慢粒患者T淋巴细胞核仁组成区相关蛋白的表达分析

用核仁银染强度探讨慢粒患者外周血T淋巴细胞rDNA转录活性及机体免疫状况的关系。方法：利用KL细胞肿瘤免疫图象分析系统及其配套细胞培养银染试剂和方法，分析24例不同时期的慢粒患者外周血T淋巴细胞Ag-NORs的表达特点，结果：慢粒患者rDNA转录活性明显低于正常对照组（P＜0．01），分组观察急栾期与加速期均明显低于正常对照组（P＜0．01），慢性期及缓解期与正常对照比较，无明显差异（P＞0．05），结论：该项指标可以灵敏地反映白血病情进展程度与机体免疫状况的相互关系，并可作为白血病的诊断及病情监测的实验参考指标。     

舒血宁对严重创伤患者T淋巴细胞Ag-NORs含量的影响

目的:研究舒血宁对严重创伤患者外周血中T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)含量的影响,探讨Ag-NORs在严重创伤转归、预后判断及干预治疗方面的意义。方法:研究对象为收治的严重创伤患者97例,对照组50例给予常规治疗,试验组47例加用舒血宁(30 ml/d)治疗;于3 d、7 d两个时间点上,采用ELISA法检测患者外周血Ag-NORs的含量。结果:严重创伤后3 d、7d,舒血宁组较创伤对照组患者外周血中T淋巴细胞Ag-NORs的I.S值均明显增高(P<0.01)。结论:舒血宁可在一定程度上减少抑制性细胞因子的生成,提高rDNA的转录活性,从而说明舒血宁的治疗在一定程度上可以增加机体细胞免疫活性,从而为严重创伤患者的干预治疗提供了新的途径。     

卡介菌多糖核酸对慢性阻塞性肺疾病T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白水平的影响

目的 探讨卡介菌多糖核酸对慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白（Ag-NORs）水平的影响。方法 选择2012年1月-2013年6月贵州省人民医院呼吸与危重症医学科及干部医疗科收治的COPD急性加重期（AECOPD）患者50例及在两科室治疗后COPD稳定期患者40例。采用随机数字表法将AECOPD患者和COPD稳定期患者分别分为治疗组和对照组。AECOPD及COPD稳定期对照组患者均仅给予常规治疗,治疗组患者在常规治疗基础上加用卡介菌多糖核酸治疗,疗程均为1个月。于治疗前后均对患者外周血T淋巴细胞Ag-NORs进行染色分析,以核仁银染面积/核银染面积（I/S%）作为Ag-NORs的检测指标。结果 治疗前,AECOPD治疗组和AECOPD对照组外周血T淋巴细胞Ag-NORs水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）|治疗后,AECOPD治疗组外周血T淋巴细胞Ag-NORs水平高于AECOPD对照组（t=-1.708,P＜0.05）。治疗前,COPD稳定期治疗组和COPD稳定期对照组外周血T淋巴细胞Ag-NORs水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）|治疗后,COPD稳定期治疗组外周血T淋巴细胞Ag-NORs水平高于COPD稳定期对照组（t=-1.647,P＜0.05）。AECOPD治疗组及COPD稳定期治疗组治疗期间各出现注射部位局部红肿1例,予热敷后1周内自然消退,其他均未出现明显不良反应。结论 COPD患者使用卡介菌多糖核酸治疗,可增加T淋巴细胞Ag-NORs水平,改善其免疫功能。     

精氨酸对胰腺癌介入治疗患者血清sTNFR-1和T淋巴细胞rDNA转录活性的影响

目的：探讨精氨酸增强的胃肠外营养对胰腺癌患者介入治疗术后血清可溶性肿瘤坏死因子受体-1（sTNFR-1）和T淋巴细胞rDNA转录活性水平的影响及其临床意义。方法：分别用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）和核仁形成区相关蛋白银染技术测定50例中晚期胰腺癌患者行动脉栓塞化疗术治疗前后血清sTNFR-1和外周血T淋巴细胞rDNA转录活性的改变，并与健康对照组比较分析。结果：胰腺癌组介入治疗前sTNFR-1增高，外周血T淋巴细胞rDNA转录活性降低，与对照组比较有显著性差异（p〈0．01）；行化疗栓塞术后，患者血清sTNFR-1降低，外周血T淋巴细胞rDNA转录活性增高，治疗前后有显著性的差异（p〈0．05）；应用精氨酸治疗组较未用组血清sTNFR-1下降和外周血T淋巴细胞rDNA转录活性升高更显著（p〈0．05）。结论：检测胰腺癌患者血清sTNFR-1和外周血T淋巴细胞rDNA转录活性的水平．有助于了解病人的免疫状况，介入治疗能改善机体免疫功能．辅以合理的免疫营养素能增强这种作用。     

