miR －329的表达对神经胶质瘤细胞增殖的影响

目的：探讨miR－329对神经胶质瘤细胞增殖的影响。方法构建稳定表达人miR－329前体的载体,转染SNB19神经胶质瘤细胞,将实验分为两组,空白组为转染pcDNA6．2－GW／EmGFP空载体的细胞,高表达miR－329组为转染pcDNA6．2－GW／EmGFP／miR－329载体,并建立稳定高表达miR－329的细胞。然后分别采用MTT法、克隆形成实验、BrdU掺入实验及Western blot检测空白组和高表达miR－329组细胞的增殖抑制速率、细胞的增殖能力、细胞的增殖活性及靶基因E2F1在蛋白水平的表达。结果与空白组相比,高表达miR－329组增殖速率减慢,指数增殖特征明显减弱;克隆形成实验显示高表达miR－329组克隆形成明显减少,克隆形成率为（5.5±1.7）％,与空白组的（14.3±2.5）％比较差异有统计学意义（P＜0.05）。 BrdU掺入实验显示空白组细胞在生长过程BrdU阳性的细胞为（32.4±4.7）％,与高表达miR－329组的BrdU阳性细胞的（18.1±2.3）％比较差异有统计学意义（ P＜0.05）。 Western blot显示在SNB19细胞中过表达miR－329后,其靶基因E2F1的表达明显被抑制。结论 miR－329的表达可抑制SNB19神经胶质瘤细胞的增殖,可能发挥类似抑癌基因的作用,其抑制细胞增殖的机制可能与靶向E2 F1的作用相关。     

胶质瘤中hsa-miR-20a的表达及对细胞增殖的影响

摘要：目的探讨hsa-miR-20在胶质瘤中的表达情况及对胶质瘤细胞增殖的影响。方法应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反
应方法检测正常脑组织和不同级别脑胶质瘤组织中miR-20a的表达情况;脂质体转染miR-20a模拟物后,通过MTT比色法及流
式细胞术观察胶质瘤U251 细胞增殖的变化。结果（1）与正常脑组织相比,胶质瘤组织miR-20a 的表达水平显著增高（P=
0.035）;（2）胶质瘤组织恶性程度越高,miR-20a表达越高（P<0.001）;（3）U251细胞转染miR-20a模拟物后,增殖能力明显加快,S
期细胞比例明显增多（P<0.001）。结论miR-20a能促进胶质瘤细胞的增殖,其高表达在脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用。
     

胶质瘤中hsa-miR-20a的表达及对细胞增殖的影响

目的探讨hsa-miR-20在胶质瘤中的表达情况及对胶质瘤细胞增殖的影响。方法应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法检测正常脑组织和不同级别脑胶质瘤组织中miR-20a的表达情况;脂质体转染miR-20a模拟物后,通过MTT比色法及流式细胞术观察胶质瘤U251细胞增殖的变化。结果 (1)与正常脑组织相比,胶质瘤组织miR-20a的表达水平显著增高(P=0.035);(2)胶质瘤组织恶性程度越高,miR-20a表达越高(P<0.001);(3)u251细胞转染miR-20a模拟物后,增殖能力明显加快,S期细胞比例明显增多(P<0.001)。结论 miR-20a能促进胶质瘤细胞的增殖,其高表达在脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用。     

干扰miR-21表达抑制胶质瘤U251细胞增殖迁移与侵袭

目的 探讨干扰miR-21表达对胶质瘤细胞U251增殖、迁移和侵袭的影响。方法使用脂质体将miR-21抑制物(人工合成干扰miR-21表达的核苷酸片段,miR-21处理组)以及对照组转染于U251细胞,利用qRT-PCR验证miR-21处理组转染的细胞中miR-21表达水平;通过MTT法、细胞划痕、transwell等实验观察miR-21处理组和对照组对U251细胞增殖迁移和侵袭的影响。结果miR-21 处理组中miR-21的表达量明显下调。即转染miR-21 抑制剂能有效降低U251细胞中miR-21的表达。miR-21 处理组的 U251细胞与对照细胞相比,增殖速度明显下降,差异具有显著性。细胞划痕实验显示干扰miR-21抑制U251细胞迁移能力。Transwell侵袭实验结果显示,miR-21 处理组的U251细胞的侵袭能力较对照组细胞明显下降。结论miR-21能促进胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力,它可能在胶质瘤的发生和进展中发挥重要作用。     

