唐山地区原发性高血压与Y染色体非重组区HindⅢ酶切位点多态性的研究

目的探讨Y染色体非重组区HindⅢ酶切位点多态性与唐山地区汉族人群原发性高血压的关系.方法入选男性研究对象412名,原发性高血压患者225例、正常对照人群187名.所有研究对象用常规方法提取白细胞DNA.采用多聚酶链反应结合限制性内切酶（HindⅢ）方法检测Y染色体非重组区HindⅢ酶切位点多态性.结果对照组和原发性高血压组Y染色体HindⅢ酶切位点多态性各基因型的差异有统计学意义（P=0.007）.HindⅢ（＋）基因型较HindⅢ（）基因型收缩压、舒张压、脉压和平均动脉压均明显降低（P＜0.05）.结论Y染色体HindⅢ酶切位点多态性与唐山地区汉族人群原发性高血压有关,可能是唐山地区汉族人群原发性高血压的一个遗传标志.     

家族性原发性高血压与基因多态性关系

目的 探讨山东省汉族人群鸟苷酸结合蛋白(G蛋白)β2,亚单位基因(GNB3)C825T多态性和血管紧张素原(AGT)基因M235T多态性与家族性原发性高血压(EH)的关系.方法 应用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切酶酶切方法,对162例原发性高血压患者和180名正常对照组进行GNB3 C825T和AGT M235T多态性检测.结果 EH组GNB3 C825T各等位基因频率与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);EH组AGT M235T多态性的MT+1vr基因型及T等位基因频率则高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);在AGT TT纯合子中,GNB3 TT纯合子患病率及收缩压(SBP)、舒张压(DBP)均高于C等位基因携带者(P<0.05);逐步Logistic回归分析结果显示,825TT+235TT基因型高血压的发病危险为其他基因型的3.45倍(P=0.001),高于单基因的AGT235TT(1.87).结论 AGT基因M235T多态性T等位基因是山东省汉族原发性高血压家系人群EH发病的危险因素之一.GNB3825T等位基因对高血压的发病有协同作用.     

肿瘤坏死因子基因6个SNPs与河南汉族原发性高血压的相关性研究

摘要：目的探讨肿瘤坏死因子基因6个SNPs位点多态性与河南汉族原发性高血压（EH）的相关性。方法采用限制性扩增片段长度多态性（PCR—RFLP）的方法检测TNF-α启动区基因-238G〉A、-308G〉A、-850C〉T、-857C〉T、-863C〉A及TNF-β第一内含子基因＋252G〉A多态性,并运用卡方检验探讨各SNP位点多态性与EH的相关性。结果TNF-α-308G〉A位点基因型分布和等位基因频率在人群中存在差异显著性（x2=6．407,P=-0．041;Xz=4．781,P=-0．029）,EH组中,TNF-α-308G〉A中基因型GA＋AA人群的收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、尿酸（uA）及空腹血糖（FPG）含量明显高于GG基因型人群（P〈0．05）;TNF-α基因-238G〉A、-850C〉T、-857C〉T、-863C〉A及TNF-β基因＋252G〉A多态性各基因型及等位基因频率在EH组和对照组的分布差异无统计学意义。结论TNF-α基因-308G〉A位点基因多态性与河南汉族原发性高血压的发病相关。TNF-α-238G〉A、-850C〉T、-857C〉T、-863C〉A及TNF-β＋252G〉A位点基因多态性与河南汉族原发性高血压无关联。     

冠心病患者对氧磷酶启动子基因-909C/G多态性分析

目的探讨中国人对氧磷酶（PONI）启动子基因-909C／G遗传多态性与冠心病（CHD）及其血脂水平的关系。方法应用多聚酶链反应（PCR）对86例冠心病患者和128例正常对照者PONI基因酶切位点的限制性片段长度多态性（RFLP）进行分析。结果PONI启动子基因-909C／G位点存在多态性，出现3种基因型：CC、CG、GG。CHD组CC、CG、GG基因型频率及C、G等位基因频率分别为0．233、0．558、0．209和0．512、0．488，在健康对照组分别为0．258、0．523、0．219和0．520、0．480，两组间基因型频率和等位基因频率差异无统计学意义（P〉0．05）；正常对照组与CHD组间各基因型亚组血浆血脂水平差异亦无统计学意义（P〉0．05）。结论PONI基因启动子-909C／G多态性与中国人CHD无关联。     

