外源性硫化氢对大鼠肝纤维化的影响

目的探讨外源性硫化氢对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的预防作用。方法将24只Wistar雄性大鼠随机分为3组,每组8只,即正常对照组、模型组、硫化氢(H2S)预防组。H2S预防组除腹腔注射40%CCl4外,还给予NaHS腹腔注射,1次/d,至第8周,所有大鼠均被处死,收集大鼠血液,检测肝纤维化指标;取肝组织检测脂质过氧化指标及观察肝脏病理变化;应用RT-PCR和Western blot方法检测肝组织NF-κB的表达。结果外源性H2S能降低血清HA、LN、PCⅢ及肝组织MDA含量(P<0.01或P<0.05),增加肝组织SOD、GSH-Px活性(P<0.01),减轻肝纤维化程度(P<0.05),而且能使NF-κB表达明显减少。结论外源性硫化氢对CCl4诱导的大鼠肝纤维化具有保护作用,其机制可能与硫化氢抑制NF-κB表达有关。     

硫化氢对大鼠肝纤维化的预防作用

目的:探讨外源性硫化氢对实验性大鼠肝纤维化的预防及其作用机制。方法:雄性大鼠24只,随机分为3组,即正常对照组(n=8)、模型组(n=8)、硫化氢预防组(n=8)。四氯化碳(CCl4)腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,硫化氢预防组除腹腔注射40%CCl4外,还给予NaHS腹腔注射,每日1次,至第8周。实验结束后,检测肝功和肝纤维化指标;观察肝组织病理学变化;应用RT-PCR和Western印迹法检测肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。结果:与模型组比较,硫化氢预防组能降低血清丙氨酸氨基转换酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、三型前胶原(PCⅢ)水平(P<0.01或P<0.05),升高白蛋白(P<0.05),改善肝功能,且TGF-β1表达明显减少,肝组织病理明显改善。结论:外源性硫化氢能有效抑制肝纤维化的发生发展,其机制可能与硫化氢降低TGF-β1的表达,减少细胞外基质在肝脏中的沉积,从而延缓肝纤维化的进程有关。     

外源性硫化氢对三硝基苯磺酸诱导的大鼠肠壁纤维化的影响

目的 探讨外源性硫化氢对三硝基苯磺酸(trinitrobenzene-sulfonic acid, TNBS)诱导的大鼠慢性结肠炎肠壁纤维化的影响。方法 健康雌性SD大鼠60只,随机分为乙醇对照组、模型组、低剂量硫氢化钠(NaHS)组、高剂量NaHS组(15只/组),后三组建立TNBS诱导的慢性结肠炎肠壁纤维化模型。实验第3周开始,低剂量NaHS组、高剂量NaHS组分别给予腹腔注射H₂S供体NaHS[14.4μmol/(kg·d)或36.0μmol/(kg·d)],对照组和模型组予同等体积的生理盐水腹腔注射,实验期间观察各组大鼠每日的一般情况,第35天处死全部大鼠,采用去蛋白法测血清中的H₂S含量,分离结肠行大体形态学评分、组织学评分、计算胶原面积百分比,RT-PCR法测定胱硫醚-β-合酶(CBS)mRNA,ELISA法测COLIα2、COLⅢ、TGF-β1、TNF-α。结果 NaHS组H₂S含量、CBSmRNA高于模型组,高剂量NaHS组高于低剂量NaHS组;NaHS组大体形态学评分、组织学评分、胶原面积百分比、COLIα2、COLⅢ、TGF-β1、TNF-α低于模型组,高剂量NaHS组低于低剂量NaHS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 在TNBS诱导的大鼠慢性结肠炎肠壁纤维化模型中,外源性硫化氢可以使结肠组织CBSmRNA表达增加,同时具有抗炎、抑制肠壁纤维化的作用,且与剂量呈正相关。     

