三氧化二砷对表皮癌细胞株A-431增殖及Survivin表达的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对表皮癌细胞株A-431增殖和细胞周期的影响以及对Sur-vivin基因表达的影响,为As2O3治疗表皮癌提供实验室依据。方法培养表皮癌细胞A-431,加入不同浓度的As2O3,MTF法观察As2O3对A431细胞增殖的影响,应用流式细胞仪检测As203对A431细胞细胞周期、凋亡和Survivin基因表达的变化。应用Western Blot免疫印迹技术观察As2O3对A431细胞Survivin基因表达的影响。结果从浓度10μmol／L到40μmol／L,As2O3可以显著地抑制A431细胞的增殖,呈时间依赖性和浓度依赖性;As2O3影响A431细胞周期的分布,作用后G0／G1期期细胞群增多,凋亡数目增多（P〈0．05）。与对照组比较,As2O3能抑制A-431细胞Survivin基因的表达,该蛋白量下降（P〈0．05）。结论As2O3对体外培养的表皮癌细胞株有显著的增殖抑制作用,有诱导表皮癌凋亡的作用;并可能与抑制凋亡抑制基因Survivin的表达有关。     

三氧化二砷对人肝癌细胞的体外作用及其机制

目的观察三氧化二砷(As2O3)对人肝癌细胞BEL7402的体外作用及其机制.方法采用MTT法观察As2O3对BEL7402细胞的生长抑制率;流式细胞仪测定经不同浓度As2O3处理后的BEL7402细胞周期、凋亡相关蛋白bcl-2阳性细胞百分率、增殖细胞核抗原(PCNA)变化.结果As2O3可显著抑制BEL7402细胞生长,且剂量-效应关系显著(r=0.965 0,P＜0.01),半数抑制浓度(IC50)为4.93 μmol·L-1;As2O3能显著下调PCNA蛋白表达(P＜0.01),并使细胞周期阻滞在G2/M期,但对bcl-2表达无影响(P＞0.05).结论As2O3可有效抑制人肝癌BEL7402细胞生长,其机制可能与下调PCNA表达及阻滞细胞周期有关.     

姜黄素和顺铂联用对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3作用

目的:研究姜黄素和顺铂联用抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3增殖的影响.方法:MTT比色法检测细胞生长活性,流式细胞仪测定细胞周期时相变化及检测细胞凋亡,透射电镜观察细胞超微结构变化.结果:姜黄素能显著抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞的体外生长,呈时间与剂量依赖性;细胞周期主要阻滞于G2/M期,部分细胞出现凋亡形态学改变.顺铂和不同浓度姜黄素联合可显著抑制PC-3细胞增殖.姜黄素和顺铂在一定程度上均可诱导PC-3细胞凋亡,两种药物联用后,诱导细胞凋亡作用增强.结论:姜黄素可与顺铂协同抑制人前列腺癌细胞株PC-3的增殖.     

多西他赛体外抗肝癌作用及对细胞内氧化还原状态的影响

目的：研究多西他赛（docetaxel）体外抗肝癌作用及其与氧化还原状态的关系。方法：用不同浓度的多西他赛处理肝癌细胞株（SMMC-7721细胞），用集落形成试验检测多西他赛对SMMC-7721细胞生长抑制作用，通过流式细胞术测定多西他赛对SMMC-7721细胞株细胞周期及凋亡的影响。用DCF／DA作为活性氧（reactive oxygen species，ROS）捕获剂检测用药后细胞内ROS产生。用试剂盒测定细胞谷胱甘肽（glutathione。GSH）水平。结果：多西他赛能抑制SMMC-7721细胞增殖，并呈浓度依赖性；诱导SMMC-7721细胞凋亡和G2／M期阻滞；导致SMMC-7721细胞内ROS产生增多和GSH降低。结论：多西他赛能通过诱导细胞凋亡和G2／M期阻滞而抑制SMMC-7721细胞增殖，用药后细胞内ROS产生增多和GSH降低可能在多西他赛体外抑制SMMC-7721细胞增殖和促进细胞凋亡中起重要作用。     

