卡氏肺孢子虫肺炎支气管肺泡灌洗液中表面活性蛋白A和D的变化

目的为进一步明确表面活性蛋白与卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的关系及肾上腺皮质激素对表面活性蛋白的影响.方法通过每周两次皮下注射25mg醋酸可的松8-12周建立PCP及细菌性肺炎大模型.收集支气管肺泡灌洗液(BALF),计数BALF中有核细胞数并分类,用免疫印迹法检测表面活性蛋白A(SP-A)及表面活性蛋白D(SP-D).将大分为免疫抑制组(共三组)及正常对照组.Ⅰ组:正常对照(n=6),为健康SD大;Ⅱ组:阴性对照(n=6),为注射醋酸可的松8周以上无肺部感染的大;Ⅲ组:细菌性肺炎(n=11),为注射醋酸可的松8周以上出现细菌性肺炎而未分离到其它病原体的大;Ⅳ组:PCP(n=14),为注射醋酸可的松8-12周出现PCP而未分离到其它病原体的大.结果阴性对照组BALF中细胞总数低于正常对照组(P＜0.001).PCP组BALF中细胞总数及多形核细胞(PMNs)百分数高于阴性对照组(P＜0.01),但低于细菌性肺炎组.PCP组BALF中SP-A浓度(45.1±22.1μg/ml)显著高于阴性对照组(16.2±9.9μg/ml,P＜0.05)及细菌性肺炎组(6.2±5.6μg/ml,P＜0.001).我们也发现PCP组中SP-D相对含量(24 249±4780灰度值)显著高于阴性对照组(13 384±2887,P＜0.001)及细菌性肺炎组(11 989±2750灰度值,P＜0.001).PCP中重度组SP-A、SP-D高于PCP轻度组(分别P＜0.01,P＜0.001).阴性对照组SP-A、SP-D高于正常对照组,但无统计学差别.结论卡氏肺孢子虫特异性刺激引起BALF中SP-A、SP-D浓度增加,SP-A、SP-D增加与肺内富含卡氏肺孢子虫有关,而与肾上腺皮质激素的应用无关.     

Relationship between the burden of pneumocystis carinii, the inflammatory reaction and lung injury in pneumocystis carinii pneumonia

Objective To study the relationship between the burden of Pneumocystis carinii (P. carinii) and the inflammatory reaction and biochemical markers in bronchoalveolar lavage fluids (BALF)in a rat model of P. carinii pneumonia (PCP). Methods Clean grade 50 male Sprague-Dawley rats were immunosuppressed by a subcutaneous injection of 25mg cortisone acetate twice a week for 8-12 weeks; the PCP model was successfully induced in 14 rats. The inflammatory reaction and biochemical markers of the activity of lactate dehydrogenase (LDH), alkaline phosphatase (AL P) and type Ⅳ collagenase (matrix metalloproteinases, MMP-2, MMP-9) as well a s the values of total protein (TP) and albumin (ALB) in BALF between the mild burden group of P. carinii (involved alveoli <25% per 100 alveoli, G roup A) and the moderate to severe burden group (involved alveoli ≥25% per 100 alveoli, Group B) were measured. The other six clean grade SD rats served as no rmal control group (Group C).Results The total white cell count in BALF was higher in Group B ［(6.8±1.7)×10(6)/L ］ than in Group A ［(3.8±1.2)×10(6)/L］ (P<0.01); however, there were no differences in white cell differentiation. Assays of biochemical marke rs showed that ALB in BALF in Group B (0.893±0.469 g/L) was increased in com parison with Group A (0.262±0.169 g/L); it was only 0.026±0.021 g /L i n Group C. The contents of TP and activities of LDH were higher in Group B (TP 1.756±0.706 g/L, LDH 2580±550 U/L) than in Group A (TP 0.784±0.553 g/L, LDH 1410±620 U/L); the values of TP and LDH were 0.063±0.020 g/L an d 370±250 U/L respectively in Group C. The activity of Type Ⅳ collagenase, including MMP-2 and MMP-9, was higher in Group B than in Group A (P<0.0 1) (MMP-2: 1102±169 grey value vs 459±274 grey value; MMP-9: 1218±257 grey value vs 449±225 grey value). There was no activity of Type Ⅳ collagenase in BALF of Group C. No statistically significant difference was observed in ALP between the groups B and A. Conclusions These results indicate that there is a significant correlation between the burde n of P. carinii in lung tissues and the inflammatory reaction as well as bi ochemical markers of the resultant activity of lung injury.     

