不同浓度氨水对小鼠光气染毒的现场防护研究

背景与目的： 检测小鼠光气染毒后肺部氧化指标的改变及不同浓度氨水对其指标的影响,以探讨对光气肺损伤现场防护的新方法。 材料与方法： 动物按体重随机分为5组,每组10只,雌雄各半,分别为阴性对照组,阳性对照组,低剂量(10 ml/L)氨水组,中剂量(20 ml/L)氨水组及高剂量(40 ml/L)氨水组。染毒柜内光气浓度23.8 mg/m3,染毒5 min。其中氨水组染毒柜内同时分别放置10 ml/L、20 ml/L和40 ml/L氨水。染毒后3 h,将动物断头处死,采血并取肺脏。荧光法分别检测肺脏的丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、还原性谷胱甘肽(Reduced glutathione,GSH)和氧化性谷胱甘肽(Oxidized glutathione,GSSG)以及全血谷胱甘肽过氧化物酶(Glu tathione peroxidase,GSH_Px),同时进行全血分析。 结果： 阴性对照组与阳性对照组各项指标比较差异均有统计学意义;且不同剂量氨水组肺脏的MDA、GSSG含量均有减少,而肺脏GSH、全血GSH_Px差异无统计学意义。此外,各组WBC与阳性对照组比较有显著下降,RBC、HGB、PLT各组相似。 结论： 光气中毒后肺部有氧化损伤,暴露于光气时给予挥发性氨水进行现场消毒,可以减轻这种氧化损伤。     

红景天、丹参及荷花粉对光气损伤的治疗作用

目的：研究红景天、丹参及荷花粉对光气损伤小鼠的治疗作用。方法：50只小鼠随机分为红景天、丹参、荷花粉治疗组,阳性对照组和阴性对照组,共5组。阴性对照组以空气为对照,其余各组小鼠给予11.9 mg/L的光气1 min,于染毒后20min,各治疗组小鼠分别以0.01ml/g的红景天、丹参和荷花粉灌胃,阳性对照组给予等体积生理盐水,4 h后解剖小鼠取样,测定支气管肺泡灌洗液中蛋白含量、肺脏MDA及GSH含量及进行血细胞测定。结果：红景天治疗组小鼠支气管肺泡灌洗液中蛋白含量显著低于阳性对照组（P〈0.05）;红景天和丹参治疗组小鼠全血血小板较阳性对照组显著升高（P〈0.05）;各治疗组小鼠肺脏MDA含量均较阳性对照组降低,其中红景天组最为显著（P〈0.05）;各治疗组小鼠肺脏GSH含量均较阳性对照组升高,其中红景天组最为显著（P〈0.05）。结论：红景天、丹参和荷花粉均对光气导致的肺损伤具有一定的治疗作用,红景天的治疗作用优于丹参和荷花粉。     

小鼠光气染毒对肺脏细胞的凋亡作用

背景与目的:小鼠原代肺Ⅱ型细胞的分离、培养方法的建立,探讨光气对肺水肿小鼠的肺脏细胞凋亡的诱导作用.材料与方法:12只二级BALB/c小鼠,雄性,随机分为2组:正常对照组(6只)和染毒组(6只).正常对照组小鼠以空气为对照,染毒组小鼠给予11.9 mg/L剂量的光气,时间为5 min.染毒后4 h,分离、培养肺Ⅱ型细胞,电镜观察两组小鼠肺Ⅱ型细胞、肺Ⅰ型细胞、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和纤毛细胞凋亡情况.结果:单宁酸染色和电镜鉴定培养细胞为小鼠原代肺Ⅱ型细胞;小鼠给予11.9 mg/L的光气染毒5 min,电镜显示光气染毒肺水肿小鼠原代肺Ⅱ型细胞出现凋亡小体,肺Ⅱ型细胞核染色质呈现月牙型,嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和纤毛细胞均出现凋亡征象.结论:建立了小鼠原代肺Ⅱ型细胞的分离、培养方法,证明光气染毒可造成肺水肿小鼠肺脏细胞发生凋亡.     

