北五味子中4种木脂素类化合物的高效液相色谱法同时测定

目的 建立高效液相色谱法同时测定北五味子中4种木脂素类化合物的分析方法.方法 考察流动相组成及配比、检测波长、柱温、流速和进样量对测定的影响,确定了最佳色谱条件:流动相为乙腈-水,梯度洗脱程序为:0～25 min乙腈:水=50:50(V/V);25～35 min线性变化到70:30(V/V),并保持5 min;40～44 min再线性变化到80:20(V/V);DAD检测器,检测波长为五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素216 nm,五味子酯甲222 nm;柱温25℃;流速0.8 ml/min;进样量10.0 μl.结果 在最佳色谱条件下,4种化合物标准曲线的线性关系良好,相关系数为0.999 4～0.999 8,各组分的检出限为0.04～0.05 μg/ml,平均回收率为90.23～95.24%,相对标准偏差为3.2%～4.9%.结论 该方法灵敏,准确,实现了对4种木脂素类化合物的同时测定.     

HPLC同时测定糖克软胶囊中5种木脂素类成分的含量

 目的建立反相高效液相色谱法同时测定糖克软胶囊中5种木脂素类(五味子醇甲、五味子醇乙、当归酰戈米辛H、五味子甲素、五味子乙素)成分含量的方法。方法色谱条件:Agilent Extend C₁₈柱;流动相为甲醇-2%四氢呋喃水溶液,线性梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1;柱温50℃,检测波长254 nm。结果5种木脂素类化合物在实验浓度内线性关系良好,五味子醇甲、五味子醇乙、当归酰戈米辛H、五味子甲素和五味子乙素的线性范围分别为15.8～1 575,5.76～576,4.65～465,3.61～361,10.6～1 057 mg·L^-1,相关系数均大于0.999 0。平均加样回收率在100.2%～103.5%之间。5种木脂素类化合物含量重复性试验RSD小于1.98%。结论本方法简单、灵敏、重复性好,可用于糖克软胶囊质量控制。     

反相高效液相色谱法测定五味子中木脂素的含量

目的 建立反相高效液相色谱法对五味子中的保留木脂素成分同时进行含量测定。方法 反相高效液相色谱法,色谱柱为Inertsil ODS-3 column(250 mm×4.6 mm i.d.,5μm),采用梯度洗脱的方式,流动相:A 甲醇,B 水。梯度洗脱:0-16 min VA : VB=70:30,16-40 min VA:VB=100:0。结果 五味子中四种木脂素与周围未知成分达到基线分离,四种木脂素线形关系良好,相关系数r>0.999。结论 此法简单、灵敏、快速,为分析五味子及其相关制剂中主要单体木脂素提供了一种可行质量控制方法。     

HPLC法测定红花五味子木脂素的含量

目的 测定不同产地、不同部位红花五味子的五味子酯甲(schisantherinA)、去氧五味子素(五味子甲素，deoxyschizandrin)、五味子乙素(schisandrinB)和五味子丙素(schisandrinc)含量。方法 HPLC法，使用Sphereclone ODS柱；流动相：水(A)，甲醇(B)，梯度洗脱：0～4min，70％B；4～54min，70％～100%B；流速为0．4mL／min,柱温：25℃；检测波长：254nm。结果 五味子酯甲、甲素、乙素、丙素在红花五味子中含量分别为0．026％～0.083%，0.007％～0.945％,0．002％～0．121％。0．01%～0．038％。其中五味子甲素普遍存在，且果实中含量高于茎藤。结论去氧五味子素是红花五味子果实的主要活性成分。     

HPLC测定五味子不同炮制品中6种木脂素类成分的含量

 目的 测定五味子及其不同炮制品中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素的含量。方法 色谱柱为依利特 ODS-C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱(0～17 min,A为50%;17～25 min,A为50%～55%;25～30 min,A为55%～75%;30～35 min,A为75%;35～40 min,A为75%～65%;40～45 min,A为65%～50%);体积流量：1.0 mL·min-1;柱温：30 ℃;检测波长：217 nm。结果 与生品相比,五味子经醋制和酒制6种木脂素的含量均有所增加;且酒制品中的含量高于或等于醋制品中的含量。结论 本实验所建立的HPLC方法稳定可靠、简便可行,可用于五味子中木脂素类成分的同时定量分析,为五味子饮片及其炮制品的质量评价和质量控制奠定了基础。     

