AVL9130电解质分析仪A、B标准液的配制及应用

目的 :实现AVL91 30 (91 2 0 )电解质 (K+ 、Na+ 、Cl- )分析仪A、B标准液的自配 ,降低成本。方法 :对原装试剂进行测量、分析和计算 ,然后配制上机和原装试剂进行对比分析、观察。结果 :相关性好 ,批内、批间误差小。回收试验亦符合要求。结论 :自配试剂完全能代替进口试剂 ,成本仅为进口试剂百分之一。     

双试剂酚红比色法测定血清碳酸氢根

目的　建立一种能适合各级实验室常规和急诊检测血清HCO3 -的方法。方法　应用自配双试剂建立了两步终点测定法 ,可同时满足全自动和半自动手工测定 ,用日立 70 6 0生化仪对本方法进行方法学评价。结果　比色液吸收峰为 5 5 8nm ,线性范围可达 5 0mmol/L ,批内CV3.4 5 % ,批间CV4 .88% ,平均回收率 10 2 .3% ,与血气分析仪 (X)相关良好 ,Y =1.0 0 5 9X -0 .10 38,r =0 .9813(n =6 0 ) ,黄疸、脂血、溶血标本对结果无影响 ,健康人静脉血HCO3 -浓度 2 1.2～ 31.2mmol/L。结论　本法操作简便、灵敏准确、试剂稳定、成本低廉     

抗乙型肝炎病毒表面抗原抗体国产ELISA试剂评价

目的　评价 6种国产抗乙型肝炎病毒表面抗原抗体 (抗 HBs)酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂盒。方法　将RocheElecsys 2 0 10电化学发光免疫分析系统上检测余留的抗 HBs标本 ,用 6种国产抗 HBsELISA试剂盒进行检测 ,评价 6种试剂盒的敏感度、检测范围、精密度和特异性。结果　 6种国产试剂盒的敏感度相差较大 ,10～ 4 0IU/L不等。 5 0IU/L以下时 ,浓度与吸光度呈直线关系 ,但吸光度数值较低 ;未发现高浓度时的钩状效应。 5 0IU/L的标本 ,A、B 2种试剂的批内变异系数 (CV)分别为 10 .1%和 13.7% ;日间CV分别为 14 .1%和2 4 .8% ;阴性标本在 6种试剂盒中出现了不同程度的假阳性。结论　国产抗 HBsELISA试剂的部分性能应改进和提高。     

双试剂酚红比色法全自动测定血清碳酸氢根方法学研究

目的　建立一种能适合各级实验室常规和急诊检测血清HCO-3 的方法。方法　应用自配双试剂建立两步终点测定法 ,可同时满足全自动和半自动手工测定 ,用日立 70 6 0生化仪对本方法进行方法学评价。结果　比色液吸收峰为 5 5 8nm ,线性范围可达 5 0mmol/L ,批内CV 3.16 % ,批间CV4 .5 5 % ,平均回收率 10 2 .3% ,与血气分析仪测定结果相关性良好 ,Y =1.0 0 5 9X - 0 .10 38,r=0 .9813(n =6 0 ) ,黄疸、脂血、溶血标本对结果无影响 ,健康人静脉血HCO-3 浓度 2 1.2～ 31.2mmol/L。结论　该方法操作简便、灵敏准确、试剂稳定、成本低廉 ,可用于血清碳酸氢根的常规分析 ,更适合自动分析     

NOVA 16全自动急诊生化分析仪试剂包内标准A液的研制与应用

目的 :研制 NOVA 1 6全自动急诊生化分析仪试剂包内标准 A液。方法 :根据电极法测定 Na、K、Cl、TCO2 、Urea、Cr、Glu、Hct的原理及标准液配制的有关要求配制类似于血浆水的 A液。结果 :自配内标准 A液与原装内标准 A液的主要理化指标 :p H、渗透压、电极斜率、线性范围均一致 ,自配内标准 A液的精密度与原装内标准 A液所测结果之间的相关性 ( r=0 .950～ 1 .0 0 0 )及自配 A液的批内 ( P>0 .0 5)、批间 ( P>0 .0 5)稳定性较好 ,长期使用对电极无损害。结论 :自配内标准 A液的准确度与精密度符合临床要求 ,提示自配内标准 A液可替代原装内标准 A液。     

