VHL和Survivin在胃癌中的表达及临床意义的探讨

目的：观察VonHippel—Lindau（VHL）及Survivin在胃癌中的表达及相互关系,探讨联合检测VHL及Survivin基因在胃癌中的意义。方法：采用免疫组织化学SP法检测40例胃癌组织．30例正常胃黏膜组织中VHL及Survivin基因的表达。结果：40例胃癌组织中,VHI。基因的阳性表达率为35％,显著低于正常胃组织的表达（P〈0．01）,Survivin的阳性表达率为80％,显著高于正常胃组织的表达（P〈0．01）．VHL基因的表达与胃癌的临床分期（P〈0．05）、淋巴结转移（P〈0．01）有关,Survivin基因的表达与胃癌的临床分期（P〈0．01）、淋巴结转移（P〈0．01）有关。结论：VHL及Survivin基因的表达可能与胃癌的发生发展有关,VHL基因蛋白的表达缺失可能在胃癌的发生、发展中存在重要意义,VHL可能作为诊断胃癌新的参考指标。     

生长阻滞特异基因1在胃癌细胞系和组织中的差异表达及其意义

目的 探讨Gas1在胃癌细胞系和组织中的差异表达及与胃癌发生、发展的关系。方法 应用RT-PCR检测Gas1在7个胃癌细胞系和23对胃癌配对组织标本中的表达情况，免疫组化检测Gas1在43例手术切除的胃癌标本和20例正常胃黏膜组织中的表达情况。结果 7个胃癌细胞系均不表达Gas1mRNA；23对胃癌配对组织标本中癌旁组织Gas1mRNA阳性表达率高于胃癌组织（P〈0．01）；20例正常胃黏膜组织中有19例表达Gas1蛋白（阳性表达率为95．0％），43例胃癌标本中有2例表达Gas1蛋白（阳性表达率为4.65％），两者相比差异具有显著性（P〈0．01）。结论 Gas1在胃癌细胞系中表达缺失，可能与胃癌细胞系的细胞学特征有关；Gaff在胃癌表达缺失，可能与胃癌的发生发展有关，Gaff可作为判断胃癌生物学行为的一个有用指标。     

胃癌组织中凋亡相关基因Survivin、Bax、p53的表达及其相关性研究

目的探讨凋亡抑制基因生存素蛋白（Survivin）在胃癌组织中表达的临床意义，及其与Bax、p53蛋白表达的相关性分析。方法应用免疫组织化学链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法（SABC法），检测25例正常胃黏膜组织及100例胃癌组织中的Survivin、Bax、p53的表达。结果25例正常胃黏膜组织中Survivin呈阴性表达，而100例胃癌组织中81例呈阳性表达，阳性率为81．0％，差异有统计学意义（P〈0．01）。Survivin基因表达与胃癌组织分化程度、临床分期及淋巴结转移呈正相关。Bax在胃癌组织中的表达率（17．0％）显著低于正常胃黏膜组织中的表达（48．0％），P〈0．01；胃癌组织中Bax与Survivin蛋白表达呈负相关P〈0．05；Survivin与p53蛋白表达呈正相关，P〈0．05。结论胃癌组织中Survivin高表达导致凋亡抑制在胃癌的发生发展中可能起重要作用。Survivin基因的异常表达提示胃癌预后不良。p53基因突变导致凋亡异常可能与其对Survivin表达调控失识关系更为密切，Bax表达下调与Survivin表达上调可能共同在胃黏膜癌变和癌变后的恶性演进过程中起重要作用，三者联合检测有望作为预警胃癌发生和转移的病理生物学标志。     

KISS-1、Ezrin蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨KISS-1、Ezrin蛋白在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法分别对21例正常胃黏膜组织、23例癌旁不典型增生组织、45例胃癌组织中KISS-1、Ezrin蛋白的表达进行检测。结果正常胃黏膜、癌旁非典型增生和胃癌组织中KISS-1蛋白的阳性表达率依次递减,经两两相比,差异均有统计学意义（P〈0.05）;正常胃黏膜、癌旁非典型增生和胃癌组织中Ezrin蛋白的阳性表达率依次递增,且两两相比,差异均有统计学意义（P〈0.05）;相关性分析发现KISS-1、Ezrin蛋白在胃癌中的表达具有显著的负相关性（r=-0.537,P〈0.01）。结论 KISS-1、Ezrin蛋白参与胃癌的发生发展过程,且可能起协同作用。     

