微量营养素缺乏对大鼠肝细胞凋亡影响的初步研究

探讨硒和维生素Ｅ缺乏与肝细胞凋亡的关系。方法：用偏食低硒低ＶＥ饲料喂饲大鼠，用流式细胞术检测肝细胞凋亡小体百分率。结果；偏食低硒低ＶＥ组较单纯偏食组有所增加，较常规平衡食组明显增加，差异显著，单纯偏食组较常规平衡食组有所增加。结论：微量营养素缺乏可引起肝细胞凋亡。     

慢性氟中毒对大鼠心肌胶原代谢的影响

目的：探讨过量氟对大鼠心肌组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响。方法：将Wistar大鼠随机分成5组（每组8只）：常规食对照组、常规食加氟组（加氟100 mg ·L^-1）、低钙偏食对照组、低钙偏食加低量氟组（加氟50 mg·L^-1）和低钙偏食加高量氟组（加氟100 mg·L^-1）。采用苦味酸-天狼星红染色、偏振光显微镜观察以及免疫组织化学法检测氟中毒大鼠心肌Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达。结果：图像分析显示苦味酸-天狼星红染色、偏振光显微镜下显示的Ⅰ型、Ⅲ型胶原面积百分比,各加氟组其Ⅰ型、Ⅲ型胶原均较其对照组稍有增高趋势,但差异无显著性(P＞0.05)。免疫组化观察Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达量0%~10%,各加氟组与其对照组相比差异亦无显著性(P＞0.05)。结论：慢性氟中毒对大鼠心肌胶原代谢无明显影响,心肌胶原可能不是氟化物作用的靶子。     

维生素C对低硒低铬饲料饲养大鼠肝细胞电生理的影响

目的阐明微量元素Se、Cr含量异常时肝细胞损害的机理。方法用细胞内微电极技术分别观察了：正常对照(两组)、单纯低Se、低Se高维生素C、单纯低cr、低Cr’高维生素C、低Se低Cr、低Se低Cr伴高维生素C饲料饲养14w后大鼠肝细胞电生理的改变。结果单纯低铬组无变化；单纯低硒组RP、APA降低，APD50、APD50延长；低硒并低铬组RP、APA降低，APD50、APD90明显延长；低Se高维生素C组仅RP降低，APA、APD与对照组相比差异无显著性意义。结论低硒并低铬可明显改变肝细胞的电生理特性，维生素C可以对抗低Se并派Cr所致的这种变化。     

维生素E通过抑制铁坏死减少放射性神经损伤

目的 背景 探索维生素E在海马神经元放射性损伤过程中的作用并探讨其可能机制。方法 HT-22细胞及U251细胞体外培养，分别设置对照组：细胞正常培养；单纯放疗组（RT）：放射线单次照射8 Gy；VE组：维生素E（200 μmol/L）处理24 h；Fer-1 组：铁坏死抑制剂（Ferrostatin-1，5 μmol/L）处理24 h；RT+VE组：放疗联合维生素E处理；RT+Fer-1组：放疗联合铁坏死抑制剂处理；RT + ZVAD 组：放疗联合凋亡抑制剂（ZVAD-FMK, 2 μmol/L）处理；RT + Necro-1 组：放疗联合坏死性凋亡抑制剂（nerosulfonamide, 100 μmol/L）处理。MTT实验测定各组细胞生长情况。检测铁坏死相关氧化应激指标包括还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、脂质活性氧簇（Lipid ROS）以及细胞内铁离子水平评估各组细胞铁坏死状态。实验小鼠根据随机数表法随机分为4组（3只/组）：对照组：小鼠正常喂养；VE组：维生素E（500 U/kg）饮食喂养6周；RT组：小鼠全脑单次16 Gy照射；RT+VE组：放疗联合维生素E处理。观察各组小鼠水迷宫实验的探索时间及探索距离评估小鼠认知功能状况。结果 与RT组相比，RT+VE组HT-22细胞存活增加（P<0.05），U251无明显改变（P>0.05）；RT+Fer-1组HT-22细胞存活也明显增加（P<0.05），RT+ZVAD组和RT+Nerco-1组HT-22细胞存活无改变（P>0.05）。与对照组相比，RT组HT-22细胞铁坏死相关氧化应激水平上 升，包括GSH下降、MDA及Lipid ROS水平上升，细胞内铁离子水平增加（P<0.05）；而与RT组相比，RT+VE组及RT+Fer-1组能逆转铁坏死相关氧化应激水平改变（P<0.05）。与对照组及VE组比较，RT组小鼠水迷宫实验中游行的距离和探索时间较RT组明显增加（P<0.05）；RT+VE组小鼠相比于RT组水迷宫探索距离及时间均有明显下降（P<0.05）。结论 铁坏死，而非凋亡和坏死性凋亡，是海马神经元放射性损伤过程中的重要因素，维生素E能通过抑制铁坏死减少放射性神经损伤。     