PI3K转录因子在哮喘患者T淋巴细胞中的表达及意义

目的：初步了解磷脂酰肌醇3激酶（phosphoinositide 3-kinase,PI3K）在急性发作期哮喘患者外周血T淋巴细胞中的蛋白表达情况。方法：收集2008年9月至2009年2月间20例急性发作期哮喘患者及健康对照组15例,尼龙毛柱法提纯T淋巴细胞,用Western blotting法检测哮喘患者T淋巴细胞中PI3Kγ蛋白的表达水平：将对数生长期的T淋巴细胞分为哮喘组（A组）、对照组（B组）,再将哮喘组随机分为3组,分别进行检测;结果：Western blotting方法检测哮喘组与对照组T淋巴细胞中磷酸化PI3Kγ蛋白表达,结果显示,与正常人相比,急性哮喘发作期患者外周血T淋巴细胞中的PI3Kγ蛋白表达水平显著上调。正常对照组外周血T淋巴细胞中PI3Kγ蛋白表达较低（10945±960）,哮喘组（20079±838.7）,表达差异显著,有统计学意义（P〈0.01）;3个哮喘组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。     

白血病T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白的检测及临床意义

目的探讨白血病患者外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白（Ag-NORs）测定的临床意义。方法采用KL型肿瘤免疫图像分析系统及配套试剂对32例白血病患者、20例良性血液病、20例正常对照者进行外周血Ag-NORs检测。结果T淋巴细胞Ag-NORs水平白血病为（6．1±0．9）I．S％,良性血液病为（8．3±0．8）I．S％,正常对照组为（8．4±0．7）I．S％,三组比较差异有统计学意义（F=66．734,P=0．000）,其中白血病组低于对照组和良性血液病组,差异有统计学意义（P〈0．01）,良性血液病组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Ag-NORs检测不仅能准确地反映白血病患者的免疫状态,对白血病的诊断、鉴别诊断和预测病情发展有一定的意义。     

以外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白的表达评价肿瘤患者免疫状态

目的:比较并评价外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)的表达以及T淋巴细胞表面分化抗原和自然杀伤细胞(NK)等分别在肿瘤患者免疫状态评价中的应用.方法:对外周血T淋巴细胞经培养后制片进行银染,通过KL型肿瘤免疫图像分析系统计数淋巴细胞核仁银染面积与细胞核银染面积比值(I.S%);应用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞表面分化抗原(CD3、CD4、CD8、CD4/8)及NK细胞.结果:在健康人组和肿瘤患者组之间, 外周血T淋巴细胞Ag-NORs及NK细胞差异有显著性,而CD3、CD4、CD8、CD4/8差异无显著性 ;以恶性肿瘤发病概率分别与外周血T淋巴细胞的Ag-NORs的表达以及CD3、CD4、CD8、CD4/ 8、NK建立回归方程,以两个回归方程判断恶性肿瘤发病的有效性,并画出ROC曲线,A g-NORs的有效性和ROC曲线下面积均高于T淋巴细胞表面分化抗原及NK细胞.结论 :从监测机体免疫状态的角度出发,外周血T淋巴细胞Ag-NORs的检测较以往T淋巴细胞表面分化抗原以及NK细胞的联合检测更为优越.     

大肠癌患者T细胞亚群和NK细胞活性检测的意义

目的：通过检测大肠癌患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞活性的表达,研究大肠癌患者免疫状况与肿瘤分期的关系,以预测术后恢复情况。方法：采用流式细胞分析法检测60例大肠癌患者和30例对照者外周血中T淋巴细胞亚群及NK细胞活性。结果：大肠癌患者CD4^＋细胞值、CD4^＋／CD8^＋比值下降且NK细胞活性显著降低,CD8^＋细胞值显著高于对照组,这种变化随临床分期的增高更加显著（P〈0．05）;化疗后CD4^＋细胞值、CD4^＋／CD8^＋比值的下降和NK细胞活性的降低及CD8^＋细胞值的增高更为突出（P〈0．01）;术后发生转移的患者CD4^＋细胞值、CD4^＋／CD8^＋比值下降及NK细胞活性下降,CD8^＋细胞值再回升。结论：大肠癌患者细胞免疫功能明显紊乱,并随病情进展及肿瘤转移而加重,切除肿瘤有助于改善患者细胞免疫功能。     

