栓线法建立大脑中动脉局灶缺血实验模型对再灌注损伤的评价意义

目的为临床脑缺血研究提供更合理实用的基础研究模型。方法选用健康Wistar大鼠41只,雌雄不限,体质量250～280g,用栓线法制作大鼠大脑中动脉局灶脑缺血模型,并限定不同时间点再灌注。结果正常对照组,假手术组,缺血30min再灌注24h组未发现神经功能缺损,评分为0分。缺血90min-再灌注模型神经功能缺损评分为2.2±0.4,梗死灶部位累及皮层和基底核。缺血持续24h组评分为3.4±0.5,与缺血90min再灌注组比,t=3.797,P<0.01。结论栓线法大鼠大脑中动脉局灶脑缺血缺血90min再灌注模型更接近临床脑缺血的病程。     

丹皮酚对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨丹皮酚对大鼠脑缺血再灌注损伤的脑保护作用。方法：利用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。治疗组缺血时腹腔注射丹皮酚，缺血2h再灌注24h观察对神经功能缺陷评分、脑组织病理形态改变、脑梗死体积的影响。结果：与对照组[(2．27&;#177;0．70)分]比较，丹皮酚治疗组[(1．67&;#177;0．72)分]症状改善，神经功能缺陷评分减少(t=2．302，P=0．029)，脑组织病理形态改变减轻。梗死体积治疗组[(105．25&;#177;9．48)mm^3]较对照组[(117．26&;#177;7．94)mm^3]减小，但两者之间差异无显著性意义(t=2．173，P=0．062)。结论：丹皮酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有一定的脑保护作用。     

脑缺血预处理对再次脑缺血大鼠神经功能、脑含水量及脑组织中Bcl-xl和P53蛋白表达的影响

目的：研究脑缺血预处理对再次脑缺血的神经功能、脑含水量以及脑组织中Bcl-xl蛋白、P53蛋白表达的影响，探讨脑缺血耐受引起的脑保护机制。方法：实验于2002-09／2003-10在锦州医学院科学实验中心进行，取48只雄性SD大鼠随机分成3组。假手术组(n=16)：颈部正中切口暴露颈总动脉后缝合皮肤；预处理组(n=16)：按Longa线栓法制成局灶-局灶脑缺血模型，将事先备好的线栓经右颈内动脉人颅插至大脑中动脉；缺血30min后，拔出线栓，缝合血管和皮肤；24h后如上步骤线栓再插至右侧大脑中动脉，再缺血时间为24h：脑缺血组(n=16)：线栓插至右侧大脑中动脉，缺血时间为24h。分别观察3组动物的以下指标：按Bederson6级5分进行神经功能评价；以干湿重法计算脑含水量；用免疫组织化学方法分别检测大鼠额顶叶皮质、海马及纹状体中Bcl-xl蛋白及．P53蛋白的表达。结果：神经功能评分：假手术组为0分，预处理组为(1．12&;#177;0．64)分，脑缺血组为(2．33&;#177;0．98)分，预处理组神经功能评分明显低于脑缺血组(P&;lt;0．05)。脑含水量测定：假手术组为(66．02&;#177;0．49)％，预处理组为(79．13&;#177;0．84)％，脑缺血组为(84．59&;#177;1．19)％，预处理组明显低于脑缺血组(P&;lt;0．05)。蛋白表达检测：预处理组额顶叶皮质、海马及纹状体中Bcl-xl蛋白表达均高于脑缺血组(P&;lt;0．05)，P53蛋白表达均低于脑缺血组(P&;lt;0．01)。结论：预处理组神经功能好于脑缺血组，再次缺血时脑水肿程度减轻，抑凋亡基因bcl-xl表达增多，促凋亡基因P53表达减少，提示缺血预处理后的脑组织耐受性明显增强，对再次缺血产生保护作用。     

