芒果叶提取物体外抗HIV-1活性研究

目的 探讨芒果叶提取物的体外抗人类免疫缺陷病毒1(HIV-1)活性,为研究与开发传统中医药资源治疗获得性免疫缺陷综合征(AIDS)提供参考。方法 通过三磷酸腺苷(ATP)法评估干预药物对TZM-bl细胞和MT-2细胞活性的影响。构建TZM-bl-HIV-1_ⅢB、MT-2-HIV-1_ⅢB两种细胞-病毒感染模型,通过荧光素酶活性检测试剂检测病毒活性,评估干预药物的抗HIV-1活性。观察MT-2-HIV-1_ⅢB细胞系统中芒果叶提取物对细胞病变效应(CPE)的抑制情况。计算芒果叶提取物的半数毒性浓度(CC₅₀)、半数抑制浓度(IC₅₀)和选择指数(SI)。结果 在TZM-bl-HIV-1_ⅢB和MT-2-HIV-1_ⅢB两种细胞-病毒感染模型中,芒果叶提取物均显示出抗HIV-1活性,且呈现剂量依赖性。在TZM-bl-HIV-1_ⅢB模型中,芒果叶提取物的CC₅₀为(320.00±29.44)μg/ml, ...     

小柴胡汤提取物体外抗HBV活性研究

1 材料与方法 1.1 小柴胡汤药物组成 柴胡240g,黄芩、人参、炙甘草、大枣、生姜各90g,半夏120g。 1.2 两种受试药物 ①小柴胡汤提取物(下文简称小柴胡汤),用大孔树脂提取工艺制备,每克提取物相当原生药40g,溶于水,但不吸潮,细粉末状,由本所制剂室提供。双蒸水配成贮备液,0.22μm微孔滤膜过滤     

HIV-1夫妻间传播的回顾性队列研究

目的研究艾滋病病毒Ⅰ型（HIV-1）的夫妻间传播率,为预防控制性传播提供科学依据。方法在某农村地区,2000—2007年陆续发现的110对配偶-方为HIV-1感染者,均为1990—1997年间-次性输血而感染,无其他感染因素,感染后与配偶无保护性生活7．51年,感染者的配偶否认除夫妻无保护性传播以外的艾滋病传播因素。对感染者配偶用酶联免疫吸附试验和免疫印迹试验（Western—blot）检测HIV抗体。结果HIV-1的夫妻间传播率为17．3％,年均传播率为2．3％。其中妻子传给丈夫的概率为19．1％,平均年感染机率2．7％;丈夫传给妻子的概率为9．5％,平均年感染机率1．1％。无保护性生活时间越长、妻子感染时丈夫的年龄越小感染率越高,测算夫妻间每次无保护性交的感染机率为0．024％～0．032％。HIV阳性妻子每次无保护性交传染给丈夫的机率是0．028％～0．037％;HIV阳性丈夫每次无保护性交传染给妻子的机率是0．011％～0．015％。结论在夫妻-方感染日期明确、夫妻无保护性生活年限明确的情况下,得到的HIV-1的夫妻传播率,对预防控制艾滋病性传播具有重要的指导意义。     

HIV-1耐药性表型检测方法研究进展

艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)耐药性产生机制及检测方法,是HIV/艾滋病(AIDS)研究领域的热点之一。HIV耐药性检测是指导抗HIV临床管理和治疗失败后选择新治疗方案的主要技术手段。目前国际上发展较为成熟并且应用于临床的有基因型和表型耐药检测两种实验方法。该文主要就HIV耐药性的表型测定法的相关进展以及耐药性检测中的新理念作一综述。     

HIV-1B/C重组毒株gp160假病毒的构建及其活性检测

目的以CD4+T细胞DNA为模板,进行gp160扩增,构建艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)前病毒假病毒,通过中和试验验证其具有感染活性。方法选择高效抗反转录病毒治疗(HAART)成功的病人3例,分离外周血单核细胞(PBMC),纯化CD4+T细胞,提取DNA,以其为模板扩增gp160全长基因,并克隆到pcDNA3.1(+)表达载体上,酶切验证得到阳性克隆。将此阳性克隆和pNL4-3质粒共转染,获得HIV-1假病毒。用免疫兔血清验证假病毒的感染活性。结果成功地获得了1株假病毒。用免疫后的兔血清测定半数抑制浓度(IC50)的滴度约在1∶90~1∶270之间。病毒的加入量与细胞感染率之间存在良好的线性关系,说明该假病毒感染系统可以通过细胞感染率较好地反映出感染性病毒的含量。结论获得了具有感染活性的HIV-1B/C重组型假病毒。     

