Foxp3基因在URSA患者外周血中的表达及其临床意义

目的探讨叉头样转录因子P3(Foxp3)基因在原因不明复发性流产(URSA)患者外周血中的表达及其临床意义。方法选取本院2017年9月至2018年9月收治的55例URSA早孕妇女作为研究组,同时选取同期50例正常早孕妇女为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Foxp3 mRNA的表达量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素6(IL-6)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素2(IL-2)、α干扰素(IFN-α)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)的水平;采用流式细胞术检测外周血T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(Tim-3)与程序性细胞死亡分子-1(PD-1)的表达;采用Pearson法分析URSA患者外周血中Foxp3与免疫细胞因子、Th1/Th2型细胞因子、PD-1及Tim-3的相关性。结果与对照组比较,研究组外周血Foxp3 mRNA的表达水平显著降低(P0.05);与对照组比较,研究组外周血IL-17、IL-6水平显著升高,TGF-β水平显著降低(P0.05);与对照组比较,研究组外周血IL-2、IFN-α、IFN-γ水平显著升高(P0.05),IL-4、IL-10水平显著降低(P0.05);与对照组比较,研究组外周血PD-1、Tim-3的表达水平显著降低(P0.05);Foxp3与IL-17、IL-6、IL-2、IFN-α、IFN-γ呈负相关(P0.05),而与TGF-β、IL-4、IL-10、PD-1、Tim-3呈正相关(P0.05)。结论 Foxp3基因在URSA患者外周血中表达下调,并可能通过引起母体免疫机制紊乱从而促进URSA的发生及发展。     

原因不明复发性流产患者外周血PD-1、Th1/Th2型细胞因子水平测定及其相关性研究

目的探讨外周血程序性细胞死亡分子1(PD-1)及血清中Th1/Th2型细胞因子变化在原因不明复发性流产(URSA)发病中的作用。方法采用流式细胞术测定140例URSA患者接受淋巴细胞免疫治疗前后外周血PD-1水平;采用ELISA法测定患者治疗前后血清Th1(IL-2、IFN-γ)/Th2(IL-4、IL-10)型细胞因子水平,同时以102例正常已生育妇女作为对照组。结果 (1)淋巴细胞免疫治疗前与对照组相比,PD-1和Th2型细胞因子(IL-4和IL-10)显著下降(P均<0.05)。(2)淋巴细胞免疫治疗后与治疗前相比,Th1型细胞因子(IL-2和IFN-γ)含量明显下调(P均<0.05)。(3)淋巴细胞免疫治疗后与对照组相比,PD-1、Th1/Th2型细胞因子水平无显著性差别(P均>0.05)。(4)URSA患者外周血PD-1含量和血清中Th2型细胞因子水平呈正相关(r=0.67,r=0.81,P均<0.05);与Th1型细胞因子呈负相关(r=-0.55,r=-0.73,P均<0.05)。(5)淋巴细胞免疫治疗后,妊娠成功的妇女PD-1表达水平显著高于妊娠失败者(P<0.05)。结论 PD-1可能通过下调Th1/Th2型细胞因子的水平抑制URSA的发生发展。     

结核性脑膜炎患者脑脊液中细胞因子水平的诊断价值

目的:探讨分泌性靶抗原-6(ESAT-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)和干扰素-γ(IFN-γ)对于早期诊断结核性脑膜炎(TBM)的临床应用价值。方法:选取48例TBM患者为研究组,29例非结核性中枢神经系统感染患者为对照组,35例普通头痛患者为正常组。采用ELISA法分别检测所有患者脑脊液中的ESAT-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ水平。结果:研究组的ESAT-6、TNF-α、IFN-γ水平与对照组相比增高,研究组与对照组的ESAT-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ水平均高于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组的ESAT-6与IFN-γ水平呈正相关(r=0.96,P<0.05)。4项指标联合检测的灵敏度明显高于使用ESAT-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ单一指标,差异均具有统计学意义(χ2=10.936,18.104,12.647,13.978;P<0.05)。结论:ESAT-6、TNF-α、IFN-γ和IL-10在TBM患者脑脊液中的表达水平显著升高,对早期诊断TBM具有重要的临床价值,而且4项联合检测较单一检测的诊断效果更佳。     

基于微小RNA-142-3p与细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4的相互作用探讨细胞因子在原因不明反复性流产的作用

