构树总黄酮对长波紫外线引起人角质形成细胞损伤的防护作用

目的研究长波紫外线(UVA)照射对人角质形成细胞的氧化损伤以及构树总黄酮(totalflavonoids of broussonetia papyrifera,TFBP)的防护效果。方法在人角质形成细胞培养的基础上,实验组在照射前加入不同剂量的TFBP,然后和处理组一起接受UVA照射,通过噻唑蓝(MTT)染色法检测细胞活性、裂解液中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,对构树叶提取物的抗氧化效果进行评价。结果随着UVA剂量的增高(0.46~2.76J/cm2),细胞的活性逐渐降低(96.3%~37.5%),添加TFBP10~200mg/L后,细胞活性升高,MDA含量由(5.14±0.58)nmol/mg pro降低到(2.98±0.14)nmol/mg pro,SOD活力由(23.09±3.91)U/mg pro增加到(34.50±1.59)U/mg pro,GSH-Px活力也有所升高。结论本试验条件下,UVA对人角质形成细胞有明显的氧化损伤,TFBP对这种氧化损伤有防护作用。     

紫外线诱导HaCaT细胞IL10 mRNA及蛋白表达

目的探讨紫外线致机体免疫抑制的作用机制。方法体外培养人角质形成细胞系（HaCaT）,以0.6,1.2,1.8,2.4,3.0,3.6 J/cm^2长波紫外线（UVA）照射,采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力。以2.4 J/cm^2UVA照射HaCaT细胞,于0,2,4,12,24,48 h收集细胞及培养掖,分别采用RT-PCR和双抗夹心ELISA方法,检测白细胞介素10（IL10）mRNA及其蛋白表达。结果3.0,3.6 J/cm^2UVA照射使体外培养的HaCaT细胞活力明显降低（P〈0.05）;0.6～2.4 J/cm^2UVA照射对细胞活力无明显影响（P〉0.05）。HaCaT细胞经2.4J/cm^2UVA照射后12h,IL19 mRNA呈弱表达;照射后24h,培养液中IL10蛋白水平为（17.45±0.65）pg/ml;照射组其他各检测时点及对照组细胞未见IL10 mRNA及蛋白表达。结论正常情况下HaCaT细胞并不表达IL10,UVA照射可诱导其表达。     

长波紫外线暴露致大鼠神经细胞能量代谢降低的恢复实验研究

目的利用体外培养神经元探讨长波紫外线(UVA)对细胞能量代谢的影响以及去除UVA暴露后,细胞能量代谢的恢复。方法将体外原代培养的大鼠神经元暴露于UVA,剂量分别为0、3、9J/cm2。照射后继续培养4和28h,以细胞化学方法进行单细胞细胞色素氧化酶活力测定,用图像分析仪进行定量分析。结果各暴露组细胞经过UVA照射及4h恢复培养后,与对照组相比,光镜下,生命征象未见明显改变,细胞色素氧化酶活力随照射剂量增加明显下降。UVA照射后,经28h恢复培养,3J/cm2剂量组细胞色素氧化酶活力与对照组未见显著差别。9J/cm2剂量组虽有所恢复,但未达到对照组水平。结论低剂量UVA暴露在未导致细胞出现明显损伤情况下,可使细胞能量代谢明显降低。经去除UVA暴露,在一定时间内,较低剂量暴露致细胞能量代谢降低可明显可恢复;但较高剂量暴露后,短期内难以恢复至正常水平。     

紫外线暴露对细胞能量代谢的影响

目的 利用体外培养神经元探讨长波紫外线(UVA)对细胞能量代谢的影响.方法 将体外原代培养的SD大鼠神经元暴露于UVA,剂量分别为0、3、6、9 J/cm2.照射后继续培养4 h,继之用细胞化学方法进行单细胞的细胞色素氧化酶活力测定,用图像分析仪进行定量分析.结果 各实验组细胞经过UVA照射及4 h恢复培养后,与对照组比较,光镜下,生命征象未见明显改变,细胞色素氧化酶活力随照射剂量增加明显下降.结论 低剂量UVA暴露在未导致细胞出现明显损份情况下,可使细胞能量代谢明显降低.     

紫外线A对家兔皮肤的氧化损伤研究

目的研究UVA对家兔皮肤氧化损伤作用,初步探讨其氧化损伤机制。方法选用成年家兔6只,雌雄各半,采用自身对照的方法将每只家兔分为5个剂量组(0、1、3、5、8 J/cm2)。连续照射染毒7 d后,取家兔皮肤组织进行组织病理学观察和电镜观察,采用免疫组化方法检测家兔皮肤细胞内8-OHdG表达,通过图像分析软件测定图像平均光密度值,并检测皮肤组织匀浆中MDA含量、SOD、GSH-Px活性。结果光镜观察低剂量组表皮层呈修复性增厚、棘细胞增多等现象,随着剂量增大,皮肤组织发生大面积坏死,表皮脱落,真皮层出现毛细血管出血坏死、炎性细胞浸润、细胞核固缩等病理改变。电镜观察真皮成纤维细胞内出现空泡变性,粗面内质网扩张和线粒体损伤,细胞损伤程度随着剂量的增大而加重。除1 J/cm2染毒剂量组外,3 J/cm2,5 J/cm2,8 J/cm2组平均光密度值均高于对照组(P0.05),且平均光密度值与染毒剂量之间存在良好的剂量-效应关系(r=0.94)。皮肤组织匀浆中的SOD、GSH-Px水平降低,而MDA增加,并存在一定的剂量-效应关系。结论 UVA照射可引起家兔皮肤氧化损伤,其作用机制可能与8-OHdG生成有关。     