内皮型一氧化氮合酶基因T786C多态性与新疆汉族原发性高血压的相关性研究

目的探讨内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因T786C多态性与新疆汉族原发性高血压（EH）的相关性。方法采取整群随机抽样的方法,选取新疆沙湾县汉族346名EH患者（病例组1与385名正常对照者（对照组）为研究对象,进行流行病学调查和临床检查,并采集血样。采用单碱基延伸反应技术检测eNOS基因T786C多态性。结果eNOS基因T786C位点基因型TT、TC、CC在病例组及对照组中的分布频率分别为80．3％,18．5％,1．2％,在对照组的分布频率分别为79．2％,19．7％和1．0％。等位基因T、C在病例组中分布频率分别为89．6％和10．4％,在对照组中分布频率分别为89．1％和10．9％。病例组和对照组基因型和等位基因分布频率差异无统计学意义（P〉0．05）。病例组年龄、收缩压、舒张压、平均动脉压、脉压、体质指数、腰臀比、胆固醇、低密度脂蛋白、肌酐、尿酸、载脂蛋白A1／B的平均水平均高于对照组（P〈0．05）,而空腹血糖、三酰甘油、高密度脂蛋白、载脂蛋白-A1、载脂蛋白-B两组间差异均无统计学意义。结论本研究结果显示,eNOS基因T786C多态性与新疆汉族原发性高血压可能不相关。     

脂蛋白脂酶基因多态性与高血压合并肥胖人群血脂的相关性研究

目的 探讨脂蛋白脂酶（LPL）基因 Hind Ⅲ酶切多态性对高血压合并肥胖及其血脂的影响。方法 选取326例高血压合并肥胖者和326名健康对照者为研究对象,开展问卷调查、医学体检和血液生化项目检测,应用限制性片段长度多态性聚合酶链反应（PCR -RFLP）技术进行 LPL 基因 Hind Ⅲ酶切位点多态性检测,回归分析脂蛋白脂酶基因多态性与高血压合并肥胖的关系。结果 LPL 基因 Hind Ⅲ位点在两组中均以 H ＋等位基因为主。单因素分析显示：两组间基因型和等位基因频率差异无统计学意义（P ＜0.05）;在高血压合并肥胖组中,H ＋H＋基因型的甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）值比 H ＋H -/H -H -基因型的高（P ＞0.05）,但高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）与 H ＋H -/H -H -基因型相比差异无统计学意义（P ＞0.05）。多因素条件 Logistic 回归分析显示,高空腹血糖（调整 OR ＝21.56,95％CI：7.49～62.11）、高甘油三酯（调整 OR ＝7.51,95％ CI：4.20～13.43）、低高密度脂蛋白胆固醇（调整 OR ＝2.67,95％ CI：1.53～4.66）、高尿酸（调整 OR ＝3.36,95％ CI：1.55～7.29）以及有高血压家族史（调整 OR ＝2.07,95％ CI：1.21～3.55）与高血压合并肥胖存在关联。结论 LPL 基因 Hind Ⅲ酶切基因型多态性仅与高血压合并肥胖者的血脂代谢存在关联,但不能确定它是高血压合并肥胖发生的独立危险因素。     

陕西汉族人群细胞连接蛋白Cx37基因多态性分布

目的探讨心血管疾病相关的细胞连接蛋白37（Connexin37，Cx37）基因C1019T多态性在陕西汉族人群的分布。方法采用聚合酶链一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术，对116例无血缘关系的健康陕西汉族人的染色体进行检测，分析基因型频率、等位基因频率分布，并与其他种族进行比较。结果Cx37基因C1019T等位基因频率为：C=68．5％，T=31．5％；基因型频率为：C／C=63．8％，C／T=30．2％，G／G=6．0％；其中男性等位基因频率为：C=76．1％．T=23．9％；基因型频率为：C／C=59．2％，C／T=33．8％，G／G=7．0％；陕西汉族人Cx37基因C1019T基因型频率和等位基因频率在男女之间差异无统计学意义，与瑞典人群相比差异有统计学意义（P〈0．05），而与日本、我国台湾人群相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论陕西汉族人Cx37基因C1019T基因型频率及等位基因频率与东方人种无差异，而有别于西方人种。     