牛磺酸对实验性肝纤维化大鼠保护作用的研究

[目的]研究牛磺酸（Tau）对实验性肝纤维大鼠肝组织的保护作用。[方法]将120只实验用大鼠随机分为正常对照组、模型组、牛磺酸低（150 mg/kg）、中（300 mg/kg）、高（600 mg/kg）剂量组和复方鳖甲软肝片540 mg/kg组,每组20只;采用CCl₄复合法制备肝硬化门静脉高压大鼠模型,灌胃给药治疗4周后,测定血清中丙氨酸氨基转移酶门冬氨酸（ALT）、氨基转移酶（AST）和总胆红素（TBIL）含量,测定血清中肝纤四项（CⅣ、PCⅢ、LN、HA）含量,HE染色法观察肝脏组织形态结构变化并对肝组织细胞坏死和组织增生进行分级;通过天狼星染色观察肝脏组织纤维化状况;测定抗氧化酶（SOD、GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量;测定血清中炎症细胞因子IL-10、TNF-α含量。[结果]与模型组相比,牛磺酸中、高剂量组大鼠血清中ALT、AST、TBIL含量和CⅣ、PCⅢ、HA含量均显著降低（P<0.05,P<0.01）,高剂量组LN含量显著降低（P<0.05）;牛磺酸各剂量组大鼠肝组织纤维化病变呈不同程度改善,以高剂量组效果最为显著;牛磺酸中、高剂量组大鼠肝脏组织SOD、GSH-Px活性显著升高且MDA含量显著降低（P<0.05,P<0.01）,血清中IL-10、TNF-α含量显著降低。[结论]牛磺酸对实验性肝纤维化大鼠具有保护作用,其机制可能与牛磺酸能够有效保肝降酶、抑制氧化应激反应和炎症反应、改善肝功能有关。     

草珊瑚流浸膏对肝纤维化大鼠的保护作用及其机制研究

目的:观察和研究草珊瑚流浸膏对肝纤维化大鼠肝功能及肝纤维化指标的影响。方法:将SD大鼠随机分为空白组、模型组、虫草组、草珊瑚组及联合(草珊瑚+虫草)组,采用40%四氯化碳(CCl4)每周2次、皮下注射6周制作的大鼠肝纤维化模型,各治疗组经灌胃给药6周后,在麻醉状态下采血,检测血清肝功能和肝纤维化指标及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1),以发酵虫草菌粉作为阳性对照。结果:与模型组比较,虫草及草珊瑚组肝纤维化程度明显减轻,谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)降低、白蛋白(ALB)升高极为明显(P<0.01);同时非常显著降低肝纤维化指标及TIMP-1(P<0.01)。结论:提示草珊瑚流浸膏对肝纤维化大鼠肝损伤及肝纤维化具有一定的保护作用。     

紫七软肝对四氯化碳所致慢性肝纤维化大鼠的肝保护作用

目的：验证紫七软肝对四氯化碳（CCl4)所致大鼠慢性肝纤维化模型的肝保护作用及抗纤维化作用。方法：模型组及各给药组首次皮下注射40％CCl4 5mL/kg，以后每3天注射1次40％CCl4 3mL/kg，正常对照组给予等体积橄榄油，持续9周，给药自造模之日开始。结果：四氯化碳所致慢性肝纤维经大鼠有明显肝损伤及慢性纤维化的表现，紫七软肝3、6、12g/kg 3个剂量组肝功能指标均有不同程度的改善；肝组织胶原蛋白含量较模型组均明显降低；HA的值较模型组显著降低；病理组织学检查结果表明其肝脏病变程度均较模型组明显减轻。结论：紫七软肝3个剂量组对慢性肝纤维化大鼠具有肝保护作用及抗肝纤维化作用。     

己酮可可碱对肝纤维化大鼠抗纤维化作用的观察

目的探讨己酮可可碱在胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型中的抗纤维化作用。方法雄性SD大鼠60只,分为假手术组、肝纤维化模型组、己酮可可碱组。比较各组肝组织羟脯氨酸含量和组织学评分。结果己酮可可碱组组织评分为2.38分,较模型组（3.5分）显著下降（P﹤0.05）。羟脯氨酸含量模型组[（108.33±14.54）μg/ml]较假手术组[（15.58±4.25）μg/ml]显著升高（P﹤0.05）,己酮可可碱组为[（67.50±12.48）μg/ml],与模型组比较下降38%。结论己酮可可碱在大鼠胆管阻塞性肝纤维化模型中具有一定的抗纤维化作用。     