目的 探讨原因不明反复性流产(URSA)过程中微小RNA-142-3p(miR-142-3p)与细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)的相互作用对细胞因子影响的可能机制。方法 选取2016年9月至2017年12月中国科学院大学深圳医院(光明)收治的45例URSA患者纳入流产组,选取同期于中国科学院大学深圳医院(光明)进行检查的40例健康早孕者作为对照组进行回顾性研究。采用流式细胞仪检测两组研究对象外周血中CD4⁺CD25⁺Treg细胞百分比,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测Th1型细胞因子与Th2型细胞因子的表达水平。结果 流产组研究对象CD4⁺CD25⁺Treg细胞百分比低于对照组(P <0.05);流产组研究对象外周血中白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-4(IL-4)的表达水平低于对照组(P <0.05),而白细胞介素-2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的表达水平均高于对照组(P<0.05);流产组研究对象的IL-2/IL-10、IFN-γ/IL-4比值...     

外周血T淋巴细胞亚群及Th1、Th2细胞因子在呼吸道合胞病毒感染患者中的检测价值探究

目的观察与研究呼吸道合胞病毒感染患者外周血T淋巴细胞亚群及Th1、Th2细胞因子的水平变化情况。方法选取2017年10月至2020年3月的90例呼吸道合胞病毒感染患者为观察组,同时期90例体检健康的同龄者为对照组。比较两组的外周血T淋巴细胞亚群指标(CD3~+、CD4~+及CD4/CD8)及血清Th1细胞因子[白细胞介素(IL)-2、γ干扰素(IFN-γ)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、Th2细胞因子(IL-4、IL-10及IL-13)水平,同时比较观察组中不同严重程度者的上述血液指标水平,采用Spearman秩相关分析分析上述血液指标与呼吸道合胞病毒感染严重程度的关系。结果观察组的外周血T淋巴细胞亚群(CD3~+、CD4~+及CD4/CD8)及血清IL-2、IFN-γ水平均明显低于对照组,血清TNF-α及Th2细胞因子(IL-4、IL-10及IL-13)水平均明显高于对照组,且观察组中不同严重程度者的上述血液指标水平比较,差异有统计学意义(P0.05)。Spearman秩相关分析显示,外周血T淋巴细胞亚群指标及血清IL-2、IFN-γ与呼吸道合胞病毒感染严重程度均呈负相关(r=-0.919～-0.762,P0.05),血清TNF-α及Th2细胞因子与呼吸道合胞病毒感染严重程度均呈正相关(r=0.785～0.923,P0.05)。结论呼吸道合胞病毒感染患者外周血T淋巴细胞亚群及Th1、Th2细胞因子呈现异常表达的状态,且与疾病严重程度密切相关,因此具有较高的临床检测价值。     

胸段硬膜外阻滞改善老年食管癌患者术后免疫抑制的机制

目的探讨胸段硬膜外阻滞对老年食管癌患者术后免疫功能的影响。方法选取40例65岁以上行右胸上腹两切口食管癌根治术患者,随机分为全身麻醉组(GA组)和全身麻醉复合胸段硬膜外阻滞组(GEA组)。检测术前、术后48 h受试者血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-2(IL-2)、白介素-10(IL-10),外周血单个核细胞(PBMC)程序性细胞死亡蛋白-1配体(PD-L1)及CD8~+T细胞程序性细胞死亡蛋白-1(PD-1)表达量,CD8~+T细胞凋亡率,以及CD8~+T细胞分泌γ-干扰素(IFN-γ)的能力。结果 2组术后48 h TNF-α、IL-2、IL-10水平均高于术前,其中GEA组TNF-α、IL-2、IL-10水平显著低于GA组(P0.05)。2组术前PD-L1表达量、PD-1含量、CD8~+T细胞凋亡率、IFN-γ无显著差异(P0.05),术后48 h GEA组PBMC PD-L1表达量显著低于GA组(P0.05)、CD8~+T细胞PD-1表达显著高于GA组(P0.05),CD8~+T细胞凋亡率显著低于GA组(P0.05),但CD8~+T细胞分泌IFN-γ水平显著高于GA组(P0.05)。结论胸段硬膜外阻滞可能通过降低围术期的应激反应来部分逆转围术期单核细胞PD-L1的上调,从而减轻T细胞IFN-γ的分泌和增殖的抑制,改善老年食管癌患者围术期免疫功能。     

