SLE患者外周血单个核细胞分泌IL-6的研究

采用IL-6依赖细胞株B_9的~3H-TdR掺入法,我们检测了不同病期SLE患者外周血单个核细胞(PBMC)24小时培养上清的IL-6活性水平。结果显示:活动期SLE患者IL-6活性水平较正常人明显增高(P<0.01);非活动期SLE同样较正常人为高(P<0.05);活动期与非活动期之间IL-6活性水平差别也有非常显著性意义(P<0.01)。提示SLE患者PBMC体外分泌IL-6功能亢进。同时我们发现:氢化可的松能明显抑制PBMC在体外分泌IL-6。     

小鼠白细胞介素3活性检测影响因素的初步研究

<正> 白细胞介素3(Interleukin 3,IL_3)是近年来发现的淋巴因子之一。关于小鼠白细胞介素3活性检测目前有四种方法:(1)20-α羟基类固醇脱氢酶法;(2)鼠骨髓细胞集落形成试验;(3)鼠骨髓细胞H_3-TdR掺入法;(4)IL_3生长依赖株32D增殖~3H-TdR掺入法。这些检测方法以32D依赖株~3H-TdR     

用7TD_1细胞检测IL-6生物学活性方法的改良

本文对IL-6生物学活性检测试验的条件进行了研究。着重比较了4组不同状态的IL-6依赖细胞系7TD_1对IL-6的反应。~3H-TdR掺入结果显示,重组人IL-6(10u/ml)对长期培养组、饥饿组、复苏组和PH4.0枸橼酸缓冲液处理组7TD_1细胞的刺激指数分别为5.0、3.0、20.0和13.0。检测IL-6的敏感性以复苏组和pH4.0处理组7TD_1细胞为高。7TD_1细胞的密度以2×10~2/孔最佳。     

IL-3选择性地维持NC而不是NK效应细胞的生长

白细胞介素-3(IL-3)能促进某些类型淋巴细胞增殖,这些细胞不同于依赖白细胞介素-2(IL-2)细胞.产生IL-3的培养条件与IL-2相同,且生成细胞似均为Thy1.2~+,lyt1~+,2~-;但IL-3反应细胞不同于IL-2反应细胞,一般为lyt2~-.作者利用~(51)Cr释放法检测了小鼠IL-3依赖细胞的自然细胞毒(NC)活性及自然杀伤(NK)活性.结果提示,与纯化的IL-3     

淋巴因子诱导的细胞毒细胞活性检测的研究

本文通过正交设计试验,建立了一种改良的诱生及检测LICC细胞毒活性的培养体系。先将脾脏淋巴细胞(5×10~6/ml)在含有IL-2(0.5U/ml)、CCDF(50％V/V)RPMI1640培养液中预培养72小时,然后加入肿瘤细胞(5×10~4/ml),用~3H-TdR后标法检测LICC细胞毒活性,杀伤时间为72小时。     

环孢菌素A对小鼠激活性淋巴细胞分泌IL-3的活性及其mRNA表达的影响

本文报告了环孢菌素A(CsA)对小鼠激活淋巴细胞分泌白细胞介素了的活性及其mRNA表达的影响,并和白细胞介素2作了比较。用ConA加PMA刺激培养的小鼠脾淋巴细胞,实验组加不同剂量的CsA,分别用其上清液刺激IL-2依赖细胞株CTLL-20和IM-3依赖细胞株FDC-P_1,以重IL-2和IL-3标准品作标准曲线,计算实验的     

~3H-TdR、~(51)Cr、~(125)I-UdR释放试验测定NK活性的比较研究

用~3H-TdR、~(51)Cr、~(125)I-UdR 分别标记YAC-1细胞,测定小鼠 NK 细胞活性 ,三种方法所获得的结果呈高度相关性,~3H-TdR 分别与~(51)Cr、~(125)I-UdR 相比以及~(51)Cr与~(125)I-UdR 相比的相关系数依次为 0.9917(P<0.001),0.9725(P<0.001),0.9478(P<0.005),表明三种释放试验均可用于检测细胞毒活性。用收集器收集残存的~(125)I-UdR 标记细胞,不仅其特异性释放率比常规测上清液的释放率要高10％左右,而且制样快速、简便。本文对三种方法的优缺点作了比较,认为~3H-TdR 释放试验作为检测细胞毒是目前国内切实可行的方法。     

肝炎后肝硬化患者细胞免疫功能的测定

51例肝炎后肝硬化(PHC)患者均有乙型肝炎病史或HBV血清标志物阳性,其中Child-Puph A级20例,B级18例,C级13例,22例健康献血员作为对照。LT试验应用~3H-TdR掺入法,IL-2活性测定应用小鼠胸腺细胞增殖法,NK细胞活性测定应用~3H-TdR后标志法。同时测定血清IgG、IgA、IgM和补体C3。 结果表明PHC患者LT刺激指数(SI),IL-2活性     

