兔眼冲击伤后早期视网膜超微结构改变

目的:通过对兔眼冲击波损伤后早期视网膜超微结构改变的动态观察,探讨眼冲击波损伤后视网膜结构改变及演变过程。方法:用激波管制成兔眼冲击波损伤动物模型,分别于伤后不同时点处死动物,摘取全眼球,取视飞纹下方后极部全层眼球壁,在透射电镜下观察其超微结构改变。结果:冲击波造成了一系列的视网膜结构改变。首先表现为视网膜视细胞结构损伤,如视细胞的外节出现微丝微管的断裂肿胀和结构紊乱、视盘肿胀和崩解、视细胞核肿胀碎裂;继而出现视网膜水平细胞和节细胞的反应性肿胀,线粒体等膜性细胞器明显肿胀,细胞间骨架破坏;随后视网膜内网状层肿胀,节细胞膜性细胞器明显肿胀,细胞间骨架破坏消失,细胞间结构异常、溶解消失。结论:眼冲击波损伤后视网膜视细胞的早期超微结构改变可能是冲击波的直接致伤效应所致,节细胞的结构紊乱可能是继发性改变,均是不可逆性视功能损害的病理改变基础。     

视网膜白蛋白检测在评价小鼠血-视网膜屏障中的实验研究

目的：建立氧诱导视网膜新生血管小鼠模型,观察白蛋白在正常鼠和模型鼠视网膜中的含量变化,探讨白蛋白检测在评价血-视网膜屏障中的作用。方法取鼠龄7 d（P7）的健康C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为模型组和正常对照组,模型组置于75％±2％氧气浓度的密闭氧舱中5 d,鼠龄12 d时（P12）返回正常空气环境以建立氧诱导鼠视网膜新生血管模型;正常对照组置于正常空气环境中饲养不予任何处理。模型组和正常对照组均在鼠龄17 d（P17）行FITC-Dextran左心室灌注视网膜铺片,荧光显微镜下观察视网膜血管分布和形态;组织切片HE 染色观察突破视网膜内界膜的血管内皮细胞。提取不同鼠龄（ P13、P15、P17）模型组和正常对照组视网膜总蛋白质,采用western blot技术检测视网膜组织中白蛋白的表达。结果荧光造影结果显示模型组视网膜有大量新生血管形成及明显的荧光素渗漏;组织切片显示模型组有大量突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核;模型组视网膜白蛋白含量随缺氧时间延长而增加。结论在氧诱导鼠视网膜新生血管形成过程中白蛋白含量明显增加,其变化趋势与血-视网膜屏障破坏和视网膜新生血管形成具有时间上的一致性,白蛋白检测可以作为评价血-视网膜屏障有效指标。     

糖可明对糖尿病视网膜病变中血-视网膜屏障的影响

目的探讨糖可明对糖尿病视网膜病变的影响。方法用链脲佐菌素(STZ)复制大鼠糖尿病视网膜病变模型,观察糖可明对模型动物血液生化、血-视网膜屏障(Blood-retinal barrier,BRB)渗漏和视网膜VEGF、occludin表达的影响。结果糖可明连续给药8周后,可明显降低GLU、TG和TC的含量(P0.05~0.01);降低血-视网膜屏障的通透性;PCR结果显示,给药组大鼠视网膜occludin mRNA表达量显著增加(P0.05~0.01);免疫组化实验发现糖可明可显著降低视网膜全层的VEGF表达(P0.01)。结论糖可明通过下调糖尿病大鼠视网膜VEGF的表达和增加occludin的表达,从而发挥其保护BRB、降低BRB通透性的作用,延缓糖尿病视网膜病变的进程。     

伊凡思蓝早期诊断血—视网膜屏障破坏

目的 血－视网膜屏障破坏（Blood-retinal barrier Breadkown,BRBB)是许多眼底病的共同病理改变。本研究的目的是探讨能否应用伊凡思蓝（Evans blue,EB)作为示踪物定量诊断BRBB。方法 实验动物选用体重约200克的雄性Sprague-Dawley大鼠。首先应用EB测定由血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF)引起的视网膜血管渗漏。然后用EB测量早期糖尿病导致的BRBB。以甲酰胺提取视网膜中的EB,用分光光度计测量提取液中的EB浓度。最后根据视网膜重量标准化视网膜内的EB含量。结果 VEGF处理眼视网膜内的EB含量显著高于未处理眼视网膜内的EB含量（P＜0．0001）。早期糖尿病大鼠视网膜的EB含量亦显著高于正常对照组视网膜内的EB含量（P＜0．05）。结论 EB是一种可以定量测定BRBB的敏感示踪物。     

