胶体金标记Dipstick试纸条诊断旋毛虫病的研究

目的:建立简便的旋毛虫病Dipstick快速诊断法.方法:以旋毛虫肌幼虫ES为诊断抗原,胶体金标记的羊抗人IgG为显色剂,建立Dipstick快速诊断方法;对旋毛虫病及其它寄生虫病患者和旋毛虫感染的动物血清进行检测.结果:检测旋毛虫病患者与旋毛虫感染的小鼠、大鼠、兔、猪血清的阳性率分别为100%(28/28)、96.00%(48/50)、100%(10/10)、100%(10/10)及100%(30/30);其它寄生虫病(斯氏狸殖吸虫病、血吸虫病、华支睾吸虫病及囊虫病等)患者及正常人血清均为阴性.试纸条和ELISA对100条幼虫感染小鼠血清检测的阳性率分别为92.00%(46/50)和94.00%(47/50)(x2=0.15,P>0.05),两种方法对200～500条幼虫感染小鼠血清检测的阳性率均为100%(60/60).结论:旋毛虫肌幼虫ES抗原Dipstick快速诊断法具有较高的敏感性和特异性,简便快捷,勿须特殊仪器设备,是一种检测旋毛虫病血清IgG抗体和流行病学调查较好的免疫诊断方法.     

斯氏狸殖吸虫成虫尿素溶解性抗原的分离提取

采用8mol/L尿素并以简化的方法,从斯氏狸殖吸虫成虫水溶性抗原(PsAWA)制备后的离心沉渣中,进一步分离提取出尿素溶解性抗原(PsAWU)。210mg虫体干粉,收获PsAWA 50.18mg,PsAWU 63.19mg,使抗原制备总收获量增加1.26倍。ELISA初步鉴定表明:PsAWU具有比PsAWA更高的血清学活性,4℃保存一定时期其活性变化亦与之相似。     

狂犬病毒ELISA抗原提取的初步研究

在狂犬病的确诊和疫苗效果考查工作中,目前仍然主要依靠血清学方法检测特异性抗体或抗原,其中又以ELISA法更为实用。在我国现已开始采用这一技术,用于狂犬病的诊断、防治以及科研工作中。一般制备狂犬病毒抗原大多用BHK-21细胞培养扩增病毒,继之浓缩和提纯。由于狂犬病毒在组织培养细胞中增殖缓慢,产量不高;而该病毒在感染小鼠脑组织中能大量增殖。     

斯氏狸殖吸虫成虫尿素溶解性抗原血清学特性

采用高浓度尿素并以简化方法,从斯氏狸殖吸虫成虫水溶性抗原(PsAWA)制备后的离心沉渣中,已分离、提取出尿素溶解性抗原(PsAWU),效果较满意。本工作用ELISA和对流免疫电泳对PsAWU与PsAWA血清学特性进行了比较分析。 敏感性 用ELISA(间接法)以两种抗原不同浓度(80～0.312 μg/ml)检测阳     

酶联免疫吸附试验对人体旋毛虫病诊断及疗效考核价值的研究

本文应用旋毛虫幼虫可溶性抗原进行ＥＬＩＳＡ检测１２２份旋毛虫病人血清，抗体阳性率为８３．６１％。发病后第１周抗体阳性率只有６１．１１％，第２周则升至８０．９５％，至第４、５周时已分别达９２．３１％和１００％，平均ＯＤ值亦有明显升高。囊虫病人和健康人血清均为阴性反应。丝虫、华支睾吸虫及并殖吸虫病人的假阳性反应率分别为５．２６％、２．７％及２３．５３％。旋毛虫病人治疗后１周的抗体阳性率及平均ＯＤ值均比治疗前明显升高（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），此现象可视为是一个治疗有效的客观指标，可用于本病的近期疗效考核。从治疗后４周抗体水平开始下降，至治疗后８周抗体阳性率及平均ＯＤ值均比治疗后２周显著下降（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），提示ＥＬＩＳＡ对本病的远期疗效考核也有一定价值。     

应用ELISA早期诊断旋毛虫病的实验研究

用旋毛虫肌肉内成囊期幼虫的盐水浸出液为抗原,用ELISA间接法检测实验家兔旋毛虫病的抗体反应动态。结果表明,1.检测21只病兔,灵敏度为95%,轻重感染组分别在感染后的第15,12天检出特异性抗体。2.检测43只健康家兔,特异度为95%;检测2只血吸虫病兔无交叉反应。3.抗旋毛虫幼虫的抗体可持续存在4个月。本法在旋毛虫病感染早期即可检出特异性抗体,故对本病的早期诊断是有意义的。     