HPLC同时测定五味子中7个木脂素类化合物的含量~△

目的:建立同时测定五味子中五味子醇甲、戈米辛D、五味子醇乙、当归酰戈米辛H、五味子甲素、戈米辛N、五味子乙素含量的HPLC方法。方法:采用SunFire~(TM) C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水梯度洗脱,流速:1 mL·min~(-1),检测波长254 nm,柱温:30℃。结果:7个化合物在各自范围内均呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.23%～100.51%,RSD为0.68%～1.80%。发现不同产地五味子中化合物的含量差别不大,7个木脂素的总质量分数最高为16.27 mg·g~(-1),最低为9.52 mg·g~(-1)。结论:本实验建立的HPLC含量测定方法准确、可靠、重复性好,可用于五味子的质量控制。     

HPLC同时测定五味子中6种木脂素类成分

目的:建立同时测定五味子中6种木脂素类成分的HPLC含量测定方法。方法:采用HPLC,以甲醇-0.5%冰醋酸为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm,流速0.9 mL.min-1,柱温35℃,同时测定五味子药材中五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲等6种木脂素类成分的含量。结果:不同产地五味子药材中均含有上述6种成分,且均以五味子醇甲的含量最高,五味子丙素含量最低。结论:建立的方法可以同时测定五味子药材中的6种木脂素类成分,为五味子及其炮制品的质量评价提供了更为全面的科学依据。     

HPLC测定五味子根茎叶中6种木脂素含量

目的: 比较五味子根茎叶6种木脂素含量的差异。 方法: 采用色谱柱Agilent TC-C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;检测波长 250 nm,流速 1 mL·min^-1,柱温 30℃。 结果: 野生五味子根茎叶总木脂素含量高于栽培品种,其根茎叶总木脂素含量差别挺大,其中根>主枝>侧枝>叶。 结论: 该方法稳定、可靠,能较好的对五味子根茎叶进行质量评价。     

五味子(北、南)的高压液相图谱及木脂素成分含量测定

用高压液相色谱法对我国主要产区的五味子(北、南)中的木脂素作了定性定量分析,结果表明,不同产地的北五味子色谱图相同,仅含量不同;不同来源的南五味子色谱图则有差别。     

辽宁凤城地区不同生长环境五味子5种木脂素成分含量测定

目的:建立五味子中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素5种有效成分的高效液相色谱测定方法,对辽宁凤城地区不同环境五味子木脂素类成分进行含量测定,筛选五味子优质药材的最佳生长环境。方法:采用高效液相法,Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-乙腈-水,梯度洗脱,柱温35℃,检测波长220 nm。结果:不同环境下五味子5种木脂素含量和总量有所不同。生长在山脚树荫丛林中且湿润环境下的五味子木脂素含量最高,品质优良。结论:本实验方法简便、准确、重复性好。     

HPLC同时测定五味子提取物中的4种类三萜内酯类物质的含量

目的:研究了HPLC测定五味子提取物中de-hydroxy arisanlactone D,25 -hydroxy schindilactone,schindilachone A,lancifodilactone D的含量的方法.方法:Waters Symmetry色谱柱(4.6mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(33∶67),柱温37℃,流速1 mL· min-1,检测波长246 nm.结果:De-hydroxy arisarlactone D,25-hydroxy schindilactone,schindilachoneA和lancifodilactoneD的线性范围和(μg)加样回收率分别为0.075～1.800( 98.57％),0.098～0.980(96.44％),0.095～0.950(97.96％),0.053 ～0.530(97.27％).结论:该方法分离良好、精密准确、能用于五味子提取物中4种类三萜内酯类物质的定量分析.     

