免疫性血小板减少症患者外周血中microRNA-181a、microRNA-146a、microRNA-326及microRNA-142-3p的表达

目的 通过检测4种免疫相关的microRNAs （miR-181a、miR-146a、miR-326和miR-142-3p）在免疫性血小板减少症（ITP）患者外周血单个核细胞（PBMCs）中的表达,探讨miRNA在ITP中的作用及意义。方法 采用实时定量PCR（RT-PCR）法,检测34例ITP患者（ITP组）及31例健康人（正常对照组）外周血PBMCs中4种miRNAs的表达水平;改良MAIPA法检测ITP组中22例患者抗血小板自身抗体GPIIb/IIIa、GPIb/IX,分析miRNA与抗血小板自身抗体的关系,以及与血小板计数等临床指标的相关性。结果 ITP组PBMCs中miR-146a、miR-326和miR-142-3p表达水平与正常对照组相比明显降低（P<0.05）,miR-146a与miR-326 (r=0.437, P=0.011）,miR-146a与miR-181a (r=0.652, P<0.001),miR-326与miR-181a(r=0.745, P<0.001）的表达水平均呈显著正相关,且miR-146a与ITP患者血小板计数呈正相关（r=0.468,P=0.016）。ITP组不同性别间4种miRNAs表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。ITP组中26例患者接受糖皮质激素治疗后,有效组与无效组4种miRNAs表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。GPIb/IX、GPIIb/IIIa单阳性组、双阳性组和双阴性组间miRNAs的表达水平均无显著性差异（P>0.05）。结论 miR-146a、miR-326及miR-142-3p表达异常在ITP的发生和发展中可能发挥了一定的作用。     

miR-324-5p和miR-215-5p在多发性骨髓瘤中的表达及预后分析

目的 检测多发性骨髓瘤（MM)患者血清中miR-324-5p和miR-215-5p的表达水平,研究其表达水平和预后的关系。方法收集60例MM患者血清标本,为初治组（20例）、巩固治疗组（20例）、复发难治组（20例）;20例健康人血清标本（健康对照组）,实时荧光定量PCR检测血清中miR-324-5p和miR-215-5p的表达水平。结果与健康对照组比较,MM患者血清中miR-215-5p表达水平下降（P<0.008 3）,初治组和难治复发组患者血清miR-324-5p表达水平下降（P<0.008 3）,巩固治疗组与健康对照组血清miR-324-5p表达水平差异无统计学意义（P>0.008 3）;巩固治疗组血清miR-324-5p表达水平高于初治组及难治复发组（P<0.008 3）;巩固治疗组血清miR-215-5p表达水平高于初治组（P<0.008 3）,巩固治疗和难治复发患者间差异无统计学意义（P>0.008 3）;初治组与复发难治组之间两种miRNAs表达水平差异无统计学意义（P>0.008 3）。miR-324-5p和miR-215-5p表达水平与β2微球蛋白和红细胞体积分布宽度呈负相关,与血红蛋白呈正相关。初治MM患者血清miR-324-5p和miR-215-5p高表达组无进展生存期高于低表达组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论miR-324-5p和miR-215-5p在MM血清中表达水平降低,miR-324-5p和miR-215-5p可能与疾病密切相关,其低表达可能提示预后不良。     

过表达miR-140-5p促进前列腺癌细胞凋亡抑制其增殖

［摘要］ 目的研究miR-140-5p在前列腺癌细胞中的表达情况,探讨 miR-140-5p在前列腺癌细胞中的生物学功能。 方法RT-qPCR方法检测前列腺癌细胞株PC3细胞及DU145细胞中miR-140-5p表达;PC3细胞中转染miR-140-5p模拟物或抑制物,CCK-8及AnnexinV/PI双染流式细胞学检测细胞活力及细胞凋亡。TCGA数据库分析高表达miR-140-5p与前列腺癌患者总生存率的关系。 结果miR-140-5p在DU145及PC3细胞中的表达明显低于RWPE-1细胞,miR-140-5p在PC3细胞中的表达明显低于DU145细胞（P＜0.05）。转染miR-140-5p模拟物的 PC3细胞中miR-140-5p相对表达量明显高于阴性对照组（P＜0.05）。miR-140-5p的模拟物转染PC3细胞48 h,过表达组细胞增殖率低于阴性对照组,凋亡率高于阴性对照组（P＜0.05）。转染miR-140-5p抑制物的PC3细胞中miR-140-5p相对表达量明显低于阴性对照组（P＜0.05）。敲低miR-140-5p表达组细胞增殖率明显高于阴性对照组,凋亡率明显低于阴性对照组（P＜0.05）。低表达miR-140-5p组患者总生存率低于高表达miR-140-5p组患者（P＜0.05）。 结论miR-140-5p在前列腺癌细胞株低表达,低表达miR-140-5p前列腺癌患者预后不良;过表达miR-140-5p可促进前列腺癌细胞凋亡,抑制其增殖。     

