PCNA、Survivin蛋白在人绒癌细胞株BeWo合体化过程中表达变化的研究

目的:通过检测人绒癌细胞株Be Wo合体化过程中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、生存素(Survivin)蛋白表达的变化,探讨滋养细胞合体化后增殖性的变化,为恶性滋养细胞肿瘤,尤其是耐药恶性滋养细胞肿瘤的临床治疗提供新的思路和方法。方法:利用毛喉素(forskolin)诱导Be Wo细胞株融合;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测促融素(Syncytin)在forskolin作用不同时间的Be Wo细胞株中的表达;应用蛋白质印迹(Western blotting)检测PCNA、Survivin蛋白在forskolin作用不同时间的Be Wo细胞株中的表达;应用噻唑蓝比色分析实验(MTT)法检测forskolin作用不同时间的绒癌细胞株Be Wo的增殖能力。结果:1forskolin作用后的Be Wo细胞株Syncytin基因的表达增强,且随着forskolin作用时间的延长,Syncytin的表达更强,于48 h达到高峰。2forskolin作用后的Be Wo细胞株PCNA、Survivin蛋白的表达降低。3forskolin作用后的Be Wo细胞株的增殖能力下降,且不同作用时间的差异有统计学意义;forskolin作用的时间越长,Be Wo细胞株增殖能力下降越明显。结论:人绒癌细胞株Be Wo合体化后PCNA、Survivin蛋白的表达降低,说明人绒癌细胞株Be Wo合体化后增殖性降低,推测诱导滋养细胞合体化可能对临床治疗恶性滋养细胞肿瘤具有一定作用。     

葡多酚对小鼠乳腺癌细胞增殖活性抑制作用

目的研究葡多酚（GPC）对小鼠乳腺癌细胞增殖活性的抑制作用。方法将皮下接种乳腺癌（EMT6）细胞株的小鼠每日经口灌胃给予不同剂量的GPC，13d后取乳腺癌组织，用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法测各组小鼠乳腺癌细胞的增殖活性．免疫组化法检测各组增殖细胞核抗原（PCNA）和P53表达。结果肿瘤对照组PCNA和P53阳性表达率分别为72．78％和37．22％．高剂量GPC组则分别为28．32％和7．46％，差异有统计学意义（P〈0．05）。各组乳腺癌细胞的增殖活性随GPC剂量的增高而降低。结论葡多酚可有效抑制小鼠乳腺癌细胞增殖活性。     

nm23和PCNA在胃肠道间质瘤中的表达及其临床意义

目的　研究胃肠道间质瘤中nm2 3和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达。方法　采用免疫组织化学SP法对胃肠道间质瘤进行研究 ,并对所有病例进行了随访。结果　 6 5例胃肠道间质瘤nm2 3蛋白阳性率分别为 :良性 90 .9%(2 0 / 2 2 )、潜在恶性 89.3% (2 5 / 2 8)、恶性 80 .0 % (12 / 15 ) ;三者两两相比较 ,差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ;恶性组nm2 3阳性率 :有转移的为 85 .7% (6 / 7) ,无转移的为 75 .0 % (6 / 8) ,两者比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;6 5例PCNA平均标记指数分别为 :良性 34.5 %、潜在恶性 6 2 .3%、恶性 88.7% ;三者两两相比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。转移组PCNA指数为 95 .4 % ,无转移组PCNA指数为 73.6 % ,二者比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　nm2 3蛋白检测无助于判断胃肠道间质瘤的良恶性及预测预后 ;检测PCNA有助于判断胃肠道间质瘤的良恶性及预测预后。     