Galectin-3和E-cadherin蛋白在胃癌中的表达及其意义

目的探讨Galectin-3和E-cadherin蛋白在胃癌中的表达及其意义。方法选择60例胃癌组织标本,采用免疫组化方法检测胃癌组织中Galectin-3和E-cadherin蛋白的表达情况．同时选择60例正常胃黏膜检测Galectin-3和E-cadherin蛋白的表达情况作为对照。结果胃癌组织Galectin-3阳性表达率高于正常胃黏膜组织（P〈0．01）,E-cadherin蛋白阳性表达率低于正常胃黏膜组织（P〈0．01）。分化程度越高、浸润程度越浅、淋巴结无转移的胃癌组织E-cadherin蛋白阳性率越高（P〈0．01）。浸润程度越深、淋巴结有转移的胃癌组织Galectin-3的阳性表达率越高（P〈0．01）。结论胃癌组织中E-cadherin阳性表达率低于正常胃黏膜组织、Galectin-3的阳性表达率高于正常胃黏膜组织。E-cadherin的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关,而Galectin-3表达率与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移有关。     

三叶因子家族在胃癌及癌前病变组织中的表达及其意义

目的探讨三叶因子家族（TFF）在胃癌及癌前病变中的表达及其意义。方法选择经胃镜活检并经病理证实的基本正常或轻度浅表性胃炎患者20例（正常胃黏膜组）、慢性浅表性胃炎伴胃黏膜肠上皮化生患者30例（肠上皮化生组）、慢性萎缩性胃炎伴胃黏膜不典型增生患者24例（不典型增生组）和胃癌患者40例（胃癌组）。采用免疫组化S—P法检测上述受检者的手术标本中TFF1、TFF2和TFF3的表达情况,并分析TFF与胃癌组织学类型、分化程度、浆膜浸润、淋巴结转移及TNM分期等临床病理特征的关系。结果TFF1、TFF2在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜、肠上皮化生胃黏膜及胃癌组织中均有表达,二者表达强度依次呈递减趋势（P〈0．05）;TFF3在正常胃黏膜没有表达,而在肠上皮化生胃黏膜、不典型增生胃黏膜和胃癌组织中均有表达,表达强度依次呈递增趋势（P〈0．05）。在胃癌组织中,TFF1在低分化胃癌中的表达阳性率显著高于中高分化胃癌（73．7％与38．1％,P〈0．05）,而TFF2在中高分化胃癌中的表达阳性率显著高于低分化胃癌（90．5％与47．4％,P〈0．01）,二者均与胃癌是否发生浆膜浸润、是否有淋巴结转移及TNM分期无关（P〉0．05）;TFF3在有浆膜浸润、伴淋巴结转移和分期较晚（Ⅲ/Ⅳ期）胃癌组织中的表达阳性率[分别为91．7％、88．9％和95．0％]显著高于无浆膜浸润及淋巴结转移和Ⅰ／Ⅱ期的胃癌组织（37．5％、46．2％和55．0％,P〈0．01）,但与胃癌组织的分化程度无关（P〉0．05）;TFF1、TFF2和TFF3在弥漫型胃癌组织中的表达阳性率[分别为75．0％、82．1％和85．7％]显著高于肠型胃癌组织[分别为25．0％、41．7％和50．0％],差异有统计学意义（P〈0．05）。结论TFF1和TFF2在正常胃黏膜-肠上皮化生-不典型增生-胃癌组织中的表达逐渐减少以及TFF3的表达逐渐增多可能在胃癌发生中起重要作用。TFF1和TFF2可能是胃癌抑制因子,其表达减少可能使胃癌恶性程度增加;TFF3可能与胃癌浸润转移有关,其表达增多则预后不良。     