长波紫外线对人皮肤成纤维细胞生长的影响

[目的 ]　观察长波紫外线 (UVA)对人皮肤成纤维细胞生长的影响 ,探讨皮肤光老化机制。　 [方法 ]　将原代培养的人皮肤成纤维细胞经UVA照射后 ,采用细胞成像、四唑盐比色实验 (MTT)、乳酸脱氢酶 (LDH)检测UVA对皮肤细胞的损伤。　 [结果 ]　随UVA照射剂量增加 ,成纤维细胞由正常细长梭状逐渐变圆、皱缩 ;UVA照射剂量为 9J/cm2 时 ,LDH从 ( 5 6.82± 4.78)U /dl上升至 ( 12 0 .40± 7.16U ) /dl;UVA照射剂量为 45J/cm2 时 ,成纤维细胞抑制率达到67.12 %。　 [结论 ]　UVA可损伤原代培养的人皮肤成纤维细胞     

紫外线对人角朊细胞的氧化损伤及防护研究

目的 探讨紫外线A（UVA）对原代培养人皮肤角朊细胞的氧化损伤及防晒化妆品的防护效果。方法 利用原代培养人皮肤角朊细胞,采用不同剂量的UVA照射,测定细胞上清液丙二醛,细胞内过氧化氢酶和超氧化物歧化酶,并对防晒化妆品的防护作用进行评价。结果 UVA照射剂量从2．88J／cm^2到11．52J／cm^2,MDA含量由2．54μmol/L增加到6．75μmol/L,CAT含量由15．75U／mg(prot)减少至6．33U／mg(prot),SOD含量由25．55NU／mg(prot)降至23．81NU／mg(prot)。涂抹广 谱防晒化妆品后照射同样剂量的UVA,MDA由2．18μmol/L增至4．82μmol/L,CAT由17．19U／mg(prot)减少至10．35U／mg(prot),SOD由26．52NU／mg(prot)降至24．51NU／mg(prot)。结论 UVA对人皮肤角朊细胞具有明显的氧化损伤作用,本实验条件下的广谱防晒化妆品对细胞具有一定的防护功能。     

不同粒径二氧化硅致人永生化表皮细胞氧化应激相关指标改变的比较

目的 探讨不同粒径、不同浓度的纳米二氧化硅(nm-SiO2)染毒人永生化表皮(HaCaT)细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活力的变化.方法 将对数生长期HaCaT细胞...     

维生素C对镍诱导的肺泡巨噬细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究维生素C(VC)拮抗Ni2O3的细胞氧化损伤的作用及对大鼠肺泡巨噬细胞iNOS诱导表达的影响。方法:采用体外细胞培养法测定在VC(25,50,100μmol/L)作用下,体外染镍肺泡巨噬细胞的死亡率及活力。同时观察细胞内丙二醛(MDA)、一氧化氮(nitricoxide,NO)和活性氧(ROS)的产生;超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、诱导型一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,iNOS)活力的变化以及应用RT-PCR法测定iNOSmRNA的表达。结果:在体外染镍肺泡巨噬细胞中加入不同浓度的VC后可降低该细胞的死亡率并提高细胞的活力,可减少MDA、NO和活性氧的产生,降低NOS的活性,提高SOD、GSH-Px、CAT的活性,iNOSmRNA表达也较镍组降低。结论:镍可致细胞脂质过氧化,VC可通过提高抗氧化酶的活性,抑制iNOSmRNA的表达,减少活性氧及NO的产生,拮抗镍对肺泡巨噬细胞的氧化损伤。     

扇贝多肽对紫外线A诱导HaCaT细胞Fas、c-fos表达的影响

目的观察扇贝多肽(PCF)对紫外线A(UVA)照射后HaCaT角质形成细胞Fas、c-fos表达的影响,以探讨PCF保护UVA致HaCaT细胞损伤的分子机制。方法体外培养的HaCaT角质形成细胞分为5组:对照组、UVA模型组、5.69mmol/LPCF组、2.84mmol/LPCF组、1.42mmol/LPCF组。蛋白质印迹法检测Fas、c-fos蛋白表达;RT-PCR检测FasmRNA表达;荧光定量PCR检测c-fosmRNA表达。结果 UVA照射后模型组Fas、c-fos表达均显著增加(P0.01),1.42～5.69mmol/L剂量范围内的PCF可抑制UVA引起的HaCaT细胞Fas、c-fosmRNA及蛋白表达(P0.05),且有剂量依赖性。结论 PCF可通过抑制Fas、c-fos表达而抑制UVA诱导的HaCaT细胞损伤。