胃癌组织中幽门螺杆菌感染与PCNA、COX-2蛋白表达的相关性

目的：探讨胃癌组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、环氧合酶-2（COX-2）蛋白的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系。方法：应用Warthin—Starry银染色观察胃癌组织中幽门螺杆菌（HP）感染情况、免疫组化染色检测胃癌中PCNA、COX-2蛋白的表达情况,并与慢性胃炎、胃黏膜上皮内瘤变标本检测结果相比较。结果：胃癌、慢性胃炎和胃黏膜上皮内瘤变组织中HP感染率分别为：84．5％、42．9％、66．7％;PCNA阳性表达率分别86．2％、47．6％、72．2％;COX一2阳性表达率为84．5％、28．6％、72．2％。在同一病变中HP阳性组PCNA、COX-2阳性表达率高于HP阴性组,胃癌组有显著差异（Fisher’s ExaCt Test：前者P=0．000,后者P=-0．025）。胃癌中HP感染与PCNA与COX-2蛋白表达呈正相关（r=0．521。P=0．000及r=0．342,P＝0．009）。结论：胃癌组织中PCNA与COX-2蛋白表达及HP感染共同参与胃癌的发生、发展。     

葡多酚对小鼠肝细胞蛋白激酶C和增殖细胞核抗原表达的影响

目的观察葡多酚(GPC)对小鼠肝细胞蛋白激酶C(PKC)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法每日给小鼠经口灌胃不同剂量的GPC,30天后取肝组织,用MTT法测各组小鼠肝细胞的增殖活性水平,免疫组化的方法检测各组PKC和PCNA的表达。结果高剂量GPC组PKC和PCNA阳性表达率分别为47.62%和82.76%,阴性对照组则分别为6.42%和32.62%,经χ2检验,差异有显著性(P<0.05)。各组肝细胞的PKC和PCNA阳性表达率随GPC剂量的增高而增高。结论葡多酚可促进小鼠肝细胞PKC的表达,提高肝细胞增殖活性。     

COX-2在上皮性卵巢肿瘤的表达及塞来昔布对卵巢癌A2780细胞株增殖的影响

目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)在上皮性卵巢肿瘤的表达及环氧化酶-2抑制剂塞来昔布(celecoxib)在体外对人卵巢癌A2780细胞株增殖的影响。方法:①采用免疫组化SP法检测COX-2在65例上皮性卵巢癌、18例交界性与18例良性上皮性卵巢肿瘤及9例正常卵巢组织中的表达;②采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察塞来昔布在体外对A2780细胞增殖的影响;③流式细胞仪(FCM)测定塞来昔布在体外对A2780细胞周期的影响。结果:①COX-2在上皮性卵巢癌组(73.80%)及交界性卵巢肿瘤组的表达(66.70%)显著高于良性卵巢肿瘤组(16.70%)及正常卵巢组(11.10%),均P<0.05;②MTT显示,塞来昔布在体外以时间-剂量依赖方式抑制A2780增殖(P<0.05);③塞来昔布作用72 h后A2780细胞周期呈剂量依赖方式出现G0/G1期阻滞(P<0.05)。结论:①COX-2在交界性及恶性上皮性卵巢肿瘤中的表达明显增强,COX-2可能在交界性及恶性上皮性卵巢肿瘤的发生、发展中起一定作用;②体外特异性COX-2抑制剂(塞来昔布)能够抑制卵巢癌A2780细胞株增殖,有可能成为卵巢癌化疗的有效药物。     

重组人生长激素联合氟尿嘧啶体外干预人结肠癌细胞株增殖

目的:在体外环境下观察基因重组人生长激素(rhGH)及联合氟尿嘧啶(5-FU)干预不同细胞膜生长激素受体(GHR)表达水平对人结肠癌细胞的增殖情况。方法:采用免疫细胞化学法检测人结肠癌细胞株HCT-8和LOVO膜表面的GHR表达水平。每株细胞分为对照组、rhGH组、5-FU组和rhGH+5-FU组,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、克隆形成实验和免疫细胞化学等方法,测定各组各株肿瘤细胞的抑制率、增殖细胞核抗原(PCNA)表达变化。结果:HCT-8高表达GHR(阳性表达细胞数≥50%),LOVO未表达GHR。rhGH显著提高HCT-8细胞增殖和克隆形成率,PCNA表达增加,且联合化疗后,较LOVO组肿瘤抑制率减少(P0.05)。结论:在体外环境下,rhGH促GHR阳性表达的结肠癌细胞增殖,且对5-FU化疗有抵抗,对于不表达GHR的结肠癌细胞无上述作用。     

