抑制HSP 70表达对体外培养的脑胶质瘤细胞生长的影响

目的 探讨抑制热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）表达对脑胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响。方法 利用细胞培养、电子显微镜及流式细胞仪的方法，观察阻滞ＨＳＰ７０表达后对肿瘤细胞生长的影响。结果 体外培养脑胶质瘤细胞株、经不同浓度槲皮素作用不同时间后，碘化丙碇染色荧光显微镜观察发现细胞核固缩，致密和破裂现象；流式细胞检测发现亚二倍体峰，提示出现细胞凋亡。分析细胞周期，发现凋亡细胞主要出现在Ｇ０、Ｇ１期，随药物的浓     

^125IUdR对大鼠胶质瘤细胞靶点放疗后的细胞凋亡研究

目的 在建立C6／Wistar胶质瘤大鼠模型的基础上，研究^125IUdR介导俄歇电子释放对大鼠G6胶质瘤DNA靶点放疗后的肿瘤细胞凋亡。方法 建立C6／Wistar胶质瘤大鼠模型后，应用流式细胞仪检测研究C6胶质瘤细胞的增殖动力学指标。结果 实验组肿瘤细胞的S期百分比与对照组相比显著降低（P〈0．001），G2＋M期的细胞也随之减少，肿瘤细胞大量停滞在G0／G1期。实验组增殖指数明显低于对照组（P〈0．001），而凋亡指数则显著增加（P〈0．001）。结论 ^125IUdR通过电离作用导致G1期细胞增殖阻滞及DNA断裂、诱导肿瘤细胞凋亡。     

冬凌草甲素上调人肝癌HepG2细胞 PTEN基因表达与诱导凋亡作用

［摘要］目的研究冬凌草甲素诱导人肝细胞癌HepG2细胞凋亡及与PTEN基因表达的关系。方法四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定冬凌草甲素诱导HepG2细胞的增长抑制；流式细胞术分析DNA倍体测定细胞凋亡；琼脂糖凝胶电泳观察DNA碎片；逆转录 聚合酶链式反应（RT PCR）半定量分析冬凌草甲素诱导人肝细胞癌HepG2细胞后PTEN mRNA的表达情况。结果MTT比色法测得冬凌草甲素对HepG2细胞增殖具有明显抑制作用，并随冬凌草甲素浓度的升高及作用时间的延长而增强；流式细胞术分析HepG2细胞经冬凌草甲素诱导后，细胞凋亡率随作用时间延长而增加；DNA电泳呈梯状条带。RT PCR测得PTEN基因mRNA的表达随细胞凋亡增加而逐渐增高。 结论冬凌草甲素能够明显抑制HepG2细胞增殖，并诱导肝癌细胞凋亡， 其作用途径可能与上调PTEN mRNA表达有关。     

IL-37 对宫颈癌HeLa 细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨炎症抑制因子IL-37 对宫颈癌HeLa 细胞株增殖和凋亡的影响。方法　将携带有目的基因IL-37 的过表达载体转染入体外培养的HeLa 细胞，用MTT 法检测细胞的增殖情况，流式细胞仪测定细胞周期及凋亡率，以野生型HeLa 细胞以及转染空载体的HeLa 细胞作为阴性对照和空载体对照。结果　荧光显微镜观察结果显示IL-37 质粒成功转染HeLa 细胞。MTT 检测结果显示，转染后12 h 至96 h，转染组OD 值明显低于空载体对照组（P<0.01），而空载体对照组和阴性对照组的OD 值无明显差异；流式细胞仪检测测结果显示，转染组细胞早期凋亡率较空载体对照组显著升高（P<0.05），而空载体对照组和阴性对照组的早期凋亡率无显著性差异。结论　过表达IL-37 的HeLa 细胞株构建成功。IL-37 可抑制宫颈癌HeLa 的增殖并诱导其凋亡。     

PPARγ激动剂吡格列酮抑制胶质瘤细胞生长、凋亡的实验研究

目的探讨过氧化物酶体增长因子活化受体了激动剂（PPARγ）吡格列酮抑制胶质瘤细胞生长的机制。方法应用细胞增殖力测定、AO／EB荧光染色、流式细胞仪检测吡格列酮抑制胶质瘤细胞生长的情况。结果吡格列酮对胶质瘤细胞株U-251的生长有抑制作用,并呈时间与剂量依赖关系（P〈0．05）;可诱导胶质瘤细胞的凋亡,呈时间依赖关系（P〈0．05）,并出现细胞凋亡征象。结论PPARγ激动剂吡格列酮对胶质瘤细胞U-251具有生长抑制作用。其可诱导胶质瘤细胞凋亡可能是细胞生长抑制的机制之一。     