颈动脉负压分流制作大鼠全脑缺血/再灌注模型

为观察被动吸烟大鼠肺泡灌洗液炎性细胞及呼吸道病理形态学改变,将清洁级SD大鼠随机分成两组,吸烟组(n=13)置于隔离器内被动吸烟2 h/d,共20 d,对照组置隔离器内2 h/d,无被动吸烟.20 d后行支气管肺泡灌洗液(BALF)炎性细胞计数及分类,并作右总支气管气道表面电镜下的病理形态学观察及肺组织学检查.结果显示吸烟组大鼠BALF中炎性细胞计数为(46.1±28.3)×106/L,较对照组(17.7±9.9)×106/L明显增高(P《0.05).光镜检查示吸烟组小气道和肺组织炎性细胞浸润,扫描电镜观察见柱状上皮细胞纤毛倒伏凌乱,部分脱落;对照组未见明显异常.烟雾刺激导致大鼠呼吸道炎性细胞增多,炎症反应增强及纤毛功能减退,因而被动吸烟可能是引起呼吸道损伤的重要因素.     

肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中碱性磷酸酶的动态变化及其意义

目的 :探讨碱性磷酸酶在肺纤维化中的作用。方法 :采用博莱霉素致肺纤维化大鼠模型 ,应用酶学方法对支气管肺泡灌洗液中碱性磷酸酶 (ALP)进行动态观察。结果 :(1)博莱霉素 (BLM )组支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、中性粒细胞第 1d即开始增加 ,第 3d达高峰 ,14d后逐渐恢复正常 ;淋巴细胞在第 7d达高峰。 (2 )BLM组BALF中ALP的绝对值增加 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ;总蛋白第 3d达到高峰 (P <0 .0 1) ,第 14～ 2 8d逐渐恢复正常 ;ALP和总蛋白比率第 7d开始增加 (P >0 .0 5 ) ,第 14～ 2 8d逐渐达到高峰 (P <0 .0 5 )。血清中ALP两组无统计学差异。 (3)BALF中ALP绝对值与炎症细胞总分数以及总蛋白无明显相关 ,BALF中ALP和总蛋白比率与炎症细胞总分数也无明显相关。结论 :博莱霉素致肺纤维化大鼠BALF中ALP明显增加 ,ALP和总蛋白比率随着肺纤维化进展而增加 ,其比率的增加可以作为反映肺纤维化进展的一项指标     

