连续R显带和荧光原位杂交技术在白血病诊断中的应用

目的探讨连续R显带和荧光原位杂交技术(FISH)在鉴定自血病染色体复杂变异易位中的应用。方法对15例核型分析有疑问的标本在R显带基础上再进行荧光原位杂交。对比分析同一中期分裂相的显带和FISH结果。结果4例应用BCR／ABL探针；4例PML／RARa探针；4例AML1／ETO探针；2例IgH探针；1例MLL探针。经显带结果与FISH结果对比分析，9例疑似的复杂易位得到确证，并精确定位。6例核型结果得到修正。结论连续R显带和FISH方法在复杂变异易位的鉴定方面与传统的核型分析和直接FISH检测相比具有明显的优势。在自血病的诊断方面．对于未知异常染色体的检出将具有更广泛的应用前景。     

染色体荧光原位杂交在血液病中的应用

染色体荧光原位杂交技术是新近开展起来的一项技术，已广泛用于临床和实验研究。该技术是利用生物素、地高辛配基等半抗原标记的已知核酸探针，通过间接免疫荧光在染色体上检测特异ＤＮＡ。本文扼要介绍了该技术的原理及其在鉴别标志染色体，检测染色体数目及结构异常，检测微小残留病与监测早期复发，鉴定骨髓移植后造血细胞的克隆起源及评价某些血液病的克隆起源等方面的研究进展。     

多色荧光原位杂交技术的临床应用

目的 检测来源不明的额外标记染色体和衍生染色体。方法 用多色荧光原位杂交技术结合G显带技术和NOR技术,对1例47,XY,inv（9）（p11q13）,＋mar和1例46,XY,t（5;？）核型进行诊断。结果 病例1的额外标记染色体片段来源于15号染色体,患者核型为47,XY,inv（9）（p11q13）,＋SMC（15）。病例2的核型为46,XY,der（5）t（4,5）（q27;q35）。在此基础上对患者的核型—表型进行了分析。结论 多色荧光原位杂交技术结合细胞遗传学核型分析,对于来源不明的标记染色体和衍生染色体的诊断是非常有帮助的。     

荧光原位杂交技术的临床应用

目的探讨荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）技术的临床价值。方法用ＦＩＴＣ直接标记或地高辛和生物素间接标记的人类染色体着丝粒α卫星ＤＮＡ探针及人类全染色体特异性探针，与经处理的标本原位杂交，荧光检测显示免疫细胞化学的杂交反应。结果杂交率＞７０％，中间期细胞均显示特异的黄绿色的杂交信号，证实３例１４／２１易位染色体，１例５号短臂缺失染色体，１例４７，ＸＹＹ和４例４６，ＸＹ女性性染色体异常。结论与传统的染色体显带技术相比，荧光原位杂交技术具有高效、灵敏、可靠的特点，可为临床提供良好的辅助诊断。     

荧光原位杂交技术及其应用

荧光原位杂交技术（ＦＩＳＨ）是通过使用特异性染色体ＤＮＡ探针与间期细胞核杂交而获得细胞遗传学信息。由于它不依赖于有丝分裂的细胞，从而使其在基础和临床研究中得到了广泛的应用，尤其在肿瘤研究中的应用越来越引人注目。染色体易位、基因缺失和基因扩增等均可通过ＦＩＳＨ进行检测。ＦＩＳＨ技术与其它研究技术的结合更显示出其勃勃的生机。     

荧光原位杂交技术在多发性骨髓瘤染色体异常检测中的应用

分子细胞遗传学技术,尤其是荧光原位杂交技术的应用．克服了传统细胞遗传学方法的缺陷,大大推动了多发性骨髓瘤的细胞遗传学研究,提高了多发性骨髓瘤染色体异常的检出率。各种荧光原位杂交技术互相补充可以提高染色体异常的检出率,这有利于促进分子生物学研究的进展,从而进一步了解该疾病的发病机制,最终开发新疗法,提高治愈率。     

C显带和N显带技术在标记染色体和双着丝粒染色体辅助诊断中的应用

目的 探讨C显带和N显带技术在标记染色体(mar)和双着丝粒染色体核型分析辅助诊断中的应用价值.方法 选取2018年3月至2020年2月于柳州市妇幼保健院进行外周血染色体核型分析的19560例就诊者为研究对象,分析C显带和N显带技术辅助诊断染色体核型的价值.结果 19560例外周血染色体核型分析中,经G显带结合C显带和...     

