单纯疱诊病毒胸苷激酶基因转染联合药物对卵巢上皮癌细胞杀伤作用的研究

目的：探讨逆转录病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV1-tk）基因转染,联合抗病毒药物羟甲基无环鸟苷（ganciclovir,GCV）和无环鸟苷（acyclovir,ACV）对人卵巢上皮癌（OEC）细胞系TYK的杀伤作用。方法：用lipofection reagent介导法将PLNTK5质粒转移入包装细胞PA317中,用滴度最高的PA317病毒上清液转染TYK细胞,运用MTT法及光镜、电镜检测GCV、ACV对目的细胞的体外杀伤效应。结果：将PLNTK5质粒转入PA317细胞后,得到了稳定的产病毒细胞株。TYK细胞可被病毒上清液转染,转导HSV1-tk基因可显著增强ACV、GCV对TYK细胞的杀伤作用。结论：逆转录病毒可介导HSV1-tk基因转染TYK细胞并获稳定表达,ACV、GCV对携有HSV1-tk基因的卵巢癌细胞有明显的体外杀伤作用。     

PCR快速检测疱疹病毒眼部感染(简报)

近年来随着抗生素和激素的广泛使用，眼部疟疾病毒感染的发病率逐渐增高。临床常见的有：单纯疱疹性角膜炎（HSK，已成为单眼致盲的主要眼病之一）、疱疹病毒引起的急性滤泡性结角膜炎、色素膜炎（包括急性视网膜坏死）和视网膜炎等。疤疹病毒主要包括5种：单纯疱疹病毒-1型和2型（HSV－1、HSV－2）、水痘一带状疤疹病毒（VZV）、巨细胞病毒（CMV）和E－B病毒（EBV）。近年国内已有用PCR方法对HSV－1型角膜炎检测的报道，而实际上疮疹病毒眼部感染中除角膜炎的病因以HSV－1感染为主外，其它眼部感染（包括少数的角膜感染）上述5…     

黄芪总皂甙抗HSV2的实验研究

目的：研究黄芪的抗病毒作用。方法：以阿昔洛韦（ACV）为阳性对照,采用病毒所致细胞病变的抑制及空斑减数实验,观察黄芪总皂甙抗HSV－2333株药效。结果：在HEp-2细胞系统中,ACV对HSV－2333株直接杀灭、感染阻断、增殖抑制的ED50为16．45μg/ml、18.26μg/ml、10.85μg/ml;黄芪总皂甙 的相应数值为1．73μg/ml、2.71μg/ml、2.74μ/ml。结论：黄芪总皂甙对HSV－2 333株的治疗指数为ACV的2．31、0．96、1．64倍,值得开发利用。     

中药双黄连对单纯疱疹病毒的抑毒作用

目的探讨中药双黄连注射液对人胚脑单纯疱疹病毒Ⅰ型脑炎模型的抑毒作用。方法采用人胚脑神经细胞制备HSV—Ⅰ型脑炎模型，用双黄连进行抑毒实验。检测培养液中的HSV－1的DAN拷贝数和肌酸激酶定量，作为抑毒指标。结果双黄连组对单纯疱疹病毒Ⅰ型脑炎模型的病变有明显抑制作用，HSV-1 DNA拷贝数反肌酸激酶定量明显降低。结论双黄连可通过减少病毒DNA的复制，对单纯疱疹病毒Ⅰ型脑炎模型的病变起到抑制病毒的作用。     

黄芪总多糖抗HSV-2的实验研究

目的：研究黄芪的抗病毒作用。方法：以阿昔洛韦（ACV）为阳性对照,采用对病毒所致细胞病变的抑制及空斑减实验,观察黄芪总多糖抗HSV－2 333株药效。结果：在Hep-2细胞系统中,ACV对HSV－2 333株直接杀灭感染阻断,增殖抑制的ED50分别为16．45,18．62,10．85μg/ml,黄芪总多糖的相应数值分别为6．04,5．43,7．50μg/ml,结论：黄芪总多糖对HSV－2333株的治疗指数为ACV的3．7,2．7,3．3倍,值得开发利用。     

