抗人绒毛膜促性腺激素McAb的制备及其特征(简报)

人绒毛膜促性腺激素(hCG)与人促黄体素(hLH),促卵泡素(hFSH)及促甲状腺素(hTSH)的结构近似,因而很难制备出与后三种糖蛋白激素无交叉反应的McAb。我们采用不同的免疫方法以及用不同分子量PEG作为融合剂,将hCG免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP2/O小鼠骨髓瘤细胞融合。在3次成功的融合中(融合率高于95％),从360个培养孔筛选出抗体阳性孔65个。经连续2～3次克隆化及液氮冻存后的多次再克隆化和传代,获得了12个持续分泌抗hCG McAb的杂交瘤株,并制备了抗体含量高达20～60mg/ml的大量小鼠腹水。     

抗牛胰岛素McAb的特点及应用

作者在丹麦NOVO公司制备了5种抗牛胰岛素McAb,并对其特点及实际应用进行了初步研究。结果表明,腹水液抗体滴度为2×10~3～2×10~5,免疫球蛋白含量高达10～30mg/ml,除1种为IgG_(2α)外,其余均属IgG1。不同的McAb,其半最大结合~(125)碘-牛胰岛素时间及半离解时间常数相差悬殊,因而与牛胰岛素结合的亲和力也很不一样(Ka为1.8×10~8～3.1×10~9 L/M)。不同种属的胰岛素原、胰岛素及其碎片的置换反应结果表明,5种     

抗纤维蛋白McAb的临床前实验研究(简报)

以Merrifield固相法合成的纤维蛋白β链氨基端七肽或其与KLH的结合物免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,经HAT选择培养,在几次筛选后得到11株分泌抗纤维蛋白McAb(AF)的杂交瘤细胞。根据理化检定,选出较好的AF8E5进行血栓定位显像和导向溶栓的实验研究。 当加入纤维蛋白原的浓度高达1000mg/ml时,AF与纤维蛋白的结合不受影响,提示AF与纤维蛋白     

抗人胰岛素和绒毛膜促性腺激素单克隆抗体的制备和初步应用

中国医学科学院内分泌中心采用不同的免疫方法及用不同分子量聚乙二醇作为融合剂、将人胰岛素(hI)和人绒毛膜促性激素(hCG)免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/O小鼠骨髓瘤细胞融合获得2株分泌     

抗红细胞生成素单克隆抗体的制备与初步鉴定(简报)

红细胞生成素(Epo)是红系造血十分重要的成份。我们利用亲和层析法从再生障碍性贫血病人尿液中分离提取出来的Epo对BALB/C小鼠进行了多次免疫,取其脾细胞与P_3-X63-59小鼠骨髓瘤细胞在50％浓度的PEG作用下进行了融合。在一次融合率达90％以上的成功试验中,从330个有克隆生长孔中筛选出20个阳性孔,经过扩大培养,冻存及数次亚克隆,获得了5个稳定的能持续分泌抗Epo单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,并制备了腹水。McAb用酶联免疫测定法(ELISA)筛选和鉴定,并用CFU-E方法鉴定了抗     

应用抗-HBs(McAb)测定HBsAg

固相放射免疫分析检测HB_sAg已广泛用于病毒性肝炎的研究与临床,其中以聚苯乙烯小球为载体的方法应用最为普遍,这次我们用单克隆抗体进行了比较实验,现将结果简略报告如下。     

抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体的制备及初步应用

将人绒毛膜促性腺激素(hCG)免疫的BALB/C小鼠脾细胞与Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,阳性孔经2～3次克隆化、液氮冻存后多次再克隆化和动物接种,获得了12株分泌抗hCG单克隆抗体(McAbs)的稳定杂交瘤株。12种McAbs除1种为IgM外,均为IgG_1;RIA滴度及亲和常数分别在0.2～7.0×10~4和0.4～5.1×10~8M~(-1)之间。有些McAbs已成功地用于血清和尿中hCG一步双位快速ELISA及滋养叶肿瘤组织切片的免疫细胞化学染色等。     

抗CD_3McAb鼠/人嵌合抗体可变区基因的克隆及序列测定(简报)

本研究表明,抗CD_3McAb具有双向调控T淋巴细胞的功能,对多种疾病,包括恶性肿瘤有明显的临床疗效,作者用DNA重组技术将鼠源抗CD_3McAb在基因水平改建为鼠/人嵌合抗体使之更适合临床应用时,用PCR法从HIT_(3a)(抗CD_3McAb)杂交瘤细胞株中分离出Ig重、轻链可变区基因,並分别克隆进了pGEM-7Zf(+),pGEM-3Zf(+)载体中,重组质粒DNA序列测定     

鼠抗人C_3McAb的制备及其特性

C_3成分是补体系统活化的枢纽,深入研究C_3是免疫病理学中的重要课题。但因纯化C_3难度较大,不易得到高纯度的抗C_3抗体,给研究工作带来许多不便。制备高度专一性的抗C_3McAb实属必需。我们将纯C_3免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,共获4孔稳定的杂交瘤,经抗C_3ELISA和CH_(50)抑制鉴定,有3个阳性孔,经有限稀释,有7株分泌较多抗体的克隆。来源于C_3孔的5个克隆分泌的Ig属IgG_1,用ELISA法检测     

抗人IgG结合型Lambda McAb和抗人IgG McAb的鉴定

SP2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞和经人IgG的Fab抗原免疫的BALB/C小鼠脾细胞融合,其融合率为97.22％。用微量ELISA和PHA试验检测抗体,筛出7个亚克隆杂交瘤细胞株,对其中的C31.10和C31.6株的鉴定结果为:用人IgG作抗原,两个McAb的PHA效价均为1∶16000～1∶32000,被动血凝抑制的抑制率随抗原量而增加,两者呈线性关系,证明它们对人IgG特异;用含2～3％PEG-6000的琼脂糖双扩散试验,C31.JoMcAb与IgG,Lambda型IgG1、IgG2、IgG3、IgG4及正常人血清呈阳性反应,但不与IgA、IgM、IgD、     