富硒蒜对Wistar雄性大鼠精子的影响

目的通过低硒动物模型研究低硒及富硒蒜对雄性大鼠精子的影响。方法将30只大鼠分成3组：对照组（喂常规饲料）、低硒组（喂低硒饲料）、补硒组（喂低硒饲料加富硒蒜粉），喂养12周。实验结束时股动脉采血测血清硒（Se）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性、及丙二醛（MDA）含量；处死动物后睾丸称重计算睾丸指数，测精子数量和精子活率。结果血清硒含量：三组大鼠分别为0.42±0.13、0.06±0.08、0.30±0.07（mg/L）；精子数量：31.7±3.8、12.4±4.1、28.7±2.9（109）；精子活率：78.35±3.23、44.63±4.40、74.45±5.62（%）；低硒组明显低于其他两组（p〈0.01）。结论低硒能够造成大鼠精子数量减少、精子质量下降；富硒蒜具有拮抗氧化作用，能够改善低硒大鼠精子的数量及质量。     

过量氟对大鼠破骨细胞活性的影响

目的：探讨过量氟对大鼠破骨细胞（osteoclasts,OCs）活性的影响。方法：对经饮水投氟20周的大鼠胫骨进行常规组织切片,并对其进行HE及抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,观察染氟大鼠胫骨OCs的变化。同时提取股骨干骺端的总蛋白质,应用蛋白质印迹法（Western blotting）观察长骨干骺端基质金属蛋白酶9（MMP-9）（又称明胶酶B）的变化。结果：染氟组大鼠胫骨各个包被及干骺端OCs增多,骨皮质密质骨松质化。常食加氟组、偏食对照组（低钙偏食饲料组）、偏食加氟组TRAP阳性细胞数较对照组均有增加,但差异无显著性（P＞0.05）。Western blotting结果显示,常食加氟组大鼠干骺端MMP-9蛋白表达增高,与常食对照组比较差异有显著性（P＜0.05)。偏食加氟组与偏食对照组比较差异也有显著性（P＜0.05）。且二者与常食对照组差异均有显著性（P＜0.05)。结论：过量氟造成骨转换增高,破骨性骨吸收增强,低钙偏食是氟骨症的促发因素。氟可通过增强MMP-9的蛋白质表达来加强OCs的活性。     

Bcl-2蛋白及caspase-3基因表达与暴发性肝衰竭肝细胞凋亡关系的研究

目的：研究Bcl-2蛋白与caspase-3基因表达在实验性暴发性肝衰竭（FHF）中对肝细胞凋亡的作用。方法：用脂多糖和D-氨基半乳糖制备FHF小鼠模型；免疫组化法检测肝组织内Bcl-2蛋白表达；原位杂交法检测肝组织内ccqspcqse-3基因表达；缺口原位末端标记技术检测肝细胞凋亡。结果：模型组用药后2h Bcl-2有较多表达，4h表达最多，以后逐渐减少，4h与2h比较差别显著（P〈0．05），与8h、12h比较差别十分显著（P〈0．01）。模型组用药后2h caspase-3开始少量表达，8h达最高峰，并出现典型的肝细胞凋亡改变。12h表达下降，且同时存在肝细胞凋亡和坏死。Bcl-2与caspase-3表达及肝细胞凋亡均呈负相关。结论：在FHF中，肝细胞凋亡与caspase-3的激活有关；Bcl-2可能通过抑制caspase-3的活性而抑制肝细胞凋亡。     