Survivin基因在人胃癌及癌前病变中表达的研究

目的探讨凋亡抑制基因survivin在胃癌及癌前病变组织中的表达。方法应用RT—PCR技术研究survivin mRNA在46例胃癌组织及相应正常组织中的表达，ELISA技术定量检测上述标本中survivin蛋白表达，免疫组织化学染色（IHC）Envision法定性检测46例胃癌标本、114例胃炎及癌前病变组织survivin蛋白表达。结果46例胃癌组织的survivin mRNA阳性表达率为32．6％,46例相应正常组织为10．87％。两组差异有统计学意义（P〈O．05o胃癌组的survivin蛋白表达浓度（75．27—358．44pg/ml）显著高于正常组（0—161．23pg／ml）（P〈0．05）。Survivin蛋白阳性表达率在浅表性胃炎（30％）、萎缩性胃炎（14．7％）、胃黏膜肠化组织（30％）差异均无统计学意义（均P〉0．05）。与不典型增生（60％）、胃癌组织（46．5％）差异均有统计学意义（均P〈0．05）。胃癌组织survivin mRNA、蛋白表达阳性率及浓度在不同性别、肿瘤长径、发生部位、大体类型、组织类型、分化程度、有无脉管侵犯、浸润深度、有无淋巴结转移、有无远处转移、TNM分期间差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论Survivin在胃癌、胃黏膜不典型增生中的表达高于正常组织。提示与胃癌发生有关；与临床病理特征无关，提示survivin可能在肿瘤的形成阶段起作用，与胃癌发展侵袭无关。     

胃癌PTEN与Survivin的表达及其相关性研究

目的探讨胃癌磷酸酶基因PTEN与Survivin的表达及其相关性。方法用免疫组织化学SP法检测70例胃癌、相应癌旁及正常胃黏膜组织中PTEN与Survivin的表达情况。结果PTEN蛋白表达在胃癌、相应癌旁及正常胃黏膜组织中阳性率分别为45171％、8429％及91．42％,差异有统计学意义（P〈0．01）;Survivin蛋白表达在胃癌、相应癌旁及正常胃黏膜组织中阳性率分别为5571％、1714％及8．57％,差异有统计学意义（P〈0．01）;PTEN与胃癌浸润深度、淋巴结转移、肝转移及临床分期呈负相关（均P〈0．05）;Survivin与胃癌淋巴结转移、肝转移及临床分期呈正相关（均P〈005）;胃癌PTEN阳性表达率与Survivin呈显著负相关（P〈0．05）。结论PTEN、Survivin基因在胃癌的发生、发展中起着不同程度的作用;联合检测PTEN及Survivin可能对胃癌恶性程度的判定及预后评估提供帮助。     

组织芯片检测磷酸化AKT蛋白在不同胃组织中的表达

目的探讨磷酸化AKT蛋白在不同胃组织中的表达意义。方法采用免疫组织化学染色,检测胃组织芯片（包括对照组正常胃黏膜、癌旁、非典型增生、原发癌及淋巴结转移癌组织）中磷酸化AKT蛋白表达。结果与正常胃黏膜、癌旁和非典型增生组织相比,AKT蛋白磷酸化在原发癌、淋巴结转移癌中表达升高（P〈0．01）;与正常胃黏膜组织比较,磷酸化AKT蛋白在非典型增生组织中表达上调（P=0．26）。结论磷酸化AKT蛋白表达与胃癌的发生发展有关。     