2种超顺磁性Fe3O4纳米粒子的制备及其对大鼠肺部的急性毒性效应

目的：分别制备壳聚糖和油酸钠修饰的超顺磁性Fe3O4纳米粒子（superparamagnetic iron oxide nanoparticles,SPIONs）,并探讨其对大鼠肺部的急性毒性效应。方法：采用化学共沉淀法制备壳聚糖和油酸钠修饰的SPIONs并对其进行表征。将54只SD大鼠随机分为生理盐水对照组（n=18）、壳聚糖SPIONs组（n=18）和油酸钠SPIONs组（n=18）。口腔内气管插管给药,对大鼠的一般情况进行观察,分别于给药后24、72 h和第14天随机处死每组中6只大鼠,腹腔静脉取血检测主要血生化指标,取支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）,计数细胞总数和中性粒细胞的数量,HE染色观察肺部的病理改变。结果：（1）制备的SPIONs均为30 nm左右的类球形结晶。（2）大鼠一般情况好,未发生死亡。（3）２实验组血清中的主要血生化指标仅有24 h总蛋白（total protein,TP）含量和14 d碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）含量２项指标与正常对照组有差异[TP（g/L）24 h组：壳聚糖SPIONs组（n=6）：62.40±3.60,油酸钠SPIONs组（n=6）：69.95±5.16,正常对照组（n=6）：63.22±2.55,F=6.344,P=0.010;ALP（u/L）14 d组：壳聚糖SPIONs组（n=6）：78.83±7.92,油酸钠SPIONs组（n=6）：106.83±26.95,正常对照组（n=6）：99.85±9.63,F=4.336,P=0.033）。（4）实验组BALF中的细胞总数（×104个）在24 h和72 h均高于正常对照组（壳聚糖SPIONs 24 h组（n=6）：780.00±130.58,油酸钠SPIONs 24 h组（n=6）：1 000.00±166.85,正常对照24 h组（n=6）：498.33±114.75,F=19.605,P=0.000;壳聚糖SPIONs 72 h组（n=6）：809.17±197.49,油酸钠SPIONs 72 h组（n=6）：920.00±125.54,正常对照72 h组（n=6）：580.00±123.29,F=7.735,P=0.005）,且油酸钠SPIONs组明显高于壳聚糖SPIONs组,在14 d时均下降（壳聚糖SPIONs 14 d组（n=6）：628.33±133.29,油酸钠SPIONs 14 d组（n=6）：654.17±99.27,正常对照14 d组（n=6）：570.83±94.15,F=0.898,P=0.428）。（5）实验组BALF中中性粒细胞的数量（×104个）在24 h和72 h均高于正常对照组（壳聚糖SPIONs 24 h组（n=6）：45.00±14.12,油酸钠SPIONs 24 h组（n=6）：90.00±24.50,正常对照24 h组（n=6）：1.02±0.33,F=44.565,P=0.000;壳聚糖SPIONs 72 h组（n=6）：9.15±8.82,油酸钠SPIONs 72 h组（n=6）：19.17±5.38,正常对照72 h组（n=6）：1.09±0.57,F=13.791,P=0.000）,且油酸钠SPIONs组明显高于壳聚糖SPIONs组,在14 d时下降至接近正常。（6）实验组的肺部HE染色可以明显看到肺泡断裂,肺泡壁增厚,炎症细胞浸润,油酸钠SPIONs组炎症表现更严重。壳聚糖SPIONs组肺损伤有自我修复的趋势,而油酸钠SPIONs组减轻不明显。结论：壳聚糖SPIONs与油酸钠SPIONs相比,对肺部毒性作用小,并且随着时间的延长,毒性效应逐渐减轻。     

安宫牛黄丸对脂多糖致急性肺损伤大鼠肺组织Nrf2蛋白表达的影响

目的 探讨安宫牛黄丸对脂多糖引起的急性肺损伤的保护机制.方法 将40只SD大鼠按随机数字表法分为对照组(Control组,n=10)、脂多糖组(LPS组,n=10)、脂多糖+安宫牛黄丸组(LPS+AG组,n=10)和安宫牛黄丸组(AG组,n=10).采用一次性腹腔注射脂多糖30 mg/kg建立大鼠急性肺损伤模型.分别检测各组大鼠肺湿重/干重比、支气管肺泡灌洗液蛋白浓度和白细胞计数、肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量、肺组织内转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)水平.结果 LPS+AG组肺组织SOD活性为(325.67±7.85)kU/g,明显高于LPS组的(298.75±6.25)kU/g,差异有统计学意义(P<0.05).MDA、INF-α含量分别为(1.89±0.35)μmol/L、(35.21±3.12)ng/g,均低于LPS组的(2.78±0.41)μmol/L、(41.52±4.87)ng/g,差异均有统计学意义(P<0.05).LPS+AG组肺组织Nrf2蛋白表达为(0.87±0.19),明显高于LPS组的(0.34±0.11),差异有统计学意义(P<0.05).结论 安宫牛黄丸对脂多糖诱发的急性肺损伤具有保护作用,可能与其能激活肺组织Nrf2表达有关.     