参附通过抗凋亡途径对大鼠肝脏缺血再灌注的影响

目的：研究参附注射液对大鼠肝缺血再灌注期间肝细胞凋亡的影响，并探讨其机制。方法：采用Pringle’s法建立大鼠肝缺血再灌注模型。54只Wistar大鼠随机分为假手术组（S组）、缺血再灌注组（IR组）和参附治疗组（SF组）。在规定时间检测肝细胞Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达、细胞凋亡，同时观察病理形态学改变。结果：细胞凋亡指数在各时间点IR组显著增多，SF组较IR组显著减少而高于S组。与IR组比较，SF组的Bcl-2蛋白表达在再灌注6h、24h提高的显著；而Caspase-3蛋白表达在再灌注2h、6h下降的显著。结论：参附注射液通过抗细胞凋亡途径保护肝脏缺血再灌注损伤。SF通过下调Caspase-3表达，同时上调Bcl-2表达而抑制再灌注时肝细胞凋亡，减轻肝缺血再灌注损伤。     

吲哚胺2,3-二氧化酶对小鼠同种异体肝细胞脾内移植的作用

目的：研究携带吲哚胺2,3-二氧化酶（IDO）的小鼠肝细胞在同种异体脾内的表达及对脾淋巴细胞的凋亡作用。方法分离BABL/c小鼠肝细胞,肝细胞脾内移植（BABL/c→C57BL/6）,分为4组：Ⅰ组为携带IDO组;Ⅱ组为1-甲基色氨酸组;Ⅲ组为空壳腺病毒组;Ⅳ组为单纯肝细胞移植组。移植术后第2,5d取脾脏免疫组织化学检测IDO表达情况,TUNEL检测脾脏淋巴细胞凋亡情况。结果携带IDO腺病毒转染肝细胞后,能有效表达IDO。免疫组织化学显示,Ⅰ、Ⅱ组脾脏有IDO阳性的肝细胞。与其他组比较,移植术后第2,5dⅠ组淋巴细胞凋亡差别有统计学意义（P＜0．05）,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组之间比较,差别无统计学意义（P＞0．05）。结论携带IDO的肝细胞能在小鼠同种异体脾内稳定表达,并能诱导脾内淋巴细胞的凋亡。     

丙泊酚对缺氧肝细胞复氧后核因子κB活性和细胞凋亡的影响

目的观察临床相关浓度丙泊酚对缺氧肝细胞复氧后核因子κB诱导激活和细胞凋亡的影响。方法采用携带报告基因的6κB-TK-Luc质粒转染离体培养的LO2肝细胞,随机数字表法分为3组：正常对照组（CO组）、缺氧复氧组（HR组）、二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC,50M）阻断组（PD组）,每组按加入丙泊酚浓度不同分为4个亚组（终末浓度为0、125、25、50M）。除CO组正常培养外,其余各组均给予缺氧4h后复氧8h处理。分别测定KB序列依赖性报告基因虫荧光素酶（Luc）的转录表达水平和肝细胞凋亡率。结果氧肝细胞复氧后Luc表达水平和细胞凋亡率均较CO组明显升高（P〈0．01）。不同浓度的丙泊酚明显降低缺氧肝细胞复氧后的Luc表达水平（P〈0.05）,且呈浓度依赖性,但其作用可被联合应用的PDTC所消除。较高浓度（25M和50M）的丙泊酚可有效抑制缺氧复氧处理后的肝细胞凋亡率（P〈0.05）,而联合应用PDTC后,50M丙泊酚亚组仍显示有明显的抑制作用（P〈0.05）。结论较高浓度的丙泊酚（≥25M）可有效降低缺氧复氧后的肝细胞凋亡,其作用部分与抑制核因子κB的诱导激活有关。     