尾型同源盒转录因子2在胃癌癌变多阶段组织中的表达及其意义

目的探讨尾型同源盒转录因子2（Cdx2）在肠型胃癌发生中的作用。方法采用免疫组织化学ABC法检测104例慢性浅表性胃炎、98例慢性萎缩性胃炎、112例胃黏膜肠上皮化生、106例胃黏膜不典型增生和93肠型胃癌组织中Cdx2蛋白的表达。结果Cdx2在慢性浅表性胃炎和慢性萎缩性胃炎组织中无表达，在胃黏膜肠上皮化生、胃黏膜不典型增生和肠型胃癌组织中阳性表达率分别为86．6％（97／112）、58.5％（62／106）和56．9％（53／93）。其中Cdx2在胃黏膜肠上皮化生组织中的蛋白表达阳性率显著高于胃黏膜不典型增生和肠型胃癌组织（P〈0．05）；在胃黏膜不典型增生与肠型胃癌组织中，Cdx2蛋白表达阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Cdx2可能为胃黏膜组织肠上皮化生病变的特异性标志物；Cdx2蛋白过表达在肠型胃癌的发生中发挥重要作用。     

胃癌组织CyclinE和p53蛋白表达的研究

研究CyclinE和 p5 3蛋白在胃癌中表达的意义。方法 :采用免疫组化SP法对正常胃粘膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生、萎缩性胃炎伴不典型增生组织各 2 0例和 78例胃癌组织标本进行CyclinE和p5 3蛋白检测。结果 :胃癌中CyclinE和 p5 3蛋白阳性表达率均高于正常胃粘膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生组 (P <0 .0 1) ,p5 3蛋白阳性表达高于萎缩性胃炎伴不典型增生组 (P <0 .0 5 ) ;CyclinE、p5 3蛋白表达与胃癌肿瘤细胞分化程度相关 (P <0 .0 5 ) ;CyclinE蛋白阳性表达率在有肝转移组高于无肝转移组 (P <0 .0 5 ) ;p5 3蛋白表达率在有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组 (P <0 .0 5 )。p5 3蛋白表达与胃癌浸润深度有关。结论 :CyclinE和p5 3蛋白异常表达可能参与胃癌的发生发展过程 ,检测CyclinE和 p5 3蛋白表达作为反映胃癌病理学特点可能有一定参考意义。     

P16蛋白在胃癌及癌前病变组织中表达的初步分析

目的：研究和分析Ｐ１６蛋白在胃癌及癌前病变（慢性萎缩性胃炎和慢性消化性胃溃疡）中的表达。方法：采用链霉菌抗生物素蛋白——过氧化物酶连接法（Ｓ－Ｐ法），检测了３０例癌前病变，３０例胃癌中Ｐ１６蛋白的表达水平。结果：Ｐ１６蛋白阳性表达：胃癌组织５３．３３％（１６／３０）；癌前病变９０．００％（２７／３０）；对照组正常胃组织９６．６７％（２９／３０）。结论：Ｐ１６蛋白表达，胃癌组与正常对照组及癌前病变组间的差异均有显著性意义（Ｐ＜０．０５），癌前病变组与正常对照组间差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）。     

胃癌及癌前病变中P16蛋白表达的研究

目的:研究胃癌及癌前病变中P16蛋白表达的情况,探讨p16基因在胃癌发生、发展中的作用。方法:收集正常胃粘膜组织标本43例,肠上皮化生组织标本35例,异型增生上皮组织标本50例及新鲜胃癌组织标本40例,采用免疫组化SP法检测以上组织的P16蛋白的表达情况。结果:P16蛋白表达的阳性率分别为:正常胃粘膜86%,肠上皮化生69%,轻、中、重度异型增生分别为83%、71%和35%,胃癌为23%(肠型29%、弥漫型19%)。其中正常胃粘膜、肠上皮化生、轻、中度异型增生间差异无显著性(P>0.05);重度异型增生和胃癌间差异无显著性(P>0.05);但两大组间差异有显著性(P<0.05)。结论:P16蛋白表达异常是胃癌发生的早期事件,且随着胃癌的发展而逐步增加。     

胃异型增生和早期胃癌AgNOR图像定量分析和PCNA表达

目的:探讨区嗜银蛋白(AgNOR)定量分析和增殖细胞核抗原(PCNA)表达在胃黏膜异型增生和早期胃癌中的意义.方法:对50例胃镜活组织检查标本的胃黏膜异型增生、早期胃癌的区AgNOR经图像分析系统进行定量分析和PCNA免疫组织化学染色.结果:正常胃黏膜和中高度异型增生之间AgNOR/细胞核与PCNA增殖指数差异均有显著性(P＜0.01);中～高度异型增生和早期胃癌之间AgNOR/细胞核和PCNA增殖指数差异均有显著性(P＜0.01).结论:胃黏膜中高度异型增生、早期胃癌与AgNOR/细胞核和PCNA增殖指数均有一定关系.     