银杏内酯对大鼠局灶脑缺血再灌注后神经功能缺失评分、脑梗死体积及皮质神经元凋亡的影响

目的：观察银杏内酯对大鼠局灶脑缺血再灌注后神经功能缺失评分、脑梗死体积、皮质神经元凋亡的影响及其银杏内酯的脑保护作用。方法：实验于2004—01／09在福建医科大学解剖学研究所完成。将月龄3个月雄性SD大鼠96只随机分为实验组和对照组，采用改良线栓法制作大脑中动脉闭塞局灶缺血模型。实验组在缺血即刻腹腔注射银杏内酯20mg／k，对照组腹腔注射等量的生理盐水。两组又随机分为再灌注6，24和48h组，每组16只，运用zea-Longa法进行神经功能缺失评分。在再灌注6，24，48h时间点每组随机取8只采用2，3，5-三苯四氮唑染色法观察梗死灶范围，并计算梗死灶体积占半球体积的百分率。另每组8只大鼠应用原位细胞凋亡检测法计数神经元凋亡数目。结果：实验过程中有4只大鼠因未出现神经功能缺损体征予以剔除，补充4只造模成功大鼠，进入结果分析大鼠保持为96只。①再灌注6，24h实验组神经功能缺损评分明显低于对照组(1.69&;#177;0．6，1．25&;#177;0．45，2．56&;#177;0．51，2．06&;#177;0．77，U=37，41，P&;lt;0．001)，再灌注48h实验组评分与对照组基本一致(0．62&;#177;0．50，0．69&;#177;0．48，U=120，P=0．714)。②再灌注6，24，48h实验组脑梗死体积占半球体积的百分率明显低于对照组[(12，27&;#177;0．55)％，(15．28&;#177;0．45)％，(16．30&;#177;0．36)％，(19．06&;#177;0．80)％，(24．19&;#177;0．57)％，(29．27&;#177;1．09)％，F=2314．44lP&;lt;0.001]。随着缺血再灌注时间的延长，两组缺血灶逐渐增加(F=1012，037，P&;lt;0．001)。③脑缺血再灌注后6h，两组均未出现TUNEL染色阳性细胞，再灌注24，48h实验组神经元凋亡数目明显少于对照组[(7．85&;#177;0．64)]个／视野，(12．74&;#177;0．78)个／视野，(14．18&;#177;0，90)个／视野。(23．80&;#177;0．80)个／视野](F=693．212，P&;lt;0．001)。随着缺血再灌注时间的延长，两组神经元凋亡数目明显增多(F=221．210，P&;lt;0．001)。结论：实验组大鼠神经功能缺损评分低、脑梗死体积小、缺血灶周围皮质神经细胞凋亡少。提示银杏内酯脑保护作用与减少皮质神经元凋亡有关。     

前列腺素E1对缺血再灌注脑损伤的保护作用

目的：探讨前列腺紊E1(PGE1)对缺血再灌注脑损伤的保护作用。方法：采用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。缺血60min。再灌注24h对每只动物进行神经症状评分后，断头取脑，并进行脑梗死体积，脑含水量测定及病理学捡查。结果：①缺血再灌注模型组出现典型神经缺损症状。而PGE1剂量组均能改善大鼠神经功能障碍，其行为评分与模型组相比差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。②缺血再灌注模型组脑梗死体积百分比高达(28．40&;#177;1．83)％。而PGE1中、高剂量组脑梗死体积百分比明显缩小(10．25&;#177;2．77)％，(12．90&;#177;2．58)％，与模型组相比差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。③缺血再灌注模型组栓塞侧脑含水量明显增加，为(83．03&;#177;0．61)％。而PGE1三剂量组脑含水量均低于模型组。为(79．93&;#177;0．70)％。(79．67&;#177;1．12)％，(80．26&;#177;1．63)％。两者相比差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。④缺血再灌注模型组脑组积病理形态学捡查可见；大量神经细胞固缩坏死。重度脑水肿，部分可见软化灶形成。而PGE13剂量组脑水肿及神经细胞坏死程度均明显减轻结论：PGE1能减轻脑缺血再灌注所致的组织损伤。发挥保护作用。     

缺血预处理及乐脉颗粒对增强局灶性脑缺血耐受的作用机制

目的：观察局灶性的脑缺血预处理对胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶表达的影响，以及给予乐脉颗粒干预治疗后的变化。方法：实验于2003-12／2004-11在四川大学华西医院外科和眼科实验室进行。取SD大鼠30只，随机分为3组，每组10只。①预缺血组：二次线栓法建立脑缺血耐受模型，预缺血10min，3d后给予大脑中动脉完全阻塞2h，再灌注22h。②假手术组：未进行缺血预处理，而单纯暴露动脉处的解剖结构10min，余同预缺血组。⑧乐脉颗粒组：预缺血10min，给予乐脉颗粒（丹参，川芎，赤芍，红花，香附，木香等组成）1．5g／（kg&;#183;d）灌胃，3d后给予大脑中动脉完全阻塞塞2h，再灌注22h。各组大鼠处死前进行神经功能缺损评分（04分，0分为无神经功能缺失症状；4分为不能自发行走）；在再灌注22h麻醉状态下处死大鼠，测定脑梗死体积；进行免疫组化染色和图像分析比较各组纤维酸性蛋白、神经元特异性烯醇化酶的表达，以评估脑组织中星形胶质细胞活化和正常神经元存活情况。结果：30只大鼠进入结果分析。①脑梗死体积：乐脉颗粒组明显小于假手术组与预缺血组[（96．84&;#177;4．99），（147．62&;#177;4．70），（114．33&;#177;7．81）mm^3，P〈0．01]。②神经功能缺损评分：乐脉颗粒组显著低于预缺血组（2．06&;#177;0．08，2．18&;#177;0．22，P〈0．01），两组均低于假手术组（3．18&;#177;0．16，P〈0．01）。⑧胶质纤维酸性蛋白阳性表达的IA值：预缺血组与乐脉颗粒组均高于假手术组（6610．83&;#177;741．43，11937．70&;#177;868．34，3500．53&;#177;143．34，P〈0．05，0．01），但乐脉颗粒组增高更为明显。④神经元特异性烯醇化酶阳性表达的IA值：乐脉颗粒组高于预缺血组和假手术组（9773．58&;#177;614．77，5459．82&;#177;605．14，2666．12&;#177;359．72，P〈0．01）；预缺血组高于假手术组（P〈0．01）。结论：①局灶性缺血预处理10min能够对3d后的SD大鼠脑再梗死提供脑保护，诱导缺血耐受的形成。②局灶性缺血预处理能够诱导缺血耐受的产生，其可能的机制之一是通过促进星形胶质细胞活化增加减少神经元的损伤，乐脉颗粒能够增强这一效应。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织的氧化损伤