PCNA和SCCA对宫颈鳞癌NACT敏感性和疗效的预测价值

目的:探讨增殖细胞核抗原(PCNA)及鳞状细胞癌抗原(SCCA)作为评价宫颈鳞癌新辅助化疗(NACT)敏感性及疗效指标的可行性。方法:收集2006年4月～2012年4月桂林医学院附属医院56例IB2～IIB期宫颈鳞癌NACT前后组织标本及其中的2011年4月～2012年4月16例宫颈鳞癌NACT前后血清标本,采用免疫组化法测定癌组织中PCNA的表达,ELISA检测血清中SCCA的表达。结果:56例宫颈鳞癌经NACT治疗2～3周后评价临床疗效,临床总有效率为67.9%(38/56)。有效组NACT前组织PCNA指数及血清SCCA水平均高于无效组(P<0.01),有效组PCNA指数及血清SCCA水平化疗后明显下降(P<0.01)。NACT后组织PCNA降幅和血清SCCA降幅与肿瘤缩小比例之间有显著相关性(r=0.808,P<0.01;r=0.708,P<0.05)。结论:联合检测组织增殖细胞核抗原及血清鳞状细胞癌抗原可作为评价宫颈鳞癌新辅助化疗敏感性和疗效的有效指标之一。     

p27、PCNA在骨肉瘤中表达的意义及相关关系

目的　探讨p2 7蛋白 (p2 7)、增殖细胞核抗原 (PCNA)在骨肉瘤中表达的意义和临床价值。方法　采用免疫组织化学S -P法测取 32例骨肉瘤、2 0例骨软骨瘤标本的p2 7、PCNA表达值 ,以SPSS 10 .0软件系统行数据处理 ,分析其表达的意义和相关性。结果　p2 7的阳性表达率在骨肉瘤中为 4 0 .6 3% (13 32 ) ,在骨软骨瘤中为 75 .0 0 % (15 2 0 ) ,两者比较有显著差异 (P <0 .0 5 ) ;PCNA的阳性表达率在骨肉瘤中为 84 .38% (2 7 32 ) ,在骨软骨瘤中为 10 .0 0 %(2 2 0 ) ,两者差异显著 (P <0 .0 1) ;在骨肉瘤中 ,p2 7与PCNA呈负相关 (γs=- 0 .5 71,P <0 .0 5 )。结论　p2 7表达下降可能是骨肉瘤发生发展的原因之一 ,PCNA可作为骨肉瘤增殖的一个标志。     

Caspase-2与caspase-3蛋白在顺铂诱导卵巢癌细胞系A2780和A2780/DDP凋亡中的表达

目的　探讨Caspase -2和caspase -3蛋白在顺铂诱导卵巢癌细胞系A2 780和A2 780 /DDP凋亡中的作用和对A2 780 /DDP细胞系顺铂耐药形成的可能影响。方法　用细胞培养方法 ,加入不同浓度 (分别为 0、5、10、2 0、40 μM)顺铂共同培养卵巢癌细胞系A2 780和A2 780 /DDP 2 4h、48h和 72h ,原位末端标记法 (TUNEL)检测卵巢癌细胞系凋亡情况 ,用免疫组化SABC法观察此过程中Caspase -2和caspase -3蛋白表达。结果　随顺铂作用时间延长和剂量增加 ,卵巢癌细胞系A2 780和A2 780 /DDP中凋亡逐渐增强(P <0 0 1) ,caspase -2和caspase -3蛋白表达呈现出对顺铂作用时间和剂量的依从性 (P <0 0 1) ,两种蛋白在A2 780细胞中表达明显强于A2 780 /DDP( P <0 0 1)。结论　Caspase -2和caspase -3蛋白活化促进顺铂诱导的卵巢癌细胞系A2 780和A2 780 /DDP凋亡 ,其表达抑制可能是影响顺铂耐药的A2 780 /DDP细胞凋亡的原因。     