肝泰胶囊对大鼠乙醇性肝纤维化的治疗作用

目的 探讨肝泰胶囊对大鼠乙醇性肝纤维化的治疗作用及其可能的机制.方法 将42只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、乙醇模型组、肝泰治疗组.采用光镜、电镜观察各组肝组织病理学改变,Masson染色观察各组肝纤维化程度.采用放射免疫法测定血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)的含量,同时用半自动生化仪检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、T-CHOL(总胆固醇)、TG(甘油三酯);分光光度仪检测丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),还原型谷胱甘肽(GSH),γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT),以及免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 治疗组与模型组相比:①肝组织肝纤维化程度明显改善;②肝组织胶原纤维面积明显减少;③ 血清透明质酸、谷丙转氨酶、总胆固醇、γ-谷氨酰转肽酶水平显著降低(均P<0.05);④肝功能损伤明显减轻.结论 肝泰胶囊对乙醇性肝纤维化有一定的治疗作用,能显著改善大鼠乙醇性肝组织损伤,减轻肝纤维化.     

硫化氢在大鼠肝星状细胞氧应激中的作用

目的利用铁超载的方法在体外复制肝纤维化的氧应激模型，给予H2S供体硫氢化钠（NaHS）和内源性H2S作用的KATP通道阻滞剂格列苯脲（GLBN），论证氧应激下硫化氢对HSC细胞具有保护作用的假说。方法将HSC—T6分为8组：空白组、对照组、NaHS组（分为3个浓度组）、格列苯脲组（分为3个浓度组）。用CCK-8试剂盒测定HSC细胞增殖情况；用MDA试剂盒测定上清液MDA（丙二醛）含量；用SOD（超氧化物歧化酶）试剂盒测定上清液和裂解液中SOD活力；用RT—PCR试剂盒检测p38基因表达水平。结果1．Fe—NTA能够促进HSC的增殖，使p38基因表达水平降低、SOD活性降低、MDA浓度提高。对照组和空白组有明显差异（P〈0．05）；2．给予NaHS处理后，细胞增殖减慢，上清液中MDA含量下降，上清液、裂解液中SOD活性提高，p38基因表达水平增高（P〈0．05）；3．给予GLBN处理后，各项指标结果与给予NaHS处理后结果相对应，各组与对照组比较均有明显差异（P〈0．05）。结论氧应激下硫化氢对HSC细胞具有保护作用，可抑制肝纤维化的发生发展。     

复方鳖甲软肝片对肝纤维化大鼠的保护作用及其机制*

目的观察复方鳖甲软肝片对肝纤维化的保护作用及其机制。方法将30只清洁级SD大鼠随机分为对照组、模型组以及药物组,每组各10只,模型组及药物组使用橄榄油配制40%CCL4,进行皮下注射造模,每周2次,连续注射6周,对照组大鼠使用等容量橄榄油皮下注射;同时药物组大鼠给予复方鳖甲片灌胃,而对照组与模型组则每天给予等容量生理盐水灌胃,灌胃均为6周。末次给药后,抽取大鼠腹主动脉血,分离血清,检测各组大鼠血清肝功能指标及纤维化指标;取各组大鼠部分肝组织,使用免疫组化法检测大鼠肝组织COX-2、α-SMA蛋白表达情况。结果模型组、药物组大鼠ALT、AST、T-Bil水平较对照组显著升高（P<0.05）,但药物组大鼠ALT、AST、T-Bil水平明显低于模型组（P<0.05）;而模型组、药物组大鼠ALB较对照组显著降低（P<0.05）,但药物组大鼠ALB水平明显高于模型组（P<0.05）。模型组、药物组大鼠HA、CIV、LN水平较对照组显著升高（P<0.05）,但药物组大鼠HA、CIV、LN水平明显低于模型组（P<0.05）。模型组、药物组大鼠COX-2、α-SMA蛋白表达较对照组显著升高（P<0.05）,但药物组大鼠COX-2、α-SMA蛋白表达明显低于模型组（P<0.05）。结论复方鳖甲软肝片对肝纤维化大鼠肝功能具有着显著的保护作用,并可有效延缓肝纤维化疾病进程,其可能机制与抑制肝组织COX-2、α-SMA蛋白表达有关。     