目的：通过观察大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的变化，进一步探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后氧化损伤的病理生理改变。方法：实验于2004-09／2005-01在泸州医学院神经生物学教研室进行。将雄性成年Wistar大鼠60只随机分为2组：假手术组30只和缺血再灌注组30只。每组分3个观察时间点，分别为手术后6，12，24h，每个时间点10只。采用线栓法制成大脑中动脉闭塞模型，假手术组手术过程同缺血再灌注组，但未插栓线，不造成脑缺血。测定手术后不同时点脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛水平。结果：在实验过程中有6只大鼠死亡，缺血再灌注组有8只大鼠手术后模型评价为0级，被排除实验，随机补充14只大鼠，最终进入结果分析仍为60只大鼠。①缺血再灌注组术后6，12，24h超氧化物歧化酶活性均低于假手术组[（289．72&;#177;10．67），（534．77&;#177;22．67）μkat／L；（330．57&;#177;18．17），（539．11&;#177;11．50）μkat／L；（377．58&;#177;14．67），（550．78&;#177;11．50）μkat／L，P〈0．05]。②缺血再灌注组术后6，12，24h丙二醛水平显著高于假手术组[（15．06&;#177;0．59），（6.78&;#177;0．25）μmoL／L；（13．53&;#177;1．11），（6．78&;#177;0．26）μmol／L；（11．31&;#177;0．97），（6．80&;#177;0．26）μmoL／L，P〈0．05]。结论：脑缺血再灌注后，缺血大鼠脑组织内丙二醛水平升高，超氧化物歧化酶活性降低，说明自由基参与了脑缺血再灌注损伤的病理生理过程。     

还原型谷胱甘肽对大鼠局灶性脑缺血再灌注后细胞间黏附分子1表达的影响

目的：观察还原型谷胱甘肽对大鼠短暂性局灶性脑缺血再灌注后细胞间黏附分子1表达的影响。方法：实验于2005—06在兰州大学基础医学院人体解剖学教研室实验中心完成。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注24h模型，随机分为假手术组、缺血再灌注模型组和还原型谷胱甘肽处理组。每组15只。制模成功后观测各组大鼠的神经行为变化，脑梗死体积，行苏木精-伊红染色计数缺血区中性粒细胞浸润数目，应用免疫组化方法检测细胞间黏附分子1的表达情况。结果：实验中假手术组未见动物死亡，缺血再灌注组2只动物死亡，还原型谷胱甘肽处理组1只动物死亡。死因均为蛛网膜下腔出血所致。①还原型谷胱甘肽处理组及缺血再灌注模型组动物均有不同程度的神经功能缺损，且还原型谷胱甘肽处理组动物神经行为学评分有改善[（2．04&;#177;0．47），（2．71&;#177;0．29），分（P〈0．05）]；还原型谷胱甘肽处理组梗死体积小于缺血再灌注模型组[（20．21&;#177;1．55），（29．57&;#177;4．40）％，P〈0．05]，假手术组未见梗死灶。②脑缺血2h再灌注24h后大鼠脑血管细胞间黏附分子1表达增加。阳性反应的细胞间黏附分子1主要见于脑缺血侧梗塞区及其周围的毛细血管壁，于神经元和胶质细胞也可见。还原型谷胱甘肽处理组的表达较缺血再灌注模型组减少[（11．29&;#177;1．11），（17．14&;#177;1．77），P〈0．05]。③假手术组细胞形态正常；缺血再灌注模型模型组右侧大脑缺血范围内皮质水肿明显，神经细胞外周隙扩大，毛细血管周隙增宽，血管内血栓形成，在皮质和纹状体可见大量死亡神经元，可见筛状坏死灶，间质水肿呈松网状，有大量中性粒细胞的浸润；还原型谷胱甘肽处理组大脑皮质神经细胞层次尚清晰，未见明显坏死灶，神经细胞及毛细血管周围间隙稍大，但明显小于缺血再灌注模型组。间质水肿、中性粒细胞的浸润也轻于缺血再灌注模型组。结论：外源性谷胱甘肽可以改善大鼠局灶性脑缺血引起的神经行为障碍，减少脑梗死体积，通过减少脑缺血引起细胞间黏附分子1表达，抑制中性粒细胞的浸润，从而减轻脑缺血再灌注后的炎症反应，而发挥对脑缺血后的保护作用。     