肝癌HSV-tk/ACV基因治疗的实验研究

目的：观察单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（HSV－tk基因,自杀基因）与阿昔洛韦（ＡＣＶ）系统对人肝癌细胞的体外杀伤效果。方法：体外培养已感染含ＨＳＶ-tk基因的重组逆转录病毒的PA317-tk细胞,获取含HSV－tk基因的重组逆转录病毒颗粒。用后者感染人肝癌细胞株SMMC－7721,G418培养基筛选抗性克降SMMC-7721-tk,并以PCR技术检测HSV-tk基因判断转染成功与否。用形态学方法和MTT法检测ACV对SMMC－7721－tk细胞的杀伤作用。结果：SMMC－7721－tk细胞经PCR证实含PCR－tk基因。形态学观察显示,ACV浓度在0.01-1μg/ml时,SMMC－7721－tk细胞小部分死亡,在浓度自1μg-1000μg/ml时,细胞大部分死亡;HE染色可见细胞凋亡。MTT法测定显示,ACV浓度自1μg/ml开始即对SMMC－7721－tk细胞产生明显抑制作用,抑制率自49％到78％,作用强度呈ACV浓度依赖性。各种浓度的ACV对SMMC－7721细胞没有或只有轻度抑制作用。结论：HSV－tk/ACV系统体外对肝癌细胞有明显的杀伤作用,有可能成为临床基因治疗方案。     

无环鸟苷对脑脊液单纯疱疹病毒DNA影响初探(附8例报告)

目的：探讨无环鸟苷对脑脊液（CSF）中单纯疱疹病毒（HSV－1）DNA的影响。方法：应用定量聚合酶链反应（PCR）技术检测了8例单纯疱疹病毒性脑炎（HSE）患者系列CSF中HSV－1，并将我环鸟苷治疗前后的HSV－1DNA量作比较分析。结果：无环鸟苷治疗后的CSF中，HSV－1DNA量较治疗前减低，结论：无环鸟苷可使CSF中HSV－1DNA量减低，CSF中HSV－1DNA定量检测可作为判断无环鸟苷疗效及给药与否的依据之一。     

抗疱疹病毒药物的研究

单纯疱疹病毒（herpes Simplex virus，HSV）是人类病毒性疾病中最常见的病毒，可引起口唇疱疹，生殖器疱疹，脑膜炎和角膜炎等一系列疾病［1，2］。在全球范围内，HSV 有着极高的感染率和发病率［3］。阿昔洛韦（acyclovir，ACV）及其相关的核苷类似物是临床上主要用于治疗疱疹性疾病的药物，并已取得了较好的疗效［4］。但是在免疫抑制患者中 ACV 耐药毒株的出现，为开发更安全更有效的抗疱疹病毒药物提出了更多的要求［5，6］。     

023 杉藻属植物Gigartina skottsbergii角叉菜聚糖抗小鼠腹腔单纯疱疹病毒的作用

先前研究表明，从杉藻属红藻类植物G．skottsber gii中分离的多种结构类型的天然角叉菜聚糖在体外实验中对单纯疱疹病毒（HSV）-1和-2复制具有选择性抑制活性，其中环化μ／v-角叉菜聚糖1C3活性较强而无细胞毒性。作者采用体内实验，首次研究了1C3对鼠腹膜内HSV-1感染的抗病毒活性。     

抗病毒药物筛选中两种方法的比较

目的：比较四甲基偶氮唑盐（MTT）法与细胞病变效应（CPE）在筛选抗病毒药物中的异同。方法：在体外用两种方法检测阿昔洛韦（ACV）对细胞毒性作用和抗单纯疱疹病毒1型（HSV-1）的作用。结果：MTT法较CPE法敏感、客观、准确。结论：MTT法是一种快速、敏感、客观和准确的筛选和评价抗病毒药物的方法。     