三氧化二砷对肝癌细胞内活性氧水平的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对肝癌细胞增殖及细胞内活性氧（ROS）水平的影响。方法用As2O3作用于体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞株，分别用MTT法和流式细胞仪观察SMMC-7721细胞增殖情况并检测ROS。结果MTT结果显示As2O3能明显抑制SMMC-7721细胞的增殖．并呈时间和浓度依赖性。流式细胞仪分析显示As2O3作用后的人肝癌SMMC-7721细胞内ROS水平明显增高（P〈0．01）．并也呈时间和浓度依赖性。结论As2O3可通过抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖和提高细胞内ROS水平诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用，这可能也是As2O3抗肝癌的主要途径之一。     

三氧化二砷对人肝癌细胞生长及其尿型纤溶酶受体表达的体外研究

目的:体外研究三氧化二砷(As2O3)对人肝癌细胞株SMMC-7721生长及其表达尿型纤溶酶受体(uPAR)的影响。方法:SMMC-7721在不同浓度的As2O3作用不同时间后,采用MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析As2O3对uPARmRNA表达的影响,并设立不加As2O3的对照组。结果:As2O3对SMMC-7721细胞的生长呈明显的抑制作用,且呈时间、浓度依赖性;与对照组比较,As2O3实验组G0/G1期细胞比例明显降低,G2/M期细胞比例提高(P<0.05),uPARmRNA表达量明显减少(P<0.01)。结论:As2O3能有效抑制肝癌细胞株SMMC-7721的生长,下调uPARmRNA的表达可能是其作用机制之一。     

TIMP-1基因体外稳定转染对人卵巢癌A2780细胞周期与增殖的影响

目的:探讨正、反义基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)基因对人卵巢癌细胞周期及增殖的影响。方法:将重组质粒正、反义TIMP-1表达载体体外转染到卵巢癌A2780细胞中,用G418筛选稳定表达细胞株并扩增培养,采用MTT细胞计数法检测肿瘤细胞生长增殖率,流式细胞术检测肿瘤细胞周期的变化。结果:经15～20 dG418筛选得到稳定表达细胞株,重组质粒TIMP-1稳定转染正义(PTs)组A2780细胞的增殖可明显受到抑制,细胞周期明显改变,细胞从G1期到S期发生阻滞。而反义(PTas)组细胞与之相反。结论:提示体外转染TIMP-1基因可使A2780细胞周期阻滞于G1期,并可抑制肿瘤细胞增殖。可为临床基因治疗及相关基因药物研究提供实验依据。     

丙戊酸对人脑胶质母细胞瘤细胞株抑制增殖及诱导凋亡作用研究

目的研究丙戊酸(2-propylpentanoic acid,VPA)体外对人脑胶质母细胞瘤细胞株增殖抑制、诱导细胞周期阻滞及促进凋亡的作用,为临床治疗提供理论依据。方法 MTT比色法检测VPA对胶质母细胞瘤细胞株的杀伤作用;流式细胞术检测其对细胞周期及凋亡的影响作用;Western blot法检测乙酰化组蛋白H3(acetyl-Histone H3)、乙酰化组蛋白H4(acetyl-histone H4)表达量变化情况。结果 VPA对胶质瘤母细胞瘤细胞株SF295、U87具有抑制增殖作用,诱导细胞周期阻滞于G2/M期,乙酰化组蛋白H3、H4表达量呈时间依赖性增加。大剂量可以诱导出现凋亡。结论 VPA能够在体外抑制胶质瘤细胞生长,诱导细胞周期阻滞及促进细胞凋亡,其机制可能与促进组蛋白乙酰化有关。     