我国部分地区HIV-1流行株的分离培养

目的分离得到能够稳定传代的我国艾滋病病毒Ⅰ型（HIV-1）流行毒株,并进行生物学表型鉴定。方法分离、活化正常人的外周血单核细胞（PBMC）,分离病人的PBMC,采用PBMC共培养和全血共培养的方法分离病人的HIV-1,通过培养上清内P24抗原含量检测病毒的复制情况。同时,标本采集后测定CD产T淋巴细胞计数和病毒载量。结果从270例HIV-1标本中,分离到可稳定传代的强阳性毒株58株,总分离率为21．48％。病毒载量与分离率呈正相关;CD4^＋T细胞计数对分离率的影响没有显著性差异。病毒载量高的标本比病毒载量低的标本分离株的快高型比例大。提示毒株的生长动力学特征与病人的病毒载量相关。结论从我国5个地区的270份HIV-1感染者样本中,分离出58株原代分离毒株,丰富了我国HIV-1毒种库,为进一步开展相关的艾滋病防治研究提供了重要的材料,奠定了坚实的基础。     

福建省未经抗病毒治疗的HIV-1毒株耐药基因变异研究

目的研究福建省未经抗逆转录病毒治疗的艾滋病病毒感染者伎滋病患者（HIV／AIDS患者）HIV的逆转录酶和蛋白酶耐药基因变异情况，为福建省开展HIV-1抗病毒治疗提供本底资料。方法采集福建省未经抗病毒治疗的HIV／AIDS病例的抗凝全血，分离血浆，用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）扩增HIV—lpol区序列并直接进行序列测定，提交Web站点http：／／hivdb．stanford．edu进行耐药突变分析。结果选取74份流行病学资料及序列资料完整的样本进入耐药基因分析，结果显示，蛋白酶基因的次要耐药突变广泛存在，以M36I、L63P、193L等多态性突变类型为主，未发现与蛋白酶抑制剂耐药相关的突变。逆转录酶区的耐药突变分布较为分散，发生率为20．27％（15．74）。依据耐药性解释，发现3例样本（4．05％）表现为对部分逆转录酶抑制剂的潜在或低度耐药。结论福建省未用药的HIV感染者中，耐药相关突变尚处于低流行状态，在开展抗病毒治疗后应当定期进行耐药性检测以期获得较好的效果。     

2008-2010年深圳市HIV-1耐药警戒线调查及耐药趋势分析

目的根据世界卫生组织(WHO)推荐的Ⅰ型艾滋病病毒(HIV-1)耐药警戒线调查方案,调查分析深圳HIV感染者的病毒株耐药突变情况,并分析耐药株传播水平的3年发展趋势。方法通过连续3年系列横断面调查,于2008年至2010年,每年采集<25岁未接受抗病毒治疗的HIV-1感染者血浆样本,提取病毒RNA,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HIV-1 pol区片断,进行序列测定和耐药基因变异分析。结果 2008年检测耐药传播率为0(0/45),2009年检测耐药传播率上升至6.1%(3/49),其中1份对核苷类反转录酶抑制剂耐药(T215S),2份对蛋白酶抑制剂出现耐药(M46L);2010年检测耐药传播率为4.0%(2/50),其中1份对核苷类反转录酶抑制剂耐药(T215S),1份对蛋白酶抑制剂出现耐药(M46I)。所有耐药株均来自经性传播人群,其中,蛋白酶抑制剂耐药株全部来自男男性行为人群。核苷类反转录酶抑制剂耐药株全部属于重组亚型CRF07_BC,而蛋白酶抑制剂耐药毒株全部属于CRF01_AE。结论深圳地区HIV-1耐药已经进入或即将进入中度传播水平,应该为深圳地区发现的HIV感染者提供耐药检测,尤其是针对性传播人群。     

HIV-1非核苷类反转录酶抑制剂耐药相关突变及其复制适应性研究

非核苷类反转录酶抑制剂是高效抗反转录病毒疗法(HAART)治疗艾滋病的重要组成部分。文章综述了非核苷类反转录酶抑制剂(NNRTIs)的耐药相关突变位点,如主要耐药突变位点、罕见的耐药突变位点、非多态性附属耐药突变位点及突变位点的相互作用;并分别阐述了各个主要耐药突变位点对病毒复制适应性的影响。对今后HIV-1NNRTIs耐药相关工作进行了展望。     