靶向抑制 DNMT1对人脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的：应用靶向 DNA 甲基转移酶1（DNMT1）基因的小干扰 RNA（siRNA）重组质粒来转染体外培养的人脑胶质瘤细胞,观察其对胶质瘤细胞增殖活性的影响。方法实验组予以 siRNA-DNMT1序列进行转染,对照组仅予以 siRNA-阴性对照序列。应用 qRT-PCR 分析 DNMT1基因表达变化, Western blot 法分析 DNMT1、PCNA 和 Cyclin D1蛋白表达变化,MTT 法检测细胞增殖生长能力,细胞克隆法分析细胞增殖克隆形成能力。结果与对照组比较,qRT-PCR 结果表明实验组 DNMT1 mRNA 表达明显减少（ P <0.01）;Western blot 法表明实验组 DNMT1、PCNA 和 Cyclin D1蛋白表达水平明显降低（P <0.01）;MTT 法检测表明实验组中活细胞数明显低于对照组（P <0.05）;细胞克隆法表明实验组细胞的增殖克隆形成能力明显低于对照组（ P <0.01）。结论靶向 DNMT1基因的 siRNA 重组质粒可减少人脑胶质瘤细胞内 DNMT1基因的表达,从而抑制胶质瘤细胞的增殖。     

miR-586在骨肉瘤患者体内的表达及意义的相关研究

目的:探究miR-586在骨肉瘤患者体内的表达及意义.方法:选取我院2014年9月~2016年9月收治的骨肉瘤患者151例,将其作为观察组,选择同期于我院进行体检的健康的志愿者52例,将其作为对照组,对患者瘤体周围正常骨组织及骨肉瘤瘤体组织中miR-586的表达、两组血清miR-586的表达、患者血清中miR-586表达与骨肉瘤患者瘤体组织的相关性、miR-586对骨肉瘤的诊断价值进行分析.结果:瘤体周围正常骨组织、骨肉瘤瘤体组织的miR-586相对表达水平分别为(0.94±0.27)、(5.34±0.29),患者瘤体周围正常骨组织较骨肉瘤瘤体组织中miR-586相对表达水平高,差异明显具有统计学意义;观察组、对照组血清miR-586的相对表达水平分别为(1.48±0.47)、(0.85±0.22),观察组较对照组高,差异明显,具有统计学意义;经皮尔森相关系数分析发现,患者血清中miR-586与骨肉瘤患者瘤体组织呈正相关的关系;经对观察组、对照组患者外周血miR-586水平ROC曲线分析,曲线下面积为0.882(0.774、0.991为95%可信区间;P=0.023),当0.9551为最佳筛查阳性届值(cut-off)时,特异度及敏感度均为85%.结论:miR-586对骨肉瘤患者具有较好的诊断价值,其表达水平可作为骨肉瘤患者诊断的生物学指标.     

eEF2K对胶质瘤细胞增殖及迁移能力的影响

目的 探讨eEF2K对胶质瘤细胞增殖及迁移能力的影响。方法 采用Westernblot法和实时荧光定量PCR检测eEF2K在胶质瘤细胞U87和正常星形胶质细胞HA1800中蛋白及m RNA的表达。在胶质瘤U87细胞上进行慢病毒转染,以下调eEF2K的表达,用Westernblot法验证转染效率。实验分为两组:转染阴性对照空病毒载体的为阴性对照组,转染eEF2K-sh RNA低表达载体的为实验组。稳转细胞株构建成功后,采用CCK-8细胞增殖实验、细胞划痕实验检测胶质瘤U87细胞的增殖能力和迁移能力。结果 与正常星形胶质细胞相比,胶质瘤细胞中eEF2K的蛋白表达量明显升高(P<0.001),m RNA的表达水平有所升高(P<0.01)。与阴性对照组相比,下调eEF2K的表达后可以抑制胶质瘤细胞的增殖能力(P<0.001)和迁移能力(P<0.01)。结论 eEF2K在胶质瘤细胞中呈高表达,下调eEF2K的表达能够抑制胶质瘤U87细胞的增殖能力和迁移能力。     