山莨菪碱对大鼠肝纤维化的抑制作用

目的:观察山莨菪碱对实验性大鼠肝纤维化形成过程的影响.方法:采用二甲基亚硝胺腹腔注射建立SD大鼠肝纤维化模型.低、中、高剂量预防组于造模的同时分别给以山莨菪碱0.5、1、2mg/(kg·d)腹腔注射,直至造模结束(4周).低、中、高剂量治疗组分别以2、4、8mg/(kg·d)的剂量腹腔注射,持续8周.采用ELISA法检测血清纤维化标志物透明质酸(HA)和层粘连蛋白(LN),HE染色观察肝脏病理学变化.结果:不同剂量预防组和治疗组LN和HA水平均低于模型组(P<0.01),且各预防组LN和HA水平均显著低于相应的治疗组(P<0.05,P<0.01).肝组织HE染色显示,与模型组比较,预防组和治疗组肝组织汇管区面积明显减小,炎症程度减轻,纤维组织减少,肝细胞排列相对整齐.结论:山莨菪碱对实验性大鼠肝纤维化有抑制作用,可用于肝纤维化的防治.     

抗纤饮对肝纤维化大鼠模型的治疗作用

目的观察抗纤饮（KXY）治疗四氯化碳纤维化大鼠模型的疗效。方法80只大鼠被随机分为4组，每组20只，A、B、C组为肝纤维化模型组，其中A组在模型制成后立即处死，B组采用抗纤饮治疗3mo，C组为自然转归组，不作任何治疗，D组为正常对照组。分别比较模型组、自然转归组、治疗组和正常对照组大鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、透明质酸（HA）的含量，并观察其组织学改变的差别．结果治疗组血清ALT、AST、PCⅢ、HA均显著低于模型组（P〈0．05）及自然转归组。病理学提示，治疗组肝细胞损伤、肝脏脂肪变性与纤维组织形成较少。结论抗纤饮在抗纤维化治疗中有确切疗效。     

藤茶总黄酮抗大鼠肝纤维化的作用

目的研究藤茶总黄酮（TCF）抗肝纤维化的作用。方法59只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组和TCF组（分高、中、低剂量组）。于12周末观察各组肝脏形态学改变,检测各组血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（CⅣ）水平以及肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）的含量。结果TCF能显著降低大鼠血清中HA、LN、PCⅢ、CⅣ的水平（P〈0.05）;与模型对照组比较,TCF组的SOD活性显著增高,MDA的含量明显降低（P〈0.01）。结论TCF能有效降低大鼠体内脂质过氧化水平,防止体内抗氧化酶受自由基诱导的氧化损伤,抑制大鼠肝纤维化的形成。     