MDR1及MDR3基因与卵巢癌细胞顺铂耐药的关系

目的:探讨MDR1(Multidrug resistance gene-1)及MDR3(Multidrug resistance gene-3)基因与卵巢癌细胞顺铂耐药的关系。方法:两种质粒一起瞬时转染A2780/DDP细胞,空载体组及未转染组作为对照。Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术、MTT法、RT-PCR、western blot分别检测A2780/DDP细胞早晚期凋亡、细胞增殖活性、MDR1和MDR3 mRNA表达及caspase-3蛋白水平。结果:两种质粒(pSuppressorNeo MDR1 siRNA,MDR3 siRNA)均未能逆转A2780/DDP细胞顺铂耐药:①流式显示转染MDR1 siRNA组、MDR3 siRNA组和pSuppressorNeo空载体组后相比较未转染A2780/DDP细胞凋亡率无显著改变(P>0.05);②在一定药物浓度范围内,转染MDR1和MDR3小分子干扰RNA均未能增强顺铂对A2780/DDP细胞的细胞毒作用;③与空载体组和未转染细胞相比,A2780/DDP细胞的MDR3及MDR1 mRNA表达均低下(P>0.05);④Caspase-3蛋白表达未见增加。结论:顺铂所致的卵巢癌细胞多药耐药与MDR1及MDR3基因过度表达均无关,卵巢癌细胞顺铂耐药为非P-gp     

顺铂作用下卵巢癌敏感细胞A2780与耐药细胞A2780/DDP凋亡与自噬水平的变化及意义

目的:通过分析自噬对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响,探讨自噬与卵巢癌顺铂耐药性的关系,为卵巢癌治疗提供依据。方法:培养卵巢癌细胞株A2780和A2780/DDP,进行卵巢癌细胞系A2780及A2780/DDP顺铂敏感性的测定,流式细胞仪测定顺铂作用下A2780和A2780/DDP细胞的凋亡率;将10μM顺铂作用48h的A2780细胞和40μM顺铂作用48h的A2780/DDP细胞经处理,采用Western blot法检测Beclin1蛋白的表达;电镜下观察10μM顺铂作用48h的A2780细胞和40μM顺铂作用48h的A2780/DDP细胞经固定染色处理的自噬细胞活性。结果:顺铂主要通过诱导凋亡对卵巢癌耐药细胞A2780/DDP及敏感细胞A2780发挥细胞毒效应;顺铂作用下,耐药细胞的自噬活性明显增强,而敏感细胞自噬活性无明显增强。结论:顺铂诱导耐药卵巢癌细胞发生凋亡的能力较亲代敏感细胞降低,在其发生过程中,反应性自噬活性增强可能与其顺铂耐药性的形成有关,提示对肿瘤细胞的自噬水平进行监测及调控可能为逆转卵巢癌铂耐药提供新的思路。     

肝素结合表皮生长因子与卵巢癌顺铂化疗耐药性关系的研究

目的检测肝素结合表皮生长因子(heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor,HB-EGF)对卵巢癌顺铂耐药细胞增殖及耐药性的影响,探讨HB-EGF与卵巢癌顺铂耐药性的关系及机制。方法间歇大剂量冲击法诱导卵巢癌顺铂耐药细胞。使用HB-EGF siRNA转染敏感及耐药细胞,Real time PCR法检测转染效果。将实验细胞分为4组,卵巢癌敏感细胞株A 2780组(A组)、卵巢癌顺铂耐药细胞株A 2780/CDDP组(A/C组)、转染后A组(Asi组)、转染后A/C组(A/Csi组)。四甲基偶氮唑蓝比色法检测4组细胞增殖能力并计算对顺铂的半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)。蛋白印迹法检测4组细胞中HB-EGF蛋白的表达情况,及耐药细胞转染前后表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、核苷酸切除修复交叉互补基因1(excision repair cross complementation group 1,ERCC 1)蛋白的表达情况。结果 A/C组中HB-EGF蛋白表达量、顺铂IC50均较A组升高;与A组相比,Asi组HB-EGF蛋白表达量降低;与A/C组相比,A/Csi组中HB-EGF mRNA表达量下降,并且HB-EGF蛋白的表达量也降低,下降幅度比敏感组更大,同时A/Csi组顺铂IC50较A/C组下降;与A/C组相比,A/Csi组EGFR、ERCC 1蛋白的表达量均降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论HB-EGF在卵巢癌顺铂耐药中的表达水平明显高于敏感细胞,抑制HB-EGF可以增强卵巢癌对顺铂的敏感性,提示HB-EGF与卵巢癌顺铂耐药性相关。此外,抑制HB-EGF的表达,可以下调卵巢癌顺铂耐药株中EGFR、ERCC 1蛋白的表达量,这可能是卵巢癌顺铂耐药的相关机制之一。     