光气致小鼠肺组织细胞凋亡相关基因的表达

目的：研究光气染毒肺水肿小鼠肺组织Bax、c-Fos、c-Jun、Caspase-3和Fas的表达。方法：10只BALB/c小鼠随机分为对照组和光气染毒组,每组5只。正常对照组以空气为对照,染毒组小鼠给予11.9 mg/L的光气,染毒时间为5 min。染毒后4 h,取小鼠肺脏,用4%的多聚甲醛固定。原位杂交和免疫组化测定肺组织Bax、c-Fos、c-Jun,Caspase-3和Fas的表达。Westen blot测定Fas蛋白的表达。结果：光气染毒组肺水肿小鼠肺组织Bax、c-Fos、c-Jun、Caspase-3和Fas基因的表达较对照组明显增高（P〈0.05）,且Fas蛋白的表达也升高（P〈0.05）。结论：光气可能通过Fas/FasL通路诱导肺上皮细胞发生凋亡。     

口服胸腺因子D对老龄雌性小鼠MDA、SOD和骨髓细胞微核的影响

目的 :探讨胸腺因子D(TFD)对老龄雌性小鼠脂质过氧化产物MDA、SOD和骨髓细胞微核的影响。 方法 :7月龄和1月龄雌性昆明种小鼠各16只 ,分别随机分成2组。TFD按0.625mg/kg对各组小鼠每日灌胃一次 ,连续9d ,于第10d采用眼眶放血法采血 ,分离血清进行MDA和SOD测定。于采血同时对小鼠进行骨髓涂片 ,计算小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率(‰)。结果 :实验表明TFD对SOD的影响不大 ,对老龄小鼠MDA则有降低作用 ,差异显著(P<0.01)。TFD可显著降低老龄小鼠的微核率(P<0.05)。 结论 :TFD对老龄引起的自由基增加和遗传损伤有拮抗作用 ,提示TFD有延缓衰老的功能     

鼻咽癌患者血清LHP、GSH－PX、SOD活性变化的临床意义

本文测定２４例鼻咽癌患者血清脂质过氧化氢（ＬＨＰ）、谷胱甘肽过氧酶（ＧＳＨ－ＰＸ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）（包括总超氧化物歧化酶Ｔ－ＳＯＤ、锰超氧化物歧化酶Ｍｕ－ＳＯＤ，铜锌超氧化物歧化酶Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ）变化、结果ＬＨＰ增高明显，与对照组相比（Ｐ＜０．０１）。表明鼻咽癌与氧自由基（ＯＦＲ）损伤有关。ＧＳＨ－ＰＸ，Ｔ－ＳＯＤ，Ｍｕ－ＳＯＤ降低明显，与对照组相比（Ｐ＜０．０１）。说明鼻咽癌患者存在着ＯＦＲ清除酶系统障碍。揭示对ＬＨＰ，ＧＳＨ－ＰＸ，ＳＯＤ检测有助于鼻咽癌的诊断、病情判断及愈后评价，在鼻咽癌放、化疗中，运用自由基清除剂，有可能提高临床疗效。     

葡萄籽提取物对老龄大鼠MDA、GSH-Px、SOD的影响

背景与目的:探讨不同浓度的葡萄籽提取物(GSE)对老龄大鼠抗氧化的作用.材料与方法:取wistar大鼠40只,设葡萄籽提取物0.1、0.5、2.5 g/kg 3个剂量组和1个溶剂对照组,每组10只,灌胃给予受试物,每天1次,连续60 d.于第61 d股静脉取血并杀鼠取肝脏制备肝匀浆,分别测定血清过氧化脂质(MDA)和谷胱甘肽氧化酶(GSH-Px)、肝组织超氧化歧化酶(SOD).结果:3个剂量组SOD活性与溶剂对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).仅2.5 g/kg剂量组所测的MDA含量和GSH-Px与溶剂对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:葡萄籽提取物有降低雌性老年大鼠(鼠龄15个月)血清中MDA含量、升高血清中GSH-Px活性的作用,提示其具有一定的抗氧化作用.     

光气急性中毒机制的深入研究

光气是一种经典的化学战剂,也是化学恐怖袭击的重点选择对象。同时光气又是一种重要的化工原料,广泛应用于高分子材料、农药、医药、香料和染料等领域,在生产、储存、运输过程中的意外事故造成的光气泄漏,极大威胁人民生命财产安全,这些使得光气一直是各国学者的研究热点。光气中毒主要引起难治性肺水肿,死亡率极高,目前世界上没有有效的救治方法和药物,主要是由于对其中毒机制不清楚。我们实验室多年来一直从事窒息性毒剂肺损伤机制研究,近年来取得了一些发现性的成果,提出了光气的酸烧伤理论,同时就氧化损伤-呼吸爆发等机制进行了一定的研究,本文将就光气部分最新研究进展做一综述。     