河南邓县人、猪旋毛虫病血清流行病学调查

本文报告用酶联免疫吸附试验(ELISA)对河南邓县人群、用酶联葡萄球菌A蛋白试验(SPA-ELISA)对当地猪旋毛虫病血清流行病学调查结果。 邓县健康人297例,ELISA阳性59例,抗体阳性率为19.87%。男女性别抗体阳性率无显著差异,但屠宰场屠宰工、农村居民、炊事员的抗体阳性率显著高于工人和学生;且青壮年和老年人抗体阳性率高于儿童及青少年。提示在流行区内,旋毛虫病感染率可能和职业、年龄有关。 邓县旋108头,SPA-ELISA阳性32头,抗体阳性率为29.63%,活检阳性猪的SPA-ELISA阳性率为93.55%,肌肉中包囊计数(个/g)与SPA-ELISA的OD_(492)值之间存在正相关。 对汉族地区旋毛虫病流行特点进行了讨论。     

ELISA法检测旋毛虫特异性IgM,IgG抗体的探讨

ELISA法检测旋毛虫患者血清特异性IgM和IgG抗体,作为早期诊断和临床确诊,对临床和流行病学调查均有实际应用价值。本文报道经病理确诊的6例患者检测全为阳性;病理活检阴性的5例患者用本法检测反为阳性;对门诊疑诊为旋毛虫病的61例患者进行检测,30例为阳性,使之明确了诊断。本检测方法特异性强,敏感性高,稳定性好,方法简便宜于推广。     

两种不同组织嗜性的小鼠肝炎病毒组合抗原检测抗体的间接ELISA方法

目的研究不同组织嗜性的小鼠肝炎病毒（MHV）组合抗原检测抗体的间接ELISA技术。方法比较两种不同组织嗜性抗原和组合抗原为基础的检测MHV抗体水平。将呼吸型MHV-1、肠型MHV-JX和混合抗原包被酶标板后，检测不同MHV毒株感染抗体。结果两种抗原都能检测出相应的MHV抗体，但交互检测效果差；组合抗原能同时检测两种MHV抗体，组合抗原可以提高MHV感染的检出率。临床样品中呼吸型感染率40％-58％，呼吸型感染率22％-70％，两型的共感染率为为17％-30％。结论组合抗原可以用于MHV感染的诊断试剂。     

Preliminary study of immunodiagnosis of trichinosis by ELISA using urea-soluble antigen of Trichinella spiralis

Urea-soluble antigens of Trichinella spiralis infected larva were preparedand the efficiency of the antigens in diagnosis of trichinosis by ELISA wasstudied.Specific IgG antibodies were detected by ELISA using urea-solubleantigens in 91.67% (22/24) of 24 serum samples taken from patients withtrichinosis and 91.67% (11/12) of 12 blood spots on filter paper.Specific IgMantibodies were seen in 95.24% (20/21) of 21 serum samples from patients withtrichinosis using the antigens.Sera of patients infected with Schistosoma japonicumhad some cross teactions to the antigens,but the sera of mice infected withSchistosoma japoni(?) Ancylostoma caninum larva and Plasmodium yoelti were allnegative in the test.     

酶联免疫法研究注射用聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子的临床药动学

目的 研究癌症患者化疗后单次 sc 不同剂量的注射用聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子 (PEG-rhG-CSF) 的药动学。方法 采用酶联免疫分析检测 (ELISA) 法测定癌症患者 sc PEG-rhG-CSF 后的血药浓度,实验数据用 3P97 药动程序拟合分析并计算药动学参数。结果 癌症患者化疗后 48 h 单次 sc PEG-rhG-CSF 30、60、100、200 μg/kg,每组4例病人的平均消除半衰期 (t1/2ke) 差异不大,分别为 (47.8±7.3)、(49.8±6.9)、(45.7±9.6) 和 (44.6±6.3) h;平均达峰时间 (tmax) 分别为 (21.0±6.0)、(24.0±0)、(21.0±6.0)、(42.0±12.0) h;平均清除率 (CL) 分别为 (5.44±0.86)、(5.06±0.69)、(3.36±0.35)、(3.31±1.20) mL/(kg·h), CL有随剂量增加而下降的趋势;平均达峰浓度 (Cmax) 分别为 (54.0±10.8)、(129.0±20.9)、(344.9±73.4)、(828.9±245.6) ng/mL;平均药时曲线下面积 (AUC0～432 h）分别为 (5 714±786)、(12 781±1 745)、(32 714±6 486)、(85 142±26 186) h·ng/mL;Cmax和 AUC 与剂量均呈正相关。结论 PEG-rhG-CSF 的较长半衰期和较慢清除率 (与 rhG-CSF 相比) 保证了该药在体内的长效特性。     

