RNA干扰技术抑制卵巢上皮性癌细胞IGF1R基因表达及增强顺铂敏感性的实验研究

目的 利用RNA干扰(RNAi)技术抑制卵巢上皮性癌(卵巢癌)HO8910PM细胞胰岛素样生长因子1型受体(IGF1R)基因的表达,探讨IGF1R的生物学功能及对顺铂敏感性的影响.方法 将IGF1R基因的特异性小分子干扰RNA(siRNA)、非特异性siRNA分别转染细胞;转染后48h通过实时PCR、蛋白印迹法(western blot)、流式细胞仪分别测定IGF1R mRNA、蛋白的表达及细胞周期变化;转染后24、48、72、96 h通过细胞增殖/毒性检测试剂cell counting kit-8(CCK-8)测定细胞增殖;于转染后24 h给予不同浓度的顺铂作用24 h,通过CCK-8法测定细胞增殖抑制率;于转染后24 h给予10μg/ml顺铂作用24 h,通过流式细胞仪及蛋白印迹法分别检测细胞凋亡和B淋巴细胞白血病/淋巴瘤蛋白2(Bcl-2)蛋白的表达.结果 (1)转染后48 h,IGF1R mRNA和蛋白的表达水平均明显下调,转染后IGF1R mRNA的表达水平下调了85.5%(P＜0.01).(2)转染后48、72、96 h,细胞增殖被明显抑制,细胞增殖活性分别为1.71±0.13、2.32±0.23、2.79±0.28,与未转染及转染非特异性siRNA的对照细胞比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).(3)转染后48 h有24.37%的细胞处于G2期(P＜0.05).(4)转染后24 h联合不同浓度的顺铂作用24 h,当顺铂浓度为2.5、5、10、20μg/ml时,细胞增殖被明显抑制,细胞增殖抑制率分别为(25.94±0.08)%、(40.25±0.05)%、(59.48±0.03)%、(74.18±0.08)%,差异均有统计学意义(P＜0.01).(5)在转染siRNA 24 h后给予10μg/ml顺铂作用24 h,可使细胞的凋亡率增加至17.95%(P＜0.05),并使Bcl-2蛋白的表达水平下调.结论 通过RNAi技术可有效抑制IGF1R基因在转录和翻译水平的表达,抑制肿瘤细胞的增殖,出现G2期阻滞,明显提高细胞对顺铂化疗的敏感性.     

子宫内膜癌Dickkopf1表达及对内膜癌侵袭力的影响

目的:研究Dickkopf1在子宫内膜癌组织和Ishikawa细胞系的表达及对子宫内膜癌侵袭力的影响。方法:应用免疫组化和免疫荧光法检测子宫内膜癌组织和Ish-ikawa细胞系中Dickkopf1的表达定位;向子宫内膜癌Ishikawa细胞系施加外源性Dickko-pf1,应用Transwellchamber法进行体外侵袭试验,检测它对内膜癌侵袭能力的影响。结果:Dickkopf1在子宫内膜癌腺上皮和基质组织中均有表达,腺上皮的表达高于基质;Dickkopf1主要表达于内膜癌细胞浆和细胞膜中;施加外源性Dickkopf1后,子宫内膜癌细胞的侵袭能力下降。结论:Dickkopf1能减弱子宫内膜癌的侵袭能力,它有望作为内膜癌的治疗靶点。     

RNA干扰技术沉默IGF-1R效应对子宫内膜癌细胞增生及裸鼠成瘤的抑制作用

目的研究靶向胰岛素样生长因子受体-1(IGF-1R)的小干扰RNA(siRNA)对子宫内膜癌生长的抑制作用。方法采用实时定量PCR(real-time PCR)和蛋白印迹法(Western-blot)测定RNA干扰后IGF-1R的表达水平;采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期改变;裸鼠成瘤实验测定IGF-1R基因表达下调后子宫内膜癌细胞在体内致瘤能力的改变。结果靶向IGF-1R基因的siRNA可以有效抑制IGF-1R基因的表达,使IGF-1R mRNA表达减少85.0%,蛋白表达减少91.4%;流式细胞术检测到转染后细胞凋亡率明显升高,发生G2/M期阻滞;裸鼠体内成瘤能力降低。结论 siRNA介导的IGF-1R基因下调能明显抑制子宫内膜癌的体内外生长。     