Ⅱ.微波对大鼠血睾屏障影响的电镜观察

作者用微波照射大鼠睾丸后,以硝酸镧作示踪剂,于照后1天、7天、14天和70天,用电镜观察20只大鼠血睾屏障的变化。结果发现,血屏睾障的结构和对硝酸镧的通透性均未见异常。     

糖尿病大鼠视网膜VEGF表达与血-视网膜屏障损伤的实验研究

目的 观察糖尿病大鼠视网膜VEGF的表达及早期血-视网膜屏障的改变,探讨二者之间的关系.方法 选取62只健康SD大鼠,应用链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组(N)、糖尿病0.5月组(DM0.5)、糖尿病1月组(DM1)、糖尿病3月组(DM3)及糖尿病5月组(DM5).分别行RT-PCR及Western Blot等实验方法,从mRNA及蛋白水平检测大鼠视网膜VEGF的表达程度.同时应用伊文思蓝法测量血-视网膜屏障的损伤.结果 正常对照组大鼠视网膜有VEGF mRNA及蛋白的表达,DM0.5组表达开始增高(P＜0.05),随病程延长,表达量逐渐增高,至DM5组视网膜VEGF表达量约为正常对照的2倍(P＜0.05).伊文思蓝法结果显示糖尿病大鼠视网膜血管渗漏较正常大鼠增强,DM0.5组鼠即有增高(P＜0.05),随病程延长,渗漏逐渐增强,至DM5组,伊文思蓝渗漏量约为正常对照的6倍(P＜0.05).结论 早期糖尿病大鼠血-视网膜屏障损伤,VEGF作为一种血管渗漏性因子可能在此过程中起重要作用.     

实验性前部PVR血-房水屏障的改变

目的 通过房水蛋白浓度的测定,探讨实验性前部增生性玻璃体视网膜病变（anterior proliferative vitreoretinopathy,aPVR）病理状态下血－房水屏障的变化。方法 将培养的同种兔皮肤成纤维细胞10^5注入行睫状体平部穿通伤及晶状体切除后的兔眼睫状前区，制作前部PVR的动物模型，以行睫状体平部穿通伤及晶状体切除后的兔眼作为对照组，以不做手术的兔眼为正常组。于术后14、28、56d分别测定实验组和对照组房水蛋白的含量。结果 术后2周，实验组和对照组房水蛋白含量无明显差别，但均明显高于正常组；术后4周、8周实验组房水蛋白含量明显于对照组。结论 在aPVR病理状态下，血－房水屏障受到破坏，是引起低眼压的原因之一。     

大鼠血视神经屏障特性的观察

目的研究大鼠视神经血视神经屏障与血脑屏障微血管内皮细胞在超微结构、标记物表达及通透性方面的差异。方法SD雄性大鼠20只,分别取筛板前区、筛板区、筛板后区、眶内段、管内段、颅内段和前额叶皮层。10只用电镜观察各部位微血管内皮细胞的超微结构;10只用免疫组织化学的方法检测内皮屏障抗原（EBA）的表达及微血管周围纤维蛋白原外渗情况。结果电镜显示视神经各段和前额叶皮层微血管内皮细胞均为紧密连接,以30000倍拍摄微血管内皮细胞。将5mm透明方格网重叠于照片上,随机数3个方格质膜囊泡数,最终折算成每μm^2内膜内质膜囊泡的数量。筛板前区内皮细胞质膜囊泡为（108．0±12．0）个,多于前额叶皮层[质膜囊泡（31．8±2．9）个],差异有统计学意义（P〈0．05）;而筛板区内皮细胞质膜囊泡（30．4±2．8）个、筛板后区（30．3±3．0）个、眶内段（31．3±3．8）个、管内段（28．9±2．0）个和颅内段（30．1±2．1）个与前额叶皮层比较差异均无统计学意义（均P〉O．05）。免疫组织化学显示筛板前区微血管内皮细胞EBA表达阴性。微血管周围纤维蛋白原阳性;而筛板区、筛板后区、眶内段、管内段、颅内段和前额叶皮层EBA阳性表达。微血管周围纤维蛋白原阴性。结论视神经筛板前区微血管内皮细胞在超微结构、标记物表达及通透性方面与前额叶皮层存在差异,因而不具有血脑屏障特性,而筛板区、筛板后区、眶内段、管内段和颅内段与前额叶皮层存在相似的特性,故具有血脑屏障特性。     