相关效应性生物标志物 TOSC 和 GSH 对百草枯灌胃染毒的反应

背景与目的 :通过与抗氧化检测单指标GSH的比较 ,探讨抗氧化能力相关效应性生物标志物TOSC的特点及适用性。材料与方法 :用0mg/kg(生理盐水对照组)、6.25、12.5、25和50mg/kg百草枯(Paraquat,PQ)对随机分组的NIH小鼠灌胃染毒 ,24、48、72h后分别测定其肝、脑、心、肾、肺的TOSC值 ,以及肝的GSH水平。 结果 :小鼠各脏器于PQ染毒24、48、72h后 ,TOSC/mg蛋白值与对照相比下降不显著 ;肝GSH水平明显降低。 结论 :TOSC是综合反映机体实际抗氧化能力即时水平的综合性指标 ,在体现氧化剂对机体的早期效应时却不如GSH灵敏     

维生素E与硫辛酸对光气损伤的抗氧化作用探讨

背景与目的:观察维生素E或/和硫辛酸对光气损伤小鼠的抗氧化作用,为临床救治光气中毒提供实验资料.材料与方法:确定小鼠在光气中毒后体内发生了一定程度的氧化损伤,然后分组给予维生素E或/和硫辛酸,应用全自动血球分析仪进行血液学分析,采用荧光法测定动物肝脏与肺脏MDA.结果:维生素E(6 mg/kg)或/和硫辛酸(0.8 mg/kg)对光气引起的全血WBC、PLT降低有促进恢复作用,对肝脏与肺脏MDA的升高有一定的抑制作用,维生素E单用组效果显著,维生素E与硫辛酸复合组效果最差.结论:维生素E对光气导致的脂质过氧化的抗氧化作用优于硫辛酸,维生素E与硫辛酸复合组效果不及单用.     

大鼠光气染毒后不同时间点肺水肿及炎症反应的差异性研究

背景与目的研究大鼠染毒后,不同时间点肺水肿以及肺部炎症的发生情况。材料与方法180只雄性大鼠,分3批,每批随机分为对照组和光气染毒后5个不同时间点检测组,共6组。正常对照组大鼠以空气为对照,染毒组大鼠给予38.08mg/L剂量的光气,时间为1min,于染毒后1、3、6、12、24h测定肺毛细血管通透性;取肺组织测定湿干比;取肺泡灌洗液进行细胞计数;分别对肺匀浆及肺泡灌洗液进行白介素10(IL-10)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的ELISA测定。结果染毒后随时间的增加,毛细血管通透性增加;肺湿干比增加;肺泡灌洗液的细胞计数增加;肺组织及肺泡灌洗液中,TNF-α增加,IL-10减少。以上各指标染毒组与对照组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论光气染毒后引起的肺水肿及炎症反应具有时间差异性。     

CT扫描、超氧化物歧化酶、丙二醛在放射性肺损伤中的预测价值

目的通过对照射后的大鼠肺部进行CT扫描和血清中SOD、MDA的检测,探讨它们在放射性肺损伤中的预测价值。方法SD大鼠分为3组：对照组、70 Gy组、144 Gy组。大鼠麻醉后用60Co治疗机单次照射右全肺;在照射后30天、90天对大鼠肺部进行CT扫描,并于照射后1、7、30、90 d处死各组大鼠,取大鼠右肺组织进行HE、Masson 染色,并对血清中SOD、MDA的含量进行检测。结果对照组、70 Gy组大鼠右肺组织未见明显的组织病理学改变,而144 Gy组可见明显纤维化改变。CT扫描结果：对照组、70 Gy组均未见明显的实变影;而144 Gy组,照射野内可见高密度实变影。70 Gy组大鼠SOD与 MDA水平与对照组比较差异无统计学意义;144 Gy组大鼠SOD水平在照射后1 d明显升高,30、90 d时则明显降低,但与对照组比较差异无统计学意义,而MDA水平从第1天开始即明显升高,且持续维持在较高的水平,各时间点与对照组比较差异均有统计学意义（P<005）。结论超过“阈值”的剂量照射大鼠肺组织后,CT扫描有一定的诊断价值,但其预测作用是滞后的;未发现SOD有明确的预测价值;初步认为MDA对放射性肺损伤有一定的预测价值。     