PSP对HSV-1糖蛋白gG mRNA表达的抑制作用

①目的　探讨钝顶螺旋藻多糖 (PSP)对单纯疱疹病毒 1型 (HSV 1)糖蛋白 gGmRNA表达的影响及其机制 ,为进一步开发该药提供理论依据。②方法　以不同剂量的PSP作用于适量HSV 1感染的Vero细胞 ,应用地高辛标记寡核苷酸探针 ,检测HSV 1糖蛋白gGmRNA的表达。③结果　PSP作用组HSV 1糖蛋白gGmRNA的表达显著低于阳性对照组 (F =1319.1,q =6 7.2 8,6 9.2 1,83.0 6 ,P <0 .0 1)。 ④结论　PSP抗HSV 1作用的机制之一为抑制HSV 1糖蛋白gG基因的转录     

紫菜多糖PY4对免疫细胞增殖的影响

目的：分析紫菜多糖的性质,测定其对免疫细胞增殖的影响。方法：将纯化得到的紫菜多糖PY4,用紫外和红外光谱进行鉴定。采用体外培养方法测定了PY4对小鼠骨髓细胞,脾 脏细胞,胸腺细胞的生长以及混合淋巴细胞反应的影响。结果：在骨髓细胞,脾脏淋巴细胞和胸腺淋巴细胞的增殖试验中给药组与对照组之间有非常显著的差异,而混合淋巴细胞反应中两者没有差异。结论：多糖PY4对小鼠骨髓细胞,脾 脏淋巴细胞和胸腺淋巴细胞增殖有一定的抑制作用,而对混合淋巴细胞反应没有明显的影响。     

诱导物对二氢嘧啶酶的作用

D对羟基苯甘氨酸可由二氢嘧啶酶水解DL对羟基苯海因制备得到。本文对Pseudomonas putida9801 菌所产生的二氢嘧啶酶诱导物进行了筛选。得出最佳的诱导物为甲硫乙基海因,最适诱导用量为0 .1 % 。与不加诱导物相比,采用分步诱导可以使酶活力增高近30 倍。     

Studies of chemical constituents and their antioxidant activities from Astragalus mongholicus Bunge

To evaluate the antioxidant activities of different chemical constituents from Astragalus mongholicus Bunge and their protection against xanthine （XA）/xanthine oxidase （XO）-induced toxicity in PC12 cells. Methods The compounds of Astragalus mongholicus Bunge were isolated by chromatography and the structures were elucidated on the basis of spectral data interpretation. Their antioxidant activities were detected by 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl （DPPH） radical scavenging activities in a cell-free system. Meanwhile, the effects against XA/XO-induced toxicity were assessed using MTT assay in PC12 cells. Results Ten principal constituents were isolated and identified as formononetin （Ⅰ）, ononin （Ⅱ）, calycosin （Ⅲ）, calycosin-7-O-β-D-glucoside （Ⅳ）, 9,10-dimethoxypterocarpan-3-O-β-D-glucoside （Ⅴ）, adenosine （Ⅵ）, pinitol （Ⅶ）, daucosterol （Ⅷ）, β-sitoster （Ⅸ） and saccharose （Ⅹ） from Astragalus mongholicus Bunge. The compounds Ⅰ, Ⅲ, and Ⅳ scavenged DPPH free radicals in vitro. Formononetin and calycosin were found to inhibit XA/XO-induced cell injury significantly, with an estimated EC50 of 50 ng/mL. Conclusion Compound Ⅲ, Ⅵ, and Ⅶ are first reported in this plant. Calycosin exhibits the most potent antioxidant activity both in the cell-free system and in the cell system.     