子宫内膜癌术中区域性动脉灌注化疗的研究

目的:研究子宫内膜癌术中区域性动脉灌注化疗(ILAIC)的药代动力学特点、组织病理学变化以及子宫内膜癌的近期疗效和作用机制。方法:(1)随机将40只新西兰白兔分为动脉灌注组和静脉注射组,用高效液相色谱分析仪(HPLC)测定不同途径注射顺铂(cDDP)后血浆及组织中的药物浓度,比较髂内动脉灌注与耳缘静脉注射cDDP后,其药代动力学参数及子宫、肾脏中药物浓度的差异;(2)用TUNEL法研究ILAIC诱导子宫内膜癌细胞凋亡的情况;免疫组织化学法研究ILAIC对子宫内膜癌细胞PCNA表达的影响。结果:(1)ILAIC后cDDP的代谢符合二室开放模型。动脉组子宫中药物浓度明显高于静脉组,而肾脏药物浓度明显低于静脉组(P<0.05);(2)动脉灌注组中肿瘤细胞的增殖指数(PI)为(44.25±19.89)%,略低于静脉组的(52.00±14.64)%,但差异无显著性(P>0.05);(3)动脉灌注组中肿瘤细胞的凋亡指数(AI)为(16.00±11.54)%,明显高于静脉组的(7.20±6.24)%,差异有显著性(P<0.05)。结论:ILAIC后,子宫中有较高浓度的化疗药物而肾脏中的药物浓度明显低于静脉化疗后;ILAIC对肿瘤细胞的杀伤作用部分是通过诱导细胞凋亡实现的,同时可降低肿瘤细胞的增殖活力;初步结果显示,ILAIC近期疗效可靠,无明显副作用。     

子宫内膜癌组织中雌激素受体相关受体亚型的表达及其意义

目的探讨雌激素受体相关受体(ERR)亚型在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义.方法选取46例子宫内膜癌及24例正常子宫内膜新鲜组织,采用RT-PCR技术和免疫组化法检测ERR亚型α、β、γ在组织中的表达,并根据雌激素受体(ER)α的表达情况将其分为ERα(+)和ERα(-)者.结果 ERRα、β、γ的 mRNA和蛋白表达之间均呈明显正相关关系(r=0.462, P=0.009; r=0.689, P=0.016 ; r=0.673, P=0.001).内膜癌组织ERα(+)者中,ERRα mRNA阳性表达率及表达水平(分别为42%,0.24±0.18)均明显低于正常内膜组织ERα(+)者(分别为78%,0.42±0.23;P=0.019,P=0.021);内膜癌组织中ERRβ mRNA阳性表达率及表达水平(分别为23%,0.21±0.16)与正常内膜组织(分别为22%,0.27±0.15)相比,差异无统计学意义(P>0.05);ERRγ mRNA在内膜癌及正常内膜组织中均呈现高表达,ERα(+)的内膜癌组织中ERRγ mRNA的表达水平(0.93±0.24)明显高于正常内膜组织(0.72±0.21,P=0.023).ERRα mRNA表达阳性的内膜癌患者中,手术病理分期为Ⅰ期患者所占百分比(30%)明显低于ERRα mRNA表达阴性者(70%,P=0.017),但其Ⅱ～Ⅳ期患者及深肌层浸润患者所占百分比(分别为70%和78%)均明显高于ERRα mRNA表达阴性者(分别为30%和43%;P=0.017,P=0.033);内膜癌组织中ERRβ mRNA的表达与手术病理分期、病理分级、肌层浸润及淋巴结转移无关(P>0.05);ERRγ mRNA表达阳性的内膜癌患者中,淋巴结有转移患者所占百分比(18%)明显低于ERRγ mRNA表达阴性者(58%,P=0.021),但其与手术病理分期、病理分级及肌层浸润程度无关(P>0.05).结论 ERR亚型可能是ER以外与子宫内膜癌发生关系密切的又一受体.ERRα可能是子宫内膜癌预后不良的指标,而ERRγ高表达可能提示预后良好.     