乙酰半胱氨酸对通气机所致大鼠肺损伤的保护作用

目的探讨乙酰半胱氨酸(NAC)对通气机所致大鼠肺损伤(VILI)的保护作用.方法将30只健康雄性SD大鼠随机分为3组,实施麻醉和气管切开术后,分别接受两种不同潮气量(VT)的通气,通气时间均为4 h.A组为对照组(VT=8 ml/kg);B组为致伤组,接受大潮气量通气(VT=40 ml/kg);C组(VT=40 ml/kg)为NAC处理组,分别在通气开始前30 min腹腔内注射和通气开始后1 h静脉内注射NAC150 mg/kg.对所有动物每小时行1次动脉血气分析.进行支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞和中性粒细胞计数,分别测定右肺干湿比值(W/D),BALF中总蛋白含量,BALF和血中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平以及肺组织和血中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,并观察肺脏的组织病理学改变.结果机械通气4 h后,B组动脉血氧分压(PaO2)较A、C组显著下降(P＜0.01),BALF中有大量的白细胞和中性粒细胞浸润.B组BALF中总蛋白含量、右肺W/D值较A、C组显著升高(P＜0.01).B组BALF中TNF-α、IL-1β水平显著升高,分别为(0.53±0.09)μg/L、(0.092 0±0.012 4)μg/L,而C组较B组显著降低,分别为(0.25±0.04)μg/L、(0.046 5±0.007 5)μg/L(P＜0.01).C组肺内和血中MDA水平较B组显著下降,而SOD水平较B组显著升高(P＜0.01).组织病理学显示B组较A、C组肺脏内有明显的中性粒细胞浸润和肺泡壁结构破坏.结论一系列炎症和炎症前反应以及氧化和抗氧化反应的失衡参与了VILI的发生机制.NAC通过其抗炎和抗氧化作用对大鼠VILI模型具有较明显的保护作用.     

非受体酪氨酸蛋白激酶Lck与IL-17在急性肺损伤大鼠模型中的表达及意义

目的 研究非受体酪氨酸蛋白激酶Lck与IL-17在急性肺损伤(ALI)炎症反应中的表达及意义。方法 气管内滴入盐酸法复制大鼠ALI模型,用免疫组织化学方法(IHC)检测肺组织中Lck和IL-17蛋白表达水平;Western印迹法检测肺组织匀浆中Lck蛋白的表达;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织匀浆和肺泡灌洗液(BALF)中IL-17的含量。结果 正常大鼠肺组织中Lck与IL-17低水平表达,ALI模型建立后6h,其表达显著增高,肺间质中阳性着色的单核细胞明显增多。与对照组比较,ALI组大鼠肺组织匀浆和肺泡灌洗液(BALF)中IL-17含量均显著升高[(102.04±14.23)pg/mg pro vs. (25.16±9.08)pg/mg pro, P＜0.01;(66.46±13.12)pg/mg pro vs. (8.19±2.54)pg/mg pro, P＜0.01]。结论 ALI大鼠肺组织、肺泡灌洗液、匀浆中Lck与IL-17的表达均上调,两者参与了ALI的炎症反应过程。     