乳腺癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达与临床病理特征及预后的关系

目的检测微小RNA（miR）-23a、miR-1247-5p在乳腺癌组织中的表达情况,并分析miR-23a、miR-1247-5p表达与乳腺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法收集2012年1月至2013年12月在昆山市第二人民医院行手术切除的150例乳腺癌患者术后的乳腺癌组织及癌旁正常组织样本,采用RT-PCR法检测组织样本中miR-23a、miR-1247-5p表达水平。单因素分析miR-23a、miR-1247-5p表达水平与患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析不同miR-23a、miR-1247-5p表达水平患者的术后生存情况;ROC曲线分析miR-23a、miR-1247-5p对患者预后的预测价值。结果与癌旁正常组织相比,乳腺癌组织miR-23a表达水平较高、miR-1247-5p表达水平较低（均P＜0.05）。乳腺癌组织miR-23a表达水平与肿瘤直径、分子分型、淋巴结转移、TNM分期有关（均P＜0.05）,miR-1247-5p表达水平与组织病理分级、分子分型、淋巴结转移、TNM分期有关（均P＜0.05）。miR-23a高表达、miR-1247-5p低表达患者的术后5年总生存率及中位生存时间均分别低于miR-23a低表达、miR-1247-5p高表达患者（均P＜0.05）。检测乳腺癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达水平对患者预后预测的AUC分别为0.709（95%CI：0.625~0.793）、0.690（95%CI：0.606~0.775）,灵敏度分别为0.812、0.749,特异度分别为0.637、0.622。结论乳腺癌组织miR-23a表达上调,miR-1247-5p表达下调,且与患者预后有关。检测乳腺癌患者术后癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达水平对患者预后预测有一定的临床价值。     

不同认知障碍程度和疗效青少年抑郁症患者miR-381-3p、miR-124检测的临床意义

目的探讨不同认知障碍程度和疗效的青少年抑郁症患者miR-381-3p、miR-124检测的临床意义。方法选取2020年1月至2022年4月绍兴市第七人民医院收治的86例青少年抑郁症患者为研究对象,其中存在认知障碍31例,包括轻度14例、中度12例和重度5例;无认知障碍55例。所有患者接受心理干预、认知疗法、重复经颅磁刺激疗法联合草酸艾司西酞普兰、奥氮平口服治疗3个月,治疗前采用简易精神状态检查量表评估认知障碍程度,并检测miR-381-3p、miR-124相对表达量;治疗3个月后采用汉密尔顿焦虑量表和汉密尔顿抑郁量表评估疗效。比较认知障碍组与无认知障碍组、不同程度认知障碍以及不同疗效患者miR-381-3p、miR-124相对表达量,采用ROC曲线分析miR-381-3p、miR-124单独或联合检测对临床疗效的预测效能。结果认知障碍组患者miR-381-3p相对表达量明显低于无认知障碍组（P＜0.05）,miR-124相对表达量则明显高于无认知障碍组（P＜0.05）。不同程度认知障碍患者miR-381-3p、miR-124相对表达量比较,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,其中miR-381-3p相对表达量为轻度＞中度＞重度（均P＜0.05）,miR-124相对表达量为重度＞中度＞轻度（均P＜0.05）。治疗3个月后疗效良好66例,疗效不佳20例。疗效不佳组miR-381-3p相对表达量明显低于疗效良好组（P＜0.05）,miR-124相对表达量则明显高于疗效良好组（P＜0.05）。miR-381-3p、miR-124单独预测患者临床疗效的AUC分别为0.719、0.695,两者联合预测的AUC为0.782,两者联合检测的效能明显高于单独检测（均P＜0.05）。结论miR-381-3p与miR-124联合检测有助于青少年抑郁症患者认知障碍严重程度的评估和临床疗效预测。     