两种定标方法检测C-反应蛋白及与快速C-反应蛋白检测结果的对比和评价

目的比较生化分析仪2种定标方式对C-反应蛋白(CRP)测定结果的影响及与快速CRP法检测结果的比较.方法用快速CRP法和生化仪二点定标及多点定标方式分别检测245例标本CRP值,其中低值A组(＜8 mg/L)33例、低值B组(8～20 mg/L)47例,中值A组(20～40 mg/L)51例、中值B组(40～80 mg/L)41例,高值A组(80～100 mg/L)34例、高值B组(＞100 mg/L)36例.结果多点定标测定低值A、B组和高值A、B组CRP结果,与二点定标比较,差异有非常显著性(P＜0.01),测定中值A、B组结果差异有显著性(P＜0.05),快速CRP法与多点定标比较,差异无显著性.多点定标、二点定标和快速CRP法的平均回收率分别为99.1%、89.9%、96.4%,批内平均变异系数(CV)分别为3.1%、5.3%、4.8%,批间平均CV分别为4.7%、7.9%、6.4%.溶血和黄疸对二点定标的干扰明显大于多点定标和快速CRP法.结论 2种定标方法对测定结果有显著影响,快速CRP与多点法无显著影响,但离散度与CV明显高于多点法.     

非配套脂蛋白试剂的使用性能验证

目的 对4种应用于自动生化分析仪的免疫透射比浊法检测血脂蛋白(a)[LP(a)]试剂进行分析性能验证,并初步应用于临床。方法 在Olympus AU5800自动生化分析仪上对英国RANDOX、浙江夸克、北京利德曼和北京九强公司生产的免疫透射比浊法LP(a)试剂(标为A,B,C,D)进行性能验证, 对4种试剂的精密度、线性范围、准确度、干扰因素(VC,胆红素、血红蛋白、乳糜)进行评估。结果 试剂A,B,C,D的批内CV分别为0.64%～1.18%,3.59%～4.75%,1.33%～3.05%和1.43%～2.01%,批间CV分别为1.04%～1.7%,3.81%～4.93%,2.16%～4.76%和2.33%～3.21%,均小于试剂盒声明不精密度; 线性范围分别为82～923 mg/L(r²=0.997),130～935 mg/L(r²=0.996 4),120～1 025 mg/L(r²=0.992 1)和117～943 mg/L(r²=0.999 5),线性相关均良好。试验浓度内的4种干扰物(VC≤10 mg/dl,Hb≤200 mg/dl,TBIL≤40 mg/dl,TG≤500 mg/dl)对试剂A和试剂D无显著干扰(偏差<±10%),但是VC≥5 mg/dl,TG≥250 mg/dl对试剂B有干扰,TG≥250 mg/dl对试剂C有干扰。4种试剂检测定值血脂质控品,与靶值偏差分别为-8.07%,1.34%,-8.05%和7.38%,可满足临床需求。结论 应用于自动生化分析仪的4种测定LP(a)试剂盒,具有较高的精密度,可满足临床测试要求,但抗干扰能力存在一定差异。     