阳离子脂质体介导HSV-TK基因对人脑胶质瘤细胞的杀伤作用

目的 观察阳离子脂质体介导的HSV－TK／ACV系统对人脑胶质瘤细胞的杀伤作用。方法 将新近克隆的含HSV－TK基因的真核表达载体pCR3-5K,用阳离子脂质体Lipofectamine转染至人脑胶质瘤细胞株TJ905中，筛选出阳性克隆，给予不同浓度的ACV，观察不同时间对细胞的杀伤情况，并用MTT方法检测不同细胞对ACV的反应情况。结果 转染TK基因的胶质瘤细胞对ACV的杀伤敏感性明显提高（P＜0．01），ACV对转染TK基因的胶质瘤细胞有特异性抑制和杀伤作用。结论 阳离子脂质体Lipofectamine是一种简便、安全、有效的基因转移方法。可用阳离子脂质体介导pCR3-TK转移，进行胶质瘤HSV－TK／GCV基因治疗的研究，为胶质瘤的治疗提供一种新方法。     

地胆草中的两个寡肽

目的；对地胆 化学成分进行研究。方法：通过理化性质和波谱分析方法对结构进行鉴定并通过二维核磁共振技术（^1H-^1HCOSY,HMQC,HMBC)对aurantiamide acetate的所有氢和碳的核磁共振化学位移进行了归属。结果：从地胆草中首次分得两个二肽衍生物。结果：鉴定其结构分别为：N－（N^1-benzoyl-S-phenylalanily1)-S-phenylalaninol(auratiamide) 及其乙酸酯（aurantiamide acetate)。     

富含生物碱的7种中草药提取液抑菌活性观察

目的：研究富含生物碱的7种中草药的抑菌活性方法。95％乙醇提取其有效成分后用滤纸片扩散法检测其抑菌活性．等倍稀释法检测其最小抑菌浓度(MIC)．滤纸条法观察协同作用,并测定各提取液生物碱含量。结果：7种中草药均有不同程度的抑菌作用,尤以益母草和苦参效果更强、更普遍;马兜铃与黄芪、马兜铃与益母草、益母草与黄芪对抑制金黄色葡萄球菌,马兜铃与苦参对抑制枯草杆菌分别有协同作用。苦参、山豆根及益母草提取液中生物碱浓度较高。结论：富含生物碱的7种中草药有抑菌活性,作为抗菌资源极具应用前景。     

预防性应用无环鸟苷对潜伏感染单纯疱疹病毒活化的抑制作用

目的:证实预防性应用无环鸟苷(ACV)能够抑制潜伏单纯疱疹病毒的激活.方法:用Balb/c小鼠建立潜伏感染模型,紫外线B照射激活病毒,照射前开始予ACV口服,停药1 d后处死动物检测活化病毒.结果:治疗组30例中无一例检出活化病毒,而对照组30例中有12例检测出活化病毒(P＜0.01).结论:预防性应用ACV特异作用于病毒激活期,能有效地抑制病毒活化.     

用荧光原位杂交技术检测hEPO转基因山羊染色体上外源基因的整合状况

目的 采用受精卵显微注射方法获得的3头hEPO转基因山羊进行检测和整合状况分析。方法 用荧光原位杂交的方法，以正常羊及正常人染色体标本为对照，通过生物素标记的探针与转基因羊染色体标本进行杂交。结果经信号放大及DAPI染色后，3头转基因羊分别在不同染色体上各有一对明显的荧光信号，而对照组无信号。结论hEPO基因在转基因山羊染色体上的整合是单位点整合，分别整合在不同的染色体上。     

阿昔洛韦缓释片的体外和体内实验研究

研制阿昔洛韦缓释片,并对其体外释放特点和初步的体内过程进行了研究。分别采用紫外分光光度法和高效液相色谱荧光检测法对阿昔洛韦进行体外释放度和体内血药浓度测定。采用４例志愿者单剂量口服缓释片和市售片,测定血药浓度并计算药动学参数。该缓释片在体外和体内均具有缓释作用,与参比制剂比较,服用缓释片组血药浓度较为平稳和持久,ＡＵＣ增大,峰浓度降低,达峰时间延长。