抑制SGLT对软脂酸诱导的内皮细胞损伤影响研究

目的探讨采用软脂酸（PA）诱导人脐静脉内皮细胞胰岛素抵抗下,钠葡萄糖共转运体（SGLT）的表达变化,及抑制SGLT表达后对内皮细胞损伤的影响和作用机制。方法将人脐静脉内皮细胞分为空白对照组（DMSO组）、PA组、PA+Insulin组、PA+根皮苷（PH）组、PA+PH+LY组。DMSO组细胞加入DMSO处理,作对照用;PA组用0.3mmol/LPA干预18h建立胰岛素抵抗模型;PA+Insulin组、PA+PH组在PA组处理的基础上再分别给予100nmol/L胰岛素、PH干预30min;PA+PH+LY组预先加入100nmol/L磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）抑制剂LY294002孵育30min,后再加入PH干预30min。采用Westernblot法检测各组细胞SGLT1、SGLT2、磷酸化胰岛素受体底物1（p-IRS-1）、磷酸化AKT（p-AKT）、磷酸化eNOS（p-eNOS）蛋白表达水平,采用RT-PCR法检测SGLT1、SGLT2mRNA表达水平,采用硝酸盐还原酶法检测NO浓度和葡萄糖消耗量。采用siRNA转染内皮细胞以沉默SGLT1和SGLT2,分为DMSO组、PA组和PA+si-Ctrl组、PA+si-SGLT1组、PA+si-SGLT2组,其中PA+si-Ctrl组细胞用无意义片段转染,采用Westernblot法检测p-IRS-1、p-AKT、p-eNOS蛋白表达水平。结果PA组细胞SGLT1、SGLT2蛋白和mRNA表达水平较DMSO组增加（均P＜0.05）,PA+PH组细胞SGLT1、SGLT2蛋白和mRNA表达水平较PA组降低（均P＜0.05）。PA组细胞葡萄糖消耗量与NO浓度均低于DMSO组（均P＜0.05）,PA+Insulin组、PA+PH组细胞葡萄糖消耗量与NO浓度均高于PA组（均P＜0.05）。PA组细胞p-IRS-1、p-AKT、p-eNOS蛋白表达水平及NO浓度均低于DMSO组（均P＜0.05）。PA+PH组细胞p-AKT、p-eNOS蛋白表达水平及NO浓度均较PA组升高（均P＜0.05）,但p-IRS-1蛋白表达水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。PA+PH+LY组细胞p-AKT、p-eNOS蛋白表达水平均较PA+PH组降低（均P＜0.05）,但p-IRS-1蛋白表达水平及NO浓度比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。PA+si-SGLT1组、PA+si-SGLT2组细胞p-AKT、p-eNOS蛋白表达水平均明显高于PA组和PA+si-Ctrl组（均P＜0.05）。与DMSO组相比,p-IRS-1在PA组、PA+si-Ctrl组和PA+si-SGLT1组、PA+si-SGLT2组明显下调,但组间比较均无统计学差异（均P＞0.05）。结论PA可增加SGLT在内皮细胞的表达;抑制SGLT可激活PI3K/AKT/eNOS通路,使NO的释放增加,从而改善胰岛素抵抗下的内皮细胞损伤。     

维生素D对老年2型糖尿病患者胰岛素抵抗影响的研究

目的：探讨维生素D对老年2型糖尿病（T2DM）患者胰岛素抵抗的影响,为该类患者的临床治疗提供可参考依据。方法共纳入160例该院诊断为T2DM的老年患者作为研究对象,采用随机数字法平均分为观察组与对照组,两组患者均给予常规降糖治疗,观察组同时加用骨化三醇（0.5μg/d ,12周）。所有患者均于治疗前及治疗后空腹抽取静脉血检测血糖相关指标及血清25羟基维生素D3[25-（OH）D3]水平。结果治疗后体质量指数（BMI）、空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、胰岛素（Fins）、25-（OH）D3及胰岛素抵抗指数（IRI）均较治疗前有明显改善,差异有统计学意义（P＜0.05）;且治疗后观察组BMI、FBG、HbA1c、Fins、25-（OH）D3及IRI较对照组改善更明显,差异有统计学意义（P＜0.05）。不同血清25-（OH）D3水平患者补充维生素D后IRI均有明显改善,差异有统计学意义（P＜0.05）;血清25-（OH）D3水平低于25 nmol/L的患者同时伴有BMI、FBG、HbA1c、Fins、25-（OH）D3水平的明显改善,差异有统计学意义（P＜0.05）。血清25-（OH）D3与BMI、FBG、HbA1c、Fins及IRI存在正相关关系（P＜0.05）。结论老年T2DM患者在常规降糖治疗的基础上,补充维生素D可以更好地改善胰岛素抵抗状况,促进患者血糖的平稳。     