人血清Kappa、Lambda轻链透射比浊法检测试剂的研制

目的建立人血清Kappa(KAP)、Lambda(LAM)轻链透射比浊分析方法。方法采用全自动日立生化分析仪,用自制透射比浊试剂检测临床血清标本,并对试剂的各项性能指标进行评价。结果KAP试剂盒的测定范围为0.75~12.00mg/mL,灵敏度为ΔA0.08/12.00mg/mL,准确度偏差5%,批内精密度(CV)5%、批间CV10%。样本中三酰甘油小于或等于5g/L、胆红素小于或等于600μmol/L、血红蛋白小于或等于5g/L、类风湿因子小于或等于600U/mL、抗坏血酸小于或等于0.3g/L时对检测结果无明显影响,自制试剂盒与进口罗氏试剂盒相关系数为0.999;LAM试剂盒的测定范围为0.50~8.00mg/mL,灵敏度为ΔA0.08/8.00mg/mL,准确度偏差5%,批内CV5%、批间CV10%。结论 KAP、LAM透射比浊试剂盒各项指标均达到临床检测要求,与罗氏同类试剂测定结果有较好的相关性,在临床上有极大的应用前景,可替代国外同类产品试剂盒。     

化学发光和酶免2种检测系统检测HBsAg情况分析

目的通过对日常献血者标本(3 031份)和血清盘的平行检测,评估化学发光(CLIA)和酶免(ELISA)2个检测系统检测HBsAg各项性能指标。方法分别采用ELISA(国产A试剂)、ELISA(进口B试剂)和CLIA(国产)对3 031份日常献血者标本进行HBsAg的检测,将阳性标本送卫生部临检中心进行确认实验;分别采用ELISA2种厂家试剂和CLIA(国产)对HBsAg血清盘进行平行检测,将上述数据汇总整理分析,比较ELISA和CLIA2种检测体系的灵敏度、特异性、阳性预期值、批内与批间精密度以及不同血清型标本和突变株的检出能力等指标。结果 ELISA与CLIA平行检测日常献血者标本(3 031份)复检符合率CLIA(国产)为83.33%、ELISA(进口B试剂)为33.33%、ELISA(国产A试剂)为14.28%,CLIA高于ELISA(2种试剂)且P0.01。ELISA和CLIA平行检测HBsAg血清盘情况:CLIA本中心实验室与其它实验室整体检测的灵敏度、特异性、阳性预期值,P0.05。ELISA(国产A)和CLIA(国产)的灵敏度分别为77.39%和89.17%,P0.05,阳性预期值和特异性,P0.05;ELISA(进口B)和CLIA(国产)的灵敏度、特异性、阳性预期值,P0.05。A盘弱阳性质控批内CV:CLIA(4.869%)A(7.269%)B(8.428%);H盘弱阳性质控批内CV:CLIA(4.949%)B(7.157%)A(13.712%);H盘强阳性质控批内CV:CLIA(4.486%)B(11.543%)A(46.454%)。弱阳性质控批间CV:CLIA(8.108%)B(15.288%)A(33.585%);强阳性质控批间CV:CLIA(6.410%)A(10.285%)B(12.673%)。血清盘HBV 3种血清型ayw1、adw2和adrq+的检出下限分别为:CLIA(国产)0.09 IU/mL、0.05 IU/mL、0.05 IU/mL;ELISA(进口B试剂)均为0.05 IU/mL;ELISA(国产A试剂)为0.18 IU/mL、0.09 IU/mL、0.05 IU/mL。针对HBsAg突变类型的检测能力多家血站整体数据显示,应用进口试剂的ELISA检测系统要优于应用国产试剂的CLIA检测系统。结论对于HBsAg的检测虽然从方法学上化学发光要优于酶联免疫,但是从我们的评估情况看其各项性能指标的检测水平2种检测系统却各有优劣,由此可见我们认为针对HBsAg的检测,各实验室应通过综合分析选择最适合自己的筛查策略。     