肺结核患者血清中miR-431、miR-194-5p、SOCS1的表达及诊断效能

目的探讨肺结核患者血清中微小RNA-431（miR-431）、微小RNA-194-5p（miR-194-5p）、细胞因子信号转导抑制物1（SOCS1）的表达及用于诊断肺结核的效能。方法选取2019年11月至2020年11月台州市第一人民医院收治的肺结核患者45例（肺结核组）、肺炎患者45例（肺炎组）、肺癌患者45例（肺癌组）及同期在本院体检中心健康体检的健康志愿者45名（对照组）作为研究对象。采用RT-PCR法检测所有研究对象入院时空腹血清miR-431、miR-194-5p表达水平,采用ELISA法检测血清SOCS1表达水平。ROC曲线评估血清miR-431、miR-194-5p、SOCS1单独检测及联合检测诊断肺结核的效能。采用Pearson相关分析miR-431、miR-194-5p、SOCS1表达水平的相关性。结果肺结核组患者血清miR-431、miR-194-5p表达水平均高于对照组和肺癌组,低于肺炎组;SOCS1表达水平低于对照组和肺癌组,高于肺炎组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。有吸烟史、有结核空洞、病灶范围大、疾病处于进展期与肺结核患者血清miR-431、miR-194-5p、SOCS1表达水平均有关（均P＜0.05）。ROC曲线显示,与血清miR-431、miR-194-5p、SOCS1单独检测以及miR-431联合miR-194-5p、miR-431联合SOCS1、miR-194-5p联合SOCS1检测相比,3项指标联合检测对肺结核的诊断效能更高（均P＜0.05）。相关性分析显示,肺结核患者血清miR-431表达水平和miR-194-5p表达水平呈正相关（r=0.680,P＜0.01）,血清miR-431、miR-194-5p表达水平与SOCS1表达水平均呈负相关（r=-0.962、-0.639,均P＜0.01）。结论肺结核患者血清中miR-431、miR-194-5p表达升高,SOCS1表达降低,3项指标之间呈线性相关,且与患者的临床病理特征有关,对肺结核的临床诊断有参考价值。     

miR-485-5p通过下调FOSL2表达影响鼻咽癌细胞增殖和凋亡

【摘要】 目的 探讨微小RNA-485-5p（miR-485-5p）对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法 选取2016年5月～2018年4月本院行手术治疗的36例鼻咽癌患者癌组织为研究对象,对应癌旁组织距离肿瘤边缘＞3cm作为对照组。RT-qPCR检测鼻咽癌组织和对应的癌旁组织中miR-485-5p和FOS样抗原2（FOSL2）mRNA水平,Pearson相关性分析鼻咽癌组织中miR-485-5p和FOSL2 mRNA表达相关性。以人永生化鼻咽上皮细胞系NP69为对照,RT-qPCR检测鼻咽癌细胞系6-10B和5 8F中miR-485-5p和FOSL2 mRNA表达水平,Western Blot检测FOSL2蛋白水平。将5-8F细胞分为miR-NC组、miR-485-5p组、si-NC组、si-FOSL2组、miR-485-5p+pcDNA3.0组和miR-485-5p+pcDNA3.0 FOSL2组,MTT实验、流式细胞术、Western Blot分别检测各组5-8F细胞增殖、凋亡及Cyclin D1、p21、Bcl-2和Bax表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-485-5p与FOSL2调控关系。结果 与癌旁组织比较,鼻咽癌组织中miR-485-5p水平降低（P＜0.05）,FOSL2 mRNA表达水平升高（P＜0.05）,且鼻咽癌组织中miR-485-5p与FOSL2 mRNA表达水平呈负相关（P＜0.05）。与NP69细胞比,鼻咽癌细胞系6-10B和5-8F中miR-485-5p表达水平显著降低（P＜0.05）,FOSL2 mRNA和蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）。与miR-NC组比较,miR-485-5p组5-8F细胞存活率、CyclinD1和Bcl-2蛋白水平降低（P＜0.05）,细胞凋亡率、p21和Bax蛋白水平升高（P＜0.05）。与si-NC组比较,si-FOSL2组5-8F细胞存活率及CyclinD1和Bcl-2蛋白水平降低（P＜0.05）,细胞凋亡率、p21和Bax蛋白水平升高（P＜0.05）。miR-485-5p在5-8F细胞中负调控FOSL2表达。与miR-485-5p+pcDNA3.0组比较,miR-4855p+pcDNA3.0 FOSL2组5-8F细胞存活率及CyclinD1和Bcl-2蛋白水平升高（P＜0.05）,细胞凋亡率、p21和Bax蛋白水平降低（P＜0.05）。结论 miR-485-5p在鼻咽癌组织和细胞中表达降低,FOSL2表达升高;过表达miR-485-5p通过靶向负调控FOSL2抑制鼻咽癌细胞增殖,并促进其凋亡。     