肾癌患者外周血Th1/Th2和Tc1/Tc2细胞因子的表达

目的检测不同临床分期肾癌患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞中细胞因子的表达水平,分析Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移对肾癌发生和转移的临床意义。方法用流式细胞仪检测60例不同分期肾癌患者和40例正常对照者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞分泌的IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4、IL-6和IL-10的表达水平。结果与正常对照组相比,无症状型肾癌患者各细胞因子的表达无明显差异,而局限型患者Th1、Tc1类细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平降低(P<0.01),局部进展型和转移型肾癌患者Th1、Tc1类细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平明显下降(P<0.01);而Th2、Tc2类细胞因子IL-4、IL-6(P<0.05,P<0.01)分泌水平升高。结论 Th1/Th2偏移和Tc1/Tc2偏移促进了晚期肾肿瘤的进展和转移。T淋巴细胞亚群改变导致免疫功能失调,使肿瘤细胞发生免疫逃逸。     

慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者Th1/Th2细胞的细胞因子变化及与肝功能指标的关系

目的利用流式细胞微球芯片捕获技术(CBA)检测慢加急性乙型肝炎肝衰竭(ACHBLF)患者辅助性T细胞1/2(Th1/Th2)分泌的细胞因子水平,探讨其在ACHBLF中变化的意义。方法收集33例ACHBLF、20例慢性乙型肝炎(CHB)患者血清及15名健康志愿者血清,CBA检测血清Th1/Th2细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,分析Th1/Th2细胞因子在ACHBLF患者血清中的变化。结果 ACHBLF患者外周血循环中TNF-α、IFN-γ、IL-4及IL-6的水平较CHB患者及健康对照者显著升高(P0.05);ACHBLF患者血清中IL-2及IL-10与CHB组和健康对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。ACHBLF患者血清中IL-4、IL-6、TNF-α及IFN-γ水平与总胆红素(TBil)、白蛋白(Alb)和凝血酶原活动度(PTA)间无明显相关性。结论 CBA可同时检测各种细胞因子,适合临床应用;ACHBLF患者TNF-α、IFN-γ、IL-4和IL-6的变化可能参与ACHBLF的发生和发展,未发现上述细胞因子与反映肝功能指标间的相关关系。     

乙型肝炎病毒感染孕妇IL-12、IL-18的表达与胎儿宫内感染的相关性研究

目的探讨白细胞介素-12(IL-12)及白细胞介素-18(IL-18)与干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)的相关性在乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染的意义。方法对105例血清乙肝表面抗原(HBsAg)阳性的孕妇(研究组,宫内感染13例,宫内未感染92例)和42例血清HBsAg阴性的正常孕妇(对照组)均采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定孕妇外周血乙型肝炎5项指标和细胞因子IL-12、IL-18、IFN-γ、IL-4水平;测定新生儿脐血乙型肝炎5项和HBV-DNA水平。结果宫内感染组孕妇的IL-12、IL-18、IFN-γ水平显著低于宫内未感染组及对照组,IL-4水平则显著高于宫内未感染组及对照组(均P<0.01)。宫内未感染组的IL-12、IL-18、IFN-γ和IL-4水平与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。3组孕妇外周血IL-12、IL-18与IFN-γ呈显著正相关(r=0.956、0.927、0.885及r=0.926、0.943、0.856,均P<0.01),与IL-4水平呈显著负相关(r=-0.926、-0.921、-0.913及r=-0.935、-0.982、-0.939,均P<0.01)。结论IL-12、IL-18既可加强HBV感染的T细胞的反应和IFN-γ的生成,又能增强Th1介导的细胞免疫功能,有望成为HBV宫内感染免疫治疗的新靶位。     

肺结核患者血清与痰上清液中TNF-α、IL-4、IFN-γ、TGF-β的表达及意义

目的探讨肺结核患者血清与痰上清液中白介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、转化生长因子β(TGF-β)的表达及临床意义。方法 40例肺结核患者空腹抽取外周静脉血、采集痰上清液,酶联免疫吸附法(ELISA)检测两者中的IL-4、TNF-α、IFN-γ、TGF-β水平,聚合酶链式反应法(PCR)检测结核菌的感染程度。结果肺结核患者痰上清液中IL-4、TNF-α、IFN-γ、TGF-β水平显著高于血清中(P0.01);痰菌量4+的痰上清液中的IL-4、TNF-α、IFN-γ、TGF-β的水平显著高于痰菌量+~3+的(P0.05);痰上清液中IL-4水平与TNF-α水平呈正相关(r=0.543,P0.05),血清中IFN-γ与TGF-β呈正相关(r=1.137,P0.05)。结论肺结核患者痰上清液中IL-4、TNF-α、IFN-γ、TGF-β表达水平明显高于外周血,随着痰菌量的增多,痰上清液中IL-4、TNF-α、IFN-γ、TGF-β的表达水平不同程度升高。     