子宫内膜癌中Maspin的表达及其与雌激素受体表达的相关性研究

目的:检测Maspin蛋白在正常子宫内膜、不典型增生及内膜癌组织中的表达,及其与雌激素受体(ER)表达的关系,探讨Maspin在子宫内膜癌发生中的作用及其作用机制。方法:免疫组化SP法检测40例子宫内膜腺癌、18例不典型增生及10例正常子宫内膜(对照组)中Maspin蛋白的表达及其与子宫内膜癌患者临床病理特征和ER蛋白表达的关系。结果:Maspin阳性表达在正常子宫内膜组最高(9/10,90%),高于内膜不典型增生组(10/18,55.6%)和内膜癌组(17/40,42.5%),差异有统计学意义(P<0.05),在内膜癌中FIGOⅠ期的表达(13/20,65.0%)明显高于Ⅱ~Ⅲ期(4/20,20.0%;P<0.05),无淋巴结转移者(17/34,50.0%)明显高于有淋巴结转移者(0/6;P=0.030),但与组织学分级及肌层浸润程度无关(P>0.05)。ER在正常子宫内膜、内膜不典型增生及内膜癌组织的阳性表达率分别为(10/10,100.0%)、(13/18,72.2%)和(20/40,50.0%),各组间差异有统计学意义(P<0.05);内膜癌组织中FIGOⅠ期的表达(14/20,70.0%)明显高于Ⅱ~Ⅲ期(6/20,30.0%;P<0.05);内膜癌高、中、低分化组中ER表达率分别为(11/15,73.3%)、(8/18,44.4%)、(1/7,14.3%),组间差异有统计学意义(P<0.05);无淋巴结转移者(20/34,58.8%)明显高于有淋巴结转移者(0/6;P=0.020),肌层浸润≤1/2者(16/24,66.7%)明显高于肌层浸润>1/2者(4/16,25.0%;P<0.05)。子宫内膜癌中,Maspin的表达与ER的表达存在正相关关系(r=0.394,P<0.05)。结论:从正常子宫内膜、内膜不典型增生到内膜癌,Maspin蛋白表达逐渐降低,且其低表达与子宫内膜癌临床分期晚、淋巴结转移有关,并与ER蛋白表达呈一致性,提示Maspin蛋白的表达可能受雌激素调控,参与了子宫内膜癌发生发展和转移过程。     

DKK1对子宫内膜癌JEC细胞生物学功能的影响

目的:观察RNA干扰对子宫内膜癌JEC细胞DKK1基因表达及生物学功能的影响。方法:用3种RNAi(DKK-homo-366、DKK-homo-811、DKK-homo-886)抑制JEC细胞中DKK1的表达,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测干扰效果。实验分组:正常对照组(正常胎牛血清培养的JEC细胞)、NC对照组(转染无意义序列的RNA片段)和siRNA组(转染DKK-homo-811干扰片段)。Transwell小室、MTT、流式细胞仪分别检测干扰前后细胞侵袭、迁移、增殖和细胞凋亡的变化。结果:real-time PCR(RT-PCR)和Western blot结果显示,siRNA组的DKK1表达显著低于正常对照组和NC对照组(P0.05);而后两组比较则无显著差异(P0.05)。Western blot结果显示,正常对照组、NC对照组和siRNA组中β-catenin蛋白表达分别为0.308±0.035、0.305±0.026和0.552±0.018;siRNA组显著高于正常对照组和NC对照组(P0.05)。Transwell小室检测结果显示,干扰DKK1可降低JEC的侵袭、迁移能力。MTT显示,siRNA组吸光度值显著低于NC对照组和正常对照组(P0.05);后两组则无显著差异(P0.05)。siRNA干扰后,siRNA组的细胞凋亡率[(7.34±0.23)%]显著高于NC对照组[(2.24±0.05)%]和正常对照组[(1.62±0.17)%](P0.05);后两组则无显著差异(P0.05)。结论:干扰DKK1可降低JEC的侵袭和增殖能力,促进细胞凋亡。DKK1基因在子宫内膜癌JEC细胞中可能发挥促癌作用。     

子宫内膜癌SREBP1表达及SREBP1 shRNA对内膜癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨胆固醇调节元件结合蛋白质1(SREBP1)在子宫内膜癌中的表达情况及SREBP1 shRNA对子宫内膜癌细胞AN3-CA生物学行为的影响。方法:采用免疫组织化学染色、实时定量逆转录聚合酶链反应、蛋白免疫印迹、Transwell体外细胞侵袭试验等方法分析SREBP1在子宫内膜组织中的表达及其对细胞生物学行为的影响。结果:SREBP1在正常子宫内膜组织中低表达,在子宫内膜癌组织中高表达,且免疫组织化学染色H-Score评分在子宫内膜癌高分化组和中、低分化组之间具有统计学差异(P<0.001);SREBP1 shRNA可减慢子宫内膜癌细胞AN3-CA的增殖速度并降低AN3-CA细胞的侵袭能力,均具有统计学差异(P<0.001)。结论:SREBP1的表达与活化参与子宫内膜癌的进展;SREBP1 shRNA可降低子宫内膜癌细胞的增殖和侵袭能力,表明内源性SREBP1参与子宫内膜癌的进展与转移,为子宫内膜癌潜在的分子靶向治疗提供了一定的理论基础。     