阿托伐他汀抑制肝癌细胞增殖作用的研究

摘要　目的：体外观察阿托伐他汀对人肝癌HepG2细胞增殖、细胞周期及COX-2蛋白表达的影响。方法：取对数期人肝癌HepG2细胞,加入阿托伐他汀使其终浓度为0μM、0.1μM、1μM、10μM、100μM,采用细胞计数法及噻唑蓝(MTT)法观察阿托伐他汀对HepG2细胞增殖的影响,流式细胞仪(FCM)研究阿托伐他汀对细胞周期的作用,免疫细胞化学观察阿托伐他汀对COX-2蛋白表达的影响。结果：1.体外阿托伐他汀呈浓度和时间依赖性地抑制HepG2细胞的增殖,但0.1μM组与0μM组差异无统计学意义。2. 细胞周期分析显示,阿托伐他汀作用24h后,呈浓度依赖性改变细胞周期分布,一方面增高G0/G1期细胞的比例,一方面降低S期及G2/M期的细胞比例,但细胞凋亡不明显。3.体外阿托伐他汀呈浓度依赖性地抑制HepG2细胞COX-2蛋白的表达。结论：体外阿托伐他汀对HepG2细胞增殖有抑制作用,该作用可能与使细胞生长阻滞于G0/G1期及抑制COX-2蛋白表达有关。     

尖吻蝮蛇毒小分子多肽对人卵巢癌A2780细胞增殖和黏附的影响

目的探讨尖吻蝮蛇毒小分子多肽(K组分)对体外培养的人卵巢癌A2780细胞株的增殖抑制作用及机制。方法MTT法观察K组分对人卵巢癌A2780细胞增殖的影响;采用光镜、电镜观察细胞形态变化;荧光染色法测定和观察K组分对A2780细胞凋亡影响;采用结晶紫染色法测定K组分对A2780与FN黏附作用的影响。结果MTT显示K组分呈剂量与时间依赖性抑制人卵巢癌A2780细胞株的增殖,电镜观察给药组细胞出现明显凋亡,荧光显微镜下可见细胞形态发生改变,K组分对A2780细胞在FN基质上的黏附有一定的抑制作用,并呈浓度依赖关系。结论K组分对体外培养的人卵巢癌A2780细胞株有较明显的抑制作用,该作用与诱导细胞凋亡和抑制细胞和细胞外基质黏附的能力有关。     

三氧化二砷诱导喉癌细胞凋亡的体外研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导喉癌Hep-2细胞株凋亡的作用。方法体外培养的Hep-2细胞与不同浓度的As2O3作用不同时间,用流式细胞仪、DNA琼脂糖凝胶电泳研究细胞凋亡的发生及对细胞周期的影响。结果流式细胞仪检测发现不同药物浓度和作用时间下均有细胞凋亡发生。2滋mol/LAs2O3引起细胞周期明显变化,作用24h后S期细胞比例增高,72h后S期细胞明显下降,细胞大量凋亡。结论As2O3可有效抑制人喉癌Hep-2细胞的体外生长,具有时间、浓度依赖性。As2O3诱导Hep-2细胞凋亡主要是S期的细胞。     

赛特铂对人卵巢癌细胞A2780的凋亡诱导作用

目的：观察赛特铂对人卵巢癌细胞A2780的凋亡诱导作用及对细胞周期的影响。方法：MTT法观察药物对细胞增殖的抑制作用，碘化丙锭染色分析细胞周期变化，电镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化，多参数流式细胞术及TUNEL法检测细胞凋亡率，并测定caspase-3的活性变化及caspase抑制剂对细胞存活率的影响。结果：赛特铂可抑制A2780细胞的增殖并诱导凋亡，具有明显的剂量依赖性，作用与顺铂相当。赛特铂主要导致A2780细胞S期细胞明显增加，G2／M期细胞少许增加。经赛特铂作用后漂浮细胞呈现典型凋亡细胞形态学改变。caspase-3活性随着细胞凋亡率增加而增加，caspase抑制剂不完全抑制细胞死亡。结论：赛特铂影响A2780细胞周期分布，可体外诱导A2780细胞凋亡。caspase依赖性和caspase非依赖性途径参与了其凋亡过程，其中caspase依赖性途径又包括caspase-3依赖性和非easpase-3依赖性途径。     