慢性胃炎患者固体餐胃排空功能的临床研究

目的探讨慢性胃炎(CG)患者幽门螺杆菌(Hp)感染、胃炎程度及是否活动性、临床症状等与胃固体排空功能的相关性.方法30例诊断为CG的患者,根据Hp检测或组织病理学结果分为Hp阳性组(n=8)及Hp阴性组(n=22);活动性炎症组(n=16)和无活动性炎症组(n=14);炎症轻度(n=15)、中度(n=9)、重度(n=6).所有患者服标准试餐加不透X线的小钡条,5 h后摄腹部平片1张,观察胃内残留钡条数目,计算胃排空率. 结果30例CG患者平均固体餐胃排空率为(67.8±40.1)%.Hp阳性者胃排空率为(75.0±39.2)%,Hp阴性者为(65.2±41.0)%,差异无显著性意义(P>0.05).伴活动性炎症者为(58.8±42.1)%,无活动性炎症者为(78.2±36.5)%,无显著性差异(P>0.05).慢性胃炎轻、中、重度患者胃排空率分别为(68.3±42.8)%,(76.1±33.5)%,(54.2±45.3)%,均无显著性差异. 结论Hp感染、炎症及是否活动性与CG的固体餐胃排空功能无显著相关性.     

Genotypes and polymorphisms of mutant CCR5-△32,CCR2-64I and SDF1-3’A HIV- 1 resistance alleles in indigenous Han Chinese

Objective To understand the interaction between surfactant proteins and pneumocys tis carinii pneumonia (PCP), and the impact of corticosteriods on surfactant proteins.Methods We established rat models of PCP and bacterial pneumonia induced by subcutaneous injection of 25mg cortisone acetate. At 8-12 wk, the bronchoalveolar lavage f luid (BALF) of rats was collected. Total nucleated cells of BALF were counted a nd differentiated, and the concentrations of surfactant protein A (SP- A) and su rfactant protein D (SP- D) were measured by immunoblotting assay. The rats were divided into three immunosuppressive groups and a normal control group. Group Ⅰ, normal control (n=6), consisted of healthy SD rats; group Ⅱ, negative cont rol (n=6), consisted of rats with cortisone acetate injection for over 8 wk with out lung infection; group Ⅲ, bacterial pneumonia (n=11), rats were injected wit h cortisone acetate over 8 wk that resulted in bacterial pneumonia without other pathogens isolated; and group Ⅳ, PCP (n=14), rats with injected cortisone acet ate for 8-12 wk and developed PCP without other pathogens isolated. Results Our results indicated that the total cell count in BALF in the negative control group was lower than that in the normal control group (P&lt;0.001). During P CP infection, the total cell count and the percentage of polymorphonuclearcytes (PMNs) in BALF were signi ficantly increased (P&lt;0.01), but were lower than those in the bacterial pne umonia group. The concentration of SP- A of BALF in PCP (45.1±22.1 μg/ml) was significantly increased in comparison with that in the negative control ( 16.2±9.9 μg/ml, P&lt;0.05) and bacterial pneumonia groups (6.2±5.6 μ g/ml, P&lt;0.001). We also found that the relative content of SP - D was signi ficantly higher in PCP (24 249±4780 grey values) than that in the negative control (13 384±2887 grey values, P&lt;0.001) and that in bacterial pne u monia (11 989±2750 grey values, P&lt;0.001). SP- A and SP- D were a lso higher in the moderate to heavy group of PCP than those seen in the mild group (P&lt;0.01, P&lt;0.001). SP- A and SP- D were higher in the negative contr ol group than those in the normal control group, but there was no significant di fference between the 2 groups. Conclusion These results suggest that the concentrations of SP- A and SP- D in BALF are inc reased by pneumocystis carinii specific stimulation, but the alteration is n ot related to the corticosteriod usage.     