依达拉奉降低大鼠一氧化氮水平抗脑缺血再灌注损伤的实验研究

目的：探讨依达拉奉在大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用及与一氧化氮（NO）的关系。方法：线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞的局灶性脑缺血模型：脑缺血40min后予再灌注24h．随后用Bederson神经缺损体征评分法评估大鼠神经功能缺损，用亚硝酸盐还原法测定脑组织中NO的含量。结果：①脑缺血再灌注24h后，缺血再灌注加依达拉奉组大鼠的神经功能障碍明显轻于缺血再灌注组；②脑缺血再灌注24h后，脑缺血再灌注组大鼠缺血侧和自身对照侧皮质及海马NO含量异常增高，与假手术组相比有显著性差异（P〈0．05）；脑缺血再灌注加依达拉奉组缺血侧和自身对照侧皮质及海马NO含量明显降低．与单纯脑缺血再灌注组大鼠相比有显著性差异（P〈0．05）。结论：依达拉奉对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用．其机制可能是降低了脑组织的NO水平。     

电针治疗大鼠脑缺血再灌注期血清白细胞介素8水平的调节

目的：通过观察脑缺血后不同时间段白细胞介素8血清的表达及电针对其表达的调节，以探讨电针治疗缺血性脑损伤的可能作用。 方法：实验于2005—08／11在南方医科大学附属南方医院神经内科实验室内进行。取135只雄性清洁级SD大鼠随机数字法分成假手术组，缺血再灌注3，6，12，24h组。缺血再灌注3，6，12，24h＋电针组。每组15只。采用大脑中动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血1h后再灌注模型，于造模成功后电针缺血再灌注＋电针组大鼠的足三里、内关穴，频率2Hz，电压1．5V，连续渡30min／次。再利用夹心酶联免疫吸附法，检测每组白细胞介素8浓度；并对每组进行神经功能缺陷评分。 结果：实验过程中有2只动物死亡，133只动物进入结果分析。①缺血再灌注3h白细胞介素8表达开始增加，6h达高峰，12h开始下降，24h恢复正常；其中缺血再灌注3，6及12h组与假手术组比较差异有显著性意义[假手术组（73．56&;#177;8．27）μg／L，缺血再灌注3h（85．18&;#177;9．56）μg／L，6h（109．82&;#177;10．82）μg／L，12h（95．27&;#177;9．71）μg／L，24h（75．61&;#177;8．43）μg／L，P〈0．05]。②缺血再灌注3，6，12h＋电针组血清白细胞介素8与缺血再灌注相应时间点组比较。差异有显著性意义[缺血再灌注3h＋电针组（80．39&;#177;8．68）μg／L，缺血再灌注6h＋电针组（98．35&;#177;9．29）μg／L，缺血再灌注12h＋电针组（86．81&;#177;8．09）μg／L，P〈0．05]。③缺血再灌注3，6，12，24h＋电针组神经功能缺陷评分与相应时间点缺血再灌注组比较明显降低[缺血再灌注3，6，12，24h＋电针组分别为（2．85&;#177;0．38），（3．06&;#177;0．55），（2．98&;#177;0．46），（3．02&;#177;0．52）分；缺血再灌注3，6，12，24h组分别为（3．38&;#177;0．57），（3．86&;#177;0．43），（3．52&;#177;0．52），（3．56&;#177;0．62）分，P〈0．05]。 结论：电针治疗能降低大鼠脑缺血再灌注期血清白细胞介素8水平。     