hsa-miR-144在结核性胸膜肥厚患者外周血中的表达及其与炎性因子IFN-γ、TNF-α、IL-6的关系

目的探讨结核性胸膜肥厚患者外周血单个核细胞(PBMC)中hsa-miR-144的表达及其与炎性因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素6 (IL-6)的关系。方法抽取80例结核性胸膜肥厚患者、80例健康对照者外周血标本,使用Ficoll淋巴细胞分离液提取外周血标本中的PBMC,采用RT-PCR法测定PBMC中的hsa-miR-144表达水平,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血浆中炎性因子IFN-γ、TNF-α、 IL-6表达水平,分析结核性胸膜肥厚患者hsamiR-144与炎性因子IFN-γ、TNF-α、IL-6的相关性。结果 RT-PCR检测结果显示,结核性胸膜肥厚组PBMC中的hsamiR-144水平明显高于健康对照组(P<0.01)。ELISA法检测结果显示,结核性胸膜肥厚组血浆炎性因子IFN-γ、TNF-α、IL-6均明显高于健康对照组(P<0.05)。spearman相关性分析显示,结核性胸膜肥厚患者外周血PBMC中hsa-miR-144与血浆炎性因子IFN-γ、TNF-α、IL-6水平存在相关性(r=0.384,P<0.05;r=0.396,P<0.05;r=0.361,P<0.05)。结论 hsa-miR-144在结核性胸膜肥厚患者外周血中呈高水平表达,且与血浆中炎性因子IFN-γ、TNF-α、IL-6呈正相关性,提示该hsa-miR-144可能参与了结核性胸膜肥厚的发生与进展。     

微小核糖核酸155对不稳定性心绞痛患者CD4+T淋巴细胞的调控作用

目的 探讨微小核糖核酸-155 (miRNA-155)对不稳定性心绞痛(UAP)患者外周血CD4 +T淋巴细胞的调控作用,从而阐明miRNA-155在UAP发病中的作用机制。方法 选取住院的UAP患者21例,同时以疑似不典型冠心病症状而冠脉造影正常的住院患者18例作为对照组。采用实时定量PCR检测外周血CD4+T淋巴细胞miRNA-155表达水平,酶联免疫法检测血清干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)表达水平。免疫磁珠法分选10例UAP患者外周血CD4 +T淋巴细胞,将分离的细胞分为对照组、miRNA-155组和miRNA-155抑制物组。对培养的细胞进行干预后,流式细胞术检测辅助性T细胞Th1和Th2数量,实时定量PCR及蛋白免疫印迹法检测IFN-γ受体α(interferon gamma receptor alpha,IFN-γRα)、T细胞表达T盒(T-box expressed in T cells,T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA-binding protein 3,GATA-3)的mRNA及蛋白表达,酶联免疫法检测细胞培养液上清IFN-γ、IL-4的表达。结果 UAP患者外周血CD4+T淋巴细胞miRNA-155与血清IFN-γ表达较对照组差异具有统计学意义(P＜0.01),且miRNA-155的表达与血清IFN-γ呈显著正相关(r=0.842,P＜0.01)。与对照组比较,体外培养CD4 +T淋巴细胞miRNA-155组Th1数量、T-bet mRNA及蛋白、培养液上清IFN-γ表达显著增加,IFN-γRα蛋白表达降低,差异具有统计学意义(均P ＜0.01);Th2数量、GATA-3、IFN-γRα的mRNA、GATA-3蛋白表达及培养液上清IL-4无明显改变(均P＞0.05);miRNA-155抑制物可有效地阻断miRNA-155的上述作用。结论 miRNA-155主要通过影响Th1细胞的分化和功能,参与对CD4 +T淋巴细胞的调控,在UAP发病机制中具有重要的作用。     