液体单试剂酶法测定血清碳酸氢根

目的建立一种稳定的单试剂酶法测定血清碳酸氢根(HCO3-)。方法利用自配单试剂建立了两点法的检测方法,可满足全自动和手工测定,用Bayer 1650生化仪对本方法进行方法学评价。结果本法的线性范围可达50 mmol/L,批内变异系数(CV)为2.48%,批间CV为3.24%,平均回收率102.8%,与血气分析仪(X)相关良好,Y=1.019X-0.745,r=0.990 3,黄疸、脂血、溶血标本对结果几乎无影响,健康人静脉血HCO3-浓度为21.5~32.3 mmol/L。结论本法操作简便、反应特异、灵敏准确、试剂较稳定,适用临床检测。     

聚凝胺对免疫球蛋白比浊测定的增强效应

目的　研究低离子聚合物Polybrene对透射免疫比浊测定的增强效应。方法　应用聚乙二醇和Polybrene建立了一种新的检测体系 ,双试剂、双波长、两点终点法检测免疫球蛋白含量。结果　Ig最低检测浓度为 1mg/L ,脂血 (Trig <4.0mmol/L)、黄疸 (TBil<70 μmol/L)、和溶血 (Hb <10g/L)对测定无影响。批内CV分别为 3 2 5 %和 2 6 7% ,批间CV分别为 3 5 %和3 13% ,与进口试剂相比较 ,结果无显著性差异 ,P >0 .0 5。结论　Polybrene可明显增加检测吸光度 ,提高检测灵敏度。     

两种定标方法检测C-反应蛋白及与快速C-反应蛋白检测结果的对比和评价

目的比较生化分析仪2种定标方式对C反应蛋白(CRP)测定结果的影响及与快速CRP法检测结果的比较。方法用快速CRP法和生化仪二点定标及多点定标方式分别检测245例标本CRP值,其中低值A组(<8mg/L)33例、低值B组(8～20mg/L)47例,中值A组(20～40mg/L)51例、中值B组(40～80mg/L)41例,高值A组(80～100mg/L)34例、高值B组(>100mg/L)36例。结果多点定标测定低值A、B组和高值A、B组CRP结果,与二点定标比较,差异有非常显著性(P<0.01),测定中值A、B组结果差异有显著性(P<0.05),快速CRP法与多点定标比较,差异无显著性。多点定标、二点定标和快速CRP法的平均回收率分别为99.1%、89.9%、96.4%,批内平均变异系数(CV)分别为3.1%、5.3%、4.8%,批间平均CV分别为4.7%、7.9%、6.4%。溶血和黄疸对二点定标的干扰明显大于多点定标和快速CRP法。结论2种定标方法对测定结果有显著影响,快速CRP与多点法无显著影响,但离散度与CV明显高于多点法。     

ADVIA 120血液分析仪过氧化物酶鞘液试剂的研制与应用

目的探讨自配过氧化物酶鞘液试剂是否能应用于ADVIA120血液分析仪。方法分析原装试剂成分、理化指标;研制效果相同的试剂,并作一系列比对试验。结果自配试剂的各项检测指标:N(%)、L(%)、M(%)、E(%)、B(%)、LUC(%)、WBCP等与进口试剂的检测结果基本一致,无显著性差异。结论自配的过氧化物酶鞘液试剂可替代进口试剂用于ADVIA120血液分析仪。     

4种型号便携式血糖仪的性能评价

目的了解四种型号的便携式(POCT)血糖仪的精密度和正确度性能,为选购和使用提供参考。方法 A、B、C、D型共4台POCT血糖仪进行精密度评价;四种型号29台血糖仪与全自动生化分析仪检测结果比对进行正确度评价。结果 A、B、C型血糖仪批内精密度变异系数CV批内=2.65%~3.91%,日间精密度中、高浓度分别为CV日间=2.95%~3.58%和CV日间=3.43%~4.06%;D型血糖仪批内精密度CV批内=5.91%~6.15%;日间精密度CV日间=5.67%~6.33%。A、B、C、D型血糖仪与全自动生化分析仪检测结果的相关系数分别为0.963 7~0.992 4、0.970 6~0.992 2、0.995 3、0.927 6。按相关规范和美国临床和实验室标准协会(CLSI)准则要求,当血糖浓度小于4.2mmol/L时,结果偏差大于0.83mmol无一例;≥4.2mmol/L时,偏倚小于20%的,A型占94.3%、B型占94.7%,D型占40%,均未达到要求,C型占100%。在低浓度医学决定水平的偏倚大于10%的有16台;中、高浓度医学决定水平的偏倚均(1台除外)小于10%。结论不同品牌型号POCT血糖仪检测性能差别悬殊,使用时需谨慎判读结果。     