氯吡脲对五味子果实形态和木脂素的影响

研究了植物生长调节剂氯吡脲(CPPU)的1×10-6,0.67×10-6,0.5×10-6清水稀释液对五味子Schisandra chinensis的果实形态和有效成分木脂素的影响。结果表明,CPPU叶面微肥促进了五味子果穗横径生长,抑制了果穗纵径生长。同时,3种不同浓度CPPU清水稀释液对五味子千粒重,产量均有不同程度的提高,其中0.5×10-6CPPU千粒重,产量最大,1×10-6次之,0.67×10-6提高的最少。通过测定不同采收期CPPU处理的五味子6种木脂素含量表明,木脂素含量的主要积累期在幼果期到半成熟果期,0.67×10-6的氯吡脲清水稀释液有利于五味子醇乙、五味子丙素、五味子乙素的积累。在五味子临床需求较大的今天,对CPPU胁迫对五味子的研究应予以高度重视。     

Gender-dependent pharmacokinetics of lignans in rats after single and multiple oral administration of Schisandra chinensis extract

Ethnopharmacological relevance

Schisandra chinensis (S. chinensis), a traditional Chinese medicine, has been widely used as sedatives and tonics in clinic. Schisandra lignans are believed to be the major bioactive components in S. chinensis. However, there is a lack of information about the effects of gender and repeated-dose on the pharmacokinetic properties of the schisandra lignans.

Aim of the study

The study was performed to investigate the influence of gender on the pharmacokinetics of schisandra lignans after administration of S. chinensis extract and to compare their pharmacokinetic behaviors between single and multiple administration.

Materials and methods

Two groups of rats (half male and half female) were received a single dose or multiple doses of S. chinensis extract, respectively. A liquid chromatography–tandem mass spectrometry method was developed and validated to determine the plasma concentrations of schisandra lignans.

Results

The pharmacokinetic parameters of schisandrin, schisandrol B, deoxyschisandrin, γ-schisandrin and schisantherin A were significantly different by gender difference. The t_1/2 of all the tested schisandra lignans in female rats were 2–9 times longer than the corresponding values in male rats. The C_max and AUC_0−t of these schisandra lignans except schisantherin A in female rats were 5–50 times higher than those in male rats. The pharmacokinetic profiles of schisandrin, schisandrol B, deoxyschisandrin and schisantherin A in both gender rats after multiple doses were similar to the corresponding profile after single dose.

Conclusion

All the tested schisandra lignans showed slower elimination and higher bioavailability in female rats after single or multiple administration of S. chinensis extract compared with male rats. Their pharmacokinetic profiles were not affected by repeated-dose except γ-schisandrin, which was eliminated more slowly in female rats after multiple administration.     

五味子鲜果不同部位的化学成分比较

目的:比较五味子果实不同部位的化学成分。方法:采用HPLC梯度洗脱法进行比较,Kromasil C18柱,检测波长220,254 nm,流速1.0 mL.min-1,柱温35℃,以6个对照品指认主要色谱峰。结果:五味子水提物、醇提物的HPLC图谱以及五味子果肉、种仁的HPLC图谱有明显差异。结论:醇提物以及果仁中均以木脂素类成分为主,果肉中以极性成分居多。为五味子临床合理应用和五味子鲜果不同部位综合开发利用提供了科学依据。     

北五味子总木脂素对脑缺血模型大鼠神经细胞凋亡及p-AKT表达的影响

目的:观察北五味子总木脂素(Schisandra chinensis lignans,SCL)对局灶性脑缺血损伤大鼠神经细胞凋亡和PI3K/AKT信号传导途径的影响,并探讨其作用机制。方法:用北五味子总木脂素高、中、低剂量组(100,50,25 mg·kg-1)给大鼠分别灌胃给药,连续14 d后,线栓法建立脑缺血损伤模型,进行神经功能评分,TTC染色观察大鼠的脑梗死面积,HE染色观察脑组织的病理形态学改变,免疫组化检测脑组织中Bcl-2和Bax的表达,Western blotting检测脑组织内p-AKT和AKT蛋白的表达情况。结果:与模型组比较,北五味子总木脂素高、中、低剂量组均能不同程度缩小脑梗死面积;改善脑组织的病理形态学改变;促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制促凋亡蛋白Bax表达,同时促进p-AKT的表达。结论:北五味子总木脂素对大鼠脑缺血性损伤具有一定的保护作用,机制可能与其促进p-AKT活性增加,提高脑组织抗缺血损伤的能力和抑制神经细胞的凋亡有关。     