蜂毒素对SGC-7901细胞生长及G_2/M期阻滞的影响

目的研究蜂毒素(Melittin)对胃上皮癌细胞SGC-7901细胞生长及细胞周期阻滞的影响。方法采用罗丹明B(SRB)染色法观察Melittin对SGC-7901细胞株生长曲线的影响;用流式细胞仪检测Melittin对该细胞周期阻滞的影响;RT-PCR检测细胞周期相关基因mRNA的表达。结果Melittin(1、2、4、8×10-3μg·L-1)体外给药24h,能抑制SGC-7901细胞的增殖活性(P<0.05orP<0.01);Melittin(4、8×10-3μg·L-1)作用SGC-790124h后,能明显阻滞该细胞株于G2/M期;并且降低G2/M期相关基因CylinB1-CDK1-Cdc25c mRNA的表达。结论Melittin具有抑制胃上皮癌细胞SGC-7901增殖的作用,其机制可能与干扰该细胞G2/M期相关基因的转录有关。     

多西紫杉醇对非小细胞肺癌细胞株A-549放疗增敏作用及机制

目的：研究多西紫杉醇对体外培养非小细胞肺癌细胞的细胞周期改变和凋亡影响,及其放疗增敏的作用及机制。方法：以非小细胞肺癌细胞株A-549为实验对象,MTT法观察多西紫杉醇对A-549细胞增殖抑制;克隆形成实验分析细胞放射敏感性;流式细胞技术检测细胞周期及凋亡率。结果：多西紫杉醇对A-549细胞有生长抑制作用,且呈剂量依赖性,在较低浓度（1μg/ml）时即可降低A-549细胞的克隆形成率。各处理组细胞的细胞周期和凋亡率结果表明,多西紫杉醇＋放疗组G2/M期细胞比例较其他组明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;细胞凋亡率差异亦有统计学意义（P〈0.05）。结论：多西紫杉醇在低细胞毒性浓度下对非小细胞肺癌细胞株A-549有放射增敏作用;多西紫杉醇对A-549细胞增敏其机制可能与其能改变细胞生长周期并诱导其凋亡有关。     

人生长激素对人胃、结肠癌细胞株细胞周期的影响

目的了解重组人生长激素（rhGH）在体外对人胃、结肠癌细胞有无促进增殖作用。方法实验分对照组、rhGH组、奥沙利铂（L-OHP）组和L-OHP＋rhGH组,利用体外细胞培养及流式细胞仪等方法,测定不同浓度的rhGH对人胃癌细胞株MKN45、人结肠癌细胞株Colo320细胞周期和增殖指数（PI）的影响。结果 rhGH在体外不促进MKN45和Colo320细胞分裂增殖。rhGH组与对照组、L-OHP＋rhGH组与L-OHP组比较均无统计学意义（P〉0.05）,L-OHP＋rhGH组与对照组比较或L-OHP＋rhGH组与对应的rhGH组比较,阻滞于G0～G1期的细胞数增加,S期和G2～M期细胞明显减少,PI明显降低（P〈0.01）。结论 rhGH在体外不促进胃、结肠癌细胞的分裂增殖。     

二烯丙基二硫诱导K562细胞凋亡及与G2 / M期阻滞关系研究

目的探讨二烯丙基二硫（DADS）对体外培养的人白血病细胞系K562细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法采用细胞计数法、形态学观察、MTT分析法、AO／EB染色、流式细胞术探讨DADS对K562细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。结果1．DADS在10-80mg-L。范围内,对K562细胞的抑制作用呈剂量一时间依赖效应。2．DADS浓度在10-80mg．L-1。时作用K562细胞24h后,凋亡率逐渐升高,差异有统计学意义（p〈0．05或P〈0．01）。3．不同浓度DADS作用于K562细胞24h后,K562细胞阻滞于G2／M期。结论DADS有抑制K562细胞增殖和促进K562细胞凋亡的作用,其作用的可能机制与k562细胞阻滞于G2／M期有关。     