化学比色法测定血清碳酸氢根的研究

目的建立一种新的血清碳酸氢根(HCO3-)测定方法。方法应用自配试剂建立两步终点测定法,可满足全自动和手工半自动测定,并对该方法进行方法学评价。结果该法比色液吸收峰556~558 nm,线性范围1~50 mm o l/L,批内CV 2.56%,批间CV 3.55%,回收率96%~103%,与血气分析仪(X)相关良好,Y=0.48 0.989X,r=0.982(n=40),脂血、溶血、黄疸标本对结果无影响,健康人静脉HCO3-浓度x-±s=25.76±2.26 mm o l/L。结论该法操作简便,结果准确,试剂稳定,成本低廉,适合各级医院常规和急诊使用。     

AVL9130电解质分析仪A、B标准液的配制及应用

目的：实现AVL9130（9120）电解质（K^ 、Na^ 、Cl^-)分析仪A、B标准液的自配，降低成本。方法：对原装试剂进行测量、分析和计算，然后配制上机和原装试剂进行对比分析、观察。结果：相关性好，批内、批间误差小。回收试验亦符合要求。结论：自配试剂完全能代替进口试剂，成本仅为进口试剂百分之一。     

脲酶和亮氨酸脱氢酶偶联法动力学测定血清或尿液中尿素

目的　建立适合于自动化分析血清和尿液尿素的脲酶和亮氨酸脱氢酶偶联的连续监测法。方法　对pH、2 酮基异乙烯酸钠、亮氨酸脱氢酶和脲酶浓度等反应条件进行实验研究 ,并对建立的方法进行评价。结果　用双试剂连续监测法 ,试剂Ⅰ :10 0mmol/LN ,N 二乙醇胺基乙酸缓冲液 (pH 8.80 ) ,含 2 酮基异乙烯酸钠 3.0mmol/L、NADH 0 .3mmol/L、亮氨酸脱氢酶 2 .0kU/L。试剂Ⅱ :试剂Ⅰ中加入脲酶 70kU/L。本法线性范围血清 0 .5～ 15 0mmol/L ,尿液 8.0～ 6 5 0mmol/L。血清和尿液的平均回收率分别为 10 2 .1%和 10 1.5 %。血清批内和批间平均CV分别为 1.0 2 %和 1.70 % ;尿液批内平均CV为 1.98%。本法 (Y)和脲酶偶联谷氨酸脱氢酶法 (X)对比相关良好 (血清Y =0 .992X +0 .0 4 0 ,r=0 .993;尿液Y =0 .990X +0 .6 1,r=0 .991)。胆红素 <32 5 μmol/L、血红蛋白 <5g/L、抗坏血酸 <80 0 μmol/L、三酰甘油 (TG) <7.5mmol/L和NH+ 4 <0 .5mmol/L对测定无明显干扰。结论　本法简便、准确、线性范围广 ,可用于常规自动分析。     

硫酸肼还原法测定血清中硝酸盐浓度

目的 建立一种简便可靠的血清硝酸盐浓度测定方法.方法 在碱性介质中用硫酸肼将去蛋白血清中的硝酸盐还原为亚硝酸盐,再用Griess试剂测定亚硝酸盐的浓度.结果 在NaOH介质(pH13.2)中,硫酸肼有最佳的还原率,56℃水浴10min,反应即可完成.该法批内CV3.58%(41.6±1.49μmol/L,n=15),批间CV6.40%(79.8±5.11μmoL/L,n=10);平均还原率94.7%;平均回收率95.1%;线性范围10～200μmol/L;参考范围32.7±15.0(±s,μmol/L).结论 该法还原反应快速、高效,重复性好,且操作简便,试剂价格低廉.     