肌肽对C57小鼠放射性肺损伤保护作用的机理研究

[目的]观察肌肽（carnosine）对C57BL小鼠放射性肺损伤（RILI）的防护效果,并探讨其机制。[方法]将120只C57BL雌性小鼠随机分为对照组、给药组、辐照组和辐照＋给药组,治疗后检测血清转化生长因子β1（TGF-β1）、丙二醛（MDA）,以及部分肺组织羟脯氨酸（HYP）水平。[结果]除辐照后第7d血清中MDA水平各处理组间无明显差异（P〉0.05）,其余不同组间各时间段TGF-β1、MDA以及肺组织HYP水平差别均具有统计学意义（P〈0.05或〈0.01）。给药组较对照组未出现明显副作用。[结论]肌肽能降低血清、肺组织中TGF-β1、MDA、HYP含量,并具有减轻放射性肺损伤的作用,且几乎无副作用,在防治放射性肺损伤中显示出良好前景。     

桑黄素在脂多糖诱导的急性肺损伤中的相关机制

目的： 探究桑黄素在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)中的相关机制。方法： 将32只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(生理盐水)、ALI模型组(LPS处理)、LPS+桑黄素低浓度(25 mg/kg)处理组和LPS+桑黄素高浓度(50 mg/kg)处理组,共4组,每组8只。LPS(6 mg/kg)溶液经气管滴入小鼠气道刺激支气管及肺组织建立ALI模型。桑黄素溶液经腹腔注射给药3 d后,收取双肺,对一部分肺组织测定湿/干质量比,进行HE染色和组织病理学观察。采用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测肺组织中氧化应激信号通路相关基因(NOX1、NOX4、Nrf2和HO-1)的表达情况。结果： HE染色和肺湿/干质量比测定结果显示气道滴入LPS成功构建了ALI小鼠模型,与对照组比较,桑黄素处理可有效缓解LPS诱导的急性肺损伤。qPCR和Western blot实验结果显示,与对照组比较,ALI模型组肺组织中,Nrf2和HO-1的表达上调(P<0.01);与ALI模型组比较,桑黄素处理可显著降低肺组织NOX1和NOX4的表达(P<0.05或P<0.01);且桑黄素处理可进一步上调Nrf2和HO-1的表达从而抑制氧化应激的发生(P<0.05或P<0.01)。结论： 氧化应激的发生参与ALI 的发生发展,桑黄素可通过激活Nrf2-HO-1信号通路降低NOX1和NOX4表达抑制氧化应激,从而减缓LPS引起的肺损伤。     

ω-3多不饱和脂肪酸对人胃癌BGC-823细胞PGE2、SOD和MDA的影响

目的：观察不同浓度ω-3多不饱和脂肪酸（EPA、DHA）对人胃癌BGC-823细胞存活情况、PGE2和脂质过氧化的影响。方法：采用MTF法测定肿瘤细胞存活率，酶联免疫吸附竞争法测定PGE2浓度，黄嘌呤氧化酶法测定总SOD活力，TBA法测定MDA含量。结果：30μg／ml和45μg／ml的EPA或DHA可显著降低肿瘤细胞存活率（P〈0．001），细胞PGE2浓度和总SOD活力明显下降（P〈0．05）、而MDA含量明显升高（P〈0．05）。结论：ω-3多不饱和脂肪酸可通过PGE2代谢和脂质过氧化作用抑制人胃癌BGC-823细胞的生长。     

光气中毒致肺泡上皮细胞线粒体结构和功能损伤的研究

目的： 研究光气中毒对肺泡上皮细胞线粒体结构和功能的损伤作用。方法：30只SD大鼠随机分为正常对照组和染毒组,每组各15只。正常对照组以空气为对照。染毒组给予光气(10 g/m3 )动态染毒5 min,构建光气致急性肺损伤模型。染毒后2 h麻醉,采集肺组织样本,测定肺组织湿/干比,进行肺组织病理检测和电镜观察,并测定肺组织线粒体酶复合物活性。结果：与对照组比较,光气染毒后,肺湿/干比显著增加(P<0.01),肺组织存在炎细胞浸润和肺泡上皮细胞损伤;线粒体明显肿胀,形态改变,甚至固缩溶解,数量减少,线粒体嵴断裂和缺失,线粒体酶复合体活性降低(P<0.05)。结论：肺泡上皮细胞线粒体损伤为光气中毒的主要毒作用靶点之一,本研究结果为光气中毒防治提供了新思路。