七叶皂苷钠对糖尿病大鼠血-视网膜屏障损伤的保护作用及其机制

目的明确七叶皂苷钠（ESC）对糖尿病大鼠血-视网膜屏障(BRB)的保护作用,进一步探讨其作用机制。方法采用链脲佐菌素（STZ）诱导SD（Sprague Dawley）大鼠建立糖尿病性视网膜病变（DR）模型,予以七叶皂苷钠（1.5mg/kg?d）灌胃处理,通过检测视网膜中伊文思蓝（EB）渗漏量评估ESC对DR大鼠BRB的影响;采用Western blot法检测视网膜组织Occludin蛋白、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶（Rho associated coiledcoil forming protein kinase,ROCK）蛋白及磷酸化肌球蛋白轻链（P-MLC）蛋白表达的量。结果ESC能够减少DR大鼠的BRB渗漏情况（P < 0.01）,ESC能够增加Occludin蛋白表达（P < 0.01）,同时抑制ROCK/P-MLC通路的激活（P < 0.01）。结论七叶皂苷钠对糖尿病大鼠BRB具保护作用,其机制为增加DR大鼠视网膜组织Occludin蛋白的表达,同时抑制炎性信号通路的激活。     

血管内皮生长因子诱发早期糖尿病的血-视网膜屏障破坏

目的血管内皮生长因子(VEGF)可以导致强烈的血管渗漏。越来越多的文献报道在糖尿病视网膜病变时VEGF升高。早期糖尿病性视网膜病变的一个特点是血管渗漏增加。本文的目的是探讨应用可溶性Flt阻断VEGF的作用能否抑制视网膜血管渗漏。方法重约200g的S-D大鼠通过注射链左霉素制备糖尿病模型。1周后通过静脉注射5%的PBS加甘油,或白介素-6受体单克隆抗体,或可溶性Flt,24h后应用伊凡思蓝法测定血管渗漏。用枸橼酸钠缓冲液处理的大鼠作为对照组。结果糖尿病大鼠的血管渗漏较对照组显著升高(P<0.05)。PBS加甘油和白介素-6受体单克隆抗体处理后的糖尿病大鼠的视网膜血管渗漏无变化(P>0.05),但用可溶性Flt处理糖尿病大鼠的血管渗漏显著降低(P<0.0001)。结论VEGF在糖尿病性视网膜病变的发生过程中起着十分重要的作用。通过抑制VEGF可以降低早期糖尿病性视网膜病变的血管渗漏。     

大剂量地塞米松对犬严重肺冲击伤的治疗作用

目的　观察大剂量地塞米松对犬严重肺冲击伤的治疗效果。方法　将 18条成年犬随机分为对照组 (T0 )与治疗组 (Tdex) ,用BST 1生物激波管造成犬严重肺冲击伤。T0 组伤后即刻给予半卧位、吸氧、补液、抗感染等处理 ;Tdex组在以上处理基础上分 3次 (伤后 0 .5、8、12h)给予总量 11mg/kg大剂量地塞米松治疗 ,于致伤后 0、0 .5、2、4、6、8、12h检测血流动力学与血气指标 ,观察伤后 2 4h内平均肺体指数及死亡率。结果　T0 组伤后血流动力学及血气指标发生严重紊乱 ,HR、sBP出现一过性下降 ,CI、CO、LCW、PaO2 及SO2 指标明显下降而SVR、SVRI显著增高 ,伤后 2 4h肺体指数为 ( 1 83±0 3 8) % ,死亡率为 40 % ;Tdex组伤后HR、sBP、CI没有明显下降 ,与T0 组相比 ,伤后 0 .5hsBP显著增高 (P <0 .0 5 ) ,伤后 4～8hLCW也显著增高 (P <0 .0 5 ) ,伤后 6～ 12hSVR显著降低 (P <0 .0 1) ,SVRI也显著降低 (P <0 .0 5 ) ,伤后 2 4h肺体指数仅为 ( 1.3 2± 0 .2 1) % (P <0 .0 5 ) ,死亡率仅为 14 .3 % ,但对血气指标紊乱没有明显改善。结论　大剂量地塞米松对犬严重肺冲击伤具有明显治疗作用     