miR-16-5p对食管鳞癌的诊断价值和作用机制研究

目的探讨miR-16-5p在食管鳞癌患者血清和健康人群血清中的表达差异,分析其对食管鳞癌的诊断价值和作用机制。方法通过基因表达汇编（GEO）数据库探寻食管鳞癌患者和健康人群血清中差异表达的miRNA;通过qRT-PCR实验对浙江省台州医院2015年9月至2019年6月的35例食管鳞癌患者的血清与健康人群血清中的miR-16-5p进行检测和分析,并通过ROC曲线评估miR-16-5p对食管鳞癌的诊断效能;下载癌症基因组图谱（TCGA）数据分析miR-16-5p在食管鳞癌组织中的表达,分析其作用机制。结果GEO数据集数据分析结果和qRT-PCR检测结果均显示食管鳞癌患者血清miR-16-5p表达水平明显高于健康人群血清（均P＜0.05）。miR-16-5p诊断食管鳞癌的灵敏度为0.7143,特异度为0.8857,此时最佳截断值为1.3351,AUC为0.802（95％CI：0.689~0.887）。TCGA数据分析结果显示食管鳞癌患者癌组织miR-16-5p表达水平明显高于癌旁正常组织（P＜0.05）。京都基因与基因百科全书（KEGG）富集结果显示,miR-16-5p的靶基因显著富集于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K-Akt）、p53、Hippo等多条肿瘤相关信号通路（P＜0.05）。基因本体论（GO）富集结果显示,miR-16-5p的靶基因显著富集于翻译、结合蛋白、细胞黏附等（P＜0.05）。结论miR-16-5p在食管鳞癌患者血清和癌组织中均表达上调,或可作为食管鳞癌辅助诊断的生物标志物。miR-16-5p可能通过调控翻译、结合蛋白、细胞黏附从而影响食管鳞癌的发生、发展,多条肿瘤相关信号通路或参与该过程。     

miR-129-5p靶向LARP1基因调控肺癌细胞顺铂耐药

【摘要】 目的 探讨miR-129-5p能否通过调控La相关蛋白1（LARP1）表达,从而调节肺癌细胞对顺铂（DDP）的敏感性。方法 通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和蛋白质印记（Western blot）检测肺癌细胞A549和肺癌顺铂耐药细胞A549/DDP中miR-129-5p、LARP1以及多药耐药相关蛋白1（MRP1）的表达水平。将A549/DDP分为对照组（NC）、miR-con组、miR-129-5p组、si-con组和si-LARP1组、miR-129-5p+pcDNA-con组、miR-129-5p+ pcDNA-LARP1组。细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞存活率和对顺铂的半数抑制浓度（IC50）。Western blot检测细胞周期蛋白D1（CyclinD1）和MRP1蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验和Western blot检测验证miR-129-5p和LARP1的靶向调控关系。结果 与A549细胞相比,A549/DDP细胞中miR-129-5p的表达水平降低,LARP1和MRP1的表达水平升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。与miR-con组比较,miR-129-5p组A549/DDP细胞存活率、IC50、CyclinD1和MRP1蛋白表达均降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。与si-con组比较,si-LARP1组A549/DDP细胞存活率、IC50降低,CyclinD1和MRP1蛋白表达降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。与miR-129-5p+pcDNA-con组比较,miR-129-5p+- pcDNA LARP1组A549/DDP细胞存活率、IC50升高,CyclinD1和MRP1蛋白表达升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。LARP1是miR-129-5p的靶基因。过表达miR-129-5p后LARP1蛋白表达降低,沉默miR-129-5p后LARP1蛋白表达升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 miR-129-5p通过靶向下调LARP1表达抑制肺癌细胞增殖,提高肺癌细胞的顺铂敏感性。     