糖尿病患者25 羟维生素D3 水平与血脂、 胰岛素功能的相关性

目的 分析糖尿病患者25 羟维生素D3[25-（OH）D3] 水平与血脂、胰岛素功能的关系。方法 选 取2018 年6 月—2018 年12 月在新疆医科大学第一附属医院住院治疗的1 型糖尿病（T1DM）、2 型糖尿病 （T2DM）患者,每组78 例。另选取同期78 例健康体检者作为对照组。根据[25-（OH）D3] 水平不同分为维 生素D3（VD3）<50 nmol/L 组（69 例）和VD3 ≥ 50 nmol/L 组（165 例）,比较两组患者血脂、胰岛素功能 及其相关性。结果 ① 3 组年龄、体重指数（BMI）、糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹血糖（FBG）、餐后2 h 血糖、空腹血清C 肽、餐后2 h 血清C 肽、25-（OH）D3 及胰岛β 细胞功能指数水平比较,差异有统计学 意义（P <0.05）;② VD3<50 nmol/L 组总胆固醇（TC）含量低于VD3 ≥ 50 nmol/L 组,而胰岛β 细胞功能 指数高于VD3 ≥ 50 nmol/L 组（P <0.05）;③相关性分析结果显示,T1DM 组患者VD3 水平、BMI 与胰岛β 细胞指数呈负相关（r =-0.259 和-0.491,P =0.025 和0.043）;T2DM 组患者VD3 水平与TC 含量呈负相关 （r =-0.227,P =0.046）;结论 糖尿病患者VD3 水平与TC 及胰岛素β 细胞功能密切相关。     

葡萄糖、游离脂肪酸对培养的人血管内皮细胞一氧化氮含量的影响

目的：观察不同浓度的葡萄糖(Glu)、软脂酸（PA）和油酸（OA）对培养24小时的人血管内皮细胞一氧化氮（NO）生成的影响。方法：采用硝酸还原酶法。结果：Glu（30mmol/L)组和Glu30mmol/L PA0.25mmol/L组细胞上清液中NO含量明显高于对照组（P＜0．05）；OA（0．025、0．5mmol/L）组，PA＋OA（PA0．25mmol/L＋OA0．5mmol/L）组及Glu＋PA＋OA（Glu30mmol/L＋PA0．25mmol/L＋OA0.5mmol/L）组细胞上清液中NO含量明显低于对照组（P＜0．05）；PA（0．125、0．25、0．5mmol/L）组与对照组，上清液中NO含量坎明显差异（P＞0．05）。结论：高浓度Glu作用于内皮细胞24小时使用内皮细胞生成NO增多，而OA抑制内皮细胞生成NO。高浓度OA与高浓度Glu联合作用时，OA抵消了Glu的作用，仍然使NO降低。高浓度Glu和游离脂肪酸对内皮细胞NO生成出现的相反效应的机制应进一步研究。     