依达拉奉对卵巢癌顺铂耐药细胞系A2780CP耐药性的影响

目的研究依达拉奉对卵巢癌耐药细胞株A2780CP增殖、凋亡及其对顺铂敏感性的影响。方法选取顺铂和依达拉奉的血药峰值浓度作为联合用药的基础,将实验分为顺铂处理A2780细胞组、顺铂处理A2780CP细胞组、依达拉奉处理A2780CP细胞组、顺铂及依达拉奉联合处理A2780CP细胞组,对照组。培养一定时间后用MTT法检测细胞相对活性,流式细胞仪分析细胞的凋亡状况。结果顺铂及依达拉奉联合处理的A2780cP细胞生长明显慢于单独2780CP细胞,顺铂及依达拉奉联合处理的A2780CP细胞对顺铂的敏感性增加（P=0．016〈0．05）;AnnexinV—FITC／P1分析显示,药物作用24小时后,顺铂及依达拉奉联合处理A2780CP细胞能提高细胞凋亡率（P=0．037〈0．05）。结论依达拉奉能显著提高A2780CP细胞对顺铂的敏感性,对顺铂耐药性有一定逆转作用。     

上皮性卵巢癌中P73蛋白、P21~(WAF1/CIP1)蛋白、PCNA蛋白的表达及其相关性

目的:探讨上皮性卵巢癌中P73蛋白、P21WAF1/CIP1蛋白与PCNA蛋白的表达及其相关性,为卵巢癌的临床诊断及治疗包括基因治疗提供实验依据。方法:采用Eli Visionplus免疫组化研究40例上皮性卵巢癌组织、15例正常卵巢组织、25例良性上皮性卵巢肿瘤组织、7例交界性上皮性卵巢肿瘤组织中P73蛋白、P21WAF1/CIP1蛋白与PCNA蛋白的表达。结果:随着上皮性卵巢癌病理学分级及临床分期增高,①P73蛋白表达率增高,差异有统计学意义(P0.05);但不同病理类型之间差异无统计学意义,在良性上皮性卵巢肿瘤与上皮性卵巢癌差异有统计学意义(P0.05);②P21WAF1/CIP1蛋白表达率降低,差异有统计学意义(P0.05);但不同病理类型之间无统计学差异,在良性上皮性卵巢肿瘤与上皮性卵巢癌差异有统计学意义(P0.05);③PCNA蛋白表达率增高,差异有统计学意义(P0.05);但不同病理类型之间无统计学差异,在良性上皮性卵巢肿瘤与上皮性卵巢癌差异有统计学意义(P0.05)。结论:①P73蛋白、PCNA蛋白表达在上皮性卵巢癌中阳性率升高,并随恶性程度增高而增高。②P21WAF1/CIP1蛋白表达在上皮性卵巢癌中阳性率降低,并随恶性程度增高而降低,与P73蛋白表达呈负相关。     

Synthesis, characterisation, activities, cell uptake and DNA binding of [[trans-PtCl(NH3)2] [mu-(H2N(CH2)6NH2)] [trans-PdCl(NH3)2](NO3)Cl