局灶性脑缺血再灌注后脑腺苷含量和烯醇化酶的动态变化

目的：研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织腺苷含量、烯醇化酶表达的动态变化及桂哌齐特对此的影响。方法：采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。应用反相离子对高效液相色谱法和免疫组织化学法分别检测脑腺苷含量及烯醇化酶表达的动态变化。并进行神经功能评分。结果：模型组大鼠脑缺血及再灌注后4个时间点脑腺苷含量均较基础水平(1．01&;#177;0．14)μmol／g增高(P&;lt;0．05)；桂哌齐特组缺血后20min为(3．26&;#177;0．30)μmol／g，60min时为(1．91&;#177;0．20)μmol／g，较模型组[分别为(2．40&;#177;0．38)μmol／g，F=92．572，P&;lt;0.05；(1．27&;#177;0．17)μmol／g]显著升高(F=92．572，43．051，P&;lt;0．05)，再灌注后15min及60min呈现增高的趋势(P&;gt;0．05)。烯醇化酶的表达在脑缺血再灌注后各时间点均明显降低(P&;lt;0．05)，桂哌齐特组均明显高于模型组(P&;lt;0.05)，且神经功能评分有明显改善。结论：脑缺血再灌注后脑组织腺苷含量急骤升高，但持续时间短暂。桂哌齐特对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤神经元有保护作用，可能与其增加内源性腺苷含量从而增强腺苷的脑保护作用有关。     

电针对缺血再灌注大鼠脑内小胶质细胞活化的影响

目的：观察局灶性脑缺血再灌注对大鼠脑内小胶质细胞活化的影响以及电针刺激水沟、百会穴的调节作用。方法：实验于2002-03在华中科技大学同济医学院组织胚胎学教研室完成。取R0只Wistar大鼠随机分为8组，每组10只：①正常对照组：不干预，次日处死。②假手术组：仅分离动脉，不插线栓，次日处死。③再灌注6，12，24h组：线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型，缺血30min后分别再灌注6，12，24h处死。④再灌注6h＋电针组：同前造模，在栓线插人大脑中动脉造模成功后立即进行针刺（水沟、百会），加电刺激（疏密波，频率4Hz／16Hz，刺激强度从1V起，每10min增加1V，终强度为3V，每次持续刺激30min），缺血30min后再灌注6h处死。⑤再灌注12h＋电针组：造模后立即针刺，隔8h后再针刺1次，参数同前。缺血30min后再灌注12h处死。再灌注24h＋电针组：造模后立即针刺1次，每隔8h针刺1次，缺血30min后再灌注24h处死。切片组织采用免疫组织化学法以蓖麻凝集素标记小胶质细胞，计算小胶质细胞数量。结果：67只大鼠进入结果分析。正常对照组和假手术组未见显色，再灌注6，12，24h组在缺血灶边缘可见大量小胶质细胞活化，数量增加，再灌注12h达高峰，分别为（35．38&;#177;1．77），（54．25&;#177;1．67），（49．29&;#177;2．21）个／200倍视野；经电针治疗后，再灌注6，12，24h＋电针组均低于同时段模型组[（32．11&;#177;2．R0），（50．88&;#177;2．64），（45．45&;#177;3．95）个／200倍视野，P〈0．05]。结论：脑缺血再灌注后脑内小胶质细胞被活化，对神经元产生毒性作用。电针治疗可减少小胶质细胞活化，从而对神经元发挥保护作用。     

雷公藤多甙对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织三磷酸腺苷酶的影响

目的：观察预应用雷公藤多甙对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑能量代谢和神经运动功能障碍的影响。方法：实验于2001-04／12在郑州大学基础医学院药理学教研室、郑州大学第二附属医院神经内科，郑州市疾病预防控制中心完成。取120只wistar大鼠随机分为6组：缺血再灌注组,雷公藤多甙45．30．15mg／kg组，尼莫地平组(10mg／kg)，假手术组，每组20只。所有动物灌胃给药，1次／d，连灌5d。缺血再灌注组和假手术组灌等体积的生理盐水。末次灌胃后1h，除假手术组不插入尼龙线，其余5组采用线栓法制作大鼠大脑中动脉局灶性缺血再灌注模型，检测各组大鼠脑组织三磷酸腺苷酶活性的变化，并进行神经病学评分(评分越高，功能障碍越重)。结果：120大鼠均进入结果分析。①神经运动功能变化：缺血再灌注组出现明显的神经运动功能障碍，神经病学评分为3．7&;#177;0．3；雷公藤多甙15，30，45mg／kg组及尼莫地平组大鼠功能障碍均明显改善，神经病学评分与缺血再灌注组比较差异显著(3．1&;#177;0．4．2、7&;#177;0．3，2．2&;#177;0．2，2．5&;#177;0．3，p&;lt;0．01)。②三磷酸腺苷酶活性：缺血再灌注组显著低于假手术组(p&;lt;0.01)，雷公藤多甙各剂量组和尼莫地平组三磷酸腺苷酶活性则高于缺血再灌注组(p&;lt;0.05或p&;lt;0.01)。结论：在脑缺血再灌注后，脑组织能量代谢障碍，细胞的主动转运功能受损。雷公藤多甙能显著升高三磷酸腺苷酶的活性，改善局灶性脑缺血引起的神经运动功能障碍。     