游离脂肪酸引起肝细胞胰岛素抵抗及其机制的研究

目的研究游离脂肪酸（FFA）诱导人肝癌细胞（HepG2）引起胰岛素抵抗及其分子机制.方法应用含0.25 mmol/L的软脂酸（PA组）或100 nmol/L胰岛素（Ins组）与不含软脂酸和胰岛素（正常组）的DMEM培养基培养HepG2细胞24 h,正常组和PA组中又分加与不加磷酯酰肌醇3激酶（PI3K）抑制剂Wort-mannin两个亚组,100 nmol/L胰岛素刺激后分别测定培养液中的葡萄糖浓度、细胞内的糖原含量、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）活性及胰岛素受体底物2（IRS-2）的蛋白水平.结果PA组和Ins组培养液中葡萄糖含量显著高于正常组（P＜0.01）,而细胞内糖原含量显著减少（P＜0.01）;PA组胰岛素刺激的PEPCK活性显著高于正常组（P＜0.01）,IRS-2蛋白水平显著低于正常组（P＜0.01）.无论应用Wortmannin处理与否,PA组中的PEPCK活性及IRS-2蛋白水平差异无显著性（P＞0.05）,而正常组中PEPCK活性及IRS-2蛋白水平的差异有显著性（P＜0.01）.结论加0.25 mmol/L的软脂酸培养24 h后,肝细胞可能由于胰岛素信号转导障碍产生胰岛素抵抗;胰岛素抵抗的形成可能与IRS-2及PI3K相关分子缺陷有关.     

老年女性代谢综合征患者血清25-羟维生素D水平变化及临床意义研究

目的 探讨老年女性患者25-羟维生素D〔25-（OH）VD〕水平与代谢综合征（MS）发生发展的相关性。方法 收集2011年9月-2013年11月于北京大学人民医院老年科住院的老年女性患者188例,年龄60~94岁,均为绝经后。按照有无MS将患者分为MS组（79例）和非MS组（109例）;按照血清25-（OH）VD中位数（31.5 nmol/L）将患者分为<31.5 nmol/L组（94例）和≥31.5 nmol/L组（94例）。测量血压、身高、体质量、计算体质指数（BMI）,并检测空腹血糖（FPG）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹胰岛素（FINS）、血钙（Ca）、血磷（P）、血清25-（OH）VD、骨特异性碱性磷酸酶（BAP）和抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）水平,计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;比较MS组与非MS组血清25-（OH）VD缺乏程度;分析血清25-（OH）VD与观察指标的相关性。结果 MS组高血压病程、糖尿病病程、TG、HDL-C、FPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR与非MS组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。MS组患者血清25-（OH）VD水平低于非MS组（P＜0.05）。<31.5 nmol/L组高血脂病程、TG、HDL-C、FPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR与≥31.5 nmol/L组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。≥31.5 nmol/L组患者血清25-（OH）VD水平高于<31.5 nmol/L组（P＜0.05）。MS组与非MS组血清25-（OH）VD缺乏程度比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。血清25-（OH）VD水平与TG、FPG、HOMA-IR呈负相关,与HDL-C呈正相关（P＜0.05）。结论 老年女性患者血清25-（OH）VD水平较低,且与血脂、血糖相关,为临床进一步研究提供了参考依据。     

窄谱中波紫外线对特应性皮炎患者血清维生素D3水平的影响

对30例特应性皮炎（AD）患者（观察组）行窄谱中波紫外线（NB-UVB）治疗,另以同期健康志愿者30例为对照组.治疗后,患者欧洲AD评分标准（SCORAD）计分系统和瘙痒程度的视觉模拟尺度（VAS）评分分别为（29.4±9.5）和（3.2±1.1）分,显著低于治疗前[（60.7±11.4）和（6.3±1.6）分]（均P＜0.01）;ELISA法测定血清25-羟基维生素素D3[25（OH） D3]及1,25-羟基维生素D3[1,25 （OH） 2D3]水平分别为（75.36 ±.23.28） mmol/L和（149.28±46.56） nmol/L,显著高于治疗前的（36.24 ± 18.48） mg/L和（97.68±32.88） nmol/L（均P＜0.01）,与对照组的（69.84±20.64） nmol/L和（147.36 ±43.68）nmol/L比较差异无统计学意义（均P＞0.05）;治疗前患者血清25 （OH）D3及1,25（OH）2D3水平显著低于对照组（P＜0.01）.NB-UVB治疗AD安全有效,能提高血清维生素D3水平.     