熊果酸对HL60细胞作用机制的初步研究

目的探讨熊果酸在体外对急性早幼粒白血病HL60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用体外细胞培养技术,荧光显微镜观察细胞结构变化、MTT法观察细胞生长抑制作用、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化。结果 MTT法证实熊果酸对HL60细胞具有增殖抑制和杀伤效应,并呈浓度和时间依赖性。显微镜下可见HL60细胞出现典型凋亡细胞形态学改变。流式细胞仪检测细胞周期阻滞于G0/G1期。结论熊果酸在体外可抑制急性早幼粒白血病HL60细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

槲皮素血浆代谢物抗大鼠C6脑胶质瘤细胞的作用

目的:考察槲皮素大鼠血浆中的代谢物对大鼠C6脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的作用。方法:将槲皮素血浆代谢产物槲皮素、槲皮苷和异鼠李素分别与C6胶质瘤细胞共培养24 h后,LDH活性法检测代谢产物对C6脑胶质瘤细胞的毒性作用,流式细胞仪检测C6胶质瘤细胞凋亡与线粒体膜电位变化。结果:槲皮素和异鼠李素对大鼠C6胶质瘤细胞有显著的细胞毒性作用,均能显著诱导C6胶质瘤凋亡(P<0.05),槲皮素显著降低线粒体膜电位(P<0.05)。结论:槲皮素血浆中的槲皮素甲基化代谢产物是主要的抗肿瘤活性成分,而槲皮素苷类代谢产物抗肿瘤活性较弱,为槲皮素及其靶向制剂进一步应用于脑胶质瘤的治疗提供参考依据。     

基因转移FasL诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的体外实验研究

目的：探讨体外基因转移Fas配体（Fas-Ligand,FasL)对恶性人脑胶质瘤细胞凋亡的影响，方法：用携带人FasL cDNA的缺陷型重组腺病毒载体（Ad-FL)，在体外转导5株人脑胶质瘤细胞，并使其表达，通过流式细胞仪，RT－PCR，TUNEL法及荧光显微镜分别进行Fas/FasL表达检测和相关凋亡检测，分析，结果：RT－PCR和流式细胞仪检测5株胶质瘤细胞表达均表达Fas，不表达FasL,而Ad-FL转导的5株胶质瘤细胞均能表达FasL,Fas表达水平与抗Fas抗体诱导胶质瘤细胞凋亡敏感性无相关性，Ad-FL能显著诱导5株胶质细胞瘤在体外凋亡或抑制其生长，结论：重组腺病毒FasL在体外诱导人脑胶质瘤凋亡效果显著。     

东亚钳蝎毒诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的 研究东亚钳蝎毒（BMK）在体外诱导白血病细胞株K562凋亡的作用。方法 流式细胞仪检测细胞凋亡率，应用RT．PCR检测野生型p53基因的表达。结果 经BMK作用于细胞后，细胞的总凋亡率均有升高；RT—PCR检测提示经BMK作用后的K562细胞p53基因的表达上调。结论 BMK能诱导K562细胞凋亡，可能促进P53基因表达上调是其机制之一。     

人参皂苷compound K对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖抑制和凋亡诱导作用

目的探讨人参皂苷compound K（CK）对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖抑制和凋亡的影响。方法应用MTT法检测CK对K562细胞增殖的影响,用流式细胞仪分析细胞周期,DNA Ladder实验观察CK对K562细胞凋亡的影响。结果人参皂苷CK能显著抑制K562细胞的增殖,呈浓度依赖性,细胞阻滞于G2/M期;CK能诱导K562细胞的凋亡,呈浓度依赖性。结论人参皂苷CK具有抑制K562细胞增殖和诱导凋亡作用。     