miR-21-5p对川崎病内皮细胞焦亡的作用及其机制研究

目的探究miR-21-5p对川崎病（KD）内皮细胞焦亡的作用及其机制。方法采用随机数字表法将16只C57BL/6小鼠分为KD组和PBS组,每组8只。利用干酪乳杆菌细胞壁提取物（LCWE）腹腔注射小鼠,构建KD模型。利用LC-WE处理小鼠冠状动脉内皮细胞（MCAECs）,构建KD体外细胞模型。在使用LCWE处理的基础上,根据转染miR-21-5p抑制剂（miR-21-5pinhibitor）或inhibitor阴性对照物（inhibitor-NC）、miR-21-5p模拟物（miR-21-5pmimics）或mimics阴性对照物（miR-NC）、用或不用含NLR家族Pyrin域蛋白3（NLRP3）抑制剂MCC950,将MCAECs分组为：（1）LCWE组和对照组;（2）LCWE+inhibitor-NC组和LCWE+miR-21-5pinhibitor组;（3）LCWE组、LCWE+MCC950组、LCWE+MCC950+miR-NC组和LCWE+MCC950+miR-21-5pmimics组。采用HE染色观察小鼠冠状动脉组织病理学变化;采用qRT-PCR法检测miR-21-5p表达变化;采用Westernblot检测焦亡相关蛋白NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1（caspase-1）、caspase-1前体（pro-caspase-1）、消皮素D蛋白（GSDMD）p30、IL-1β、IL-18的蛋白表达;采用细胞计数盒法检测细胞活力;采用乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测LDH活性。结果与PBS组相比,KD组小鼠冠状动脉组织病变明显,冠状动脉组织中NLRP3介导的细胞焦亡、miR-21-5p表达水平均升高（均P＜0.01）。与对照组相比,LCWE组MCAECs细胞活力明显降低并且miR-21-5p表达水平明显升高（均P＜0.01）。与LCWE+inhibitor-NC组相比,LCWE+miR-21-5pin-hibitor组细胞miR-21-5p表达水平、NLRP3、ASC、caspase-1、GSDMDp30、IL-1β、IL-18的蛋白表达以及LDH活性均明显降低（均P＜0.01）,而细胞活力明显升高（P＜0.05）。与LCWE组相比,LCWE+MCC950组NLRP3、ASC、caspase-1、GSDMDp30、IL-1β、IL-18的蛋白表达以及LDH活性均明显降低（均P＜0.01）,且细胞活力明显升高（P＜0.01）,而进一步转染miR-21-5pmimics明显逆转了以上变化（均P＜0.01）。结论在KD中,miR-21-5p通过激活NLRP3炎症小体调节血管内皮细胞焦亡,从而加剧血管内皮细胞损伤。提示抑制miR-21-5p可以部分改善KD期间的血管内皮细胞损伤,miR-21-5p可以作为治疗KD的潜在干预靶点。     

miR-377-5p通过下调VEGF-C对结肠癌的血管和淋巴管生成的影响研究

目的探讨miR-377-5p通过下调VEGF-C对结肠癌的血管和淋巴管生成的影响研究。方法该实验分为3组,miR-377-5p干扰组、miR-377-5p阴性对照组和miR-377-5p过表达组。采用实时荧光RT-PCR、Western blot、CCK-8、流式细胞、细胞划痕、Transwell、血管生成实验检测miR-377-5p m RNA和蛋白表达、细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭、血管和淋巴管生成。结果与正常结肠组织对比,结肠癌组织中miR-377-5p m RNA和miR-377-5p蛋白的表达明显低于正常结肠组织(均P<0.05);与miR-377-5p干扰组相比,miR-377-5p阴性对照组和miR-377-5p过表达组中的m RNA及蛋白显著升高(均P<0.05),与miR-377-5p阴性对照组相比,miR-377-5p过表达组的m RNA及蛋白明显增加(P<0.05);与miR-377-5p干扰组相比,miR-377-5p阴性对照组和miR-377-5p过表达组的结肠癌细胞增殖能力明显降低(P<0.05),与miR-377-5p阴性对照组相比,miR-377-5p过表达组的结肠癌细胞增殖能力显著降低(P<0.05);与miR-377-5p干扰组相比,miR-377-5p阴性对照组和miR-377-5p过表达组的结肠癌细胞增殖凋亡明显升高(P<0.05),与miR-377-5p阴性对照组相比,miR-377-5p过表达组的结肠癌细胞凋亡能力显著升高(P<0.05);伤口愈合实验显示,miR-377-5p过表达组的结肠癌细胞的迁移能力显著低于miR-377-5p干扰组和miR-377-5p阴性对照组(P<0.05);miR-377-5p过表达组的结肠癌细胞的侵袭能力也明显低于miR-377-5p干扰组和miR-377-5p阴性对照组(P <0.05);miR-377-5p过表达组的VEGF-A、VEGF-C和P-Akt、VEGFR-3蛋白水平显著低于miR-377-5p干扰组和miR-377-5p阴性对照组(P<0.05);miR-377-5p过表达组的MVD(微血管密度)和LMVD(淋巴微血管密度)显著低于miR-377-5p干扰组和miR-377-5p阴性对照组(P<0.05)。结论 miR-377-5p在结肠癌中低表达,抑制了结肠癌细胞的增殖、细胞迁移和侵袭,促进了结肠癌细胞的凋亡能力,并直接靶向VEGF-C抑制肿瘤的血管和淋巴管生成。     