RNAi抑制宫颈癌HeLa细胞survivin基因及其对顺铂敏感性影响的研究

目的:利用RNA i技术抑制宫颈癌HeLa细胞株Survivin基因,观察HeLa细胞株的细胞凋亡率、survivin蛋白表达及对顺铂(DDP)药物敏感性的变化。方法:以培养的宫颈癌HeLa细胞株为体外研究模型,设脂质体组、对照组、RNA i组进行实验。(1)半定量RT-PCR,W estern blot法检测Survivin mRNA、蛋白在各组细胞中的表达;(2)用流式细胞术分析各组细胞周期及细胞凋亡率的影响;(3)用MTT法分析DDP对各组细胞存活率作用的浓度。结果:(1)RT-PCR检测结果显示,Survivin扩增条带(206bp)的亮度差异显著,RNA i组明显弱于脂质体组及对照组。RNA i组Survivin mRNA相对含量较质脂体组明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);W estern blot检测各实验组Survivin蛋白的表达,脂质体组与对照组Survivin蛋白条带明显存在,且基本一致,而RNA i组同样位置的条带基本消失;(2)RNA i组细胞阻滞在G0/G1期,G/M期减少,与脂质体组和对照组分别比较,差异有统计学意义(P<0.01);(3)MTT比色法检测结果显示,不同浓度顺铂处理后脂质体组、对照组、RNA i组的IC50分别为(0.298±0.035)、(0.147±0.031)、(0.012±0.001),RNA i组HeLa细胞对顺铂的药物敏感性增高。两者相比差异有统计学意义(P=0.000)。结论:RNA i明显抑制了Survivin在转录及翻译水平的表达;RNA i抑制Survivin基因表达,能明显提高宫颈癌HeLa细胞对顺铂的药物敏感性。     

DACH1在子宫内膜癌的表达及与ER、PR表达的相关性

目的:探讨细胞命运决定因子DACH1蛋白、ER、PR在子宫内膜癌的表达及分析其与子宫内膜癌临床病理指标及预后的关系。方法:免疫组化技术检测80例子宫内膜癌、20例正常子宫内膜、10例复杂增生子宫内膜和10例不典型增生子宫内膜组织标本中DACH1蛋白、ER、PR的表达,分析其与子宫内膜癌患者临床病理参数及预后的关系。结果:在子宫内膜癌、正常子宫内膜、不典型增生和复杂增生子宫内膜中DACH1蛋白表达的阳性率分别为36.3%(29/80)、95.0%(19/20)、8/10、10/10,DACH1蛋白在子宫内膜癌中的表达显著低于非癌组(P=0.000)。DACH1表达阳性率内膜癌Ⅰ期为47.7%,Ⅱ~Ⅳ期为22.2%,两者差异有统计学意义(P0.05)。DACH1表达阳性率与内膜癌的病理分级有关,G1~G2级显著高于G3级(43.6%vs 20.0%,P0.05)。内膜样癌中DACH1表达阳性率为42.2%,特殊类型癌中DACH1表达的阳性率为2/16,两者差异有统计学意义(P0.05)。单因素生存分析显示DACH1阳性组子宫内膜癌患者的总体生存率明显高于DACH1阴性组(P0.05)。80例子宫内膜癌组织中34例呈ER阳性表达,42例呈PR阳性表达,DACH1蛋白表达与ER蛋白表达呈正相关(ρ=0.245906,P0.05),与PR蛋白表达呈正相关(ρ=0.3527758,P0.01)。结论:DACH1蛋白在子宫内膜癌组织表达缺失,且和ER、PR表达有一定的相关性,它在子宫内膜癌的发生、发展及预后中可能起重要作用。     