抗旋毛虫单克隆抗体竞争酶联免疫吸附试验的建立及初步应用

作者选用1株高特异性抗旋毛虫单克隆抗体2G_8B_(10)H_2,建立了单克隆抗体竞争酶联免疫吸附试验(competitive ELISA,简称cELISA),并进行了初步应用。结果表明:20只日本大耳兔在感染旋毛虫后17天有35％呈现阳性,31天全部阳性.对其中5只感染兔的血清终点滴度观察了142天,了解特异性抗体的变化规律.该规律为病程估计提供了线索。另外,其他蠕虫感染兔血清29份无1例假阳性发生。可以认为,单克隆抗体cELISA是一种灵敏、特异的旋毛虫病免疫诊断方法。     

用日本血吸虫成虫抗原ELISA检测血吸虫病抗体的现场应用

用日本血吸虫成虫抗原(AAg)和虫卵抗原(EAg)ELISA检测血吸虫病疫区粪检阳性病人134例,其阳性率分别为99.25％和98.51％。134例中45例儿童和89例成人用AAg检测,其阳性率分别为100％和98.88％,而用EAg检测的阳性率分别为97.78％和98.88％。AAg和EAg检测26例正常人均为阴性。结果表明:AAg与EAg的检出率以及儿童与成人的检出率均相似。     

ELISA法检测可溶性人类白细胞抗原-Ⅰ及广东人参考值的测定

目的探讨可溶性人类白细胞抗原-Ⅰ(sHLA-Ⅰ)的定量检测技术,并用于检测广东地区人群的参考值。方法以W6/32包被酶标板,捕捉样品中sHLA-Ⅰ,β2微球蛋白抗体为一抗,再加酶标二抗及底物显色。根据不同浓度标准sHLA-Ⅰ显色后Dλ值的标准曲线,检测60 例正常广东人的sHLA-Ⅰ含量。结果sHLA-Ⅰ最低检测限为2.84 ng/ml,批内变异系数为5.80%,批间变异系数为9.00%,回收率为98.57%~100.15%。广东人sHLA-Ⅰ正常值为(699.54±360.10)ng/ml。结论ELISA法检测sHLA-Ⅰ具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。     

ELISA法在检测流行性出血热病毒抗原中的应用

采用ELISA和IFA法检测细胞培养中EHFV抗原,检出时间分别在病毒感染细胞后第4d 和第6d,对 EHFV 抗原的定量检测提示病毒释放的高峰期在其感染细胞后10～12d,患者血浆标本 EHFV 抗原的检出率为26.6%。以上结果指出 ELISA 法用于 EHFV 抗原的检测比 IFA 法优越,适用于实验室对 EHFV 繁殖的监测,而检测 EHFV 抗原用于临床诊断则敏感性太低。     

酶联法测定脑脊液白血病相关抗原CD9及其应用

应用酶联免疫吸附技术（ＥＬＩＳＡ），建立了脑脊液白血病细胞相关抗原ＣＤ９检测方法，并对白血病患儿脑脊液ＣＤ９含量进行了初步测定。结果表明：ＣＤ９（＋）白血病患儿发生中枢神经系统白血病（ｃｅｎｔｒａｌｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｒｎｌｅｕｋｅｍｉａ，ＣＮＳＬ）时脑脊液ＣＤ９含量明显升高，其含量变化有助于临床疗效监测。初步随访结果表明：脑脊液白血病相关抗原检测能早期特异诊断ＣＮＳＬ敏感性优于常规检测方法。     

血清抗结核菌纯蛋白衍生物IgG测定对结核病的诊断意义

作者采用ELISA法检测血清抗结核菌纯蛋白衍生物(PPD)IgG抗体。结果表明,该试验诊断结核病的敏感性为93.4％,特异性为98.5％,预计值有效性为97.3％,对结核病,尤其是细菌学诊断尚有一定困难的肺外结核具有重要的辅助诊断价值。     

单克隆抗体双夹心ELISA检测血吸虫循环抗原对抗血吸虫药疗效考核的价值

应用日本血吸虫抗３１／３２ｋＤ（１Ｄ＝０．９９２１ｕ）单克隆抗体双夹心酶联免疫吸附试验（双夹心ＥＬＩＳＡ）检测血吸虫循环抗原，用于城市急性血吸虫病经吡喹酮治疗５年后无再次感染患者的疗效考核，阳性率为１２．２０％。与快速法ＥＬＩＳＡ检测循环抗原的符合率为９６．３４％。与常用检测抗体的ＩＨＡ、ＥＬＩＳＡ法平行对照，阳性率基本一致。与改进的粪便孵化法比较，两法的符合率为８５．３６％。无疫水接触史健康人未见阳性反应。对肝病患者无交叉反应。结果显示双夹心ＥＬＩＳＡ法检测循环抗原敏感性高，特异性强，具有良好的抗血吸虫药物疗效考核价值。