强直性脊柱炎外周血Th17细胞的检测及意义

目的探讨Th17细胞在强直性脊柱炎(AS)患者外周血中的水平及意义。方法取20例AS患者(分AS病情稳定组及活动组各10例)和健康人外周血单个核细胞(PBMC)、免疫磁珠分选CD4+T细胞,用或不用非特异性刺激剂(anti-CD3、anti-CD28),然后加佛被酯/离子霉素,经固定/透膜处理进行细胞内染色,流式细胞术检测CD4+T细胞内白细胞介素-17(IL-17)、γ-干扰素(IFN-γ)、及IL-6水平。结果免疫磁珠分选CD4+T细胞纯度达90%以上。AS病情活动组IL-17表达水平较病情稳定组和健康对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.01)。用anti-CD3、anti-CD28刺激后,CD4+T细胞IL-17胞内表达水平较无刺激有一定的增加。AS患者CD4+T细胞IFN-γ胞内表达水平呈现与IL-17表达相似的特点。结论 AS患者外周血CD4+T细胞胞内IL-17和IFN-γ呈高表达,提示分泌IL-17的Th17细胞和分泌IFN-γ的Th1细胞共同参与了AS发病过程。     

膀胱癌患者外周血中IL-2、IFN-γ、TNF-α的表达及临床意义

目的探讨膀胱癌患者外周血中白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平及临床意义。方法选择60例膀胱移行细胞癌患者为研究对象,病理分级:I级26例,II-III级34例;临床分期[1]:Tis-T1期24例;T2-T4期36例。选择40例膀胱良性病变患者为疾病对照组。另选择健康者60例为对照组。采用ELISA方法检测入组对象IL-2、IFN-γ、TNF-α水平。结果膀胱癌组血清TNF-α水平高于膀胱良性病变组和对照组,差异有统计学意义(P0.01),膀胱良性病变组和对照组血清TNF-α水平无显著差异(P0.05),膀胱癌组血清IL-2、IFN-γ水平低于膀胱良性病变组和对照组,差异有统计学意义(P0.01),膀胱良性病变组和对照组血清IL-2、IFN-γ水平无显著差异(P0.05);膀胱癌不同病理分级之间血清IL-2、IFN-γ、TNF-α水平存在明显差异,随着膀胱癌病理分级的升高,血清IL-2、IFN-γ水平呈下降趋势,TNF-α水平呈上升趋势,三组间两两比较差异有统计学意义(P0.01);随着膀胱癌临床分期的升高,血清IL-2、IFN-γ水平呈下降趋势,TNF-α水平呈上升趋势,三组间两两比较差异有统计学意义(P0.01);IL-2、IFN-γ水平与膀胱癌病理分级、临床分期均呈负相关(P0.05);TNF-α水平与膀胱癌病理分级、临床分期呈正相关(P0.05);IL-2、IFN-γ、TNF-α与年龄、病程、BMI等因素无明显相关性(P0.05)。结论 TNF-α在膀胱癌患者外周血中呈现高表达,IL-2、IFN-γ在膀胱癌中低表达,IL-2、IFN-γ、TNF-α与膀胱癌的发生、发展有关。     

肺结核合并慢性阻塞性肺疾病患者细胞免疫状态评价

目的评价肺结核合并慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者免疫应答的变化及其意义。方法入选2009年1月至2011年12月同济大学附属上海市肺科医院住院患者中肺结核合并COPD(简称TB合并COPD组)152例,肺结核不合并COPD(简称TB组)150例,COPD不合并肺结核(简称COPD组)157例,健康对照50例。用双标记抗体流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群。采用酶联免疫法分别检测各组血清中白细胞介素1(IL-1)、可溶性白细胞介素2受体(s IL-2R)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-5、IL-6、干扰素γ(IFN-γ)水平。两组比较采用Mann-Whitney(M-W)U检验,多组比较采用Kruskal-Wallis(K-W)H检验,相关性分析采用Spearman检验。结果 TB合并COPD组、TB组、COPD组三组外周血CD4+T细胞百分比分别为35.60%(27.80%,41.70%),38.05%(30.50%,43.80%),34.00%(27.60%,40.20%),显著低于健康对照组40.20%(37.00%,46.40%),P=0.001;TB合并COPD组CD4+T细胞百分比低于TB组,P=0.02;TB合并COPD组、TB组、COPD组三组CD8+T细胞百分比分别为26.60%(21.88%,30.95%),26.60%(21.130%,33.88%),25.17%(17.70%,31.50%),显著高于健康对照组21.95%(17.55%,26.48%),P=0.000。TB合并COPD组、TB组、COPD组三组CD4+/CD8+比值分别为1.41(0.91,1.86),1.52(0.93,1.86),1.45(1.01,1.99),显著低于健康对照组1.92(1.52,2.48),P=0.000。血清IL-1、s IL-2R、TNF-α、IL-5、IL-6、IFN-γ的浓度,三组均显著高于健康对照组(P<0.05);s IL-2R、IL-5、IL-6、TNF-α浓度在TB合并COPD组均高于TB组(P<0.05);s IL-2R、IL-6、TNF-α、IFN-γ在TB合并COPD组显著高于COPD组(P<0.05)。在COPD组TNF-α、IL-6与FEV1%负相关,r值分别为-0.352,-0.269,P=0.000。结论肺结核合并COPD患者细胞免疫功能受损,且受损程度比肺结核患者严重。     