子宫内膜癌DNA错配修复基因hMLH_1表达的研究

目的:探讨DNA错配修复基因hMLH1的表达与子宫内膜癌的关系。方法:选取1981年1月至2001年12月在天津医科大学总医院住院手术子宫内膜癌104例和正常子宫内膜35例(其中增生期17例,分泌期18例)及子宫内膜不典型增生8例,用免疫组化SABC法检测组织中hMLH1基因蛋白产物的表达,并对hMLH1蛋白表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系进行了分析。结果:子宫内膜癌、子宫内膜不典型增生、正常子宫内膜增生期和分泌期hMLH1表达缺失率分别为64.4%、37.5%、11.8%和5.6%。子宫内膜癌组织中hMLH1的表达缺失率明显高于正常子宫内膜组织(P=0.0001);子宫内膜样腺癌、腺癌伴鳞状上皮分化、透明细胞癌和浆液性癌hMLH1表达缺失率分别为68.9%、50%、25%和0,在子宫内膜样腺癌中hMLH1基因表达缺失率明显高于其他组织学类型(P=0.02,P=0.003)。hMLH1基因表达缺失者5年生存率明显高于阳性表达者(P=0.012),遗传性子宫内膜癌、非特异肿瘤聚集性子宫内膜癌及散发性子宫内膜癌hMLH1蛋白表达缺失率分别为100%、94.1%及55%,遗传性及非特异肿瘤聚集性子宫内膜癌hMLH1基因表达缺失率明显高于散发性子宫内膜癌(P=0.02,P=0.003)。结论:hMLH1基因表达缺失与子宫内膜癌和子宫内膜不典型增生发生有关。hMLH1基因表达缺失与子宫内膜癌组织学类型中的子宫内膜样腺癌有关,hMLH1基因表达缺失者预后较好,且在遗传性子宫内膜癌患者中表达缺失率明显高于散发病例。     

胰岛素对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨胰岛素对子宫内膜癌细胞系Ishikawa3-H-12细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法 应用免疫细胞化学方法和RT-PCR技术检测Ishikawa3-H-12细胞胰岛素受体（INSR）蛋白和mRNA的表达。以不同浓度胰岛素作用Ishikawa3-H-12细胞不同时间,采用四甲基偶氮唑蓝比色法、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡和细胞周期。结果 （1）Ishikawa3-H-12细胞INSR蛋白呈棕黄色阳性表达,并可见INSR基因的表达。（2）胰岛素以浓度和时间依赖的方式促进子宫内膜癌细胞增殖,1×10^-4mol／L胰岛素作用48h时促增殖作用最显著,增殖率为（340．2±15．9）％,与对照细胞（以胰岛素浓度为0作为对照,为100％）比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。（3）胰岛素以浓度和时间依赖的方式使Ishikawa3-H-12细胞中G0／G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,1×10^-4mol／L胰岛素作用72h时最显著,G0／G1期细胞比例为（27．7±2．5）％,S期细胞为（55．2±1．4）％,分别与对照细胞[分别为（67．6±1．5）％、（15．7±1．0）％]比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）;胰岛素对G2／M期细胞无影响（P〉0．05）。（4）随着胰岛素浓度的增加,Ishikawa3-H-12细胞凋亡率逐渐下降。1×10^-4mol／L胰岛素作用最显著,作用24、48、72、96h时的细胞凋亡率分别为（1．76±0．16）％、（1．70±0．15）％、（1．56±0．20）％、（1．31±0．24）％,分别与对照细[分别为（9．81±0．61）％、（9．93±1．44）％、（9．10±0．66）％、（10．30±1．20）％]比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论 胰岛素对子宫内膜癌Ishikawa3-H-12细胞具有促进增殖、抑制凋亡的作用。     

细胞动力学在子宫内膜癌发病机制中的作用

探讨细胞动力学在子宫内膜癌发病机制中的作用。方法 :对13例子宫内膜癌、癌周内膜 ,15例简单型增生过长内膜 ,13例复杂型增生过长内膜石蜡组织切片 ,作HE染色及原位末端标记 (TUNEL) ,在光镜下 ,对切片中的有丝分裂细胞及凋亡细胞进行计数。结果 :复杂型增生过长内膜有丝分裂指数 (MI)及细胞凋亡指数 (AI)均较简单型增生过长内膜显著增高 (P均 <0 0 1) ,但MI/AI比值两者无显著差异 ;子宫内膜癌灶MI、AI、MI/AI比值均较癌周内膜及复杂型增生过长内膜显著增高 (P <0 0 1,P <0 0 5,P <0 0 5)。结论 :在子宫内膜癌变的早期 ,细胞动力学遵循既定细胞数调节机制 ,即加速的细胞增殖通过加快的细胞凋亡予以平衡。当过度增殖的细胞不能通过相应增强的凋亡途径加以清除时 ,会导致DNA损伤和变异的积累 ,最终引起子宫内膜癌。     