脑外伤后局部应用地塞米松对家兔脑病理改变的影响

目的 :通过研究脑外伤后脑皮层局部应用地塞米松对家兔脑组织形态和脑电图的影响 ,探讨地塞米松对损伤灶部位的治疗作用或负面影响。方法 :15只家兔随机分为A、B 2组 ,A组 10只 ,B组 5只。采用额顶骨骨窗成形后硬脑膜外打击法制作动物脑损伤模型。致伤后应用局部微量等距离扩渗法分层浸注地塞米松 ,实施皮层损伤灶给药。A组为单侧骨窗成形 ,即单侧皮层损伤 ,10只家兔随机平均分为A1和A2 2组。A1组为生理盐水对照组 ,于致伤侧按上述方法给予同A2 组等体积的生理盐水。A2 组于致伤侧局部给予地塞米松作为治疗组。B组双侧骨窗成形后造成双侧脑皮层损伤模型 ,设左侧为生理盐水对照侧 (B1) ,右侧为地塞米松治疗侧 (B2 ) ,方法同A组。分别于致伤前后、用药前后动态观察脑电图。 72h后行病理切片检查。结果 :2组家兔致伤后均呈损伤性脑电图。用药后 4 0～ 90min ,A2 组和B2 侧脑皮层脑电图好转 ,4 8h后接近正常。A1组和B1侧异常脑电图则持续存在。病理学检查可见治疗组 (侧 )较对照组 (侧 )脑组织挫伤、水肿程度明显为轻。结论 :家兔脑损伤后局部应用微量地塞米松可明显减轻损伤灶脑挫伤和脑水肿程度 ,并能改善脑电图而未发现有负面影响或癫痫样脑电图。     

大鼠创伤性脑损伤后血脑屏障通透性变化的研究

目的研究大鼠创伤性脑损伤后血脑屏障（BBB）通透性的变化。方法参照Feeney’s自由落体致伤法,制作大鼠顶叶局灶皮质挫裂伤模型。应用伊文氏兰（Evans Blue,EB）示踪,测定伤后不同时点皮层和海马脑组织中EB含量;应用荧光显微镜观察皮层和海马是否存在EB的渗出。结果损伤灶皮层和同侧海马中EB含量在伤后1～6h与伤后1～7d明显增多,高峰期在3h和3d。荧光显微镜下发现血脑屏障中间期损伤灶同侧海马仍然存在EB的渗出。结论大鼠顶叶局部脑挫裂伤后,损伤灶皮层和同侧海马BBB开放呈双相性变化,BBB开放中间期仍然有很少量EB渗出。     

冲击伤后房水神经兴奋性相关氨基酸含量改变的实验研究

目的：通过对兔眼冲击波伤后房水神经兴奋性相关氨基酸含量的动态测定，分析了解其变化及意义。方法：用激波管制成实验兔右眼冲击伤模型，造型前局部麻醉下取0．3ml左眼房水及1ml血清。伤后第10、20d分别处死实验兔各6只，取右眼房水0．3ml。用液相色谱仪分别测定标本中8种神经兴奋性相关氨基酸含量。结果：对照眼房水神经兴奋性氨基酸含量均高于血清；神经兴奋抑制性氨基酸中牛氨酸、色氨酸、甘氨酸含量低于血清，而丙氨酸含量高于血清。冲击伤后10d和20d兔实验眼房水眼中谷氨酸、天冬氨酸和谷氨酰胺的含量比对照眼有所增高，但伤后10d仅谷氨酰胺含量的差异有统计学意义，伤后20d上述3种氨基酸含量差异有统计学意义。神经兴奋抑制性氨基酸，伤后10d和20d实验眼中甘氨酸、丙氨酸增高，其差异有统计学意义。结论：冲击波损伤后实验眼房水神经兴奋性相关氨基酸含量改变明显，以伤后20d更加显著，其改变可能与预后相关。     

大黄对大鼠脊髓损伤后血-脊髓屏障的保护作用

目的 观察不同浓度大黄对大鼠脊髓损伤(SCI)后血-脊髓屏障(BSCB)的影响,筛选大黄煎药灌服的最佳浓度,拟为临床治疗SCI提供一定的依据.方法 成年健康SD大鼠125只,随机分为假手术组(Sham组)、模型组及大黄低、中、高剂量组.大黄各剂量组用大黄水溶液灌胃,其余两组用等量生理盐水.记录大鼠SCI后双后肢运动功能(BBB)评分、脊髓含水量以及荧光显微镜观察注入伊文思蓝(EB)后的BSCB情况.结果 (1)BBB评分:模型组和大黄低、中、高剂量组与Sham组比较差异均有统计学意义(P<0.05).(2)脊髓含水量的测定:模型组和大黄低、中、高剂量组与Sham组比较差异均有统计学意义(P<0.05).(3)荧光显微镜下观察到Sham组没有EB染出,模型组EB大量染出,以3 d时染出最多,大黄各剂量组EB染出较模型组有不同程度减少,以大黄中剂量组EB染出最少.结论 中剂量组大黄有效地降低了大鼠SCI后BSCB的通透性,对其保护作用最为明显.     