The dinuclear complex: [[trans-PtCl(NH(3))(2)] [mu-(H(2)N(CH(2))(6)NH(2))] [trans-PdCl(NH(3))(2)](NO(3))Cl (code named DHD) has been synthesized and characterized. The activity against human cancer cell lines including ovarian: A2780, A2780(cisR), cell up take, level of binding with DNA and nature of interaction of the compound with pBR322 plasmid and salmon sperm DNAs have been determined. The compound is found to exhibit significant anticancer activity against ovarian cancer cell lines: A2780, A2780(cisR) and A2780(ZD0473R)--about two times as active as cisplatin against A2780 cell line, about five times as active as cisplatin against A2780(cisR) and A2780(ZD0473R) cell lines. The higher activity of DHD suggests that the compound is able to overcome multiple mechanisms of resistance operating in A2780(cisR) and A2780(ZD0473R) cell lines. DHD is believed to form a range of interstrand GG adducts with duplex DNA that induces global changes in the DNA conformation, unlike cisplatin and ZD0473 that form mainly intrastrand adducts that induces a local kink in a DNA strand. Increasing prevention of BamH1 digestion of form I and form II pBR322 plasmid DNA with the increase in concentration of DHD provides support to the idea that the interstrand binding of DHD with pBR322 plasmid DNA brings about global changes in DNA conformation.     

内皮抑素质粒联合顺铂对上皮性卵巢癌细胞株A2780增殖和凋亡的影响

目的:探讨内皮抑素质粒联合顺铂对上皮性卵巢癌细胞株A2780增殖和凋亡的影响。方法:通过瞬时转染内皮抑素质粒到卵巢癌细胞A2780后,采用MTT法和流式细胞术检测内皮抑素以及内皮抑素和顺铂联合应用对细胞增殖和凋亡的影响。结果:MTT法检测发现转染内皮抑素质粒后,A2780细胞的增殖明显减慢,顺铂对其生长抑制作用明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测发现与空白组相比,转染内皮抑素质粒后A2780细胞的G0/G1期细胞明显增加,S期细胞明显减少,细胞的凋亡率由(1.59±0.86)%增加到(8.66±1.27)%;内皮抑素质粒联合顺铂治疗后,上述差异更加显著(P<0.01)。结论:内皮抑素联合顺铂可通过抑制A2780细胞的生长和增加其凋亡而产生协同抗瘤作用。     

靶向EZH2基因的shRNA干扰对人卵巢癌细胞Drosha基因表达的影响

目的:探讨RNA干扰沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)基因对卵巢癌细胞株A2780的Drosha基因表达的影响。方法:获得稳定表达EZH2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的人卵巢癌细胞株A2780-shEZH2,实时定量PCR法(qRT-PCR)和免疫印记法(Western blot)检测转染株的Drosha基因表达。结果:以未转染组A2780细胞Drosha的表达水平为100%,EZH2-shRNA转染组A2780-shEZH2细胞Drosha的mRNA及蛋白水平分别上升(53.02±4.32)%和(51.26±1.35)%,与未转染组比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论:沉默EZH2基因可以上调Drosha基因的表达。     

Synthesis, characterization, activities, cell uptake and DNA binding of trinuclear complex: [{trans-PtCl(NH(3))}(2)mu-{trans-Pt(NH(3))(2-hydroxypyridine)-(H(2)N(CH(2))(6)NH(2))(2)]Cl(4)

The trinuclear complex: [{trans-PtCl(NH(3))}(2)mu-{trans-Pt(NH(3))(2-hydroxypyridine)-(H(2)N(CH(2))(6)NH(2))(2)]Cl(4) (code named CH9) has been synthesized and characterized. The activity of the compound against human ovarian cancer cell lines: A2780, A2780(cisR) and A2780(ZD0473R), cell up take, level of binding with DNA and nature of its interaction with pBR322 plasmid DNA have been determined. Although the compound is found to be less active (about a half time as active as cisplatin) against the parent ovary cell line A2780, it is found to be more active than cisplatin against resistant cell lines: A2780(cisR) (3.6 times more) and A2780(ZD0473R) (3.4 times more). The higher activity of CH9 against the resistant cell lines suggests that the compound has been able to overcome multiple mechanisms of resistance operating in A2780(cisR) and A2780(ZD0473R) cell lines. Like other multicentered complexes, the compound is believed to form a range of interstrand GG adducts with duplex DNA that induces permanent global changes in the DNA conformation. This binding is different from that of cisplatin and ZD0473 that form mainly intrastrand adducts, inducing a local kink in a DNA strand. Increasing prevention of BamH1 digestion of form I and form II pBR322 plasmid DNA with the increase in concentration of CH9 provides support to the idea that global changes in DNA conformation are induced as a result of its interaction with the compound.