肾移植受者T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白表达活性研究

目的探讨T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白表达活性(Ag-NORs)对肾移植受者术前及术后用药病情监测的应用价值.方法应用普通细胞银染技术对32例肾移植患者术前及术后使用免疫抑制剂1,2,3周外周血T淋巴细胞染色,通过计算机显微图像分析技术,计算硝酸银染色酸性非组蛋白(Ag-NORs)面积与核面积的比值(I*S%).结果肾移植患者术前Ag-NORs的I*S%为(6.31±0.86);术后使用免疫抑制剂1,2,3周Ag-NORs的I*S%分别为(4.72±0.93),(4.28±1.05),(4.66±1.21).肾移植术后各期与术前Ag-NORs的I*S%差异有显著性意义(P＜0.01);术后各期之间Ag-NORs的I*S%差异无显著性意义(P＞0.05).结论T淋巴细胞核仁酸性非组蛋白表达活性在肾移植及其术后用药病情监测中具有重要的意义.     

急性期SARS患者的血液系统损害

[目的]探讨急性期SARS患者血液系统的损害。[方法]用全自动血细胞分析仪检测44例SARS患者外周血WBC计数及分类、红细胞、血红蛋白和血小板,用流式细胞仪检测SARS患者外周血T淋巴细胞亚群;并与正常对照组比较。[结果]与对照组比较,SARS组患者WBC总数显著下降,淋巴细胞百分数和绝对数显著下降,中性粒细胞绝对数显著下降,百分数显著增加;血小板显著降低;红细胞和血红蛋白与对照组比较无显著性差异;CD3 、CD4 和CD8 细胞绝对数显著下降,CD3 、CD4 、CD8 细胞百分数和CD4 ／CD8 比值与对照组比较无显著性差异。[结论]SARS冠状病毒感染损伤患者的淋巴细胞、中性粒细胞和血小板,使患者细胞免疫功能下降,而红细胞无明显受损。     

睡眠呼吸暂停综合征患者T细胞,NK细胞功能的研究

目的：检测睡眠呼吸暂停综合征（ＳＡＳ）患者外周血Ｔ淋巴细胞、ＮＫ细胞的变化,探讨ＳＡＳ对细胞免疫功能的影响。方法：应用ＡＰＡＡＰ桥联酶标法测定外周血淋巴细胞表型。结果：ＳＡＳ患者组ＣＤ３＾＋细胞与正常对照组差异无显著性（Ｐ〉０．０５）,ＣＤ４＾＋、ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋、ＣＤ１６＾＋、ＣＤ２５＾＋细胞ＳＡＳ组均低于正常对照组,而ＣＤ８＾＋细胞高于正常对照组（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）。结论：ＳＡ     

严重急性呼吸综合征患者细胞免疫功能的变化

为探讨老年严重急性呼吸综合征(SARS)患者细胞免疫功能的变化,为临床提供理论依据,对211例SARS患者按不同年龄、疾病严重程度以及激素使用情况分组。采用流式细胞技术测定患者不同病程的外周血T淋巴细胞亚群的变化。结果所有患者发病后均出现T淋巴细胞的明显下降,低谷出现于发病后22.83d。老年SARS患者疾病极期T细胞各亚群绝对数均低于中青年患者,重症患者低于轻症患者(P<0.01)。激素使用与否以及剂量大小对T细胞影响不大。提示SARS患者发病初期细胞免疫功能受到明显损害,老年、重症SARS患者的损害更为显著,外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞下降的程度可作为病情轻重及预后判断的指标之一。     

Measurement of subgroups of peripheral blood T lymphocytes in patients with severe acute respiratory syndrome and its clinical significance