干扰RNA沉默tpd52基因对胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的 探究沉默tpd52基因表达后对胶质瘤U87细胞增殖、周期及凋亡的影响.方法 将携带着shRNA-tpd52(抑制tpd52的核苷酸序列)、shRNA-NC(阴性对照的核苷酸序列)的慢病毒体外转染胶质瘤细胞系U87.在转染48 h后荧光显微镜下观察表达GFP细胞数量,采用荧光定量PCR、Western blot分别检测TPD52 mRNA及蛋白表达量,MTT检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期分布,Annexin V和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡.结果 U87细胞转染率>90%,与shRNA-NC组及空白对照组相比较,shRNA-tpd52组细胞TPD52 mRNA及蛋白表达量明显减少(P<0.01),而且细胞增殖能力明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期被阻滞在G0/G1期、细胞凋亡比例明显增加(P<0.05).结论 沉默胶质瘤细胞中tpd52基因表达后,可以有效抑制细胞增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡.     

血小板因子-4对人脑胶质瘤细胞增殖能力的影响

目的探讨PF-4对人脑胶质瘤细胞增殖能力的影响。方法人脑胶质瘤细胞U251传代培养,分别加入浓度为0（对照组）、900ng／ml、1200ng／ml、1500ng／ml的PF-4。采用MTT比色法测定0D值;利用LSCM测定经Fluo3标记的脑胶质瘤细胞内游离Ca2＋荧光强度。结果1．对照组0D值为0．261±0．016;实验组（）D值分别为0．210±0．008、0．193±0．010、0．162±0．019。经Student—Newman—Keul法比较,P〈0．05。2．对照组脑胶质瘤细胞内游离Ca2＋荧光强度为24．21±2．36;实验组脑胶质瘤细胞内游离Ca2＋荧光强度分别为39．35±3．31、52．39±3．26、65．56±2．81。经单因素方差分析,各组间差异P〈0．05。结论PF-4对人脑胶质瘤细胞增殖有明显的抑制作用,且具有剂量依赖性．随浓度的增加其抑制作用逐渐增强。     

IL-12siRNA对脑胶质瘤细胞增殖与分化的影响

目的 观察IL-12 siRNA对脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响.方法将含有IL-12 siRNA的表达质粒稳定转染人脑胶质瘤细胞,应用MTT法及AO/EB染色观察脑胶质瘤细胞的增殖与凋亡情况.结果转染后,MTT法显示IL-12 siRNA组中的细胞生长受抑明显,AO/EB染色显示IL-12siRNA组的凋亡率较阴性对照组及空载体组高.结论 IL-12siRNA靶向干扰了IL-12蛋白的表达,并对脑胶质瘤细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用.     

受体相互作用蛋白140敲低对小鼠小胶质瘤细胞增殖的影响

目的 探讨受体相互作用蛋白(RIP)140基因敲低对小鼠小胶质瘤细胞(BV-2)增殖的影响.方法 用脂质体转染方法将RIP140-短发夹RNA(shRNA)质粒导入BV-2细胞,用嘌呤霉素筛选稳定表达RIP140-shRNA的细胞系,用实时定量PCR和Western印迹法检测RIP140敲低的效果,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测RIP140敲低对细胞增殖的影响.结果 成功构建稳定表达RIP140-shRNA的BV-2-71674和BV-2-71080;与BV-2细胞相比,BV-2-71674和BV-2-71080细胞中RIP140的表达无论mRNA水平还是蛋白质水平均明显低,下调率(mRNA)分别为73%和75%(均P<0.01);MTT法检测显示,BV-2细胞在24、48、72、96 h 4个时间点增殖率分别为3.03±0.01、7.36±0.08、14.15±0.25、23.35±0.09,BV-2-71674细胞则分别为2.15±0.03、6.43±0.08、11.77±0.31、18.47±0.04,BV-2-71080细胞分别为1.77±0.03、4.74±0.25、10.03±0.02、17.66±0.21;BV-2-71674和BV-2-71080细胞增殖率均明显低于BV-2细胞,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 RIP140敲低可以抑制BV-2细胞的增殖.     