硫化氢对氧应激大鼠肝星形细胞的影响

目的探讨硫化氢（H2S）对大鼠肝星形细胞（HSC）增殖和氧应激的影响。方法用铁超载的方法复制肝纤维化的氧应激模型,给予外源性H2S供体硫氢化钠（NaHS）和炔丙基甘氨酸（PPG,H：S合成关键酶胱硫醚-γ-裂解酶CSE抑制剂）,通过绘制生长曲线法和用CCK-8细胞计数法测定不同浓度H2S和PPG分别作用于500μmol／L次氮基三乙酸铁（FeNTA）培养下的HSC6、12、24h细胞上清液和裂解液中H2S浓度、超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量,通过检测HSC的增殖情况、CSEmRNA表达水平、H2s浓度和氧化抗氧化指标（MDA、SOD）来探讨H2S对HSC氧应激的影响。结果FeNTA所致的增殖HSC氧应激损伤明显增加,抗氧化能力减弱。同时,CSEmRNA表达水平低下,H2S产生减少。给予PPG后,HSC增殖显著且CSEmRNA表达受到抑制。内源性H2S随着严重的氧应激损伤进一步减少。给予NaHS后,HSC增殖减少,CSEmRNA表达和H2S产生显著增加以缓解氧应激损害和增强抗氧化能力。结论H2S对HSC增殖具有一定的抑制作用,对FeNTA诱导的氧应激具有保护作用。     

苦参碱对大鼠实验性肝纤维化的影响

目的：研究苦参碱对肝纤维化的防治作用及其机理。方法：应用四氯化碳诱导大鼠实验性肝纤维化，并以苦参碱防治。观察了３，６，１２周对照组、模型组、治疗组的血清丙氨酸转移酶（ＡＬＴ）、透明质酸（ＨＡ）、肝组织羟脯氨酸（ＨｙＰ）含量以及肝脏病理变化。结果：苦参碱５０ｍｇ／ｋｇ和１００ｍｇ／ｋｇ均能显著减轻肝细胞变性、坏死及纤维组织的形成，同时能降低不同实验阶段血清ＡＬＴ（Ｐ＜０．０１）、ＨＡ（Ｐ＜０．０１）以及肝组织中Ｈｙｐ含量（Ｐ＜０．０５）。结论：苦参碱有防治四氯化碳诱发的肝纤维化的作用。     

硫化氢对大鼠肝星形细胞增殖和氧应激的影响

目的探讨H2S对大鼠肝星形细胞（HSC）增殖和氧应激的影响。方法用铁超载的方法复制HSC增殖模型,通过绘制生长曲线以及CCK-8细胞计数法检测不同浓度的H2S对500μmol／L次氮基三乙酸铁（FeNTA）作用下的HSC增殖的影响。通过不同浓度的H2S作用于500μmol／LFeNTA培养的HSC,检测6h、12h、24h细胞上清液和裂解液中H2S、SOD活力、MDA含量,观察H2S对HSC氧应激反应的影响。结果同对照组比较,一定浓度的H2S对HSC增殖有抑制作用。在FeNTA诱导的氧应激反应中,一定浓度范围的H2S可有效提高SOD的活性和降低MDA含量。结论H2S对HSC增殖有较强抑制作用,对FeNTA诱导的氧应激具有保护作用。     

逍遥散对肝纤维化大鼠肝脏保护作用的研究

目的观察逍遥散对胆管结扎致肝纤维化大鼠肝功能及肝纤维化指标的影响。方法采用胆管结扎法复制肝纤维化大鼠病理模型,各组大鼠分别以生理盐水、阳性对照药、低剂量逍遥散、高剂量逍遥散进行干预,测定各组大鼠血清ALT、AST、TBIL、HA、PCIU、LN、Ⅳ—C水平。结果肝纤维化模型组大鼠血清ATJT、AST、TBIL、HA、PCⅢ、LN、Ⅳ—C水平均显著高于假手术组（P〈0．05）;阳性对照药组、逍遥散高剂量组大鼠血清ALT、AST、TBIL、HA、PCⅢ、LN、Ⅳ—C水平均显著低于肝纤维化模型组（P〈0．05）。结论逍遥散对胆管结扎致肝纤维化大鼠肝功能具有一定程度的保护作用,对肝纤维化具有一定的防治作用。     