Objective To investigate the changes of subgroups of peripheral blood T lymphocytes in patients with severe acute respiratory syndrome (SARS) and its clinical significance. Methods Subgroups of blood T lymphocytes in 93 patients with SARS were detected by flow cytometer. The results detected in 64 normal subjects and 50 patients with AIDS served as controls. Results The numbers of CD3+, CD4+, and CD8+ lymphocytes all significantly decreased in acute phase of patients with SARS ［(722±533)/μl, (438±353)/μl, (307±217)/μl)］ compared with those in normal controls ［(1527±470)/μl, (787±257)/μl, (633±280)/μl, all P&lt;0.01)］, which was different from what we observed in patients with AIDS who had decreased CD4+ ［(296±298)/μl］ but increased CD8+ ［(818±566)/μl］ counts. The counts of CD3+,CD4+, and CD8+ lymphocytes decreased more apparently in patients with severe SARS. All the five patients who died had CD4+ counts less than 200/μl. As the patients’ condition improved, CD3+, CD4+, and CD8+ counts gradually returned to normal ranges. Conclusion The damage of cellular immunity is probably an important mechanism of pathogenesis of SARS.     

丙泊酚联合氯胺酮麻醉对急性淋巴细胞白血病患儿外周血T淋巴细胞免疫功能的影响

目的观察丙泊酚联合氯胺酮麻醉对急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿外周血T淋巴细胞免疫功能的影响。方法对照组为80例健康体检儿童,试验组为78例经骨髓穿刺确诊为ALL的患儿,试验组患儿鞘内注射化疗药物治疗,期间静脉注射丙泊酚[（2±1）mg／kg]联合氯胺酮（0．5mg／kg）镇静麻醉,分别将经骨髓穿刺确诊镇静麻醉前、镇静麻醉6h后（即鞘内注射前）及镇静麻醉24h后（即鞘内注射并镇静麻醉18h后）的患儿血样设为TG-t0组、TG-t1组和TG-t2组。采用流式细胞仪对外周血T淋巴细胞亚群：CD3、CD4、CD8和CD4/CD8的水平和CD4＋CD25＋CD127．Treg细胞进行检测。以Ag-NORs、Th1／Th2比值及TGF-β作为免疫学指标,采用KL型肿瘤免疫图像分析系统对外周血Ag-NORs进行检测;采用酶联免疫吸附法检测Th1／Th2比值及TGF召的血清浓度水平。结果试验组患儿外周血CD8、Treg比例、TGF-β水平明显高于对照组,而CD3、CD4、CD4/CD8比值、Ag-NORs水平及Th1／Th2比值明显低于对照组,TG-t0组、TG-t1组和TG-t2组的T细胞亚群及相关免疫学指标差异均无统计学意义。结论ALL患儿较健康儿童机体免疫功能低下,而在诊断和术后使用丙泊酚联合氯胺酮麻醉对其外周血T淋巴细胞免疫功能改变无直接影响。     

236例SARS患者外周血中幼稚和记忆CD4T细胞亚群变化

目的：研究严重急性呼吸综合征(SARS)患者外周血T淋巴细胞及CD4细胞中幼稚亚群(Tn)和记忆亚群(Tm)的异常变化，以期更好地了解SARS患者细胞免疫功能，从而建立新的实验室指标。方法：采用多色荧光标记流式细胞术结合血液分析仪检测236例不同病程的SARS患者(包括50例重型患者和186例普通型患者)的外周血T淋巴细胞及CD45RA和CD45RO分子在CD4细胞中的表达情况。结果：与正常对照组比较，SARS患者的外周血T淋巴细胞及CD4细胞中Tn和Tm绝对值明显减低，其百分比无明显改变，重型尤其明显。其中，重型组CD4细胞中的Tm百分比高于普通型；各病程SARS患者比较，三个病程组的T淋巴细胞计数均明显低于正常对照组，以I组为最低，CD4、CD8亚群的绝对值均低于正常对照组；在CD4细胞中，各病程Tn和Tm的百分比无明显差异，绝对值以Ⅱ组最高，但均低于正常对照组。结论：伴随着全面低下的细胞免疫功能，SARS患者的CD4^ T细胞的Tn和Tm均明显减少，重型尤其明显，但是在病程中可有轻度回升。相对于百分比而言，CD4细胞中Tn和Tm表面标志分子(分别为CD45RA和CD45RO分子)表达绝对值对于明确机体细胞免疫功能的意义更为重要。     