烧伤、冲击伤及烧冲复合伤后大鼠早期血清中性粒细胞弹性蛋白酶的变化及意义

目的 探讨中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)在大鼠烧伤、冲击伤与烧冲复合伤后早期血清中浓度的变化及意义.方法 选择雄性SD大鼠176只,随机分为对照(C)组、烫伤(BU)组、冲击伤(BL)组与烧冲复合伤(BB)组.C组不致伤;BU组背部脱毛置人94 ℃水中12 s,致25%体表面积(TBSA)Ⅲ°烫伤;BL组以5 g 8701压缩炸药柱为爆炸源,以左侧胸壁距爆炸源75 cm距离进行爆炸,致中度冲击伤;BB组同BL、BU组伤情先致冲击伤后立即烫伤.伤后24 h内,BU、BB组按照50 ml/kg,腹腔注射乳酸钠林格注射液抗休克治疗,1次/12 h.致伤组分为伤后3 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、7 d共7个时相点.测定各时相点支气管肺泡灌洗液(BALF)总蛋白浓度(BCA法)、肺组织含水率(称重法)及血清NE浓度(ELISA法).结果 各致伤组SD大鼠的BALF总蛋白浓度、肺组织含水率及血清NE浓度伤后各时相点均高于C组(P＜0.01或P＜0.05),其伤后峰值均出现在2 d以内,尤其是伤后2 d,BU组、BL组及BB组血清NE浓度分别为(319.85±19.50)ng/ml,(467.43±31.64)ng/ml,(626.00±26.38)ng/ml;C组(78.53±25.10)ng/ml.组间比较,总体伤情水平BB组＞BU组及BL组(P＜0.01或P＜0.05).相关分析表明,伤后3d内,BU组血清NE浓度与BALF总蛋白浓度、肺组织含水率均存在显著正相关(r=0.7910,0.8078,P＜0.05),BB组血清NE浓度与BALF总蛋白浓度存在显著正相关(r=0.8672,P＜0.05).结论 NE可能在烧伤、冲击伤,尤其是烧冲复合伤的早期肺损伤中起到了重要作用.     

硫化氢对急性肺损伤大鼠肺组织核转录因子κB及细胞间黏附分子1表达的影响

目的 探讨硫化氢(H2S)对油酸诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核转录因子κB(NF-κB)与细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响.方法 雄性SD大鼠42只,采用随机数方法分为对照组(6只)、油酸组及油酸+硫氢化钠(NaHS)组,后2组大鼠分别在2、4、6h3个时间点进行观察,每个时间点大鼠为6只.复制大鼠ALI模型,对照组大鼠经过尾静脉注射0.1 ml/kg生理盐水;油酸组大鼠通过尾静脉注射油酸0.1 ml/kg;油酸+NaHS组大鼠先腹腔注射NaHS 56 μmol/kg(溶于0.5 ml生理盐水),30 min后经大鼠尾静脉注射油酸0.1 ml/kg.对支气管肺泡灌洗液沉渣行瑞士染色进行白细胞分类计数;对大鼠肺组织病变进行半定量肺损伤评分;测定肺组织中H2S的含量;应用免疫组织化学法对肺泡上皮细胞中ICAM-1表达进行定位及半定量分析,并对NF-κB核转位进行半定量分析.结果 油酸组大鼠2、4、6h支气管肺泡灌洗液多形核白细胞(PMN)比例[(74.5±3.0)％、(80.2±2.0)％和(87.2±2.7)％]及肺损伤评分(5.2±0.8、6.4±0.6和6.8±0.8)均明显高于对照组[(3.1±1.6)％和0.4±0.6,均P＜0.01];肺组织中H2S含量均明显低于对照组[ (21.20 ±0.38) μmol/g、( 20.80±0.53)μmol/g、(18.92±0.75)μmol/g比(26.81±0.65)μmol/g,均P＜0.01];肺泡上皮细胞中NF-κB核表达和ICAM-1胞膜表达则均明显高于对照组(均P＜0.05).油酸+NaHS组支气管肺泡灌洗液PMN比例及肺损伤评分在2、4和6h3个时间点均明显低于油酸组(均P＜0.05);肺组织中H2S含量在4和6h明显高于油酸组(均P＜0.05);肺泡上皮细胞中NF-κB核表达和ICAM-1胞膜表达在4和6h则明显低于油酸组相应时间点(均P＜0.05).结论 H2S可能通过抑制ALI大鼠肺部炎症反应发挥保护效应,其抗炎效应与其抑制大鼠肺泡上皮细胞NF-κB的表达有关.     