hMLH1、hMSH2、c-Myc、PTEN在残胃癌中的表达和意义

目的:比较正常胃黏膜、残胃炎、胃癌、残胃癌中hMLH1、hMSH2、c-Myc及PTEN蛋白表达情况,探讨上述蛋白在残胃癌发生、发展中的作用。方法:用免疫组化SP法检测hMLH1、hMSH2、c-Myc、PTEN蛋白在20例正常胃黏膜、20例残胃炎、38例胃癌、18例残胃癌组织中hMLH1、hMSH2、c-Myc、PTEN蛋白的表达情况。结果:在残胃癌中hMLH1、hMSH2蛋白的阳性率分别为50.0%,44.4%,分别低于正常胃黏膜组织100.0%,100.0%(P<0.01)。胃癌中hMLH1、hMSH2的表达阳性率为68.4%,63.2%,与残胃癌相比无显著差异(P>0.05)。c-Myc蛋白在残胃炎黏膜组织的表达阳性率(45.0%)要高于正常胃黏膜(0.0%)(P<0.05),而残胃癌中的表达阳性率(61.1%)与胃癌中的表达(55.3%)差异无显著性(P>0.05)。PTEN蛋白在残胃癌(44.4%)和胃癌(47.4%)中的表达均下调,两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:残胃癌的发生可能与错配修复系统失活有关,癌基因c-myc激活和抑癌基因PTEN的失活也参与了残胃癌的发生、发展。     

原发性胃淋巴瘤中APC 蛋白的表达及其意义

目的 研究分析原发性胃淋巴瘤（PGL）组织中腺瘤性结肠息肉病（APC）蛋白的表达,以及与 临床病理特征的关系,探讨APC 蛋白在PGL 发生、发展中的作用及意义。方法 选取2006 年6 月-2011 年 12 月中南大学湘雅医院、湖南省邵阳市中医医院PGL 术后患者的临床资料和手术病理标本。采用免疫组织 化学法检测45 例PGL 和30 例胃正常黏膜组织中APC 蛋白的表达。结果 PGL 和胃正常黏膜组织中APC 蛋 白阳性表达率分别为37.78% 和90.0%,差异有统计学意义（P <0.05）。PGL 组织中有无淋巴结转移和不同临 床分期的APC 蛋白阳性表达率比较,差异有统计学意义（P <0.05）。不同年龄、性别及大体形态的APC 蛋 白阳性表达率比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 APC 蛋白在PGL 中低表达,是PGL 发生的一个重 要原因,提示APC 蛋白可作为PGL 发生的一个重要检测指标。     

胃癌FHIT基因异常及与EB病毒感染相关性的研究

目的:检测胃癌FHIT基因转录、Fhit蛋白表达以及EB病毒(EBV)的感染情况,探讨EBV感染对FHIT基因异常表达的影响及其与胃癌发生的关系.方法:应用巢式RT-PCR法检测30例胃癌组织和30例配对正常胃黏膜组织中FHIT基因的表达,并对异常转录本进行测序;Western杂交法检测10例胃癌Fhit蛋白的表达;PCR法检测50例胃癌(包括RT-PCR检测30例)EBV的感染情况.结果:正常胃黏膜组织中均检测到正常大小转录本,11例(36.7%)胃癌检测到异常转录本;测序结果1例异常转录本缺失FHIT外显子5～7,1例缺失FHIT外显子4～7;4例(40.0%)Fhit蛋白表达缺失或降低;5例(10.0%)EBV阳性,其中4例(80.0%)同时存在FHIT基因的异常转录本.结论:FHIT基因及其产物Fhit蛋白的缺失在胃癌的发生发展中起重要的作用.EBV感染可能通过引起FHIT基因的异常导致胃黏膜上皮细胞癌变.     