华蟾素诱导HL-60细胞凋亡及机制研究

目的：观察华蟾素（cinobufacini）对白血病HL-60细胞的增殖抑制作用和诱导凋亡作用的机制。方法：以HL-60细胞为研究对象，采用MTT法观察细胞增殖作用；Annexin V-FITC／PI双染和吖啶橙／溴乙锭（AO／EB）荧光染色法检测细胞凋亡；罗丹明染色法检测线粒体膜电位；分光光度法检测Caspase-3活性。结果：在0．78～6．25μg&#183;ml^-1，华蟾素能明显的抑制HL-60细胞的增殖；华蟾素作用24h后，AnnexinV阳性的细胞从7．81％增加至66．02％，而且在荧光显微镜下可以明显观察到凋亡细胞；线粒体膜电位下降和Caspase-3活性升高。结论：华蟾素能够抑制HL-60细胞增殖，这种作用与其诱导细胞凋亡破坏线粒体功能和激活Caspase-3有关。     

神经酰胺对再生障碍性贫血患者T淋巴细胞增殖与凋亡作用的影响

目的：研究神经酰胺对再生障碍性贫血（AA）外周血T淋巴细胞增殖与凋亡的影响。方法：分离纯化30例AA患者、6例正常人外周血T淋巴细胞，MTT法检测不同质量浓度神经酰胺（C2—ceramide）对T淋巴细胞增殖活性的影响；流式细胞仪检测C2—ceramide对AA外周血T淋巴细胞凋亡产生的影响。结果：C2-ceramide对AA外周血T淋巴细胞的生长具有质量浓度依赖性抑制作用，而对正常淋巴细胞的抑制作用不明显；流式细胞仪检测C2-ceramide处理后的AA外周血T淋巴细胞凋亡比例明显高于AAT淋巴细胞的自然凋亡率，DNA电泳可见凋亡特有的DNA片段。结论：神经酰胺可通过抑制AA外周血T淋巴细胞增殖及诱导凋亡的作用，对AA免疫紊乱进行调节。     

姜黄素对Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞周期变化与凋亡的影响

目的：探讨姜黄素（Curcumin，Cur）对β-淀粉样肽（25—35）[βamyloid peptide-（25-35），Aβ25-35]诱导体外去血清培养的PC12细胞周期变化与细胞凋亡的影响。方法：种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期，用MTT比色法分析细胞存活率；流式细胞仪检测分析细胞周期的改变与凋亡的时间关系，Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变；DNA电泳观察细胞凋亡时特异性梯状条带（DNA—Ladder）；结果（1）用终浓度分别为0～20μmol／L的姜黄素（Cur）处理去血清培养PC12细胞24h，     

阿司匹林体外抑制U251细胞增殖及其机制研究

目的研究阿司匹林体外抑制U251胶质瘤细胞的作用及其机制。方法采用MTT法观察药物对人胶质瘤细胞U251的增殖抑制作用;采用流式细胞仪检测U251细胞周期的变化;FITC-AnnexinⅤ/PI双标记检测U251细胞的凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2的表达和Caspase-3的激活。结果阿司匹林可明显抑制人胶质瘤细胞U251的增殖,细胞阻滞在G2/M期;诱导细胞发生凋亡,下调凋亡相关蛋白Bcl-2的表达以及诱导Caspase-3的激活。结论阿司匹林在体外对胶质瘤细胞U251有明显的抑制作用,并可诱导其凋亡。     

吡非尼酮对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响(“豪森杯”优秀论文三等奖)

目的：研究吡非尼酮（pirfenidone,PF）对人肝癌细胞系HepG2增殖和凋亡的影响。方法：CCK-8法测定不同浓度PF对HepG2细胞增殖活性的影响;Hoechst 33258荧光染色法观察PF处理后HepG2细胞形态的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：PF对HepG2细胞具有显著增殖抑制作用,并呈浓度和时间依赖性;Hoechst 33258染色可见PF处理后细胞出现典型的凋亡形态学变化;流式细胞仪检测结果显示,与空白组比较,PF处理后的HepG2细胞凋亡率显著增加（P﹤0.01）。结论：PF对人肝癌细胞系HepG2细胞增殖具有抑制作用,且与诱导HepG2细胞凋亡有关。     