妊娠糖尿病患者血清维生素D与胰岛素抵抗的相关性分析

目的 探讨胰岛素抵抗与妊娠糖尿病（GDM）患者血清维生素D 的相关性。方法 选择我院2019 年1 月至2020 年1 月收治的GDM 患者32 例作为观察组,选择同期健康体检产妇32 例作为对照组。均检测空腹胰岛素、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、25-羟维生素D 水平、空腹血糖,并分析胰岛素抵抗与血清25-羟维生素D 的相关性。结果 观察组三酰甘油（2.20±0.48）mmol/L、总胆固醇（4.43±0.15）mmol/L、低密度脂蛋白胆固醇（2.39±0.17）mmol/L、高密度脂蛋白胆固醇（1.31±0.29）mmol/L 与对照组[（2.17±0.42）mmol/L、（4.46±0.16）mmol/L、（2.43±0.19）mmol/L、（1.29±0.28）mmol/L]比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;与对照组比较,观察组空腹胰岛素（24.79±2.43）U/L 及空腹血糖（7.29±0.81）mmol/L 水平均较高,差异有统计学意义（P＜0.05）;与对照组比较,观察组胰岛素抵抗指数（6.75±1.32）较高,25-羟维生素D 水平（18.86±3.48）nmol/L 较低,差异有统计学意义（P＜0.05）;经Pearson 相关性分析发现,GDM 患者血清25-羟维生素D 与胰岛素抵抗呈负相关（r=-0.733,P=0.000）。结论 GDM 患者血清维生素D 与胰岛素抵抗有关,推测GDM 患者的胰岛素抵抗可通过维生素D 补充进行调节,临床可根据生素D 与胰岛素抵抗情况,积极为患者实施高效的治疗方案。     

1α,25-（OH）2D3对大鼠成骨细胞周期及相关蛋白表达的影响

目的研究1a,25-（OH）2D3对SD大鼠成骨细胞增殖及相关蛋白的表达的影响。方法采用流式细胞术（FCM）检测细胞周期,RT-PCR和Westernblotting分别检测细胞G。期调节蛋白细胞周期素D1（cyclinD1）、细胞周期素依赖性激酶4（CDK4）、p21mRNA和蛋白的表达。结果与0nmol·L-1组比较,各1d,25-（OH）2D3干预组细胞周期发生改变,G0／G1期细胞数递减,而S＋G2/M期细胞比例升高,PI增加,差异显著（P〈0．05）;且1a,25-（OH）2D3可诱导细胞cyclinDl、CDK4mRNA及蛋白表达和下调p21（P〈0．05）。结论置1d,25-（OH）2D3可上调cyclinD1、CDK4表达和抑制负性调节因子p21,调节相关蛋白表达以促进成骨细胞增殖。     

血清维生素D水平与脑卒中后抑郁的关系

目的探讨急性脑卒中患者血清中25-羟基维生素D[25（OH）D]水平与脑卒中后抑郁的关系。方法选取2014年6月至2015年12月神经内科门诊及病房诊治的卒中患者（脑梗死组）及同期体检中心健康检查者（对照组）各66例。采用患者健康问卷抑郁量表对脑梗死组患者进行抑郁测定。据测定结果分为无抑郁亚组、轻度抑郁者、中度抑郁者及重度抑郁者。测定并比较脑梗死组患者及对照组的血清25（OH）D水平。结果脑梗死组血清25（OH）D水平[（44.93±17.94）nmol/L]与对照组[（65.14±19.70）nmol/L]比较，差异有统计学意义（t=2.36，P＜0.01）。抑郁亚组血清25（OH）D水平[（40.93±14.64）nmol/L]与非抑郁亚组[（57.36±16.45）nmol/L]比较，差异有统计学意义（t=3.47，P＜0.01）。轻度、中度、重度患者血清25（OH）D水平[（41.80±3.07）、（25.50±3.10）、（10.80±4.88）nmol/L]均低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）。血清25（OH）D水平与卒中后抑郁程度呈负相关（rs=-0.24，P＜0.01）。结论脑卒中及卒中后抑郁患者血清25（OH）D水平均降低。血清25（OH）D水平与脑卒后抑郁程度呈负相关。     