血清miR-141和miR-195-5p在乳腺癌早期诊断中的临床意义

 目的 观察血清miR-141和miR-195-5p在乳腺癌早期诊断中的临床意义。方法 选择2015年1月至2018年6月在复旦大学附属华山医院经病理确诊的乳腺癌患者126例,作为乳腺癌组;选择同期在我院活组织检测为乳房良性病变的患者和健康体检者,分别作为良性病变组（75例）和对照组（45例）。用qRT-PCR法检测各组血清miR-141和miR-195-5p水平。并用miR-141和miR-195-5p质粒转染到人乳腺癌细胞MX-1中,观察其增殖和迁移能力。观察各组血清miR-141和miR-195-5p水平变化,乳腺癌患者术后血清miR-141和miR-195-5p水平变化,乳腺癌患者血清miR-141和miR-195-5p水平与临床指标的相关性,及其诊断乳腺癌的灵敏度和特异性。结果 乳腺癌组血清miR-141水平显著高于良性病变组和健康对照组（P<0.01）,良性病变组血清miR-141水平高于健康对照组（P<0.01）;乳腺癌组血清miR-195-5p水平明显低于良性病变组和健康对照组（P<0.01）,良性病变组血清miR-195-5p水平较健康对照组明显降低（P<0.01）,手术后乳腺癌组和乳腺良性病变组血清miR-141水平较手术前明显降低（P<0.01）,而miR-195-5p水平较手术前明显升高（P<0.01）。乳腺癌患者血清miR-141和miR-195-5p水平与年龄和肿瘤直径无明显相关性,而与淋巴结转移、雌激素受体（estrogen receptor,ER）、孕激素受体（progesteron receptor,PR）、人类表皮因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2,HER-2）、TNM分期、分子分型和组织分型有明显相关性（P<0.01）,多元线性回归分析显示血清miR-141和miR-195-5p表达水平与淋巴结转移、PR、TNM分期和分子分型呈线性相关（P<0.05）。MX-1细胞转染miR-141和miR-195-5p质粒后,miR-141促进MX-1细胞的增殖和迁移能力（P<0.01）,而miR-195-5p抑制MX-1细胞的增殖和迁移能力（P<0.01）。在乳腺癌诊断方面,联合检测的灵敏度为88.1%,特异性为92.0%,AUC为0.964,明显优于单个指标miR-141（Z=3.413,P<0.01）和miR-195-5p（Z=3.426,P<0.01）,而血清miR-141和miR-195-5p的AUC相比较差异无统计学意义。结论 miR-141和miR-195-5p参与乳腺癌疾病的发生发展过程,与乳腺癌细胞增殖和迁移密切相关,在乳腺癌早期诊断中具有重要的临床意义。     

