析

为研究伴复杂核型异常（complex chromosome abnormalities，CCA）的髓系恶性血液病的8号染色体异常，采用常规染色体分析和多重荧光原位杂交技术检测81例伴CCA的髓系恶性血液病患者的染色体异常，其中急性髓系白血病（AML）25例、慢性髓系白血病（CML）35例和骨髓增生异常综合征（MDS）21例。结果表明：81例标本中CCA涉及所有染色体，而8号染色体异常发生率为35．8％（29／81），其中AML为56％（14／25）、CML为28．6％（10／35）、MDS为23．8％（5／21），CML加速期、急变期发生率分别为20％（1／5）、33．3％（9／27）。29例伴8号染色体异常的髓系恶性血液病中有15例为非平衡易位，占51．7％。结论：8号染色体异常是伴CCA的髓系恶性血液病中常见的染色体异常，可能与疾病进展相关，多为不平衡性易位。     

原发性血小板增多症的细胞遗传学特征

目的研究原发性血小板增多症(ET)患者的细胞遗传学特征。方法应用经典细胞遗传学(CC)方法R显带技术研究98例初诊ET患者的染色体异常,进一步应用SpectrumRed标记的8号染色体着丝粒DNA探针和间期荧光原位杂交技术(FISH)检测50例患者+8的发生率。结果CC分析98例ET患者除2例无分裂相外,仅6例(6.12%)发现染色体异常:1例13q-、2例5q-、1例7q-、1例der(14)t(1;14)和1例Rob(13;14)。FISH分析50例患者中1例+8。结论CC技术检测ET患者染色体异常发生率为6.25%,且缺乏特征性染色体异常。+8发生率低。     

CYTOGENETIC STUDIES OF LEUKEMIA INDUCED BY 6,8,12- AND 7,8,12-TRIMETHYLBENZ(A)ANTHRACENE

Cytogenetic studies on 64 rat leukemias induced with 7,8,12- and 6,8,12-trimethylbenz(a)anthracene were performed. Highly distinctive changes were found repeatedly in one special pair of chromosomes. 10 leukemias (15.6%) showed the presence of stemline(s) with trisomy of the largest telocentric chromosome (C-1 trisomy). Another chromosome abnormality, elongation of one of the pairs of the same chromosome (long C-1), was found in 5 leukemias (7.8%) as the predominant stemline and in 7 other cases as a small cell population. This chromosome abnormality, despite slight differences in their elongation rate, was defined as a new specific chromosome abnormality. Other chromosome abnormalities not related with C-1 chromosome were found in 8 cases (12.5%). The remaining 41 leukemias (64.1%) had the predominant stemline with normal karyotype. From this study it appears that three structurally different hydrocarbon carcinogens, 7,12-dimethylbenz(a)anthracene and 7,8,12- and 6,8,12-trimethylbenz(a)anthracene act on blood-forming cells by a common specific mechanism.     

应用逆转录多重PCR方法检测正常核型急性白血病患者的易位相关融合基因

为了探讨逆转录多重PCR方法在检测具有正常核型的急性白血痛（AL）患者的易位相关融合基因中的价值，应用包括19种染色体易位特异性引物对的逆转录多重PCR方法对37例经常规细胞遗传学方法揭示为正常核型的AL患者进行了检测。结果表明：有8例（21．6％）AL患者分别检测出有PML／RARA、AML1／ETO、CBFB／MYH11和BCR／ABL等4种融合基因的存在。结论：逆转录多重PCR可在核型正常的AL患者中检出隐匿的染色体易位，故凡常规细胞遗传学显示为核型正常的AL患者，均应对其进行逆转录多重PCR检测。     

Genetic analysis of hematopoietic neoplasms

Now dozens of genetic abnormalities have been identified in leukemias and lymphomas mainly through breakpoint analyses of the chromosome translocations recurrently observed in these tumors. After analyses on most of the major chromosome translocations have been completed, the current interests of genetic researches on hematopoietic tumors are unbalanced chromosome abnormalities that accompany gene deletions and amplifications among a variety of genetic mutations. In this regard, array based comparative genomic hybridization (CGH) and related techniques provide robust measures that enable high throughput genome-wide estimations of copy number changes for a large number of tumor samples. With these and other innovative techniques, identification of relevant genes for leukemogenesis and lymphomagenesis is being accelerated to provide more comprehensive understandings on development of these hematopoietic neoplasms.