PPAR-γ激动剂对AngⅡ刺激血管内皮细胞分泌血管活性因子的影响

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂对AngⅡ刺激血管内皮细胞分泌血管活性因子的影响,并与AngⅡⅠ型受体(AT1R)拮抗剂losartan相对照,即从细胞水平进一步揭示PPARγ与高血压病的关系.方法 以脐静脉内皮细胞为研究对象,观察PPARγ激动troglitazone对内皮细胞分泌内皮素-1(ET-1)和NO的影响,及其对AngⅡ刺激内皮细胞分泌ET-1和NO的影响,并与losartan相对照.结果 10 μmol/L和50μmol/L troglitazone使人脐静脉内皮细胞分泌ET-1含量与对照组相比虽有下降但无统计学意义,而NO与对照组相比明显升高(P＜0.05);50μmol/L troglitazone可明显抑制AngⅡ(1×10-6 mol/L)刺激的ET的分泌(P＜0.05);两种浓度troglitazone均能抑制AngⅡ对内皮细胞生成NO的减低作用(P＜0.05);losartan抑制AngⅡ刺激内皮细胞合成和分泌ET-1增加和抑制AngⅡ减弱内皮细胞合成和分泌NO的作用比troglitazone更为明显(P＜0.05).结论 PPARγ激动剂troglitazone可抑制AngⅡ刺激内皮细胞合成和分泌ET-1的增加和NO的减少,但其作用并没有losartan明显,提示troglitazone通过影响血管活性因子的分泌而调节血压的作用并非完全是通过AT1R途径.     

siRNA沉默热休克蛋白27对雌激素心血管保护作用的影响

目的  通过基因沉默技术,研究热休克蛋白27（HSP27）对雌激素介导的心血管保护作用的影响。方法  人脐静脉内皮细胞（HUVEC）转染HSP27 siRNA,免疫荧光法检测siRNA转染效率,Western blot和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测HUVEC中HSP27蛋白和mRNA表达水平;1×10-7 mol/L雌二醇（E2）处理转染HSP27 siRNA的HUVEC,24 h后采用硝酸还原酶法检测培养基中一氧化氮(NO)的含量,酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、内皮素-1（ET-1）的含量。结果  HSP27 siRNA能降低HSP27蛋白和mRNA表达。1×10-7 mol/L E2可促进HUVEC分泌NO,同时降低ICAM-1和ET-1水平。转染HSP27 siRNA后,E2介导内皮细胞分泌NO和ICAM-1受到抑制。但沉默HSP27对E2抑制内皮细胞分泌ET-1无明显影响。结论  HSP27可能通过雌激素来影响内皮细胞分泌NO和ICAM-1,参与心血管的保护。

     

胰高血糖素样肽-1对高糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及相关机制

目的：探讨胰高血糖素样肽-1（glucagon—like peptide-1,GLP—1）对高糖诱导人脐静脉内皮细胞huma numbilica lvein endothelial cells,HUVECs）凋亡的影响及相关机制。方法：HUVECs加入不同处理因素后分组,分别培养48h后,MTT检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞早期凋亡率;Westernl印迹测定细胞P-Akt,p-eNOS水平;NO试剂盒检测NO浓度。结果：高糖（33mmol／L）培养48h后HUVECs细胞活力下降p〈0．05）,细胞凋亡率增加（p〈0．01）,细胞p-Akt,p-eNOS,NO水平均下降（P〈0．05）;高糖条件下加人GLP．1（3nmol／L）培养48h,与高糖组相比较,HUVECs细胞活力增加（P〈0．01）,细胞凋亡率减少（p〈O．05）,细胞p-Akt,p-eNOS,NO水平均增／JH（V〈0．05）;P13K抑制剂wortmannine（100nmol／L）可以阻断GLP-1的抗凋亡作用及其对P—Akt蛋白、p-eNOS蛋白及NO水平的影响;eNOS抑制剂L—NAME（100umol／L）仅能阻断GLP-1的抗凋亡作用及对NO水平的影响,不影响p-Akt蛋白的表达。结论：GLP．1可改善高糖诱导的HUVECs凋亡,该抗凋亡作用可能与P13K／Akt／eNOS通路的上调相关。     