双黄连对肺炎支原体感染大鼠组织中PDGF—BB影响的免疫组织化学研究

为探讨中药制剂双黄连粉针剂(双黄连)对反复肺炎支原体肺部感染大鼠肺组织中血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)蛋白质水平表达的影响,给大鼠于24周内反复9次经超声雾化吸入肺炎支原体以复制其慢性肺部感染模型,并应用双黄连腹腔注射进行治疗干预;随后用PDGF-BB单克隆抗体按SABc法行免疫组织化学染色,定量图像分析。结果(1)感染组动物(n=4)支气管肺泡灌洗液肺炎支原体-PCR检测均为阳性,而对照组(n=4)和感染加双黄连治疗组(n=4)均为阴性(均为P<0．05);三组动物的支气管和肺组织常规细菌培养结果均为阴性;感染组动物透射电镜检查见肺泡间隔增宽,其中有较多胶原纤维堆积,其余两组则未见明显异常。(2)感染组动物肺间质结缔组织中以及小气道和小血管的壁上可见较强的细颗粒状或细丝网状棕黄色PDGF-BB免疫组化染色阳性表达产物,其积分光密度为23．26±3．87(n=4),显著高于正常对照组者(1．52±0．61,n=4,P<0．05)和感染加双黄连治疗组者(3．49±0．63,n=4,P<0．05)。提示双黄连可抑制反复肺炎支原体肺部感染大鼠肺组织中PDGF-BB蛋白质水平的表达,对于防止肺炎支原体肺部感染所引起的肺间质纤维化可能具有一定的作用。     

黄芪甲苷诱导NO生成并激活PKCε对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究黄芪甲苷（AsⅣ）对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,阐明其作用机制。方法：30只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、再灌注模型组、阳性药尼可地尔(10 mg/kg) 组、AsⅣ (5 mg/kg)组及AsⅣ+氯化白屈莱赤碱(CHE)（3 mg/kg）组,每组6只,结扎左冠状动脉前降支30 min,松扎再灌注120 min 制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,检测AsⅣ对其血清中LDH、MDA和SOD以及NO的影响,同时光镜下观察心肌细胞病理组织形态学变化, Western blotting 法检测心肌细胞胞浆及胞膜PKCε 蛋白表达。结果：AsⅣ组与模型组比较,LDH漏出量降低 (P<0.05), MDA含量明显降低(P<0.01), SOD活力增强(P<0.01), NO含量增加(P<0.01)。HE染色组织形态学观察,与模型组比较,AsⅣ组心肌细胞形态有明显的改善,炎细胞浸润也有减轻。Western blotting 法检测,AsⅣ组心肌细胞胞膜PKCε表达量高于模型组（P<0.05）。CHE减弱了ASⅣ的这种保护作用;与AsⅣ组比较,AsⅣ+CHE组LDH漏出量升高 (P<0.05), MDA含量升高(P<0.01), SOD活力降低(P<0.01),PKCε胞膜表达量降低（P<0.05）,心肌细胞水肿明显、胞质着色较浅。结论：AsⅣ通过诱导NO的生成对大鼠心肌缺血再灌注损伤产生保护作用,PKCε的激活可能是AsⅣ保护心肌细胞信号传导通路的组成部分。     