钙蛋白酶10基因多态性与原发性高血压遗传易感性相关性研究

目的：探讨钙蛋白酶10基因多态性与原发性高血压遗传易感性的关系。方法：采用病例对照研究设计，以聚合酶链式反应-等位基因特异性扩增法（PCR-ASA），检测Calpain 10基因SNP43G／A位点和SNP44T／C位点基因型，并进行与原发性高血压的关联分析。结果：在非糖尿病人群中。原发高血压患者和血压正常者的钙蛋白酶10基因SNP43GG基因型频率分别为70．59％和72．73％，差异无统计学意义。其SNP44TT基因型频率分别为80．88％和78．41％，差异亦无统计学意义；分析原发性高血压与血糖、真胰岛素、C肽及胰岛素抵抗指数HOMA-IR等的关系，高血压患者与正常人群各项临床指标之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：钙蛋白酶10基因与昆明高原地区人群原发性高血压的发病无关，同时亦未发现原发性高血压与胰岛素抵抗的相关性。     

高血压前期患者5-羟色胺2A受体基因多态性分析

目的研究高血压前期患者5-羟色胺2A受体(5-HT2AR)基因多态性并随访观察不同基因型患者的原发性高血压(EH)患病率。方法应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)检测42例健康对照者及41例高血压前期患者的5-HT2AR 1438A/G、102T/C基因多态性,并采用高效液相色谱-紫外光检测法测定血清5-HT水平。全部受试者在第6、12个月随访,观察不同基因型患者的EH患病率。结果 5-HT2AR基因1438A/G基因型高血压前期组及对照组差异有统计学意义,高血压前期组GG基因型频率显著高于对照组(P<0.05),并具有较高的血清5-HT水平(P<0.001)。6、12个月后GG基因型患者的EH患病率显著高于AA和AG型者(P<0.001)。102T/C基因型2组差异有统计学意义,同期随访不同基因型患者EH患病率差异无统计学意义。结论 5-HT2AR 1438A/G基因多态性与EH的患病显著关联;1438A/G位碱基纯合突变可导致高血压患者血清5-HT水平升高;102T/C基因多态性与EH无关。     

原发性高血压与血管紧张素Ⅱ1型受体基因573位点多态性的研究

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体基因573位点多态性在高血压发病的意义。方法采用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）。方法对152例高血压患者及111例血压正常者的血管紧张素Ⅱ1型受体基因573位点多态性进行检测，并对该基因多态性与高血压发病的相关性进行分析。结果AT1R T573C基因型和等位基因频率在EH组和健康对照组之间差异无统计学意义（P〉0、05）。性别分层后，在男性组和女性组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论血管紧张素Ⅱ1型受体基因573位点多态性与高血压不相关。     

150例广州地区汉族人肿瘤坏死因子TNFα-850 C/T基因突变频率的检测

目的了解广州地区汉族人肿瘤坏死因子TNFα-850 C/T基因的分布特点。方法应用PCR-RFLP方法对150例广州地区健康汉族人肿瘤坏死因子TNFα-850 C/T基因进行检测,并结合文献进行了不同地区间的分析比较。结果肿瘤坏死因子TNFα-850 C/C野生型纯合子频率为78.67%,C/T杂合子频率为19.33%,T/T突变型纯合子频率为2.0%,突变等位基因频率为0.1167。结论该方法简便、快速、准确,适合于一般实验室检测及大规模的人群调查,肿瘤坏死因子TNFα-850 C/T基因多态性在不同地区间分布存在着一定的差异。     