罗格列酮对血管紧张素Ⅱ诱导的人脐静脉内皮细胞内皮素-1基因表达及肿瘤坏死因子-α分泌的影响

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮对经血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的影响,探讨罗格列酮对动脉粥样硬化过程中分子调控网络的作用。方法:罗格列酮干预AngⅡ处理后的HUVECs,通过RT-PCR、实时定量PCR检测内皮细胞PPARγ、ET-1基因mRNA表达,Western blot检测细胞PPARγ、ET-1前体蛋白、Akt、ERK1/2的表达,ELISA法检测细胞上清中TNF-α含量。结果:AngⅡ可上调HUVEC中PPARγmRNA及蛋白表达量、ET-1mRNA及ET-1前体蛋白表达,TNF-α分泌量呈浓度依赖性增高,ERK1/2的表达量增加;罗格列酮干预后细胞PPARγ表达量明显升高,ET-1表达量明显降低,细胞上清TNF-α含量明显降低,ERK1/2的表达被抑制。Akt的表达没有变化。结论:罗格列酮通过上调PPARγ基因的表达,抑制ERK1/2信号转导途径,影响AngⅡ处理的HUVECs中ET-1基因及其前体蛋白的表达,抑制炎症因子TNF-α的分泌。     

四种黄芪黄酮类化合物单体对血管内皮细胞功能的保护作用

目的 观察从甘肃陇西产黄芪中提取的黄酮类化合物芒柄花素、毛蕊异黄酮-7-o-β-D-吡喃葡萄糖(CG)、毛蕊异黄酮和2’-OH-3’,4’-二甲氧基异黄烷-7-o-β-D-吡喃葡萄糖(DG)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用.方法 将芒柄花素、CG、毛蕊异黄酮和DG分别与1 μm...     

小干扰RNA沉默MST1基因减轻TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡

目的:探讨丝/苏氨酸蛋白激酶(mammalian sterile 20-like kinase 1,MST1)对肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-α,TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)凋亡的影响及作用机制。方法:用不同浓度的TNF-α(0~100 ng/mL)诱导内皮细胞凋亡,24 h后通过TUNEL法观察内皮细胞凋亡率,Western印迹分析TNF-α对MST1活性的影响;随后将构建的MST1小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)在脂质体Lipofectamine 2000的介导下转染原代HUVEC,转染后24 h加入TNF-α(10 ng/mL)诱导HUVEC凋亡,24 h后通过Western印迹确定MST1 siRNA的基因沉默效率;通过TUNEL法观察MST1基因的敲除对TNF-α介导的内皮细胞凋亡的影响;并进一步用Western印迹观察MST1基因敲除对caspase-3活性的影响。结果:TNF-α(10,40,100 ng/mL)能导致内皮细胞凋亡显著增多(P<0.001),并且呈剂量依赖性;随着TNF-α浓度增加,MST1的活化增多,MST1激酶活性相应增加;MST1 siRNA对内皮细胞中MST1基因表达的抑制呈剂量依赖性,100 nmol/L MST1 siRNA能特异性沉默内皮细胞中MST1基因的表达(P<0.05);MST1 siRNA能明显减少TNF-α诱导的内皮细胞凋亡(P<0.05),抑制TNF-α诱导的MST1裂解活化,同时caspase-3的活性也相应减少。结论:MST1 siRNA通过抑制caspase-3的级联放大效应减少TNF-α诱导的HUVEC凋亡。     

妊娠相关血清蛋白-A对内皮细胞生理功能的影响

目的：观察妊娠相关血清蛋白-A（PAPP-A）在体外对内皮细胞生理功能的影响。方法：体外培养人脐静脉内皮细胞株(HUVEC),随机分为4组。分别给予不同浓度(0,50,100及200ng/mL)的PAPP-A刺激,于0,12,24和48 h收集上清液和细胞,用硝酸还原酶法测定一氧化氮（NO）的浓度,用免疫组织化学法测定内皮素-1（ET-1）的表达。结果：在不同的时间点,随着PAPP-A浓度的增加,上清液NO的浓度逐渐降低,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)。随着PAPP-A浓度的增加,ET-1的表达呈浓度依赖性增加,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论：PAPP-A可能通过减少内皮细胞NO的分泌,上调ET-1的表达来影响内皮细胞的功能。     