抗人精浆蛋白McAb的制备及其特性研究

本文报道用杂交瘤技术建立了２株分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体的细胞株Ｄ１和Ｃ１２。Ｄ１株分泌的抗体为ＩｇＭ，Ｃ１２株为ＩｇＧ３。这两株均能与正常人精浆和无精子症患者的精浆产生特异性免疫反应。Ｄ１株单抗具有补体依赖性制动人精子的作用，间接免疫荧光试验表明，它能结合到人精子颈部和顶体后区。这充分说明２株单抗是特异性抗人精浆的，Ｄ１是精子制动抗体，其相应的精子抗原属于精子外套抗原成分之一。     

抗人IgA McAb的鉴定

用人IgA免疫BALB/C小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP 2/0-Ag 14融合,测定99个融合孔,抗体阳性者10孔。其中2个经克隆获得代表株39-1,2-9。对后者所分泌的McAb及杂交瘤细胞免疫小鼠的腹水,进行了特异性和纯度鉴定。被动血凝抑制试验证明,2个McAb均可被抗原IgA所抑制,抑制率与抗原量成正比;用含2％PEG-6000的琼脂免疫双扩散试验,39-1McAb和免疫抗原IgA产生一条沉淀线,     

抗入■链单克隆抗体(McAb)的研制及临床应用

抗μ链是临床诊断及实验研究的重要试剂之一,广泛应用于肾组织 IgM 定位及各种细菌、病毒性感染早期特异性 IgM 抗体的检测。提取及纯化μ链,并免疫动物,制备抗μ链多克隆抗体。生产过程繁杂,我们从巨球蛋白血症患者血清中提纯了 IgM、免疫BAIB/C 小鼠后,成功地建立了分泌抗μ链的杂交瘤细菌株。所获抗μ链 McAb 效价高(腹水 McAb 琼脂双扩散效价可达1:28)、稳定性好(液氮中保存1年以上效价不变)、     

~(99m)Tc-PMT的制备及初步动物实验(简报)

1982年Kato报道了~(99m)锝-吡哆醛-5-甲基色氨酸(Tc~(99m)-PMT)肝胆显像剂的合成和动物实验结果。经国外一些单位的实验研究和临床应用结果表明该制剂具有肝脏摄取率高,肝肠通过快,尿路排泄少,拮抗血清胆红素能力强等特点,是目前较理想的肝胆显像剂。我室参考国外文献采用氯化亚锡还原法制备了~(99)Tc-PMT,初步动物实验结果满意。本文是该项研究     

抗P~(185)McAb的制备、鉴定及其在免疫组化检测的应用

求文以HER－2／neu癌基因表达产物为抗原免疫BALB／C小鼠，采用常规淋巴细胞杂交瘤技术建立一株稳定分泌抗P185MCAb的杂交瘤株5E12。McAb5E12属IgG1亚类，与SKBR-3、T47D乳癌细胞系呈阳性反应，与HT29、EC109、DAC－1、SP2／0、成纤维细胞及小鼠NIH3T3等细胞系均呈阴性反应。30例乳癌组织石蜡切片同时以自制抗P185McAb5E12及进口McAbC－erbB2（Ab-3）进行免疫组化染色，二者的结果全部相符。阳性反应物定位于细胞膜，背景清晰，证实自制MCAbSE12的性能良好，可以替代同类进口产品，可为临床检测及科研工作提供有效的免疫试剂。     

同CA19-9抗原有交叉反应的抗人胰腺癌单克隆抗体的制备及初步鉴定(简报)

本研究应用人胰腺癌细胞株PANC-1免疫BABL/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,获得一批抗人胰腺癌单克隆抗体(单抗),其中有一个单抗的特异性相对较好.该单抗可与抗CA19-9单抗竞争性结合CA19-9抗原,提示二者有可能识别相同的抗原决定簇.而抗CA19-9单抗是目前世界上用于胰腺癌诊断较佳的抗体,在胰腺癌的早期诊断、病情监测及预后等方面均有重要价值.经进一步观     

分泌抗人IgM单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和初步鉴定(简报)

用经过初步统化的人IgG免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞在聚乙二醇1000作用下与SP2/0-Ag14骨髓瘤细胞融合,克隆后得到一株分泌抗人IgM McAb的杂交瘤细胞株5C1C8。     

杜氏利什曼McAb制备的初步研究

以杜氏利什曼前鞭毛期免疫BALB/C小鼠3次后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合。融合率为38/48,分泌抗杜氏利什曼“801”株(由新疆平原地区喀什的病人分离获得)的杂交瘤有5孔,阳性孔由于未能及时克隆化而丢失一部分,最终仅获得1株McAb (D_1-B_5-G_1)。经间接免疫荧光试验(IFA),这一株McAb腹水对杜氏利什曼“801”株前鞭毛期的     

抗人IgG重链McAb和抗人IgG亚类限制性McAb的鉴定

本文对4株针对人IgG重链杂交瘤细胞株(1B3,2D5,2A4和2B6)所分泌的McAb用琼脂糖免疫双扩散试验及ELISA试验分析,均证实它们是针对人IgG上的三个不同抗原决定簇;用人IgG亚类Ig分析,证明1B3 McAb可与IgG所有的4个亚类反应,而其它3种McAb为IgG亚类限制性的McAb,2B6和2D5不与IgG4反应,称缺-IgG4 McAb,2A4不与IgG3反应,称缺-IgG3 McAb。