miR-144-3p在大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的表达及其靶向调控作用

目的探讨在骨髓间充质干细胞成骨分化过程中,miR-144-3p表达的生理功能和作用机制,并预测其靶基因,为成骨细胞 分化的深入研究提供实验依据。方法采用大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）,并在体外诱导间充质干细的成骨分化,通过 qRT-PCR 检测成骨分化标志基因（Runx2, OCN）以及miR-144-3p 的表达;通过向BMSCs 株转染miR-144-3p mimic 以及 miR-144-3p inhibitor,检测miR-144-3p 表达对BMSCs分化的影响,并通过Western blot 以及qRT-PCR检测miR-144-3p 靶蛋 白在RNA水平以及蛋白水平的表达变化。结果在体外诱导BMSCs成骨分化过程中,成骨分化标志基因（Runx2, OCN）的 表达量逐渐升髙,而miR-144-3p 的表达量则逐渐降低,到诱导成骨第21 天表达水平最低;检测各组ALP活性发现,相比于 对照组miR-144-3p mimics 转染组ALP活性显著降低（P<0.05）,miR-144-3p inhibitor 转染组ALP活性显著升高（P<0.05）;运 用多种靶基因预测数据库TargetScan、microRNA.org和miRanda对miR-144-3p进行靶基因的预测分析发现,smad4最可能是 miR-144-3p的靶基因;qRT-PCR结果表明,smad4在各组中的表达水平差异无统计学意义（P>0.05）;Western blot结果显示,smad4 在miR-144-3p mimics转染组表达显著下降,在miR-144-3p inhibitor转染组则显著升高,相比于对照组差异均有统计学意义（P< 0.05）。结论miR-144-3p参与调控大鼠BMSCs成骨分化,其抑制成骨分化的功能是通过降低smad4转录后的表达水平来实现。     

MicroRNA-590-5p、microRNA-103、microRNA-34c-5p、Dicer 及BRMS -1 基因在肺癌中的表达研究

目的 探讨microRNA -590-5p（miR -590-5p ）、miR -103、miR -34c -5p 、Dicer 及BRMS -1 在肺 癌中表达及相互间关系。方法 选取47 例肺癌患者的癌组织及癌旁正常组织,利用Trizol 提取总RNA,实 时荧光定量聚合酶链反应检测基因的相对表达量。结果 肺癌组织与癌旁正常组织miR -103、miR -34c -5p 、 Dicer 及BRMS -1 基因表达水平比较,差异有统计学意义（P <0.05）,miR -34c -5p 与P53 呈正相关（P <0.05）, miR -103 与多药耐药相关蛋白呈正相关（P <0.05）,Dicer 与miR -34c -5p 、miR -103 及miR -590-5p 呈负相 关（P <0.05）。结论 在肺癌组织中Dicer 基因表达与miR -34c -5p 呈负相关,可能通过抑制癌基因的表达, 抑制肺癌的发生。     

miR-142-3p、miR-216a、miR-107-5p在ICU血液净化AKI患者中的表达及对疗效的评估价值分析

目的 分析miR-142-3p、miR-216a、miR-107-5p在ICU血液净化急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)患者中的表达及对疗效的评估价值。方法 选取我院ICU收治的行血液净化治疗的AKI患者132例作为AKI组,同期选取于我院行健康体检的健康志愿者80例作为健康组。检测miR-142-3p、miR-216a、miR-107-5p表达量,分析其在ICU血液净化AKI患者中的表达,所有患者均行血液净化治疗,对比患者治疗前后及不同疗效下上述指标表达量,分析三者对疗效的评估价值。结果 与健康组相比,AKI组miR-142-3p、miR-107-5p表达升高,miR-216a表达降低(P<0.05)。与治疗前相比,治疗后AKI组患者miR-142-3p、miR-107-5p表达升高,miR-216a表达降低(P<0.05)。根据治疗是否有效分为治疗有效组110例,治疗无效组22例。与治疗有效组相比,miR-142-3p、miR-107-5p在治疗无效组表达升高,miR-216a在治疗无效组中表达降低(P<0.05)。与存活患者相比,mi...     