荧光原位杂交技术在染色体病临床诊断中的应用研究

目的 探讨荧光原位杂交（FISH）技术，在染色体病临床诊断中的实用意义。方法选择18、21；x，y二组双色荧光直接标记DNA探针，对2003年7月～2004年12月，在江西省妇幼保健院门诊及住院就诊的71名患者提供的72例标本（2例来自同一名患者）。全部行单色或双色FISH分析，其中70例同时进行了常规染色体对比分析。结果 成功地检测了经培养的，或未培养的、新鲜的，或陈旧的，以及常规染色体制备失败及不宜检测的临床各类标本。发现了常规染色体分析未能检出的异常，及结果与临床体征不相一致的原因。结论 FISH技术是一种快速、简便、检测范围广、对标本质量要求不高的分子细胞遗传学技术。它弥补了常规染色体检测方法中的不足，在染色体疾病临床诊断中具有广阔的应用前景。     

多色荧光原位杂交技术在急性白血病研究中的应用

染色体核型与急性白血病的预后、诊断及治疗关系密切。目前各实验室常规应用的方法是传统染色体核型分析与荧光原位杂交技术,但这两种技术各有不足之处。新近发展起来的多色荧光原位杂交技术有效地弥补了这些不足。本文就多色荧光原位杂交技术的原理、种类、特点及其在急性白血病研究中的应用作一综述。     

应用荧光原位杂交技术检测肺癌间期细胞部分染色体数目的改变

目的 应用荧光原位杂交（FISH）技术研究肺癌细胞部分染色体数目改变及其意义。方法 用8、11、12和17号染色体的着丝粒探针与24例肺癌标本的间期细胞进行杂交检测。结果 标本中8、11、12和17号染色体超二倍体分别达到62．50％（15／24）、50，00％（12／24）、54．17％（13／24）、54．17％（13／24）。结论 FISH技术可检测肺癌间期细胞染色体数目的改变，肺癌遗传学变异中主要以8、11、12、17号染色体的增加多见，对肺癌的发生、发展和预后有一定的提示作用。     

双色荧光原位杂交技术检测浆细胞白血病13号染色体缺失

为了解浆细胞白血病（PCL）中13号染色体缺失情况及其与临床特征的相关性，运用双色荧光原位杂交（FISH）技术及位于13q14和13q31的序列特异性DNA探针，对21例初发PCL患者的间期细胞进行13号染色体缺失的检测。结果显示，21例PCL中13例（61．9％）具有del（13q14）异常，其阳性细胞率在52％-98％之间；12例（57．4％）有del（13q31）异常，其阳性细胞率在50％-98％之间。13例del（13q14）异常患者中，12例伴有del（13q31），仅1例阴性。结论：PCL中13号染色体缺失发生率较高，大部分PCL患者13号染色体缺失片段可能涉及由13q14到13q31的整个区间。FISH技术是一种在分析PCL13号染色体缺失异常方面较为快速、准确和敏感的方法。     

骨髓涂片荧光原位杂交法在检测多发性骨髓瘤细胞8号染色体遗传学异常的应用

本研究旨在建立骨髓涂片间期荧光原位杂交（I-FISH）的实验方法,为检测多发性骨髓瘤（MM）分子细胞遗传学提供新方法。以骨髓涂片为载体,通过一系列的处理,固定及消化后,用8号染色体着丝粒探针行I-FISH分子细胞遗传学的检测,并比较该方法与常规I-FISH结果的差异。结果表明：两种方法分析非恶性血液病标本的各个信号比例无统计学差异（P〉0．05）。骨髓涂片I-FISH研究中,19例MM患者中8例（42．1％）有8号染色体异常,其中8号染色体单体（-8）5例（26．3％）,8号染色体三倍体（＋8）3例（15．8％）。结论：骨髓涂片I-FISH具有操作简便、经济、准确的特点,可用于MM分子遗传学异常的研究。     