穿心莲内酯对胶质瘤U87细胞增殖的抑制作用及其机制

目的：观察穿心莲内酯（Andro）对胶质瘤U87细胞增殖的抑制作用,阐明其作用机制。方法：取对数生长期U87细胞,分为二甲基亚砜(DMSO)对照组、4H-穿心莲内酯(4H-Andro)对照组和Andro组, MTT法检测不同浓度(0、5、10、15、20和25 μmol•L^-1) DMSO 、4H-Andro 及Andro对U87细胞活力的影响,计算U87细胞半数抑制浓度（IC50）;Western blotting法检测各组U87细胞NF-κB蛋白表达强度。结果：通过浓度筛选,Andro平均IC50为8 μmol•L^-1。与DMSO和4H-Andro对照组比较,8 μmol•L^-1 Andro处理24 h后U87细胞增殖活性降低（P<0.01）,增殖抑制率达到50%;Andro处理96 h时,U87细胞增殖活性进一步降低（P<0.01）,增殖抑制率达到65%。与DMSO和4H-Andro对照组比较,8 μmol?L-1 Andro处理48 h后, U87细胞中NF-κB（即磷酸化p65）蛋白表达强度下降（P<0.01）。结论：Andro作为临床上常用的天然抗炎药物,具有抑制胶质瘤细胞增殖的功能,并且可通过靶向抑制NF-κB蛋白表达强度发挥作用。     

livinβ对胶质瘤细胞增殖和凋亡能力的影响

目的探讨livinβ基因阻断对胶质瘤细胞增殖和凋亡能力的影响。方法脂质体法转染重组质粒于人星形胶质瘤细胞(U251),MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡值,RT-PCR、Western blot分别检测细胞中caspase-3基因及蛋白的表达。结果 MTT法检测转染组细胞增殖明显低于对照组和空载体组,差异有统计学意义(P<0.05);PI单染流式细胞术检测转染组细胞凋亡值明显低于对照组和空载体组,差异有统计学意义(P<0.05);转染组caspase-3基因及蛋白表达均明显高于对照组和空载体组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论阻断人星形胶质瘤细胞(U251)中livinβ基因表达,caspase-3基因及蛋白表达均明显增加,激活细胞凋亡蛋白酶级联反应,导致凋亡增加,细胞增殖减少,进一步证实了livinβ基因在胶质瘤的发生、发展中起着重要作用。     

局部热化疗对大鼠皮下移植胶质瘤细胞增殖和血管再生的影响

目的:研究局部热化疗对大鼠皮下移植胶质瘤血管再生的影响,探讨其作为胶质瘤辅助治疗的可行性.方法:将传代培养的C6细胞接种于大鼠背部皮下,肿瘤生长至1.5～2 cm直径时,分组进行局部热疗、化疗和热化疗.继续观察皮下肿瘤生长情况,测量瘤体体积和质量;用免疫组化S-P法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达;用因子Ⅷ相关抗原(FⅧ-RA)染色标记血管内皮细胞,以微血管密度(MVD)作为定量检测指标.用H-E染色法、电镜观察肿瘤增殖状况和肿瘤微血管结构的变化.结果:热疗、化疗、热化疗与对照组比较:瘤体缩小,质量减轻;PCNA、IGF-Ⅰ、VEGF蛋白表达降低(P<0.01),MVD降低(P<0.01),且热化疗较单纯热疗和化疗降低更明显(P<0.01).热化疗后肿瘤细胞增殖明显受抑制,微血管外径变小,血管壁变厚,血管减少,血管内皮细胞紧密连接增多,细胞连接间隙减小,有的血管甚至只能发现完整的基膜而缺乏内皮细胞.结论:热疗、化疗、热化疗能抑制肿瘤血管再生与肿瘤增殖,且热化疗有协同作用;热化疗抑制胶质瘤的PCNA合成与表达、以及抑制IGF-Ⅰ的合成与分泌是其抑制肿瘤增殖的机制之一;热化疗能降低肿瘤VEGF合成与分泌,破坏与减少肿瘤血管再生.作为胶质瘤辅助治疗有良好的临床应用前景.     