肝癌患者血清Th1/Th2相关因子与免疫功能的相关性研究

目的探讨肝癌患者血清Th1/Th2相关因子与免疫功能的相关性。方法选取2015年4月至2016年12月该院1 100例肝细胞癌患者和1 100例健康体检者分别作为研究组和对照组,比较两组血清干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-12、IL-4、IL-6、IL-10、C3补体、C4补体及CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、CD19~+B细胞、CD16/65~+NK细胞水平,分析它们之间的相关性,并对Th1与Th2平衡关系进行研究。结果研究组IFN-γ、TNF-α、IL-12水平明显低于对照组,IL-4、IL-6、IL-10水平明显高于对照组(P0.05);研究组外周血CD4~+T细胞、CD16/65~+NK细胞水平明显低于对照组,CD8~+T细胞、C3补体、C4补体水平明显高于对照组(P0.05);两组外周血CD19~+B细胞水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。肝癌患者血清IFN-γ、TNF-α、IL-12水平与CD4~+T细胞、CD16/65~+NK细胞、C3补体、C4补体水平呈正相关,与CD8~+T细胞水平呈负相关(P0.05);IL-4、IL-6、IL-10水平与CD4~+T细胞、CD16/65~+NK细胞、C3补体、C4补体水平呈负相关,与CD8~+T细胞水平呈正相关(P0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,Th1/Th2比值若小于1,其恶性肿瘤发生发展的风险上升。结论 Th1/Th2相关细胞因子水平与机体细胞免疫和天然免疫功能关系密切,而肝癌患者存在Th1/Th2比值异常,并影响相关细胞因子的生成。     

趋化因子受体CCR4与变应性鼻炎发病机制的相关性研究

目的探讨CCR4与变应性鼻炎(AR)发病机制的相关性。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)检测20例AR患者和20例健康人血清中IFN-γ、IL-4水平,流式细胞仪检测外周血CCR4+CD4+T细胞占CD4+T细胞百分比,免疫组化检测CCR4在鼻黏膜表达情况。结果与对照组比较,AR患者血清中IFN-γ的水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);IL-4水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);CCR4+CD4+T细胞占CD4+T细胞百分比,AR组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化鼻黏膜CCR4表达水平,AR明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。AR组外周血CD4+T细胞中CCR4+CD4+T细胞数量所占的百分比与血清IL-4含量呈正相关(r=0.873,P<0.05),与鼻黏膜CCR4表达量呈正相关(r=0.826,P<0.05),与血清INF-γ含量呈负相关(r=-0.801,P<0.05)。结论趋化因子受体CCR4与AR发病机制相关。     

过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞TLR6表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答相关性研究