大鼠脑缺血再灌注时脑水肿的实验研究

目的：利用大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，研究脑缺血再灌注(cerebral ischemic reperfusion，CIR)时脑水肿(brain edema，BE)的发生、发展变化规律。方法：健康雄性普通级Wister大鼠52只，体质量200—250g，单纯随机分成正常组、假手术组和缺血再灌注组。缺血再灌注组为缺血2h．根据再灌注时间分为12，24，48，72h，5，7d组，假手术组又分为术后12，24，48，72h，5，7d组，每组4只。应用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注模型，采用干、湿重法测定脑组织水含量。结果：脑缺血再灌注12h时MCAO侧大脑半球脑水含量增加（80．12&;#177;0．31)％，48h-5d达到高峰(84．38&;#177;0．32)％，7d时仍处于较高水平(82．32&;#177;0．41)％。与正常侧(78．51&;#177;0．32)％、假手术组(78．45&;#177;0．33)％和正常组(78．53&;#177;0．35)％相比，差异均有显著性意义(P&;lt;O.01)。结论：脑缺血再灌注时造成脑水肿。脑水肿为脑缺血再灌注损伤的重要机制之一。     

局灶性脑缺血再灌注中c-Fos，胶质纤维酸性蛋白的表达和神经保护

目的：研究c-Fos和胶质纤维酸性蛋白(glial fibfillary acidic protein，GFAP)在局灶性脑缺血再灌注中的表达，尼莫地平脑保护作用的时机。方法：采用线栓法大脑中动脉闭塞90min加双侧颈总动脉结扎60min造模，18只SD大鼠随机等分为6组：对照组，I-R组，预防组，缺血治疗组，I-R治疗组，再灌注后治疗组。尼莫地平颈内动脉给药，再灌注后24h行脑功能障碍评分，再灌注72h处死测量脑组织梗死体积．并行苏木精一伊红染色，c-Fos，GFAP免疫组化染色。另选18只动物，I-R组9只和I-R治疗组9只各再分为再灌注后2，24和48h，行苏木精一伊红染色，c-Fos，GFAP免疫组化染色。结果：苏木精-伊红染色示预防组，I-R治疗组，再灌注后治疗组较之I-R组缺血半暗区神经元损伤明显减轻。再灌24h后神经功能障碍评分为：缺血治疗组(2．3&;#177;0．8)分≥I-R组(2．2&;#177;1．0)分&;gt;再灌注后治疗组(1．8&;#177;0．6)分&;gt;预防组(1．5&;#177;1．2)分&;gt;I-R治疗组(1．3&;#177;0．5)分&;gt;对照组(0．8&;#177;1．1)分，治疗组中除缺血治疗组外均较I-R组梗死体积小，但较对照组大，差异有统计学意义。治疗组皮质缺血半暗带，海马CA1区GFAP阳性细胞数均较I-R组少(P&;lt;0．05)．但齿状回减少程度较轻；给药后皮质缺血半暗带以及海马各区c-Fos阳性细胞数明显减少。GFAP在再灌注2h大量表达，48h达高峰，且反应性星型胶质细胞居多，72h持续表达；c-Fos 2h反应最为强烈，24h仍大量表达，48h后明显下降，72h少量表达。结论：预防性及再灌注早期尼莫地平动脉给药对局灶性脑缺血再灌注治疗效果较好；反应性胶质细胞对脑缺血后神经元存活起着重要作用；c-fos基因参与了脑缺血损伤的信号转导。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注血浆细胞因子和内皮素对红景天干预的反应