低硒高锰饮食对大白鼠血浆维生素E的影响

本文报道了用硒錳含量不同的饲料饲养大白鼠,并用荧光法测定大鼠血浆维生素E。比较分析了低硒、高錳对大鼠血浆VE的影响。     

氟骨症患者体内维生素E与硒水平的研究

作者测定了煤烟污染型氟中毒病区氟骨症患者血清维生素E(VE)及硒(Se)水平。结果发现,氟骨症患者VE水平降低(P<0.01),而硒水平则较非病区健康人为高(P<0.01)。同时还测定了病区和非病区的粮食及居民膳食中的Se水平,发现病区粮食和熟食中的硒水平则较非病区为高。这些结果提示,氟中毒患者机体抗氧化能力低下;而硒水平较非病区高可能和摄取水平有关。     

硒和维生素E对克山病病区粮喂饲大鼠心肌纤维化的影响

目的:观察适时适量补充硒(Se)和维生素E(VE)对心肌纤维化和心肌重构的影响,探讨克山病病区的低Se和低VE膳食是否在心肌损伤后的修复过程中持续发挥作用.方法:30只Wistar 大鼠随机分为:正常对照组(Control,混合饲料喂养)、病区粮饲料组(EG,病区粮喂养)、病区粮饲料加Se组(EG+Se)、病区粮饲料加...     

EGCG对裸鼠移植瘤中人口腔表皮样癌耐药细胞凋亡的影响

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)增敏长春新碱(VCR)对人口腔表皮样癌多药耐药细胞株KBV200裸鼠移植瘤的抑瘤作用及与瘤细胞凋亡的关系.方法:采用KBV200接种于裸鼠皮下,建立耐药肿瘤模型;2周后,EGCG和VCR腹腔注射,联合处理2周;免疫组化法检测瘤组织Bcl-2,Bax的表达;TUNEL法检测细胞凋亡; 流式细胞仪进行细胞周期分析;透射电镜观察瘤组织细胞超微结构的改变.结果:EGCG联合VCR处理治疗后瘤重、肿瘤相对体积明显低于对照组和VCR组(P<0.05),且与EGCG的剂量呈正相关;低、中、高EGCG联合 VCR组Bcl-2的表达明显低于VCR组(P<0.01);低、中、高EGCG联合 VCR组Bax蛋白的表达明显高于VCR组(P<0.01);TUNEL法低、中、高EGCG联合 VCR组凋亡指数明显高于VCR组,与EGCG呈剂量依赖关系; 流式细胞技术显示低、中、高EGCG联合 VCR组G2/M期细胞高于VCR组(P<0.01); 电镜下三个联合用药组瘤组织中可见较多典型的细胞凋亡的形态学表现.结论:EGCG在体内具有增敏VCR对KBV200移植瘤的杀伤作用.机制可能是通过下调Bcl-2蛋白,上调Bax蛋白的表达,从而促进肿瘤细胞的凋亡.     

复合微量营养素对高脂血症大鼠血浆PGI2、TXA2水平的影响

目的：观察复合微量营养素（硒、维生素E、维生素C、镁）对高脂饲料诱导的高脂血症大鼠血浆前列环素I2（PGI2）和血栓素A2（TXA2）水平的影响，为营养干预防治动脉粥样硬化（AS）提供实验依据。方法：60只幼年Wistar大鼠随机分为5组，分别饲以正常饲料、高脂饲料、高脂饲料补充微量营养素硒＋维生素E＋维生素C、高脂饲料补充镁、高脂饲料补充微量营养素硒＋维生素E＋维生素C＋镁。饲养8周后测定大鼠血中脂质以及PGI2和TXA2含量。结果：复合微量营养素硒、维生素E、维生素C和镁能显著抑制高脂饲料主导的大鼠血浆甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇以及血栓素A2升高，降低TXA2／PGI2值，同时显著升高高密度脂蛋白胆固醇。结论：复合微量营养素硒、维生素E、维生素C和镁具有明显的降血脂作用，且降脂模式非常有利于预防AS，同时能降低TXA2／PGI2值，提示具有抗血小板聚集和促血管扩张作用。     