柚皮素诱导肺腺癌A549细胞凋亡的研究

目的：研究柚皮素对肺腺癌A549细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法应用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）观察柚皮素对A549细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33342染色后于倒置荧光显微镜下观察柚皮素对A549细胞形态的影响;通过Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞术检测柚皮素对A549细胞诱导凋亡的作用。结果柚皮素可抑制A549细胞的增殖,且呈现时效、量效依赖关系;Hoechst 33342染色倒置荧光显微镜下发现不同浓度柚皮素作用细胞48h后出现细胞核破裂、浓染,呈现明显的凋亡形态学特征;200μM、400μM 柚皮素作用细胞48h 后 A549细胞凋亡率分别为（12.15±2.14）%和（25.26±3.37）%。结论柚皮素可能通过诱导细胞凋亡从而发挥其抑制A549细胞增殖的作用。     

蛇床子素体外对人前列腺癌DU145细胞增殖的抑制作用及机制

目的观察天然化合物蛇床子素对人前列腺癌DU145细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,为临床应用提供实验基础。方法用不同浓度的蛇床子素作用于DU145细胞,用四甲基偶氮噻蓝(MTT)法检测细胞增殖;用流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测蛇床子素诱导DU145细胞凋亡;用荧光显微镜观察蛇床子素作用于DU145细胞后细胞核的形态变化。结果 MTT法显示,蛇床子素对DU145细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.05),并呈现明显的时间浓度依赖性;流式细胞仪法显示,蛇床子素可诱导DU145细胞凋亡,且呈浓度依赖性;荧光显微镜下观察到蛇床子素处理组可见核固缩、核碎裂等典型的凋亡改变。结论蛇床子素对人前列腺癌DU145细胞的增殖具有抑制作用,机制与其诱导细胞凋亡有关。     

C2-神经酰胺诱导大鼠脑胶质瘤细胞C6的早期凋亡作用

目的 :研究外源性C2 神经酰胺对大鼠脑胶质瘤细胞C6活力的抑制作用以及早期凋亡诱导作用。方法 :采用MTT法测定C2 神经酰胺对C6细胞活力的影响 ;倒置荧光显微系统观察细胞形态变化 ;An nexinⅤ PI双染色流式细胞术对细胞早期凋亡进行定量分析。结果 :C2 神经酰胺可显著抑制C6细胞的活力 ,IC50 为 2 .2× 10 -5mol·L-1;荧光染色可见核浓染等细胞凋亡特征形态改变 ;流式细胞术分析表明C2 神经酰胺可诱导C6细胞发生早期凋亡作用 ,且凋亡百分率呈时间及浓度依赖性 ,C2 神经酰胺 2× 10 -5mol·L-1处理 2 4h后平均早期凋亡率高达4 9 .3%。结论 :C2 神经酰胺主要通过诱导早期细胞凋亡对大鼠脑胶质瘤C6细胞发挥细胞毒作用 ,提高神经酰胺水平有望成为肿瘤化疗的新途径。     

蛇床子素抑制HaCaT细胞增殖及诱导凋亡的影响

目的 探讨蛇床子素抑制HacaT细胞的增殖及诱导凋亡的影响.方法 将不同浓度蛇床子素溶液作用于HaCaT细胞24h、48h和72h,用MTT法和流式细胞仪检测其对细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用.结果 蛇床子素能以时间和浓度依赖性的方式抑制HaCaT细胞增殖,且能以浓度依赖性的方式诱导HaCaT细胞凋亡.结论 蛇床子素可以抑制HaCaT细胞的增殖并诱导HaCaT细胞的凋亡.     

RNA干扰靶向cyclin D1基因对K562细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响

目的 利用RNA干扰（RNAi）技术体外观测其对K562细胞cyclin D1基因的沉默效应及对细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法 通过壳聚糖介导转染K562细胞、Westernblot分析检测转染前后CyclinD1蛋白表达变化；集落形成实验检测细胞增殖能力；流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡率的影响。结果 构建靶向cyclin D1基因的shRNA表达质粒（pshRNA-419和pshtNA-575）经壳聚糖转染后．能显著抑制cyclin D1基因表达；抑制K562细胞增殖，影响其集落形成能力；影响K562细胞周期分布，诱导细胞凋亡。而设计一碱基突变的序列所构建的质粒并无上述生物学效应。结论 cyclin D1基因表达下调可抑制K562细胞生长，并诱导细胞凋亡。提示cyclin D1基因可能是白血病治疗的一个有效靶点的。