目的：观察大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤时血浆细胞因子和内皮素含量的变化，及红景天对其变化的影响。方法：实验于2005-10／12在锦州医学院药理教研室进行。取30只SD大鼠随机数字法等分为3组：①假手术组：生理盐水按2mL／d灌胃5d后手术操作同其他组，但不夹闭右侧颈总动脉。②局灶性脑缺血再灌注模型组：生理盐水按2mL／d灌胃5d后，用10g/L戊巴比妥纳（40mg／kg）麻醉大鼠，取颈正中切口，暴露右侧颈总动脉、颈内动脉和颈外动脉，结扎颈总动脉、颈外动脉，于颈总动脉分叉下方剪一小口，将预先烧成圆头的4-0单丝尼龙缝线经该切口插入颈内动脉约（18&;#177;1）mm，将大脑中动脉起始部阻塞，1h后将栓线抽出约1cm，恢复再灌注1h。③红景天组：红景天按2mL／d灌胃给药，连续5d后与局灶性脑缺血再灌注损伤组相同。③假手术组及局灶性脑缺血再灌注损伤组、红景天组再灌注1h后均立即取血，利用放射免疫技术检测大鼠血浆细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、内皮素的水平。结果：30只大鼠全部进入结果分析。①脑局灶性缺血再灌注损伤组久鼠血中细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6及内皮素含量较似丁术组明显增高[（1．40&;#177;0.14），（0.68&;#177;0.10）mg／L；（142．60&;#177;12.33），（78．60&;#177;6．42）μg／L；（168.40&;#177;3.87），（114.50&;#177;2.84）μg／L，P〈0.05]。②红景天组血中细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、内皮素含量较局灶性缺血再灌注组下降[（1．02&;#177;0.20），（1．40&;#177;0.14）mg/L;（121.00&;#177;13．96），（142．60&;#177;12．33）μg／L；（155．00&;#177;5．88）．（168．40&;#177;3.87）μg／L．P〈0.05]。结论：红景天显著降低局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠血中细胞因子及内皮素水平，红景天的保护效应部分是由于减少血浆细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和内皮素的水平。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后fas基因和fasL基因表达变化的规律

目的：探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后Fas mRNA和FasL mRNA的表达变化。方法：实验于2004-03-01／06-30在哈尔滨医科大学附属第二医院科研中心进行。取健康Wister大鼠48只随机分为6组，即假手术组，缺血2h再灌注6，12，24，48和72h组，每组8只鼠。线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)及再通模型，应用RT-PCR技术检测MCAO及再通后缺血半暗带皮质Fas mRNA和FasL mRNA表达。结果：假手术组Fas mRNA，FasL mRNA均未见表达，再灌注6h起二者开始有少量表达(分别为0．23&;#177;0．02和0．06&;#177;0．01)，Fas mRNA的表达高峰在再灌注24h(0．94&;#177;0．06)，FasL mRNA的表达高峰在再灌注48h(0．35&;#177;0．02)，再灌注72h二者的表达均明显下降(分别为0．45&;#177;0．03和0．22&;#177;0．03)。结论：脑缺血再灌注可诱导Fas mRNA和FasL mRNA表达。     

旋磁场对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的：观察旋磁场对大鼠急性局灶性脑缺血再灌注的影响。 方法：实验于2003-03在中国医科大学完成。选择18～20周鼠龄健康Wistar大鼠70只，随机数字表法分成3组，假手术组12只，对照组20只、治疗组38只。治疗组按照再灌注时间又分为4个时间点：再灌注即刻6只，再灌注6h20只，再灌注12h6只，再灌注18h6只。以改良Longa线栓法制备动物局灶性脑缺血模型，假手术组手术操作过程相同，但栓线插入深度为10mm。采用5级评分法评定神经功能缺损来筛选病例。评分1级和2级且缺血2h再灌注24h后存活者入选对照组和治疗组。假手术组和对照组不予旋磁治疗。治疗组治疗时将磁头对准大鼠头部，磁头与皮肤距离7mm左右，治疗时间为15min。各组动物均于再灌注24h时断头取脑。脑含水量采用于湿重法，梗死灶体积采用TTC染色法测定，并分析缺血侧脑组织的超氧化物歧化酶和丙二醛含量及脑组织形态学变化。 结果：实验中剔除死亡及模型制备不合格筛选后符合条件动物70只，全部进入结果分析。①治疗组除再灌注即刻时间点外其余各时间点大鼠脑含水量比对照组减少，脑水肿程度均减轻[（2．48&;#177;0．22）％，（2.32&;#177;0．19）％，（2．23&;#177;0．36）％，（2．91&;#177;0．44）％，P〈0．05]。②治疗组绝对脑梗死体积比对照组减小[（128．21&;#177;15．05），（171．22&;#177;40．50）mm^3，t=2．438，P〈0．051，相对脑梗死体积比对照组减小[（20．22&;#177;1．44）％，（25．17&;#177;3．85）％，t=2．95，P〈0．051。③与对照组比较，旋磁治疗组大鼠脑组织中超氧化物歧化酶含量增加[（54．54&;#177;3．85），（69．52&;#177;5．88）NU／mg,t=5．568，P〈0．051，而丙二醛含量下降[（0．85&;#177;0．06），（1．03&;#177;0．09）μmol／g，t=4．076，P〈0．051。④大体形态学表现为对照组右侧大脑半球水肿明显，颜色呈脂肪样苍白，脑沟变浅，脑回变平，组织较脆且易碎。而治疗组右侧大脑半球水肿程度较轻，大脑表面充血明显。 结论：旋磁场对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有预防和治疗作用，此作用可能与减轻脑水肿，提高超氧化物歧化酶的活性，降低丙二醛的含量有关.     