血小板活化因子对颈髓损伤后血脊髓屏障的影响

探讨血小板活化因子对颈髓损伤后血脊髓屏障的影响。采用蛛钢膜下腔注射ＰＡＦ及静脉注射ＰＡＦ受体拮抗剂ＢＮ５２０２１，观察其对颈髓损伤后伤区信邻近脊髓组织ＰＡＦ含量，血脊髓屏障，颈髓水肿的影响。颈髓损伤后颈髓伤区及邻近脊髓组织ＰＡＦ含量，伊文思蓝含量，水含量均明显增加，蛛网膜下腔注射ＰＡＦ可使伤后ＰＡＦ含量，伊文思蓝含量，水含量增加更为显著。     

家兔视网膜脱离状态下玻璃体NGF水平及视网膜细胞动态观察

目的 :研究视网膜脱离状态下玻璃体内源性神经生长因子 (NGF)水平及视网膜细胞的动态变化 ,为视网膜脱离的治疗提供实验依据。方法 :健康青紫兰家兔制备视网膜脱离模型 ,模型制备后 8h ,1d ,4d ,7d ,14d以夹心酶免疫反应方法检测玻璃体NGF的水平 ,同时制备视网膜光镜、电镜标本 ,观察视网膜细胞的动态变化。统计学方法采用方差分析、秩和检验和直线相关分析。结果 :①家兔正常玻璃体NGF的水平为 (16 48± 2 5 2 )ng/L。视网膜脱离后 8h玻璃体NGF水平已增加 ,1d后达正常水平的 12 6倍 ;脱离后第 4d为正常水平的 4倍 ;第 14d降至正常水平。②视网膜脱离后第 4～ 7d变性及凋亡视细胞数增加 ,与玻璃体NGF水平显著负相关。③视网膜脱离 7d后神经节细胞层的厚度与玻璃体NGF水平显著正相关。结论 :NGF对视网膜细胞可能具有保护作用 ,提示外源性NGF可应用于治疗视网膜脱离     

水下火器爆炸致兔急性闭合性肝损伤的实验研究

目的 探讨水下火器爆炸致兔急性闭合性肝损伤的病理生理机制.方法 选取30只兔,随机分为空白对照组(10只)和实验组(20只),实施水下爆炸损伤腹部,制作急性闭合性肝损伤模型,分别于爆炸损伤12、24 h后采样(每时间点各10只),测定肝湿/干重比(W/D)、动脉血氧分压(PaO2)、谷丙转氨酶(ALT)和炎性因子.选取肝组织,显微镜观察光镜下肝组织病理形态.结果 光镜下,实验组12 h起可见肝组织片状出血,肝血管破裂出血明显,肝组织内见片状坏死,肝索破坏,炎细胞浸润,偶见肝细胞嗜酸性变.与空白对照组比较,实验组W/D明显升高(P<0.05),PaO2明显降低(P<0.05).与空白对照组比较,实验组ALT指数明显升高(P<0.05),炎性因子较空白对照组明显升高(P<0.05).结论 水下爆炸冲击波可导致实验兔急性闭合性肝损伤,引起相应病理生理学改变.     

大鼠蛛网膜下腔出血后血脑屏障通透性变化

目的 探讨大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage, SAH)后血脑屏障(blood brain barrier,BBB)通透性变化.方法 雌性SD大鼠80只,分为生理盐水对照组(NS组)和SAH组.采用经额叶底面蛛网膜下腔插管至Willis环注血法建立SAH模型,在SAH后6、12、24、36、48、60、72 h等不同时间点,应用荧光分光光度计和荧光显微镜方法分别检测大脑皮质BBB对伊文思蓝(Evans Blue, EB)的通透性,同时利用透射电镜观察BBB超微结构变化.结果 与NS组比较,大脑皮质EB含量和漏出量的最大值均出现在SAH后36 h时(P＜0.05),于60 h时恢复至正常水平(P＞0.05).BBB超微结构改变在SAH后36 h时最明显.结论 BBB通透性改变发生在SAH急性期,是由多种因素共同所致,而且SAH后BBB具有自我修复特性.