SARS患者白细胞形态学观察

目的：观察不同病程的严重急性呼吸综合征(SARS)患者白细胞形态的变化。方法：对不同病程SARS患者的血涂片进行形态观察和分析。结果：SARS患者发病期间，其粒细胞比例明显升高，淋巴细胞明显减少，而且出现核仁及多核仁现象，随病程进展，粒细胞、淋巴细胞的比例逐渐恢复至正常范围，有核仁的淋巴细胞也随之减少至消失，均为正常成熟的淋巴细胞。结论：SARS患者发病期间，外周血涂片白细胞分类中，中性粒细胞(分叶核)比例升高，淋巴细胞比例明显减少，随病程进展出现的核仁淋巴细胞减少，血细胞比例、形态恢复正常。     

Rapid loss of both CD4+ and CD8+ T lymphocyte subsets during the acute phase of severe acute respiratory syndrome

Objective To study the alteration of peripheral lymphocyte subsets in severe acute respiratory syndrome (SARS) patients and to help improve the early diagnosis of the disease. Methods Anti-coagulating blood samples from 98 SARS patients in the acute phase, 56 normal healthy blood donors, and from patients infected by HIV, CMV and EBV were collected. The T lymphocyte subsets were counted by flow cytometry using fluorescence-labeled specific monoclonal antibodies. Results A significant decrease was observed in all SARS patients in their peripheral CD4+ and CD8+ T lymphocyte absolute counts ［256(104)×10(6)/L and 256 （117）×10(6)/L, respectively］, which were also lower than those of the patients infected with HIV, CMV and EBV. All patients infected with HIV, CMV and EBV had significantly higher CD8+ T lymphocyte counts in comparison with normal controls. Conclusions Decrease of both CD4+ and CD8+ T lymphocytes of patients is related to onset of SARS. T lymphocyte subset analysis would help improve the early diagnosis of the disease.     

不明原因的复发性流产患者外周血T淋巴细胞功能的检测

目的：探讨不明原因的复发性流产（ＵＲＳＡ）与免疫因素的。方法：采肜形态学方法和ＥＬＩＳ本夹心法分别对３０例ＵＲＳＡ患者及３０例健康妇女外周血中Ｔ淋巴细胞转化率及血浆中可溶性ＩＬ－２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）进行检测。结果：ＵＲＳＡ患者外周血中Ｔ淋巴细胞转化率和血浆中ＳＩＬ－２Ｒ水平均比正常对照组妇女同（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）。结论：ＵＲＳＡ患者外周血中Ｔ淋巴细胞被活化、细胞免疫增强,提示Ｔ细胞介导     

慢性阻塞性肺疾病患者人类巨细胞病毒感染状态及与细胞免疫功能的关系

目的 :探讨慢性阻塞性肺疾病 ( COPD)患者的人类巨细胞病毒 ( HCMV)感染状态 ,及其与细胞免疫功能的关系。方法 :对 60例 COPD患者及 60例对照组的血清应用酶联免疫吸附试验( ELISA)方法检测 HCMV- Ig M、HCMV- Ig G,用聚合酶链反应 ( PCR)方法检测血清中 HCMV-DNA,用流式细胞术检测外周血中 T淋巴细胞亚群的分布。结果 :COPD患者重度组的 HCMV抗体阳性率、血清 HCMV- DNA阳性率均高于对照组 ,细胞免疫功能低下 ;COPD患者中 HCMV-Ig M阳性者的细胞免疫功能低于 HCMV- Ig M阴性者。结论 :绝大多数重症 COPD患者免疫功能低下 ,并伴有 HCMV的感染 ,免疫功能低下与 HCMV的感染可互为因果     

调和肝脾法对肠易激综合征免疫学作用机制研究

目的：观察调和肝脾法对肠易激综合征患者免疫学指标的作用。方法：临床选择腹泻型肠易激综合征患者为研究对象,治疗前后分别检测患者血中IgG、IgA、IgM、C3、C4;血T淋巴细胞总数与亚群数目;IL-2水平,并设正常对照组。结果：腹泻型肠易激综合征患者治疗前血清IgM含量明显升高,外周血总T淋巴细胞、T8^＋细胞数目显著降低;淋巴细胞转化功能明显低下,IL-2低于正常组,经调和肝脾法治疗后过高的IgM含量显著下降（P〈0．01）,淋巴细胞转化功能增强,抑制性T淋巴细胞（T8^＋）恢复正常,IL-2也接近正常水平。结论：腹泻型肠易激综合征患者体液免疫亢进,细胞免疫功能低下,免疫调节机制紊乱,调和肝脾法中药能抑制某些亢进的体液免疫指标,增强细胞免疫功能,从而起到调节免疫功能的作用。