外源性硫化氢对异丙肾上腺素诱导的大鼠急性心肌缺血的保护作用

目的观察静脉注射外源性硫化氢(H2S)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠急性心肌缺血的保护作用。方法 SD雄性大鼠18只,体重200~250g,随机分为3组(n=6):正常对照组,模型组和NaHS治疗组。模型组和NaHS治疗组采用皮下多点注射ISO方法制作大鼠急性心肌缺血模型。对照组大鼠皮下注射等剂量生理盐水(0.1ml/100g)。NaHS组静脉注射NaHS(50mmol/L,0.1ml/100g),模型组静脉注射等容积生理盐水(0.1ml/100g)。给药后,记录3组大鼠70min内心电图。实验结束后,各组大鼠取血测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酸(AST)、磷酸肌酸激酶(CK)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)。结果模型组大鼠记录10min后,大鼠心电图ST段明显下降(模型组:-0.21±0.20mV比对照组:0.04±0.04mV,P<0.05)。静脉注射NaHS能明显改善ISO诱导的大鼠心肌缺血,大鼠心电图ST段在给药后30min开始恢复(模型组:-0.18±0.16mV比NaHS治疗组:-0.09±0.06mV,P>0.05),50min内基本恢复正常(NaHS治疗组:-0.01±0.06mV比对照组:0.01±0.05mV,P>0.05),和模型组比较有显著性差异(模型组:-0.19±0.17mV比NaHS治疗组:-0.01±0.06mV,P<0.05)。NaHS治疗组血清ALT、AST、CK、CK-MB与模型组比较显著降低。结论外源性硫化氢对异丙肾上腺素诱导的大鼠急性心肌缺血有显著的保护作用。     

中药肝力克对实验性大鼠肝纤维化的影响

目的：观察中药肝力克对实验性肝纤维化大鼠肝组织炎症活动度和肝纤维化的影响。方法：大鼠随机分成正常对照组和遣模组。造模组大鼠予40％CCl4皮下注射。造模结束后，将造模组大鼠随机分为肝纤维化模型组，肝力克大、中、小剂量组及秋水仙碱组，并给予不同剂量的药物灌胃治疗，实验结束后处死大鼠，取肝组织常规HE染色，观察大鼠肝组织炎症活动度和肝纤维化程度。结果：肝纤维化模型组大鼠肝组织炎症活动度计分及肝纤维化程度计分均较正常对照组明显升高，差异有非常显著性意叉；用肝力克各剂量及秋水仙碱治疗后，大鼠肝组织炎症活动度及肝纤维化程度均明显降低，与肝纤维化模型组相比，差异有非常显著性和显著性意叉，其中尤以肝力克大剂量组炎症活动度降低最明显。结论：肝力克有明显减轻实验性肝维化大鼠肝组织炎症活动度及改善纤维化程度的作用。     

补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织纤维化的影响及机制研究

目的:观察补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织中TβRⅠ、TβRⅡ及α-SMA的mRNA和蛋白表达的影响,探讨补肾柔肝方抗肝纤维化的作用机制。方法:Wistar大鼠53只,随机分为4组,空白对照组、模型组、秋水仙碱组、补肾柔肝方组。除空白对照组外,其余均造模,造模组首次于背部皮下注射纯CCl45 ml/kg,3 d后皮下注射40%(V/V)CCl4花生油3 ml/kg,每周2次,造膜8周制备肝纤维化模型。造模后秋水仙碱组用秋水仙碱水溶液灌胃(5 ml·kg-1·d-1),补肾柔肝方组给予补肾柔肝方流浸膏灌胃(5 ml·kg-1·d-1),连续8周。取各组大鼠肝组织,分别采用PT-PCR法和Western blot法检测肝组织TβRⅠ、TβRⅡ、α-SMA mRNA表达和蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠的TβRⅠ、TβRⅡ、α-SMA蛋白表达升高;TβRⅠ、TβRⅡmRNA、α-SMA mRNA表达明显升高(P0.01);与模型组大鼠相比,秋水仙碱组及补肾柔肝方组TβRⅠa、TβRⅡ、α-SMA蛋白表达水平有所降低;TβRⅠ、TβRⅡmRNA、α-SMAmRNA表达水平明显降低(P0.05)。结论:补肾柔肝方能够降低大鼠肝脏内TβRⅠ、TβRⅡ、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平,减轻大鼠肝脏的纤维化程度。