化学计量学方法研究北五味子中木脂素含量与抗氧化活性的相关性

目的:通过五味子抗氧化活性与木脂素含量的相关性分析,建立五味子抗氧化活性的快速评价方法。方法:采用高效液相色谱测定了采自吉林省不同地区的37批不同五味子样品中的5种木脂素的含量,并分别从抑制肝、肾、脑中脂质过氧化能力和清除.DPPH自由基能力几方面测定了上述样品的抗氧化活性。以SPSS 11.5软件进行了双变量相关性(biva-riate)分析及多元线性回归的逐步回归(stepwise)分析。结果:双变量相关性分析结果表明,五味子醇甲与抑制肝脏、脑脂质过氧化、.DPPH清除能力具有显著的相关性(P<0.01),均呈正相关;五味子醇乙与4种抗氧化活性均有相关性(P<0.05或0.01),均呈正相关;而五味子甲素与抑制肝脏、脑脂质过氧化、.DPPH清除能力具有显著的负相关性(P<0.01),五味子乙素仅与抑制脑脂质过氧化能力具有负相关性(P<0.05)。逐步回归分析结果与Bivariate分析结果基本一致,并分别得出木脂素与不同模型中抗氧化活性相关性的线性回归方程。采用另外10批样品的测定结果经回归方程模拟,所得的抗氧化活性与测定的抗氧化活性基本一致。结论:采用相关性分析和线性逐步回归分析法建立的抗氧化活性评价模型,从而确定五味子抗氧化活性的物质基础,同时还可根据所测定的五味子中木脂素的含量来推测样品的抗氧化活性。     

东北不同产地五味子药材品质研究

目的:初步考察东北不同产地五味子药材的品质,为其药材质量标准的制定和规范化种植提供参考。方法:参照药典和相关文献,测定10份不同产地五味子药材的外观性状和水溶性浸出物、灰分和挥发油含量,并以HPLC测定木脂素类成分含量。结果:东北不同产地五味子药材中总灰分含量≤7.0%,酸不溶性灰分含量≤1.0%,水溶性浸出物含量≥45.0%,同时这10份药材中五味子醇甲含量则均符合我国2010年版药典规定。结论:东北不同产地五味子药材的外观性状和内在品质均存在差异,因此建立科学全面的质量标准对保证五味子药材品质具有重要意义。     

五味子特殊类型白果五味子的ITS2序列鉴定研究

目的： 以ITS2片段作为DNA条形码,在分子水平上研究白果五味子。方法：结合五味子和华中五味子样品对白果五味子进行研究,对样品ITS2片段进行双向测序,CodonCode Aligner拼接序列,利用MEGA 5.0进行多序列比对,利用ITS2数据库及其网站预测ITS2二级结构,应用BLAST 1方法进行鉴定分析。结果：白果五味子样品ITS2序列长度为231 bp,BLAST 1鉴定白果五味子样品为五味子。白果五味子和五味子居群间平均K2P（Kimura-2-parameter）遗传距离（0.002 2）远远小于五味子和华中五味子的种间平均K2P遗传距离（0.021 6）。结论：ITS2鉴定白果五味子属于五味子;ITS2可以用于鉴定和区分五味子和华中五味子。     

HPLC测定金莲花中金莲花碱的含量

目的:建立金莲花中金莲花碱的含量测定方法,并测定市售金莲花药材中金莲花碱的含量。方法:采用高效液相色谱法,Agilent C18 ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%醋酸溶液(0～30 min,2∶98～100∶0),流速为1.0mL.min-1,检测波长为258 nm。结果:金莲花碱在0.138 0～1.241 0μg呈良好的线性关系,购自全国各地的9批金莲花药材中的金莲花碱为0.05%～0.11%。结论:本方法精密、准确、重现性好,可用于测定金莲花中金莲花碱的含量。     

星点设计-效应面法优化北五味子果实提取工艺

目的:星点设计-效应面法优选北五味子果实的提取工艺。方法:以乙醇体积分数、提取时间、溶媒比为自变量,以北五味子总木脂素含量得率为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,用效应面法选取最佳工艺,并进行预测分析。结果:确定最优提取工艺为20倍量85%乙醇,提取3次,每次170 min,提取预测值与理论值偏差为0.19%,二项式拟合复相关系数r=0.994 2。结论:星点设计-效应面法优化的北五味子果实提取工艺,方法简单,精密度高,可预测性较优。