荧光原位杂交技术在膀胱癌诊断中的应用

目的 探讨荧光原位杂交(FISH)检测尿脱落细胞染色体畸变在膀胱癌诊断中的临床应用价值。方法 采用3、7及17号染色体着丝粒特异性探针及9号染色体p16位点特异性探针对20名健康人(正常组)新鲜晨尿进行FISH检测,建立阈值。留取75例膀胱癌(膀胱癌组)患者和25例非膀胱癌对照(非膀胱癌对照组)患者晨尿分别进行FISH检测及尿脱落细胞学检查。以至少两种探针检测结果超过阈值或一种探针检测结果存在至少两种异常为诊断阳性。结果 四种探针单一应用诊断膀胱癌的灵敏度分别为73.3％ (55/75)、76.0％ (57/75)、62.7％ (47/75)和62.7％ (47/75),联合应用的灵敏度为85.3％ (64/75),特异度为96.0％ (24/25)。尿脱落细胞学检查的灵敏度和特异度则分别为9.3％(7/75)和100.0％ (25/25)。FISH检测诊断膀胱癌的灵敏度明显高于尿脱落细胞学检查(85.3％与9.3％,x2= 57.00,P＜0.001)。FISH检测诊断膀胱癌的灵敏度与膀胱癌病理分级(低级别为84.2％,高级别为86.5％,x2=0.08,P＞0.05)及临床分期(Ta～T1为82.9％,T2～T4为87.5％,x2=0.32,P＞0.05)均无关。结论 荧光原位杂交技术检测尿脱落细胞染色体畸变诊断膀胱癌灵敏度高、特异性强、无创伤性,可作为膀胱癌早期诊断的一项重要方法,并可在预测肿瘤生物学行为及预后方面具有重要的临床意义。     

间期荧光原位杂交检测骨髓增生异常综合征20q-染色体异常

为了探讨间期荧光原位杂交(FISH)技术在检测骨髓增生异常综合征(MDS)20号染色体长臂部分缺失异常中的价值，应用绿色荧光素SpectrumGreen直接标记的酵母人工染色体(YAC)克隆912C3(跨越20号染色体长臂q12断裂点)作为探针，对52例MDS患和5名正常对照的骨髓细胞进行单色间期FISH检测，每例分析200—300个细胞，以1个绿色荧光杂交信号＞7．16％作为阳性标准，并与常规细胞遗传学(conventional cytogenetics，CC)检测结果相比较。结果显示，52例MDS患中FISH检测7例(13．5％)为阳性，CC检测其中4例为阳性，3例为阴性。结论：YAlC912C3为探针的间期FISH技术是检测MDS患20q-染色体异常的有效方法，是CC检测的一个重要补充。     

荧光原位杂交在慢性淋巴细胞白血病遗传学异常及预后中的应用

目的 探讨荧光原位杂交（FISH）技术在慢性淋巴细胞白血病（CLL）染色体异常检测及预后判断中的应用.方法 采用荧光原位杂交技术组合探针检测14例CLL患者11,12,13及17号染色体异常情况,14例患者采用FC方案后,观察疗效并随访12～34个月.结果 采用FISH技术染色体异常检出率为64.2％;随访12～34个月,13（92.8％）例患者存活.结论 FISH在检测CLL染色体异常方面较为快速、准确和敏感,可提高染色体异常检出率,为CLL提供较为准确的分子细胞遗传学信息,指导临床与预后分析.     