转化生长因子β1及其受体基因过量表达与进展期胃癌分化及临床预后的关系

目的明确转化生长因子β1（TGF-β1）及其受体基因和下游Smad基因家族成员在肠型胃癌中的表达变化与临床病理学特征及其预后的关系。方法在建立胃癌差异基因表达谱的基础上,确定胃癌及癌旁形态学正常组织中TGF-β1的mRNA表达水平存在明显差异,进一步利用组织微阵列和免疫组化染色分别检测了胃癌及癌旁形态学正常组织中TGF-β1蛋白表达水平。结果TGF-β1蛋白主要以细胞质着色为主,在90例胃癌组织中32例（36％）阳性表达,58例（64％）为阴性表达。进一步对不同分化程度的胃癌组织中TGF-β1蛋白的表达进行分析,结果表明在39例高中分化组织中23例（59％）呈阳性表达,而51例低分化胃癌中9例（18％）为阳性表达,差异有统计学意义（P〈0．01）。进一步分析了TGF-βR-Ⅰ蛋白的表达,在74例胃癌组织中42例（57％）阳性表达,32例（43％）染色阴性。在38例高中分化组织中26例（68％）呈阳性表达,在36例低分化胃癌中16例（44％）阳性表达,差异有统计学意义（P〈0．05）。对有随访资料的肠型胃癌的TGF-β1及TGF-βR-Ⅰ蛋白的表达情况与临床病理学特征进行分析。应用Kaplan-Meier法分析蛋白阳性和阴性表达组病例的生存时间,确定TGF-β1蛋白阳性表达组病例生存和预后明显好于TGF-β1阴性表达组病例（P=0．0058）。而TGF-βR-Ⅰ蛋白表达与生存和预后无明显关系（P=0．8453）。结论TGF-β1表达水平与胃癌的分化程度有关,表达阳性组病例的预后明显好于表达阴性组的病例,提示TGF-β1表达对中晚期胃癌的再分型和分类具有重要的临床意义。     

胃癌及癌前病变中PCNA、Bcl-2及P16蛋白的表达

目的 :研究胃癌及癌前病变患者增殖细胞核抗原 (PCNA)、抑癌基因 p16和关键性凋亡调节基因 Bcl- 2蛋白的表达 ,进一步探讨胃癌发生的分子生物学机制。方法 :应用免疫组化方法测定 90例病人的 PCNA、Bcl- 2、P16蛋白表达情况 ,其中 2 0例胃癌组织 ,18例异型增生 ,12例肠上皮化生 ,2 4例萎缩性胃炎 ,16例浅表性胃炎。结果 :从浅表性胃炎到胃癌 PCNA指数呈递增趋势 ,各组间差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。 Bcl- 2在异型增生组织中的阳性表达率与胃癌、肠上皮化生相比差异无显著性(P>0 .0 5 ) ,异型增生、肠上皮化生、胃癌组织中 Bcl- 2的阳性表达率均显著高于慢性胃炎 (P<0 .0 5 )。p16在慢性胃炎中阳性表达率显著高于胃癌、肠上皮化生和异型增生 (P<0 .0 5 )。结论 :胃癌发生的早期即存在较明显的 p16基因表达低下 ,PCNA、Bcl- 2蛋白表达增加     

肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及意义

目的　探讨肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及其与临床病理因素的关系。方法　应用免疫组织化学S P法检测 6 2例肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达。结果　肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达阳性率分别为 5 3.2 %和6 4 .5 % ,PCNA蛋白表达阳性肺癌Fhit蛋白阳性率明显低于PCNA蛋白表达阴性肺癌 (P <0 .0 1)。Fhit蛋白和PCNA蛋白在肺癌中表达与肺癌的分化程度、淋巴结转移、3年生存期均密切相关 ,PCNA蛋白与肺癌病理类型亦有关。结论　Fhit蛋白和PC NA蛋白异常表达与肺癌发生、发展密切相关 ,二者相互抑制 ,呈明显负相关