肺炎克雷伯菌致大鼠重症肺炎模型的建立

目的 探索大鼠细菌性重症肺炎的诊断标准及病理生理特点。方法 Sprague Dawleg大鼠随机分为模型组、观察组和对照组．每组分为3小组，前两组每小组8只，对照组每小组4只。其中，模型组和观察组分别接种相同浓度不同剂量的肺炎克雷伯菌菌液，对照组接种与观察组剂量相同的生理盐水。分别与接种后的第2、4、6天分批处死动物．动态观察动物的血液动力学、血气分析、外周血象、肺泡灌洗液中白细胞和中性粒细胞计数及病理改变。结果 接种高剂量菌液的模型组于接种后第5天出现明显血液动力学改变，于第4天出现血气分析的改变。模型组外周血象、肺泡灌洗液的白细胞和中性粒细胞计数及病理改变在各处死时间段较接种低剂量的观察组明显加重。同时，模型组和观察组随着接种时间的延长，血液动力学、血气分析、外周血象、肺泡灌洗液的白细胞和中性粒细胞计数及病理改变逐渐加重。对照组的各项检测指标于接种前后无明显变化。结论 随着接种一定浓度菌液剂量的增加，致使大鼠肺炎明显加重，出现类似人群细菌性重症肺炎的改变。     

肺炎克雷伯菌致大鼠重症肺炎模型的建立

目的 探索大鼠细菌性重症肺炎的诊断标准及病理生理特点。方法 SpragueDawleg大鼠随机分为模型组、观察组和对照组,每组分为3小组,前两组每小组8只,对照组每小组4只。其中,模型组和观察组分别接种相同浓度不同剂量的肺炎克雷伯菌菌液,对照组接种与观察组剂量相同的生理盐水。分别与接种后的第2、4、6天分批处死动物,动态观察动物的血液动力学、血气分析、外周血象、肺泡灌洗液中白细胞和中性粒细胞计数及病理改变。结果 接种高剂量菌液的模型组于接种后第5天出现明显血液动力学改变,于第4天出现血气分析的改变。模型组外周血象、肺泡灌洗液的白细胞和中性粒细胞计数及病理改变在各处死时间段较接种低剂量的观察组明显加重。同时,模型组和观察组随着接种时间的延长,血液动力学、血气分析、外周血象、肺泡灌洗液的白细胞和中性粒细胞计数及病理改变逐渐加重。对照组的各项检测指标于接种前后无明显变化。结论 随着接种一定浓度菌液剂量的增加,致使大鼠肺炎明显加重,出现类似人群细菌性重症肺炎的改变。     

滴注空气在脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤模型建立过程中的作用

目的：研究滴注空气对脂多糖（LPS）诱导的小鼠急性肺损伤（ALI）模型的影响,为建立更加有效的气管滴注方法提供依据。方法：45只健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+空气组,每组15只。以LPS作为刺激物,LPS组和LPS+空气组小鼠采用暴露式气管滴注方法建立ALI模型,LPS+空气组小鼠行气管滴注前1 mL注射器内预先吸入100 μL空气,对照组小鼠不进行任何处理。气管滴注后24 h进行支气管肺泡灌洗液（BALF）中生化指标检测、细胞分类计数、肺湿/干重（W/D）比值测定和肺组织形态学观察。结果：与对照组比较,LPS组和LPS+空气组小鼠BALF中碱性磷酸酶（ALP）和乳酸脱氢酶（LDH）活性、总蛋白浓度、总细胞和中性粒细胞数量以及肺W/D比值显著升高（P<0.05）;与LPS组比较,LPS+空气组小鼠BALF中ALP和LDH活性、总蛋白浓度、总细胞和中性粒细胞数量以及肺W/D比值显著升高（P<0.05）。肺组织学观察,与对照组比较,LPS组和LPS+空气组小鼠肺组织均有不同程度的液体积聚、中性粒细胞浸润、充血和出血;与LPS组小鼠比较,LPS+空气组小鼠肺泡腔内积聚了更多富含蛋白的液体、中性粒细胞和红细胞。结论：滴注空气可以用于改进气管滴注方法,建立更加可靠的ALI动物模型。