Lack of association between human G-protein beta3 subunit variant and overweight in Japanese workers

We examined the association of the G-protein beta3 subunit gene (GNB3) C825T polymorphism with overweight in Japanese workers. This cross-sectional study used multivariate analysis to investigate whether a polymorphism in the C825T polymorphism was associated independently with overweight when factors such as age and lifestyle were taken into account. The study in 1453 men and 1172 women involved identifying subjects with the C825T genotype using the polymerase chain reaction, followed by restriction fragment-length polymorphism analysis. Overweight was defined as a BMI > or = kg/m(2). Genotype distributions for C825T in overweight men (CC = 80, CT = 162, TT = 80) and women (CC = 52, CT = 91, TT = 40) were not significantly different from normal-weight men (CC = 278, CT = 588, TT = 265) and women (CC = 242, CT = 549, TT = 198). The allele distributions were also not significantly different between either sex. The power of the study was estimated as 98% in men and 81% in women based on the allelic frequencies reported in a previous positive study in Chinese subjects. Multiple logistic regression analysis showed that the genotype was not significantly associated with overweight. In conclusion, this study indicated that the GNB3 C825T polymorphism is not a significant factor for overweight in Japanese people.     

2株分离的嗜人T细胞白血病病毒I型的PCR检测

[目的 ]用 PCR法检测嗜人 T细胞白血病病毒 I型 (HTL V- I)的分离情况。 [方法 ]采集 2例日本鹿儿岛县成人 T淋巴细胞白血病 (AL T)病人的肝素抗凝血 ,分离外周血单核细胞 (PBMCs) ,加入植物血凝素和白介素 - 2 ,与健康人 PBMCs共培养进行 HTL V- I的分离 ,然后抽提 DNA,用 HTL V- I的 gag1和 tax1两引物进行 PCR扩增 ,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳确定病原分离结果。 [结果 ]2株都扩增出了 HTL V- I前病毒 DNA的 gag1和 tax1片断 ,证明了嗜人 T细胞白血病病毒 I型的分离成功。 [结论 ]PCR法是快速、准确检测嗜人 T细胞白血病病毒感染的有效方法之一。     

白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶真核表达质粒pcDNA3．1／SAP2的构建

目的构建白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶真核表达质粒pcDNA3．1／SAP2．为以其作为基因疫苗进行免疫动物实验奠定物质基础。方法从白假丝酵母菌中提取基因组DNA，以其为模板采用聚合酶链反应（PCR）法获取SAP2基因，将真核表达质粒pcDNA3．1（＋）myc-HisC和SAP2基因行EcoRI和XhoI双酶切，琼脂糖凝胶纯化，连接酶切产物，转化TOP10感受态细菌，筛选菌落和测序鉴定。结果经PCR扩增获得的目的基因分子量与预计相同，并定向插入真核表达载体pcDNA3．1（＋）myc-HisC，电泳获得预期的SAP2条带,测序证实为正确的SAP2序列。结论利用真核表达质粒pcDNA3．1（＋）myc-HisC可以方便而高效地构建pcDNA3．1／SAP2重组质粒，该质粒能直接激活抗原提呈细胞，可以使重组质粒具有较强的免疫原性和免疫反应性。     

致病性猪链球菌主要毒力因子基因多重PCR检测

目的建立多重PCR体系．实现猪链球菌毒力相关因子基因cps、mrp、epf，（epf^＊）和sly的同步检测。方法根据上述毒力因子基因核苷酸序列，设计和合成4对特异性引物，通过体系和条件优化，建立多重PCR检测方法，并对72株种属背景明确的实验菌株（其中猪链球菌48株、阴性对照株24株）及49株猪临床分离的链球菌样本进行检测分析。结果48株猪链球菌中，cps2检出率为33．3％（16／48）、mrp检出率为29．2％（14／48）、epf检出率为25％（12／48）、epf^＊检出率为6．3％（3／48）、sly检出率为54．2％（26／48），上述检测结果与菌株的毒力因子背景情况完全相符；24株阴性对照和49株猪临床分离样本毒力因子检测结果均为阴性。结论多重PCR可用于猪链球菌毒力相关因子CPS2、MRP、EF、Sly的基因检测，特异性和敏感性好，为该病快速诊断和分子流行病学调查提供了新的技术手段。     