MiR-184通过调节FOXO3促进卵巢癌细胞增殖能力

目的 探讨miR-184通过调节FOXO3促进卵巢癌细胞增殖能力的影响。方法 荧光定量PCR检测样品中miR-184的表达水平;将miR-184mimic和miR-184 inhibitor转染至人源SKOV3卵巢癌细胞株中,并采用MTT法对转染目的基因成功的人源SKOV3卵巢癌细胞进行体外增殖活力的检测,同时检测cyclin D1、p27和FOXO3 mRNA的表达水平。结果 卵巢癌组织和细胞中miR-184的表达显著高于癌旁组织,SKOV3细胞中miR-184的表达显著高于人卵巢上皮细胞IOSE80;与IOSE80细胞相比,SKOV3细胞中FOXO3和p27 mRNA表达水平显著降低,而cyclin D1 mRNA表达水平显著升高。MTT试验表明,过表达miR-184后,SKOV3细胞增殖活性显著提高;当抑制miR-184表达后,SKOV3细胞增殖活性显著降低。此外,过表达miR-184后,SKOV3细胞的cyclin D1 mRNA表达量显著升高,而FOXO3和p27 mRNA表达量则显著降低(P<0.05)。与此相反,当抑制miR-184的表达后,SKOV3细胞的cycl...     

MiR-9在人神经胶质瘤中调节CBX7的表达

目的检测CBX7在人神经胶质瘤中的表达,研究人神经胶质瘤中异常表达的microRNA对CBX7的可能调控作用。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测2例正常脑组织、9例胶质瘤组织和3株胶质瘤细胞系中CBX7mRNA和蛋白水平的表达变化。结合Miranda和改良的机器学习法预测调控CBX7的miRNA。采用real-time PCR检测上述组织和细胞系中miR-9的表达,然后在细胞中过表达或敲低miR-9,结合荧光素酶实验和Western blot检测miR-9对CBX7表达的影响。采用MTT实验和流式细胞术分析miR-9敲低后对T98G细胞生长的影响。结果在胶质瘤组织和细胞系中,CBX7的mRNA水平改变不明显,而蛋白水平却明显下调。生物信息学预测CBX7可能受包括miR-9在内的多个miRNAs调控。与正常组织相比,miR-9在胶质瘤中表达明显增高。在293ET细胞中,过表达miR-9能抑制CBX7-3UTR报告基因活性。在T98G细胞中,敲低miR-9可增加CBX7-3UTR报告基因活性,对内源性CBX7的mRNA水平无明显影响,但使CBX7蛋白表达增加。敲低miR-9后,T98G存活细胞数增加,而且G1期细胞数比对照组明显减少。结论由于受到miR-9转录后水平的抑制,CBX7在人神经胶质瘤中表达下调甚至缺失。     

抑制eEF-2激酶对人脑胶质瘤细胞增殖作用的影响

目的研究抑制eEF-2激酶对人脑胶质瘤LN229细胞增殖作用的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测抑制eEF-2激酶后LN229细胞的增殖能力,台盼蓝染色法检测细胞的存活能力,相差显微镜观察细胞形态学的变化,流式细胞仪分析细胞周期的分布,Western blot方法检测细胞phospho-eEF2和Cleaved Caspase-3、PARP蛋白表达水平的变化。结果抑制eEF-2激酶对人脑胶质瘤LN229细胞的增殖有显著抑制作用（P〈0.05或0.01）,呈现时间和剂量依赖性趋势;作用24 h后,随着给药浓度的增加,LN229细胞的活力逐渐降低（P〈0.05或0.01）,且细胞形态也逐渐发生明显改变;NH125（0.5μmol/L）作用24 h后,LN229在S期阻滞,且出现小凋亡峰,phospho-eEF2（Thr56）的表达明显下降,Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP的表达显著增加（P〈0.05）。结论抑制eEF-2激酶后,人脑胶质瘤LN229的细胞增殖作用明显被抑制,细胞活力降低,该作用可能与其诱导的细胞周期阻滞以及其诱导的Caspase-3、PARP激活相关细胞凋亡途径有关。     