降钙素基因相关肽和神经生长因子对局灶性脑缺血再灌注大鼠空间学习记忆能力的影响

目的：观察外源性降钙素基因相关肽和神经生长因子对局灶性脑缺血再灌注后大鼠学习记忆能力的影响。方法：实验于2005—02／07在中国医科大学基础医学院神经生物实验室进行，取清洁级8周龄雄性SD大鼠30只，抽签法随机分为假手术组、缺血再灌注组、降钙素基因相关肽和神经生长因子治疗组，每组10只。用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型。2h后再次麻醉大鼠，直视下轻轻拔出栓线约10mm以实现再灌注。缺血再灌注组缺血2h后经腹腔注入生理盐水1mL；降钙素基因相关肽和神经生长因子治疗组缺血2h后经腹腔注入2mg／L降钙素基因相关肤0．5mL和1000U／mL神经生长因子0．5mL，1次／d，连续10d，第一次给药均在缺血再灌注后15min内完成。假手术组分离血管，不插栓线、不注射药物外，其余皆同于两组动物。按照ZeaLonga5级评分法进行神经功能评分。选取评分为1，2和3分的动物进行Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力变化，比较假手术组、缺血再灌注组、降钙素基因相关肽和神经生长因子治疗组间大鼠的空间学习记忆能力的差异。结果：实验过程中缺血再灌注组、降钙素基因相关肽和神经生长因子治疗组分别有3只和2只大鼠缺血再灌注后不符合模型判断标准，其余均进入结果分析。①造模10d后缺血再灌注组大鼠Morris水迷宫的隐匿平台逃避潜伏期明显比假手术组大鼠长（P〈0．01）；降钙素基因相关肽和神经生长因子治疗组大鼠隐匿平台逃避潜伏期明显比缺血再灌注组缩短（P〈0．01）。②缺血再灌注组大鼠穿越原平台位置水域的次数明显比假手术组大鼠少（（1．79&;#177;0．39），（4．30&;#177;0．73）次／min，P〈0．01]；降钙素基因相关肽和神经生长因子治疗组大鼠穿越原平台位置水域的次数明显比缺血再灌注组大鼠多[（3．16&;#177;1．03），（1．79&;#177;0．39）次／min，P〈0．01]。结论：降钙素基因相关肽和神经生长因子能显著改善大鼠大脑中动脉梗塞后的空间学习记忆能力，说明降钙素基因相关肽和神经生长因子对缺血神经元有恢复作用。     

大鼠脑缺血再灌注损伤与盐酸法舒地尔的保护作用

背景：传统钙离子拮抗剂脑保护作用并不确实，盐酸法舒地尔是一种新型钙离子拮抗剂，具有强大的扩血管作用和保护缺血脑组织的作用。目的：研究盐酸法舒地尔作为细胞内钙离子拮抗剂对大鼠缺血再灌注损伤的保护作用。设计：随机对照的实验研究。地点和对象：全部实验于解放军总医院实验动物中心完成。选择体质量250～300g健康SD大鼠30只(解放军总医院实验动物中心提供)，以Haruo Nagasawa法建立脑缺血模型，分为盐酸法舒地尔组15只和生理盐水组15只。另选体质量250～300g健康SD大鼠50只(解放军总医院实验动物中心提供)，以Carys M Bannister转流法制作局灶缺血模型。转流法模型50只大鼠5只一组分为10组，各用于测定盐酸法舒地尔和生理盐水治疗动物缺血前，缺血60min，再灌注20，60，120min缺血区脑组织乳酸含量。干预：用线栓法和转流法制作大鼠大脑中动脉区缺血再灌注模型，于缺血前30min分别给予盐酸法舒地尔和生理盐水。主要观察指标：缺血后5，60min和再灌注30min的局部脑血流量(rCBF)；术后3，24，48h神经功能；缺血60min，再灌注20，60，120min缺血脑组织乳酸含量。结果：法舒地尔组缺血5，60min，再灌注30min局部脑血流(rCBF)为[(3．11&;#177;0．02)，(3．60&;#177;0．02)，(8．04&;#177;0．10)mL／(100g&;#183;min)]明显高于对照组[(2．63&;#177;0．04)，(3．17&;#177;1．29)，(6．74&;#177;0．03)mL／(100g&;#183;min)]；法舒地尔组神经功能好于对照组；再灌注60，120min乳酸含量法舒地尔组[(7．2&;#177;0．3)，(7．4&;#177;0．2)mmol／kg]少于对照组[(10．2&;#177;0．3)，(10．0&;#177;0．3)mmol／kg]。结论：盐酸法舒地尔能改善动物模型缺血脑组织局部血流量，加速再灌注过程乳酸清除，具有脑保护作用。