IL-2反应细胞的研究概况及进展

目前,随着IL-2在基础理论研究及临床实践中应用的日益广泛,IL-2活性的检测方法也就成为一项越来越需要普及的技术。然而至今仍未有十分简便准确、敏感而又无害的理想方法。虽然近年来许多学者正在探索用ELISA 或放免等生化学方法来代替传统的生物学方法以测定标本中IL-2含量,但由于纯化的IL-2及抗IL-2单克隆抗体等试剂来源的困难,至今尚未能实现。因此,目前生物学方法仍然被认为是最可靠的首选的方法。检测IL-2活性的生物学方法种类很多,除传统的~3H-TdR 掺入法外,尚有用检测活细胞数来判断IL-2活性     

不同杂交瘤饲养细胞上清和条件培养液中IL-2和IL-6水平的比较

本文应用细胞因子依赖细胞株CTLL和7TD1及。~3H-TDR掺入方法,分别对6种常用培养杂交瘤的饲养细胞培养上清和条件培养液中IL-2和IL-6的生物学活性水平进行了定量检测和比较。结果发现,除大鼠混合胸腺细胞培养上清中含有约1u/ml IL-2外,其它均未测出IL-2的生物学活性。但6种上清中都含有IL-6,其中人成纤维细胞CRL_(1506)和人内皮细胞中含有很高水平的IL-6,分别为10000u/ml和2512u/ml;大鼠混合胸腺细胞和小鼠腹腔巨噬细胞培养上清分别为158u/ml和126u/ml;小鼠脾脏细胞和胸腺细胞培养上清中IL-6相对较低,分别为79u/ml和16u/ml。此外,本文还对常用饲养细胞及条件培养液在杂交瘤细胞生长中可能起的主要作用进行了讨论。     

人红细胞对LAK细胞DNA合成和IL-2受体表达影响的研究

本文用~3H-TdR掺入法、APAAP免疫染色法和MTT法研究人红细胞(RBC)对LAK细胞DNA合成、IL-2受体(IL-2R)表达及杀伤活性的影响。人RBC对LAK细胞DNA合成有抑制作用,对LAK细胞IL-2R表达和杀伤活性有促进作用。随RBC浓度增加,抑制作用和促进作用均明显加强。     

恶性肿瘤病人手术前后IL-2检测

<正> 手术治疗仍然是多种肿瘤的首选治疗方案,但术后仍然存在着一定比例的局部病灶的复发和远处转移灶的出现,仍需要作密切的观察。我们的实验发现,IL-2活性水平的消长与肿瘤病人的病程和预后均有密切关系。 我们用较敏感的生物活性测定方法:取培养的IL-2依赖细胞株CTLL-2细胞做定量测定。首先检测了在未经任何治疗情况下20例乳癌、10例胃癌病人外周血淋巴细胞在1％PHA(Difco,USA)刺激24小时后的IL-2活性,结果平均活性单位为6.19u/     

Bestatin的免疫药理学研究Ⅲ.Bestatin对NK细胞活性的影响

本文探讨BS对NK细胞活性的影响。 (1)给C57BL/6小鼠口服BS5mg/kg/天×7天,取其脾细胞为效应细胞,以小鼠白血病细胞株YAC-1为靶细胞,用~3H-TdR渗入抑制实验测定NE细胞活性。结果发现给药组小鼠NK细胞活性显著高于未给药的对照组。(2)腹腔注射环磷酰胺(50mg/kg)后,小鼠NK细胞活性明显降低,如同时给小鼠口服BS,则可部份恢复其NK细胞活性。(3)自健康人外周血中分离淋巴细胞,在含有BS的培养液中培养后,弃培养液,     

PHA-LAK细胞激活培养过程中多项免疫学指标的动态分析

本文用APAAP、ELISA、MTT等方法检测了PHA—LAK细胞激活培养过程中某些免疫学指标的动态变化,结果表明:(1)在PHA-LAK细胞预刺激阶段,CD3~+、CD4~+、CD8~+及mIL-2Ra~+细胞百分率均持续升高(P均<0.01);上清液中sIL-2R水平和IL-2活性也升高,且前者与MIL-2Ra~+细胞百分率呈正相关(r=0.84,P<0.05);(2)在rIL2激活培养阶段,CD3~+、mIL-2Ra~+细胞百分率居高不下,CD4~+细胞百分率逐渐降低,而CD8~+细胞百分率则逐渐升高,培养上清液中sIL-2R水平增加和IL-2活性降低的幅度以激活培养的初期(0～3d)为最大.从而提示PBMC经预刺激后可迅速被外源性的rIL-2激活,这不仅可以提高rIL-2的利用率,也可能是PHA-LAK细胞具有较高增殖能力和细胞毒活性的原因.     