目的探讨TLR6在过敏性紫癜(HSP)患儿外周血单个核细胞(PBMC)的表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答的相关性,探讨TLR6与HSP发病机制的关系。方法选取我院住院的急性期HSP患儿42例为研究对象,另选取健康儿童30例作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞TLR6蛋白表达,实时荧光定量PCR技术检测外周血单个核细胞MyD88mRNA的基因相对表达量,ELISA法检测血浆IFN-γ、IL-4、IL-17水平。结果 (1)HSP患儿外周血单个核细胞TLR6蛋白表达(TLR6阳性细胞百分率及平均荧光强度)显著高于正常对照组(t'=9.40,P<0.01;t'=10.49,P<0.01),HSP组外周血单个核细胞MyD88 mRNA相对表达量显著明显高于正常对照组(t'=2.46,P<0.01)。(2)HSP组血浆IL-4水平显著高于对照组(t'=3.44,P<0.01),IFN-γ水平高于对照组(t'=2.44,P<0.05),IFN-γ/IL-4比值低于对照组(t'=2.27,P<0.05),IL-17水平显著高于对照组(t'=2.64,P<0.01)。(3)HSP组单个核细胞TLR6蛋白表达与MyD88 mRNA呈显著正相关(r=0.79;P<0.01);与血浆IL-4水平呈显著正相关(r=0.69,P<0.01);与IFN-γ/IL-4比值呈负相关(r=-0.38,P<0.05);与IL-17水平呈正相关(r=0.36,P<0.05);与血浆IFN-γ水平不存在相关性(P>0.05)。结论 TLR6活化可能参与了HSP的免疫发病机制;HSP患儿体内存在Th1/Th2失衡,Th17异常活化,活化的TLR6可能通过上调Th2、Th17免疫应答介导HSP的免疫发病机制。     

再生障碍性贫血患者治疗前后免疫T细胞亚群和血清IL-8、IFN-γ、TNF-α水平变化研究

目的探讨再生障碍性贫血患者治疗前后免疫T细胞亚群和血清白细胞介素-8(IL-8)、γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化。方法 80例再生障碍性贫血患者(研究组)及同期本院体检的32名健康志愿者(对照组),比较治疗前后研究组、对照组免疫T细胞亚群(CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+)、血清IL-8、IFN-γ、TNF-α水平变化,依据治疗6个月后研究组预后情况分为缓解组和未缓解组,比较两组免疫T细胞亚群和血清IL-8、IFN-γ、TNF-α水平,对再生障碍性贫血患者预后与免疫T细胞亚群和血清IL-8、IFN-γ、TNF-α水平进行相关性分析。结果研究组治疗前CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+低于治疗后及对照组,CD8~+、IL-8、IFN-γ、TNF-α高于治疗后及对照组;治疗后CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+低于对照组,CD8~+、IL-8、IFN-γ、TNF-α高于对照组(P0.05)。缓解组CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+高于未缓解组,CD8~+、IL-8、IFN-γ、TNF-α低于未缓解组(P0.05)。再生障碍性贫血患者预后与CD3~+、CD4~+呈正相关(P0.05),与CD8~+、IL-8、IFN-γ、TNF-α呈负相关(P0.05)。结论再生障碍性贫血患者治疗后可有效调节其免疫T细胞亚群和血清IL-8、IFN-γ、TNF-α水平,且免疫T细胞亚群和血清IL-8、IFN-γ、TNF-α水平变化与其预后存在相关性。     

支气管哮喘患者外周血PD-1，IFN-γ，IL-4与Th细胞及T细胞亚群水平表达的临床意义研究

目的　探讨支气管哮喘患者外周程序性死亡受体1（programmend cell death protein l, PD-1）、干扰素-γ（intorferon-γ,IFN-γ）、白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）与辅助性T细胞（helper-T cell, Th细胞）及T细胞亚群水平表达的临床意义。方法　选取2019年9月～2020年9月就诊于西安国际医学中心医院的80例哮喘患者为研究组,另以同期在该院体检的80例健康成人为对照组,采用肺功能仪检测两组研究对象的肺功能指标;ELISA法检测两组研究对象血清PD-1,IFN-γ和IL-4水平;单克隆抗体间接免疫荧光法检测两组研究对象外周血Th细胞和T淋巴细胞亚群占比,比较两组以上指标差异并分析其临床意义。结果　与对照组相比,研究组肺功能指标FEV1和FEV1/预计值百分比（fevl%pred）、血清PD-1和IFN-γ水平、外周血Th1细胞占比、Th1/Th2比值、CD8+水平以及CD4+/CD8+比值均显著降低,血清IL-4表达水平和外周血Th2细胞及CD4+水平占比均显著升高,差异均有统计学意义（t=3.221~19.847,均P＜0.01）,而两组CD3+水平无显著差异（t=1.132,P=0.259）。结论　支气管哮喘发作伴随着患者血清PD-1水平降低以及IL-4水平增高,从而抑制了Th1细胞产生IFN-γ,并使得Th1/Th2和CD4+/ CD8+平衡状态破坏,各细胞及细胞因子相互制约、相互调节,构成复杂的调节网络,对哮喘的诊断治疗有重要意义。