Impact of highly active antiretroviral therapy on the maturation of anti-HIV-1 antibodies during primary HIV-1 infection

OBJECTIVES: To study the impact of highly active antiretroviral therapy (HAART) on isotype switching and avidity maturation of HIV-1-specific immunoglobulin G (IgG) in patients with primary HIV-1 infection (PHI). METHODS: We studied the emergence and the evolution of anti-HIV IgG antibodies by quantitative immunoblotting to analyse IgG subclasses and IgG avidity. Serum samples were obtained from 16 PHI patients from the French PRIMO Cohort Study at various points in the first year of infection: eight patients received no treatment (group I), and eight patients received efficient HAART (group II) during the study period. RESULTS: Early initiation of HAART in PHI patients partially prevented an increase in anti-HIV-1 IgG levels. Within IgG subclasses, the amount of anti-HIV-1 IgG1 gradually increased with time in both groups, although levels remained lower in treated patients. The anti-p24 IgG2 level was always lower in group II. We observed a decrease in anti-p24 IgG3 over time in both groups. Treatment did not affect the maturation of HIV-1 IgG avidity, which increased in both groups until month 3 and then remained high until the end of the 12-month follow-up period. CONCLUSIONS: HAART in PHI partially prevents the emergence of HIV-1 IgG antibodies, but does not affect the quality of these antibodies, as reflected in their isotype and avidity.     

青蒿提取物对房颤大鼠心肌炎症相关因子TNF-α及ICAM-1表达的影响

目的观察青蒿提取物对房颤大鼠心肌炎症相关因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨青蒿抗心律失常的作用机制。方法将大鼠分为对照组、模型组、青蒿组、卡托普利组。采用氯化钙、乙酰胆碱混合液以舌下静脉给药的方式建立房颤动物模型,隔日重复1次,连续4周,停药后心电图仍有典型房颤改变为造模成功。实验当日,动物静脉血,ELISA法测样品中TNF-α、ICAM-1浓度。结果模型组血清TNF-α、ICAM-1水平较对照组均有提高(P<0.05)。卡托普利组在降低TNF-α、ICAM-1表达方面作用最为显著,青蒿组作用略差于卡托普利组(P>0.05)。结论青蒿提取物通过抑制炎症因子TNF-α、ICAM-1,抑制心脏结构重构和电重构,减少心律失常的发生。     

Antidiabetic activity of aqueous leaf extract of Atriplex halimus L. (Chenopodiaceae) in streptozotocin-induced diabetic rats

Objective

To investigate the antidiabetic effect of A. halimus leaf in streptozotocin-induced diabetic rats.

Methods

The aqueous extract of the plant leaf was tested for its efficacy in streptozotocin-induced diabetic rats. The extract was evaluated for its acute and short term general toxicity in male mice and for its antihyperglycemic activity using glucose tolerance test in rats. The aqueous extract was subjected to phytochemical screening and determination of total phenolic contents.

Results

The statistical data indicated the significant increase in the body weight and decrease in the blood glucose and hepatic levels. The total protein level was significantly increased when treated with the extract.

Conclusions

These results suggest that the aqueous leaf extract of A. halimus has beneficial effects in reducing the elevated blood glucose level and hepatic levels in streptozotocin-induced diabetic rats.     

莱菔提取物对胃肠运动的影响

目的采用电生理学的实验方法,观察莱菔提取物（Raphanus sativus.L extract,Rex）对胃电活动和小肠消化期间移行性运动复合波（Migrating motility complex,MMC）的影响,并与促进胃肠道运动的经典药物吗丁啉和西沙比利进行对比,探讨莱菔提取物的促胃肠动力作用。方法采用旋转蒸发的方法,制备莱菔提取物。采用电生理学的方法,记录给予不同的药物对胃肠电活动的影响。结果莱菔提取物对胃电的波幅和频率的影响,与吗丁啉组相比,没有显著性差异。莱菔提取物对小肠MMC的影响与西沙比例相比差异不显著。结论莱菔提取物对胃肠道运动的影响,与经典促胃肠动力药物的作用相当。     