间期荧光原位杂交技术检测骨髓增生异常综合征患者的染色体异常

本研究探讨间期荧光原位杂交（FISH）技术在检测骨髓增生异常综合症（MDS）患者染色体异常中的价值。采用常规细胞遗传学（CC）和间期FISH技术对80例MDS患者和20例正常对照者的骨髓细胞进行分析,比较两种方法检测MDS患者异常克隆的阳性率。结果表明：80例MDS患者经FISH技术检出染色体异常43倒（53．8％）,明显高于CC的异常核型检出率17例（21．3％）,两者比较有统计学意义（P〈0．05）;在世界卫生组织（WHO）各亚型中,FISH异常检出率高于CC,其中难治性贫血（RA）和难治性贫血伴多系病态造血（RCMD）两组患者阳性率结果差异具有显著性;在国际预后积分系统（IPSS）各评分等级中,FISH阳性率也明显高于CC,其中中危组患者差异具有统计学意义。结论：FISH技术敏感性优于CC,可以检测出CC分析失败及正常的染色体异常克隆,提高异常染色体的检出率,这一点主要体现在IPSS中的中危组患者;在WHO各亚型中,RA和RCMD组患者从FISH技术中获益较大。     

免疫磁珠分选对荧光原位杂交检测多发性骨髓瘤细胞遗传学异常的影响

本研究旨在明确免疫磁珠浆细胞分选对使用荧光原位杂交(FISH)技术检测多发性骨髓瘤(MM)细胞分子遗传学异常的影响,探索适合我国国情的检测方法。对同一MM患者的标本进行2种方法检测:1种为不经分选,直接进行FISH;另1种为经过CD138免疫磁珠分选(MACS)富集浆细胞后进行FISH检测;比较2种FISH技术对MM遗传学异常检出率并分析其影响因素。探针类型为13q14(RB-1)和14q32(IGH)。结果表明:①利用13q14(RB-1)探针对42例患者同时进行了分选和不分选的的FISH检测显示,经过CD138磁珠分选后25例(56.8%)检测到13q14缺失;不经分选直接进行FISH检测仅9例(21.4%)患者检出13q14缺失,2种标本处理方法的检出率具有统计学差异(p=0.01);②利用14q32(IGH)探针对22例患者同时进行了分选和不分选的FISH检测显示,经过CD138磁珠分选后14例(63.6%)可以检测到14q32重排,不经分选直接进行FISH检测仅7例(31.8%)患者检出14q32重排,2种标本处理方法的检出率具有统计学差异(p=0.035);③不分选FISH的阳性细胞检出率与骨髓涂片和流式细胞仪所检测的浆细胞比例呈明显的正相关。当骨髓涂片细胞中浆细胞比例超过50%,或者流式细胞仪检测浆细胞比例超过10%时,不分选FISH与磁珠分选FISH结果之间没有统计学差异。结论:MACS-FISH显著提高了MM遗传学异常的检出率,避免了假阴性的发生;直接进行FISH检测的检出率低的主要原因是检测标本中浆细胞比例较低;未经分选直接进行13q14(RB-1)和14q32(IGH)探针FISH检测,其阳性细胞率与骨髓涂片、流式细胞仪所检测出的浆细胞比例呈显著正相关,说明随着所检验标本中浆细胞比例的升高,不进行分选直接进行FISH检测的缺点得到一定弥补。当骨髓涂片细胞中浆细胞比例超过50%,或者流式细胞仪检测浆细胞比例超过10%时,2种检测方法之间没有差异。     

荧光原位杂交技术检测乳腺癌Her-2/neu扩增

目的：探讨荧光原位杂交技术（FISH）检测乳腺癌Her-2/neu的扩增情况,比较FISH法与免疫组织化学（I HC）法检测结果的一致性。方法：收集乳腺癌患者手术切除的肿瘤标本50例。经石蜡包埋,组织切片后,应用FISH法检测Her-2/neu扩增情况,I HC法检测Her-2/neu蛋白表达情况,并对两种检测方法的结果进行统计学分析。结果：50例标本中FISH阳性17例,FISH阴性33例,FISH阳性率34%（17/50）。50例标本中I HC（～）14例,I HC（0～＋）36例,I HC蛋白表达率28%（14/50）。FISH法与I HC法检测结果的总符合率为82%（41/50）（K=0.581）。结论：FISH法具有较高的稳定性与可靠性,临床开展FISH法检测Her-2/neu基因扩增情况作为I HC法的补充,可以更加准确和客观地对乳腺癌患者的治疗和预后进行评价。