血浆miR-769-5p、miR-320a和miR-22-3p水平检测在结核分枝杆菌感染的肺结核诊断中的应用价值研究

目的 研究miR-769-5p、miR-320a和miR-22-3p这三种血浆游离miRNAs水平在诊断结核分枝杆菌感染的肺结核中的价值。方法 随机选择95例结核分枝杆菌感染的肺结核患者作为病例组,以95例健康体检者作为对照组,采用反转录实时定量PCR(RT-PCR)检测血浆中游离的miR-769-5p、miR-320a和miR-22-3p水平。结果 血浆miR-769-5p、miR-320a和miR-22-3p水平与年龄、性别没有显著的相关性(P>0.05)。病例组患者血浆miR-769-5p、miR-320a和miR-22-3p水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。血浆miR-769-5p水平诊断结核分枝杆菌感染的肺结核的曲线下面积(AUC)为0.92,血浆miR-320a水平诊断结核分枝杆菌感染的肺结核的AUC为0.84,血浆miR-22-3p水平诊断结核分枝杆菌感染的肺结核的AUC为0.70。结论 血浆游离miR-769-5p、miR-320a和miR-22-3p具有潜在的肺结核诊断价值。     

miR-590-5p和miR-590-3p参与肝细胞肝癌发展的机制

目的研究miR-590的两个臂—miR-590-5p和miR-590-3p对肝癌细胞增殖能力的影响,以及参与肿瘤发生发展的机制。
方法利用miRNA芯片、QPCR对肝癌标本和各细胞株miR-590的表达谱系进行分析和验证。通过脂质体将miR-590 mimic或
inhibitor 转染正常肝细胞或肝癌细胞,MTT生长曲线分析和软琼脂克隆形成实验检测转染后细胞增殖及存活能力的变化。
Targetscan预测miR-590-5p和miR-590-3p的靶基因,并通过萤光素酶报告系统以及western blot进行验证。结果miRNA芯片
结果显示3个肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma, HCC）组织相对于癌旁正常组织,miR-590-5p和miR-590-3p表达上调。通
过QPCR验证了10 例临床HCC肿瘤标本发现80%的HCC组织相对于癌旁组织miR-590-5p 和miR-590-3p 均同步显著上调。
QPCR结果进一步发现,HepG2、Hep3B、Huh7三株HCC细胞株相对于正常肝细胞株L-O2 miR-590-5p/3p同样表达上调。MTT
和软琼脂克隆形成结果显示,L-O2 分别过表达miR-590-5p 和miR-590-3p,细胞的增殖能力都显著增加（P<0.05）;而HepG2、
Hep3B、Huh7分别下调miR-590-5p和miR-590-3p的表达后,细胞的增殖能力也都显著降低（P<0.05）。Targetscan预测,PDCD4
和PTEN 分别作为miR-590-5p 和miR-590-3p 的潜在靶基因。萤光素酶报告系统以及western blot 结果显示miR-590-5p 和
miR-590-3p 可以分别直接下调靶基因PDCD4 和PTEN的表达（P<0.05）。进一步我们发现miR-590-3p 通过下调PTEN激活
PI3K-AKT信号通路,促进AKT1-S473的磷酸化水平。结论在HCC发展过程中miR-590扮演着重要的致癌因子角色,我们结
果发现miR-590的两个臂都具有促进肿瘤发生的生物学功能,它们分别通过靶向调节抑癌基因PDCD4和PTEN的表达来促进
HCC细胞的增殖和存活,并激活核心的PI3K-AKT肿瘤信号通路。由此可见miR-590 在HCC发生发展过程中具有重要的意
义,也可作为临床诊治潜在的新靶标。
     

miR-144和miR-502-3p在原发性肝细胞癌术后复发患者中的表达及临床意义

目的探讨miR-144和miR-502-3p在原发性肝细胞癌术后复发患者中的表达及临床意义。方法从我院肝癌数据标本库中挑选82例原发性肝癌深低温冻存组织标本。其中50例早期复发组(术后1年内肝内出现复发病灶);32例非早期复发组(术后超过2年未出现肝内复发病灶)。运用实时荧光定量PCR验证miR-144、miR-502-3p在两组肝癌组织中的表达水平。结果相对于非早期复发组,miR-144在肝癌早期复发组中表达上调[(43.893±107.890)vs(6.321±6.845),P=0.018];其在肝癌组织中的表达仅与肝癌术后早期复发有关(P<0.05)。而miR-502-3p在肝癌早期复发组中表达下调[(6.702±9.775)vs(26.467±39.613),P=0.009];其在肝癌组织中的表达与肿瘤直径、肝癌术后早期复发、脉管癌栓、肝硬化、Edmonson病理分级有关(P<0.05)。结论 miR-144、miR-502-3p与肝癌的早期复发转移密切相关,并且可能是肝癌早期复发的分子标记物以及未来肝癌靶向治疗的有效靶点。