层粘连蛋白及其受体与子宫内膜癌关系的初探

了解层粘连蛋白 (laminin ,LN)和层粘连蛋白受体 (laminin -re ceptor ,LN -R)在正常子宫内膜、子宫内膜增殖症、子宫内膜癌中的分布规律 ,探讨内源性LN与LN -R表达间的关系。方法 :用LSAB免疫组化法 ,检测 16例正常子宫内膜、12例子宫内膜增殖症、2 7例子宫内膜癌组织中LN和LN -R的表达。结果 :LN在腺上皮基底膜 (EBM)、腺上皮细胞 /腺癌细胞 (EC)、间质细胞 (SC)中均有表达 ,LN -R仅在EC中有表达。 3组内膜组织间EBM表达构成比、EC及SC内LN表达率及EC内LN -R表达率比较差异均有显著性 (P均 <0 0 1)。 3种内膜LN -R与EC及SC内LN表达明显相关 (P <0 0 1,P <0 0 5)。LN、LN -R表达与子宫内膜病理分级、手术病理分期、绝经状态、雌激素受体有关。结论 :LN及LN -R表达与子宫内膜癌发生、预后有关 ;LN和LN -R的表达间存在内源性的相互调节关系。     

钙通道TRPV6基因在子宫内膜癌表达及其临床意义的初步研究

目的:研究TRPV6在子宫内膜癌组织的表达及其与临床病理特征的关系。方法:选取58例子宫内膜癌石蜡切片,用免疫组化法测定TRPV6的分布及表达,分析其与临床病理之间的关系;另取31例正常子宫内膜及13例不典型增生内膜石蜡切片为对照。选取15例子宫内膜腺癌及11例正常子宫内膜新鲜组织标本,以实时定量PCR方法检测TRPV6的表达。结果:(1)TRPV6在子宫内膜癌组织的表达主要位于胞膜及胞浆内,阳性表达率77.6%,显著低于非绝经期子宫内膜组织(100%)及不典型增生子宫内膜组织(100%)(P0.05),且前者表达强度显著低于后二者(P0.01)。mRNA水平研究表明TRPV6在内膜癌组织中的表达也显著低于正常内膜组织(P0.05);(2)绝经后子宫内膜癌患者TRPV6阳性表达率为71.8%,显著低于未绝经患者(89.5%);(3)在子宫内膜癌组织中,宫颈受累者TRPV6阳性率显著高于宫颈未受累者(89.3%vs 67.7%,P=0.039)。结论:TRPV6在子宫内膜癌组织的表达低于正常子宫内膜组织,TRPV6阳性表达者较多发生子宫内膜癌宫颈受侵,表明钙通道蛋白TRPV6与子宫内膜癌有一定的关系,为探讨子宫内膜癌发病分子机制提供了研究资料。     

LHRH拮抗剂Cetrorelix对子宫内膜癌细胞生长周期的影响及其机理

目的 :研究LHRH拮抗剂Cetrorelix对子宫内膜癌细胞生长周期及周期相关蛋白的影响 ,探讨其抑制内膜癌细胞生长的机理。方法 :用流式细胞仪细胞周期分析及Westernblotting蛋白分析法 ,研究在Cetrorelix的作用下子宫内膜癌细胞系HEC 1A细胞生长周期及相关周期蛋白的改变。结果 :1 0 -5mol/LCetrorelix可导致HEC 1A细胞生长停滞于G2 /M期 ,而与G2 /M期停滞相关的p5 3 ,磷酸化p5 3 (phospho p5 3 ) (丝氨酸 3 92 )及磷酸化cdc2 (phospho cdc2 ) (酪氨酸 1 5 )蛋白水平均显著增高。结论 :Cetrorelix抑制内膜癌细胞增殖作用的机理是结合细胞表面受体后引起一系列抑制性信号传递 ,导致细胞周期停滞于G2 /M期 ,主要表现为G2 期停滞。其中p5 3激活及cdc2磷酸化失活是引起细胞周期停滞的重要因素