钙调素蛋白磷酸酶对Slingshot-1L的调控作用

目的 探讨钙调素依赖蛋白激酶(Calcinenurin/PP2B/CnA/Cn)对Slingshot-1L(SSH-1L)活性的调控作用.方法 用脂质体法将含YFP-SSH-1L的重组质粒转染至MG63细胞,经钙离子载体A23187诱导10 min,进行免疫细胞化学染色,观察细胞形态变化;体内及体外实验检测PP3B对SSH-1L的活性调控作用;应用免疫共沉实验检测PP2B与SSH-1L的相互结合情况.结果 Ca~(2+)信号诱导骨肉瘤细胞形成伪叶,同时SSH-1L与F-actin移位共聚集至细胞膜伪叶,但是被PP2B有效抑制剂Cypermethrin完全阻断;在体外,SSH-1L磷酸酶活性测定实验以及SSH-1L与PP2B结合实验证实SSH-1L与PP2B在细胞内是一对相互结合的蛋白质,同时PP2B具有促进SSH-1L酶活性的作用.结论 PP2B通路对细胞伪叶的形成及细胞运动具有重要调控作用,同时对SSH-1L酶具有促进其活性的作用.     

白萝卜提取物对大鼠小肠动力作用的影响

[目的]研究白萝卜提取物(Raphanus sativus L extract,Ecr)和西沙比利对大鼠小肠动力作用的影响,并进行对比观察,为开发Ecr促胃肠动力作用的药用价值提供理论依据。[方法]采用旋转蒸发的方法制备Ecr后,以1 ml/kg(每1 ml折合生药约57 g)的剂量灌胃给药,同时设立西沙比利对照组和0.85%氯化钠对照组。应用小肠肌电测定和胃肠内标记物葡聚糖蓝2000进行标记的方法,测定给药前后大鼠小肠消化间期移行性复合肌电活动(Interdigestive myoelectrical complex,IMC)的变化和小肠推进比。[结果]Ecr对小肠推进有明显促进作用,IMC周期显著缩短,活动期单位时间内快波数明显增加,且与西沙比利组没有显著性差异,但与0.85%氯化钠对照组相比差异有统计学意义。[结论]Ecr对大鼠小肠动力具有显著的促进作用,其作用效果与西沙比利相近。     

Isotype modulates epitope specificity, affinity, and antiviral activities of anti-HIV-1 human broadly neutralizing 2F5 antibody

The constant heavy chain (CH1) domain affects antibody affinity and fine specificity, challenging the paradigm that only variable regions contribute to antigen binding. To investigate the role of the CH1 domain, we constructed IgA2 from the broadly neutralizing anti-HIV-1 2F5 IgG1, and compared 2F5 IgA2 and IgG binding affinity and functional activities. We found that 2F5 IgA2 bound to the gp41 membrane proximal external region with higher affinity than IgG1. Functionally, compared with IgG1, 2F5 IgA2 more efficiently blocked HIV-1 transcytosis across epithelial cells and CD4(+) cell infection by R5 HIV-1. The 2F5 IgG1 and IgA2 acted synergistically to fully block HIV-1 transfer from Langerhans to autologous CD4(+) T cells and to inhibit CD4(+) T-cell infection. Epitope mapping performed by screening a random peptide library and in silico docking modeling suggested that along with the 2F5 IgG canonical ELDKWA epitope on gp41, the IgG1 recognized an additional 3D-conformational epitope on the gp41 C-helix. In contrast, the IgA2 epitope included a unique conformational motif on the gp41 N-helix. Overall, the CH1 region of 2F5 contributes to shape its epitope specificity, antibody affinity, and functional activities. In the context of sexually transmitted infections such as HIV-1/AIDS, raising a mucosal IgA-based vaccine response should complement an IgG-based vaccine response in blocking HIV-1 transmission.     

枸杞菊花水提液对老年大鼠晶状体抗氧化能力的影响

目的探讨枸杞菊花水提液对老年大鼠晶状体抗氧化能力的影响。方法以SD清洁级老年大鼠为研究对象,设立青年对照组。以明目地黄丸为阳性对照,给药组〔枸杞菊花水提液低、中、高剂量(0.5、1.0、2.0 g/kg)〕,灌胃30 d后,取大鼠晶状体匀浆,观察其丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)活性和总抗氧化能力(T-AOC)的变化。结果与空白组相比,枸杞菊花水提液可显著增强SD老年大鼠T-AOC、CAT活性,并明显降低MDA的含量,呈现一定的量-效关系。结论枸杞菊花水提液可提高SD老年大鼠晶状体的抗氧化能力。