大蒜素对人宫颈癌Hela细胞增殖影响及其作用机制

目的探讨大蒜素对体外培养宫颈癌Hela细胞增殖的影响及其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定不同浓度大蒜素对Hela细胞增殖抑制率;流式细胞术测定细胞周期变化及凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax的表达。结果 MTT显示大蒜素能抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,并具有时间-剂量依赖性关系;流式细胞术测定结果显示10μg/ml大蒜素可明显诱导宫颈癌Hela细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在G2/M期;可降低癌基因蛋白Bcl表达（P〈0.01）,而促进Bax表达（P〈0.01）。结论大蒜素对人宫颈癌Hela细胞增殖具有抑制作用,与细胞周期阻滞和凋亡相关蛋白表达有关。     

三氧化二砷对人肺癌A549细胞凋亡及耐药基因表达的影响

目的研究三氧化二砷（As2O3）对人肺癌细胞株的诱导凋亡作用及对耐药基因LRP表达的影响。方法应用人肺腺癌A549细胞株,运用体外细胞培养法、MTT法、流式细胞术检测As2O3对人肺癌细胞株抑制及诱导凋亡作用;用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测LRP mRNA的表达。结果As2O3对人肺癌A549细胞具有抑制作用,其抑制率呈时间-剂量依赖关系。不同浓度的As2O3均可诱导凋亡。1．0μmol／L、3．0μmol／L的As2O3可下调LRPmRNA的表达。结论As2O3具有抑制肿瘤细胞生长及诱导细胞凋亡作用,其机制与下调LRPmRNA表达有密切关系。     

胡桃醌衍生物MAM抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的体外研究

目的　探讨虎杖提取物2- 甲氧基-6- 乙酰基-7- 甲基胡桃醌（2-Methoxy-6-acetyl-7-methyljuglone,MAM）对人乳腺癌细胞MAD-MB-231 体外增殖的影响及可能机制。方法　体外培养正常人肝细胞LO2、人乳腺癌MDA-MB-231 和MDA-MB-468 细胞,采用Cell Counting Kit-8（CCK8）法检测MAM 对细胞增殖的影响,采用Hoechst33258 染色检测MAM 对MDA-MB-231 细胞凋亡的影响,采用流式细胞术检测MAM 对MDA-MB-231 细胞周期的影响,western blot 分析相关蛋白表达的变化。结果　MAM 对人乳腺癌MDA-MB-231 细胞生长有较强的抑制作用,呈剂量和时间依赖性。MAM 作用24 h 可诱导MDA-MB-231 细胞发生典型的凋亡形态学改变,抑制MDAMB-231 细胞周期在G2/M 期,同时显著下调细胞内Cdk1 和CyclinB1 蛋白的表达、上调p-Cdk1（Thr14）的蛋白表达水平（P<0.05）。结论　MAM 能够通过抑制Cdk1-CyclinB1 复合物的形成,使细胞周期阻滞在G2/M 期,干扰细胞周期进程,从而抑制MDA-MB-231 细胞的增殖。     

雷公藤内酯醇对肺腺癌细胞系A549的体外抑制作用的研究

目的观察雷公藤内酯醇对肺腺癌细胞系A549体外生长特性的影响。方法分别采用MTT法、流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳以及荧光染色观察雷公藤内酯醇肺腺癌细胞系A549增殖、细胞周期以及凋亡的影响。结果14nmol.L-1～896nmol.L-1的雷公藤内酯醇均能抑制A549细胞的生长且生长抑制作用呈剂量以及时间依赖性。雷公藤内酯醇在低浓度(14nmol.L-1)条件下,能诱导A549细胞发生细胞周期阻滞,阻滞部位在S期;高浓度(55,112mol.L-1)的雷公藤内酯醇使A549阻滞在G2/M期,并诱导其发生凋亡。结论雷公藤内酯醇能抑制A549细胞的生长,使其阻滞在S期和G2/M期,并诱导其发生凋亡。