G蛋白β3亚基C825T多态性与高血压病相关性研究进展

原发性高血压是目前最常见的心血管疾病,高血压相关基因多态性的筛查及关联分析,是研究高血压候选基因及其功能的主要手段之一。随着发现G蛋白β3亚单位基因多态性与增强G蛋白活性并提高细胞内信号转导相关,国内外学者开始探讨GNB3 C825T多态性与高血压的关系,但研究结果尚存在争议。就G蛋白的生物学功能、GNB3 C825T多态性与高血压病相关等方面的研究进展做一综述。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的基因多态性研究

目的应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对耐亚胺培南铜绿假单胞菌进行基因多态性研究。方法对医院临床分离的8株耐亚胺培南铜绿假单胞菌进行随机引物聚合酶链反应(PCR)扩增,扩增产物进行电泳和聚类分析。结果耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药表型相同,但基因型相同,绝大多数基因型不同。结论通过RAPD分析了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌基因型的特性,明确耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药的表型与基因型的关系,为该菌的感染控制提供分子流行病学依据。     

Genetic analysis of Pseudomonas aeruginosa by enterobacterial repetitive intergenic consensus polymerase chain reaction (PCR) and arbitrarily primed PCR: gel analysis compared with microchip gel electrophoresis.

OBJECTIVES: To assess the applicability of a newly emerging microchip gel electrophoresis for rapid strain differentiation among clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa, and to compare this technique with the traditional gel method for DNA separation. METHODS: One hundred clinical strains of P. aeruginosa obtained from a hospital in northwestern Ohio were tested for reactivity to 3 serotype-specific monoclonal antibodies by enzyme-linked immunosorbent assay. Twelve strains (4 from each serogroup) were selected for DNA analysis by polymerase chain reaction (PCR)-based, single primer DNA fingerprinting methods with 3 different primers: 1 enterobacterial repetitive intergenic consensus PCR and 2 arbitrarily primed PCRs. The PCR products were analyzed by agarose slab gel and microchip gel electrophoresis. RESULTS: Of the 100 clinical isolates tested, 39% (4%, 14%, and 21%) were found to be serotypes 0:3, 0:6, and 0:11, respectively. Twelve strains were chosen for DNA analysis by PCR. The PCR products were analyzed by agarose slab gel electrophoresis and on microchips to determine interspecies diversity. Both methods demonstrated that different serotypes exhibited different electrophoretic patterns. Two strains (clinical strains 6 and 7, serotype 0:6) showed identical patterns, indicating a high degree of relatedness. CONCLUSION: In all cases, there was concordance between the electrophoretic patterns detected by the two methods. The capability of conducting both PCR and microchip gel electrophoresis offers an opportunity for an automated and rapid method for genetic analysis and differentiation among strains of P. aeruginosa and other microorganisms.     

血小板膜糖蛋白Ia-807基因多态性与急性心肌梗死的关系研究

目的通过检测急性心肌梗死患者及对照组人员的血小板膜糖蛋白Ia-807基因多态性，探讨该多态性与急性心肌梗死发病的关系。对象急性心肌梗死患者32例，均符合世界卫生组织关于急性心肌梗死的诊断标准。对照组32例（排除有冠心病、缺血性脑卒中及外周血管血栓疾病者）。方法血小板膜糖蛋白Ia-807基因多态性分析：（1）碘化钾法提取人基因组DNA；（2）多聚酶链反应（PCR）扩增目的基因片段；（3）酶切产物经2％琼脂糖凝胶电泳分离后，紫外灯下观察酶切结果。SPSS11．5软件分析数据。结果急性心肌梗死组血小板膜糖蛋白Ia-807TT＋Tc基因型携带者频率显著高于对照组。结论血小板膜糖蛋白Ia-807T等位基因可能是急性心肌梗死发病的独立遗传性危险因素。