3种肌钙蛋白Ⅰ试剂在自动生化仪上的分析性能验证

目的对3种应用于自动生化分析仪的胶乳增强免疫比浊法检测血肌钙蛋白I(cTnI)试剂进行分析性能验证,并初步应用于临床。方法参考CLSI EP6-A、EP15-A、EP7-P方案对3种方法的精密度、线性范围、干扰因素(胆红素、血红蛋白、乳糜)进行评估,并与美国贝克曼库尔特公司生产的化学发光免疫分析仪及配套试剂进行比对。参考CLSI C28-A2方案对试剂A、B、C的参考范围进行验证,评估试剂A、B、C与贝克曼ACCESS2化学发光免疫分析仪判定cTnI异常的一致率。结果试剂A、B、C的CV批内、CV总均小于试剂盒声明不精密度,定量测定下限可分别达0.11、0.23、0.07ng/mL,基本满足检测要求,线性范围分别为0.12～26.3ng/mL(r=0.994),0.20～25.3mg/L(r=0.997),0.10～26.9mg/L(r=0.999),线性相关均良好。胆红素、血红蛋白、乳糜浊度分别不超过684μmol/L、3.88g/L及1240FTU时,对试剂A检测结果无显著干扰,试剂B、C后两项数值较试剂A高。乳糜血清标本高速离心后,试剂A、B、C测定cTnI浓度较离心前的平均偏倚分别为-7.31%、1.42%、1.02%。试剂A、B、C与ACCESS2化学发光免疫分析仪检测结果具有较好相关性和一致性。结论应用于自动生化分析仪的3种胶乳增强免疫比浊法测定cTnI试剂盒,具有较高的精密度和灵敏度,与ACCESS2化学发光免疫分析仪结果相关良好;可满足临床测试要求.但抗干扰能力存在差异,部分试剂参考范围也有待进一步验证。     

血清Lp-PLA2质量与活性检测结果的一致性评价

目的评价两种测定脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)质量与活性的试剂在雅培C16000自动生化分析仪上检测结果的一致性。方法根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)文件相关要求,评价两种试剂的精密度、正确度、线性范围及参考区间,同时对A、B两种试剂检测患者标本的一致性进行评价。结果 A试剂和B试剂各水平重复性分别为1.96%和2.43%、0.58%和0.78%,实验室内精密度分别为3.10%和3.23%、0.76%和1.96%,均小于厂商声称的重复性,即A试剂重复性≤5%,B试剂重复性≤10%;正确度验证A试剂和B试剂偏倚分别为0.33%和2.17%、2.94%和3.92%,均小于所选用的1/2允许总误差(12%)的标准;线性范围A试剂为29.0～792.5ng/mL,B试剂为74～1 486U/L,回归系数R2分别为0.997 0和0.999 6,相关系数(r)分别为0.998 5和0.999 8,A、B试剂线性均符合CLSI EP6-A文件及试剂厂家的要求;A、B两种试剂方法学比较中,回归系数R2=0.599 1,r=0.774 0,两种试剂检测方法间有一定相关性,但一致性较差;参考区间A试剂的验证范围:10～200ng/mL,B试剂的验证范围:男性230～728U/L,女性194～640U/L(18～49岁),208～698U/L(50～88岁),均通过验证,两种试剂厂家提供的参考区间可运用于临床。结论两种应用于全自动生化分析仪C16000测定Lp-PLA2的试剂精密度、正确度及线性均良好,提供的参考区间可用,但两种试剂方法学间比较一致性较差。