Rho激酶信号通路参与ET-1诱导的人气道平滑肌细胞迁移和细胞骨架的变化

目的 研究Rho激酶信号通路在内皮素-1(ET-1)诱导的人气道平滑肌细胞(ASMCs)迁移及细胞骨架变化中的作用.方法 组织块贴壁法培养人ASMCs,改良的Boyden小室检测ASMCs的迁移能力;激光共聚焦扫描显微镜观察细胞骨架的变化;Western blotting检测ET-1刺激不同时间后Rho激酶底物肌球蛋白磷酸酶目标亚单位1(MYPT1)的磷酸化水平.结果 ET-1在0.1、1、10、100 nmol/L浓度具有趋化ASMCs的迁移能力,10 nmol/L的ET-1趋化ASMCs迁移的能力最强(与对照组相比,P<0.01).Rho激酶抑制剂Y-27632可浓度依赖性地抑制ET-1趋化的ASMCs跨膜迁移,与ET-1组相比,10μmol/L的Y-27632显著抑制了ASMCs迁移(P<0.01);ET-1(10 nmol/L)刺激后ASMCs细胞骨架和形态改变,伪足生成,应力纤维形成增多,Y-27632可显著抑制ET-1诱导的上述改变;ET-1刺激15、30min后p-MYPT1表达显著增高(与对照组相比,P<0.01),随着刺激时间的延长,p-MYPT1表达下降(P>05).结论 Rho激酶信号通路在ET-1诱导的ASMCs迁移和细胞骨架变化中发挥重要的作用.     

从治疗干预的角度评价胰岛素抵抗与内皮功能紊乱的相互关系

内皮功能障碍可导致兼具胰岛素抵抗特征的心血管疾病。胰岛素抵抗是2型糖尿病、肥胖以及代谢综合征等一系列代谢紊乱的标志,而这些代谢紊乱具有内皮功能障碍的特征。促进葡萄糖处理的胰岛素代谢反应可被内皮中胰岛素的血管反应增强以刺激血管扩张剂NO的产生。事实上,由胰岛素刺激所产生的葡萄糖摄取量的增加中,25％～40％可通过骨骼肌中NO-依赖性血流的增加来解释。与NO产生相关的内皮中3-磷酸激酶依赖的胰岛素信号通路,与骨骼肌中促进葡萄糖摄取的代谢通路有着惊人的相似。其他已经明确的非代谢性旁路调节内皮中血管收缩药内皮因子-1（ET-1）的分泌。代谢性胰岛素抵抗具有在3-磷酸激酶依赖信号通路特异性损坏的特征,在内皮中,这也许会引起NO产生和ET-1分泌的失衡,从而导致血流减少继而使胰岛素抵抗加剧。在动物和人类中开展的治疗性干预证明,改善内皮功能可改善胰岛素抵抗,同时改善胰岛素敏感性可改善内皮功能障碍。总之,细胞学、生理学、临床医学以及流行病学研究都强烈支持内皮功能障碍与胰岛素抵抗存在相互关系,这种关系有助于将心血管疾病和代谢疾病联系起来。本综述将讨论内皮功能障碍和胰岛素抵抗的相关病理生理学机制,并重点强调这个机制对代谢综合症的冶疗意义。     

黄秋葵总黄酮对氧化应激损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用及其机制研究

目的 观察黄秋葵总黄酮对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）氧化应激损伤的影响。方法 采用MTT法检测黄秋葵总黄酮对HUVECs的保护作用,采用分光光度法测定细胞培养上清液中细胞内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）及一氧化氮（nitric oxide,NO）含量,酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中内皮素-1（endothelin-1,ET-1）含量,采用二氯荧光乙酰乙酸盐法检测活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;Western blot方法检测内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）的表达水平。结果 黄秋葵总黄酮可以提高氧化应激损伤的HUVECs存活率,增加SOD活性,升高NO水平,降低MDA、ET-1水平,降低细胞ROS水平,升高eNOS的表达水平。结论 黄秋葵总黄酮对过氧化氢诱导的HUVECs氧化应激损伤有保护作用,其作用机制可能与调节SOD、MDA、ET-1、NO氧化应激相关因子,调控内皮细胞功能相关蛋白eNOS的表达有关。