THC抑制IL—2激活NK细胞的机理

THC(delta-9-tetrahydrocannabinol)是毒品大麻(marijuana)的主要心理活性成分,对白细胞介素-2(IL-2)激活NK细胞活性有非常显著的抑制作用。为了探讨THC抑制NK活性的机理,本实验用重组人IL-2-鼠NK细胞系统,从配体-受体结合的角度研究了THC对IL-2激活NK细胞活性的影响。结果表明:16μmol～32μmolTHC处理(台盼兰排除和~3H-TdR掺入法证明对NK细胞无毒性作用),能显著降低NK细胞与IL-2的特异结合;减少NK细胞表面的IL-2受体数目;但THC并不显著改变IL-2与受体结合的平衡解离常数(kd值);也不影响Tac单克隆抗体与β链Tac位点的结合。     

合成多肽P72对葡萄球菌肠毒素超抗原抑制效应的研究

目的 观察合成多肽P72对葡萄球菌肠毒素超抗原(SEs)促人外周血单个核细胞(PBMC)增殖活性的抑制作用.方法 3H-TdR掺入法检测人 PBMC的增殖;ELISA检测IL-2、IFN-γ、TNF-β分泌情况.结果 P72对 SEA、SEB、SEC的促PBMC增殖及分泌IL-2、IFN-γ、TNF-β具有抑制作用.结论 细胞试验显示合成多肽P72对超抗原SEA、SEB、SEC的活性具有抑制作用.     

一种高度敏感的改良的IL—1检测方法

采用CTLL-2检测IL-1诱导小鼠胸腺瘤细胞系EL_4产生IL-2活性,建立了一种间接检测IL-1的方法。通过对多种影响因素进行探讨,选择了较适的诱导血清浓度,细胞浓度,诱导时间和转移诱导上清稀释度,从而使检测IL-1的敏感性达10~(-3)～10~(-4)U/ml(2.5～25×10~(-4)Pg/ml,约为小鼠胸腺细胞检测方法的10~2～10~3倍),整个检测流程可在40小时内完成。若用CTLL-2和EL_4细胞同时培养的一步法检测,敏感性约为10~(-1)U/ml,但30小时内可完成检测。此法不受高浓度rHuTNF-α、rHuTNF-β、rHuIL-6干扰,IL-2、ConA、PHA、LPS和SEB对检测系统只有较弱的影响,但A23187可明显地干扰检测系统。因此,本方法可用于基础和临床研究过程中不同来源的IL-1生物学活性检测。     

白细胞介素2受体的表达:在T细胞增殖中的作用

本文研究IL2和IL-2受体在人T细胞增殖中的作用.方法是从健康人外周血分离出巨噬细胞和T细胞.巨噬细胞经γ-射线照射并用神经氨酸酶和半乳糖氧化酶(NAGO)处理作为刺激细胞.T细胞与经上述方法处理的自身巨噬细胞共同培养,经不同时间终止激活.然后通过E花环再次分离T细胞予以重新培养,培养中加或不加外源性IL-2,用~3H-TdR掺入法检测其增殖反应.T细胞与巨噬细胞共同培养至少经2-4小时激活,可产生对IL-2的反应,而以激活后18-24小时反应最强.用抗IL-2受体的单     

IL-2对培养的人垂体腺瘤细胞增殖的影响及其机制

目的:研究IL-2对人垂体腺瘤细胞的增殖、细胞周期、细胞内蛋白激酶C(PKC)及cAMP/cGMP的影响,并探讨其作用的机制。方法:采用MTT比色法和3H-TdR掺入法检测IL-2对人垂体腺瘤细胞增殖和DNA合成的影响;用流式细胞术检测IL-2对垂体腺瘤细胞细胞周期的影响。用放射免疫测定法检测PKC的活性及cAMP和cGMP的含量。结果:(1)IL-2可促进垂体腺瘤细胞增殖和DNA合成,且呈剂量依赖性。(2)IL-2可显著降低垂体腺瘤细胞G1期的细胞比率,而增加S期和G2期的细胞比率。(3)与空白处理组相比较,使用PKC的激动剂PMA处理培养的人垂体腺瘤细胞,可使胞膜和细胞总PKC升高;而用IL-2(1×105U/L)处理后,胞质、胞膜和细胞总PKC的活性均升高。(4)IL-2(5×104、1×105U/L)作用于人垂体腺瘤细胞后,胞内cAMP浓度显著降低;而cGMP的浓度没有明显改变。结论:IL-2对垂体腺瘤细胞增殖分化的调控作用是细胞内多信息系统相互整合的结果。     

人胎脾脏和胸腺细胞的LAK活性与增殖特性

本文报道用细胞毒及~3H-TdR掺入等方法,研究人重组IL-2对人胚胎中期脾脏和胸腺细胞LAK活性的诱导及细胞增殖反应影响的一般规律。在低剂量IL-2的作用下,人胎脾脏和胸腺细胞出现广谱杀瘤活性,但二者的活性表达有所不同;脾脏细胞出现很强的增殖反应,胸腺细胞没有出现。实验结果提示,胎儿脾脏和胸腺细胞对重组IL-2的反应性存在差异。