替莫唑胺对神经胶质瘤TJ905细胞增殖特性和迁移能力的影响

目的探讨替莫唑胺(TMZ)对人胶质瘤TJ905细胞增殖和迁移能力的影响。方法培养TJ905细胞,分别应用不同浓度的TMZ(0、50、100、200、400μmol·L-1)干预TJ905细胞,干预不同时间(24、48、72 h)后收集细胞,应用Cell Counting Kit-8检测药物干预前后细胞增殖活性变化;细胞划痕实验检测400μmol·L-1TMZ对TJ905细胞迁移能力的影响。结果随着TMZ浓度的升高和培养时间的延长,TJ905细胞的密度降低,细胞出现皱缩,增殖受到明显抑制,并可见散在的细胞碎片;TJ905细胞存活率随着培养液中TMZ浓度的升高和培养时间的延长而降低(P<0.05);400μmol·L-1TMZ的培养液培养24、48和72 h后TJ905细胞迁移度均低于对照组(P<0.05)。结论 TMZ能有效抑制TJ905细胞增殖和迁移。     

不同水平自噬对替莫唑胺抑制神经胶质瘤细胞增殖的影响

目的 探讨不同水平自噬对替莫唑胺抑制神经胶质瘤细胞增殖的影响.方法 使用0(对照)、10、25、50μg/L的雷帕霉素(RAPA)预处理人胶质瘤细胞(U87细胞)0.5 h;再加入200μmol/L替莫唑胺作用24 h,收集U87细胞.采用流式细胞术检测自噬标志物微管相关轻链蛋白3(LC3)-Ⅱ表达量,RT-PCR法检...     

MiR-124通过调控Smad4促进C6胶质瘤细胞凋亡的研究

【立论依据】 胶质瘤是中枢神经系统肿瘤中最常见的恶性肿瘤。由于外科技术难以做到病理学上的全切除,术后复发率非常高。在前期实验中我们发现C6胶质瘤细胞miR-124含量显著低于与正常大鼠大脑组织,且转染miR-124 后,C6胶质瘤细胞数明显减少。我们应用microRNA靶基因信息软件查到smad4的mRNA与miR-124-3p有3个结合位点,smad4可能是miR-124的靶基因。由此推测miR-124可能通过抑制smad4的蛋白表达对胶质瘤细胞起作用。 【设计思路】 本实验以大鼠C6胶质瘤细胞为研究对象,通过人为转染miR-124,分析其对smad4蛋白表达的影响,并确定smad4为miR-124新靶基因,从而探索miR-124对促进C6胶质瘤细胞凋亡的新作用机制。 【实验内容】 (1)通过qRT-PCR检测正常大鼠大脑、C6胶质瘤细胞、转染后的C6胶质瘤细胞中miR-124的表达水平。(2)转染外源miR-124观察C6胶质瘤细胞的生长状态。(3)结合蛋白质印迹和TUNEL assay方法,比较分析miR-124转染前和后C6胶质瘤细胞凋亡差异。(4)通过qRT-PCR检测比较分析转染miR-124 前后C6胶质瘤细胞中smad4 mRNA的表达变化。(5)用蛋白质印迹检测转染miR-124前后的C6胶质瘤细胞中Smad4表达变化。(6)以siRNA-Smad4 抑制smad4基因的表达后,再转染 miR-124 mimic,通过蛋白质印迹和细胞荧光染色方法比较分析细胞增殖的变化。 【材料】 C6胶质瘤细胞,Lipo2000脂质体,miR-124 mimic,实时PCR仪,超净台,孵箱,相差显微镜,荧光显微镜,PCR相关试剂,蛋白质印迹相关试剂,TUNEL assay试剂盒,Smad4抗体等。 【可行性】 前期研究已证实人工转染miR-124后其细胞数明显降低,smad4的蛋白水平下调;通过microRNA靶基因信息软件查到smad4可能是miR-124的另一个靶基因;项目组成员已熟练掌握研究所需要各种实验技术;实验设备齐全,具有完成上述实验的基本仪器设备。 【创新性】 我们将证明:miR-124通过抑制smad4的蛋白表达,调控smad4,抑制胶质瘤细胞的增殖且促进死亡。已有研究表明miR-124通过抑制靶基因STAT3 的蛋白表达对胶质瘤起作用,但目前尚无关于miR-124与 smad4之间作用关系的报道。