线粒体-细胞色素C途径在非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞凋亡中的作用

目的 研究大鼠非酒精性脂肪肝形成中肝细胞凋亡以及线粒体-细胞色素C途径在其中的作用.方法 Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组和高脂饲料2、4、8和12周组(其中每组各8只);HE染色光镜观察肝脏组织病理改变;采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)以及流式细胞仪检测肝细胞凋亡指数;激光共聚焦显微镜检测肝细胞线粒体膜电位;免疫组织化学检查caspase-3在肝脏表达分布,Western blotting检测细胞色素 C以及caspase-3含量变化.结果 高脂饮食组4～12周组肝细胞线粒体膜电位与对照组比较明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01);高脂饮食组肝细胞凋亡指数与对照组比较明显增加,随着脂肪肝的加重逐渐增高,差异有统计学意义(P＜0.01);高脂饮食组细胞色素C含量以及caspase-3蛋白表达随着时间延长逐渐增高,以12周增加明显,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 大鼠非酒精性脂肪肝引起的肝细胞损伤与肝细胞凋亡密切相关,线粒体-细胞色素C途径参与了其调控过程.     

硒、锌及维生素E对富锰所致大鼠体内脂质过氧化的保护作用

本文叙述了在低硒富锰饲料中补充硒、锌及ＶＥ对大鼠血及组织中脂质过氧化（ＬＰｏ）的影响。实验表明，当用亚硝酸盐诱发大鼠缺氧时，在低硒环境下，富锰可使丙二醛（ＭＤＡ）积累增加，引起ＬＰｏ加剧。补充硒、锌及ＶＥ均能对抗富锰引起的上述影响。研究还表明，硒、锌及ＶＥ的联合补充有显著的抗氧化协同作用，尤其以硒与ＶＥ的组合为最佳。     

Changes of peripheral tissue thyroid hormone metabolism in rats fed with selenium- and vitamin E-deficient artificial semisynthetic diet

ＯｕｒｒｅｃｅｎｔｓｔｕｄｉｅｓｏｎｅｔｉｏｌｏｇｙａｎｄｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＫｅｓｈａｎｄｉｓｅａｓｅ（ＫＤ）ｈａｖｅｖｅｒｉｆｉｅｄｔｈａｔａｍｅｔａｂｏｌｉｃｄｉｓｔｕｒｂａｎｃｅｏｆｔｈｙｒｏｉｄｈｏｒｍｏｎｅ（ＴＨ）ｉ...     

硒和维生素E对心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原合成代谢的影响

目的：研究硒（Se）及维生素E（VE）对去甲肾上腺素（NE）处理的心肌成纤维细胞（CFbs）Ⅰ型胶原合成的影响。方法：酶消化法获得Wistar大鼠乳鼠CFbs,与NE、Se和VE作用一定时间后,测定上清中羟脯氨酸（HYP）和Ⅰ型胶原含量。结果：Se、VE及Se+VE组培养液中HYP含量分别为（64.88±1.25）、（47.60±1.59）和（41.34±1.73）mg·L^-1 prot,明显低于NE组［（68.27±1.89）mg·L^-1 prot］（P<0.05）,Ⅰ型胶原含量分别为(0.67±0.05)、(0.40±0.03)和 0.39±0.04,与NE组（0.90±0.15）比较,差异有显著性（P<0.05）。结论：Se和VE单独应用可抑制CFbs Ⅰ型胶原的合成,二者联合应用具有协同作用。   